中成藥蒽醌類化合物的鑒定

1、中成藥蒽醌化合物的鑒定中成藥蒽醌化合物的鑒定中藥飲片及中成藥的鑒定均參照中華人民共和國藥典2015版決明子決明子的鑒定標(biāo)準(zhǔn)一：來源鑒定；二：顯微鑒定；三：甲醇浸出物檢查TLC(通則0502)；四：水分檢測（通則0832）；五：黃曲霉素測定（通則2351）；六：含量測定HPLC（通則0512）；七：對照品溶液的制備；八：供試品溶液的制備決明子鑒定決明子鑒定TLC法：法：一：一：浸漬提取浸漬提取取本品粉末1g，加甲醇10ml，浸漬1小時，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，再加鹽酸1ml，置水浴上加熱30分鐘，立即冷卻，用乙醚提取2次，每次20ml，合并乙醚液，蒸干，殘?jiān)尤燃淄?ml使溶解

2、，作為供試品溶液。二：二：對照品制備對照品制備另取橙黃決明素對照品、大黃酚對照品，加無水乙醇一乙酸乙酯（2：1）制成每1ml各含1mg的混合溶液，作為對照品溶液。三：三：點(diǎn)樣點(diǎn)樣照薄層色譜法（通則0502）吸取上述兩種溶液各2l，分別點(diǎn)于同一硅膠H薄層板上，以石油醚（3060）-丙酮（2：1）為展開劑，展開，取出，晾干。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；置氨蒸氣中熏后，斑點(diǎn)變?yōu)榱咙S色（橙黃決明素）和粉紅色（大黃酚）。 決明子檢測TLC法流程圖決明子粉末1g+甲醇浸漬1小時濾過蒸干殘?jiān)铀?0ml溶解+鹽酸1ml水浴加熱30分鐘冷卻乙醚提取2次每次20ml乙醚層合并蒸干

3、殘?jiān)尤燃淄?ml溶解供試品2大黃酚水層供試品1橙黃決明素橙黃決明素；大黃酚乙醇+乙酸乙酯（2:1）(1ml/1mg混懸)對照品1；對照品2TLC點(diǎn)樣；展開供試品1；對照品1分別點(diǎn)樣2l（展開劑石油醚加丙酮2:1）氨氣熏顯色兩個斑點(diǎn)比較計(jì)算Rf值 HPLC法法：色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 含量測定含量測定：照高效液相色譜法（通則：照高效液相色譜法（通則0512） 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動相A，以0.1%磷酸溶液為流動相B，按下表中的規(guī)定進(jìn)行梯度洗脫；檢測波長為284nm。理論板數(shù)按橙黃決明素峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。 測定法：分別精密吸取對照品溶液與

4、供試品溶液各10l,注入液相色譜儀，測定，既得。 本品按干燥品計(jì)算，大黃酚（C16H10O4）不得少于0.12%，含橙黃決明素（C17H16O7）不得少于0.080%。制何首烏的鑒定標(biāo)準(zhǔn)制何首烏的鑒定標(biāo)準(zhǔn)一：一：來源鑒定來源鑒定（參照何首烏生藥，黑豆制法）；（參照何首烏生藥，黑豆制法）；黑豆汁拌勻照燉法（通則黑豆汁拌勻照燉法（通則0213）；）；照蒸法（通則照蒸法（通則0213）二：二：顯微鑒定顯微鑒定；三：三：水分檢測水分檢測（通則（通則0832）；）；四：四：照醇溶液浸出物檢查照醇溶液浸出物檢查，通則（，通則（2201)，用乙醇為溶劑，不得少于，用乙醇為溶劑，不得少于5.0%五：五：含量測

