蛋白質與酶工程第六章酶的固定、修飾改造賈2014級生物技術2015生物科學專升本第一課時_第1頁
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1、水不溶性載體水不溶性載體使酶固定化的方使酶固定化的方法稱為包埋法。法稱為包埋法。包埋法的類型包埋法的類型天然凝膠天然凝膠瓊脂瓊脂;海藻酸鈣海藻酸鈣;角叉菜膠角叉菜膠;明膠明膠溫溫 和和不不 變變差差合成凝膠合成凝膠聚丙烯酰胺、光交聯(lián)樹脂聚丙烯酰胺、光交聯(lián)樹脂聚合反應聚合反應 部分失活部分失活高高 交聯(lián)法（交聯(lián)法（cross-linking）是利用雙功能或多功能試劑是利用雙功能或多功能試劑在酶分子之間、酶分子與惰在酶分子之間、酶分子與惰性蛋白間或酶分子與載體間性蛋白間或酶分子與載體間進行交聯(lián)反應，形成網(wǎng)狀結進行交聯(lián)反應，形成網(wǎng)狀結構的酶固定化方法。構的酶固定化方法。（3 3）吸附交聯(lián)法）吸附交聯(lián)

2、法 此法先將酶吸附在硅膠、此法先將酶吸附在硅膠、藻土、氧化鋁、球狀酚醛樹藻土、氧化鋁、球狀酚醛樹脂或其他大孔型離子交換樹脂或其他大孔型離子交換樹脂上，再用戊二醛等雙功能脂上，再用戊二醛等雙功能試劑交聯(lián)，用此法所得固定試劑交聯(lián)，用此法所得固定化酶也可稱為殼狀固定化酶。化酶也可稱為殼狀固定化酶。（4 4）載體交聯(lián)法）載體交聯(lián)法 用多功能試劑的一部分功能基團化學修飾高聚用多功能試劑的一部分功能基團化學修飾高聚物載體，而其中的另一部分功能基團偶聯(lián)酶蛋白。物載體，而其中的另一部分功能基團偶聯(lián)酶蛋白。四種固定化酶制備方法的特點小結四種固定化酶制備方法的特點小結（三）固定化酶的評價（三）固定化酶的評價（四）固定化酶的性質和影響因素（四）固定化酶的性質和影響因素（四）固定化酶的性質和影響因素（四）固定化酶的性質和影響因素（2）屏蔽效應：酶經(jīng)固定化后，載體會成為底物或）屏蔽效應：酶經(jīng)固定化后，載體會成為底物或者其他效應物結合到活性中心或者變構中心的空間障者其他效應物結合到活性中心或者變構中心的空間障礙，可以通過加入連接臂的方式進行改善。礙，可

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