5、定含量測定HPLC（通則（通則0512）；）；二苯乙烯苷二苯乙烯苷 （避光操作）。（避光操作）。取本品粉末（過四號篩）約取本品粉末（過四號篩）約0.2g，精密稱定，照何首烏藥材，精密稱定，照何首烏藥材含量測定含量測定項(xiàng)下的方法測定。本項(xiàng)下的方法測定。本品按干燥品計(jì)算，含品按干燥品計(jì)算，含2，3，5，4一四羥基二苯乙烯一四羥基二苯乙烯-2-O-p-D-葡萄糖苷（葡萄糖苷（C20H2209）不得）不得少于少于0.70%。 游離蕙醌（制何首烏游離蕙醌（制何首烏） 照高效液相色譜法照高效液相色譜法（通則（通則0512）測定。）測定。 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 以十八烷墓硅烷鍵合

6、硅膠為填充劑；以甲醇0.1%磷酸溶液（80：20）為流動相；檢測波長為254nm。理論板數(shù)按大黃素峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。 對照品溶液的制備對照品溶液的制備 取大黃素對照品、大黃素甲醚對照品適量，精密稱定，加甲醇分別制成每1ml含大黃素80g、大黃素甲醚40g的溶液，即得。 供試品溶液的制備供試品溶液的制備 取本品粉末（過四號篩）約1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，加熱回流1小時，取出，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。 測定法測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10l，注入液相色譜儀，測定，即得。 本品按干燥品計(jì)算，含游

7、離蒽醌以大黃素（C15H1005）和大黃素甲醚（C16H12O5）的總量計(jì)，不得少于0.10%。 品名血脂寧丸品名血脂寧丸856 處方?jīng)Q明子、山楂、荷葉、制何首烏處方?jīng)Q明子、山楂、荷葉、制何首烏 制法以上四味，與白糖粉碎成細(xì)粉，過篩，混勻。制法以上四味，與白糖粉碎成細(xì)粉，過篩，混勻。 每每100g粉末加煉蜜粉末加煉蜜7090g制成大蜜丸，即得。制成大蜜丸，即得。 性狀本品為棕褐色的大蜜丸；味甜、酸。性狀本品為棕褐色的大蜜丸；味甜、酸。 鑒別（一）鑒別（一）TLC法法 （1）溶解溶解取本品取本品9g，剪碎，加甲醇，剪碎，加甲醇30ml，超聲處理，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，分鐘，濾過，濾液

8、蒸干，殘?jiān)铀畾堅(jiān)铀?0ml使溶解，加鹽酸使溶解，加鹽酸1ml，加熱回流，加熱回流30分鐘，放冷，用乙醚振搖提取分鐘，放冷，用乙醚振搖提取2次，每次次，每次20ml，合并乙醚提取液，蒸干，殘?jiān)尤燃淄?，合并乙醚提取液，蒸干，殘?jiān)尤燃淄?ml使溶解，作為使溶解，作為供試供試品溶液。品溶液。 對照品對照品另取另取大黃酚大黃酚對照品、對照品、大黃素甲醚大黃素甲醚對照品，加三氯甲烷制成每對照品，加三氯甲烷制成每1ml各含各含1mg的混合溶液，作為的混合溶液，作為對照品溶液對照品溶液。 點(diǎn)樣點(diǎn)樣照薄層色譜法（通則照薄層色譜法（通則0502）試驗(yàn)，吸取供試品溶液）試驗(yàn)，吸取供試品溶液46l、對照品

9、溶液、對照品溶液24l，分別點(diǎn)于同一硅膠，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚（薄層板上，以石油醚（3060）甲酸乙酯甲酸乙酯甲酸甲酸（15：5：1）的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（）的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。 （2）溶解提取溶解提取取本品取本品20g，剪碎，加甲醇，剪碎，加甲醇40ml，超聲處理，超聲處理30分鐘，濾過，濾液分鐘，濾過，濾液蒸至近干，殘?jiān)冒痹囈赫糁两?，殘?jiān)冒痹囈?5ml溶解，用

10、三氯甲烷振搖提取溶解，用三氯甲烷振搖提取3次，每次次，每次20ml，合并三，合并三氯甲烷液，蒸干，殘?jiān)寐燃淄橐海舾?，殘?jiān)?.01mol/L鹽酸溶液鹽酸溶液20ml溶解，用三氯甲烷溶解，用三氯甲烷20ml振搖提振搖提取，棄去三氯甲烷液，酸水液用濃氨試液調(diào)節(jié)取，棄去三氯甲烷液，酸水液用濃氨試液調(diào)節(jié)pH值至值至9lO，再用三氯甲烷振搖提，再用三氯甲烷振搖提取取2次，每次次，每次20ml，合并三氯甲烷液，蒸干，殘?jiān)尤燃淄椋喜⑷燃淄橐?，蒸干，殘?jiān)尤燃淄?ml使溶解，作為使溶解，作為供試供試品溶液。品溶液。 對照品對照品另取另取荷葉荷葉對照藥材對照藥材2g，加甲醇，加甲醇10ml，同法制

11、成對照藥材溶液。再取荷葉堿對，同法制成對照藥材溶液。再取荷葉堿對照品，加三氯甲烷制成每照品，加三氯甲烷制成每1ml含含1mg的溶液，作為的溶液，作為對照品對照品溶液。溶液。 點(diǎn)樣點(diǎn)樣照薄層色譜法（通則照薄層色譜法（通則0502）試驗(yàn)，吸取供試品溶液）試驗(yàn)，吸取供試品溶液610l、對照藥材溶液及對、對照藥材溶液及對照品溶液各照品溶液各46l，分別點(diǎn)于同一硅膠，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷薄層板上，以環(huán)己烷乙酸乙酯乙酸乙酯濃氨試液濃氨試液（15：15：0.4）為展開劑，置氨蒸氣飽和的展開缸內(nèi)，展開，取出，晾干，噴以?。檎归_劑，置氨蒸氣飽和的展開缸內(nèi)，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液。

12、供試品色譜中，在與對照藥材色譜和對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯碘化鉍鉀試液。供試品色譜中，在與對照藥材色譜和對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。相同顏色的斑點(diǎn)。 檢查應(yīng)符合丸劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定（通則檢查應(yīng)符合丸劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定（通則0108）。）。 溶解提取溶解提取含量測定取重量差異項(xiàng)下的本品，剪碎，混勻，取約含量測定取重量差異項(xiàng)下的本品，剪碎，混勻，取約2g，精密稱定，置錐形瓶中，加甲醇精密稱定，置錐形瓶中，加甲醇30ml，超聲處理（功率，超聲處理（功率200W，頻率頻率40kHz） 60分鐘，濾過；藥渣與濾紙?jiān)偌蛹状挤昼?，濾過；藥渣與濾紙?jiān)偌蛹状?0ml，超聲處，超聲處理（功率理（

13、功率200W，頻率，頻率40kHz） 30分鐘，濾過；藥渣用甲醇分鐘，濾過；藥渣用甲醇20ml洗滌，合并濾液與洗液，置水浴上蒸干，殘?jiān)眉状既芙?，轉(zhuǎn)移洗滌，合并濾液與洗液，置水浴上蒸干，殘?jiān)眉状既芙?，轉(zhuǎn)移至至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，作為量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，作為供試品溶液供試品溶液。 對照品對照品另取另取熊果酸熊果酸對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含含0.1mg的溶液，作為對照品溶液。的溶液，作為對照品溶液。 點(diǎn)樣點(diǎn)樣照薄層色譜法（通則照薄層色譜法（通則0502）試驗(yàn)，精密吸取供試品溶液）試驗(yàn)，精密吸取供試品溶液2l、對照品溶液對照

14、品溶液2l與與4l，分別交叉點(diǎn)于同一硅膠，分別交叉點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯薄層板上，以三氯甲烷甲烷甲醇（甲醇（20：0.5）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在硫酸乙醇溶液，在105加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，在薄層板上覆蓋同加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周圍用膠布固定。照薄層色譜法（通則樣大小的玻璃板，周圍用膠布固定。照薄層色譜法（通則0502）進(jìn)行掃描，波長：進(jìn)行掃描，波長：S=540nm，R=420nm，測量供試品吸光度，測量供試品吸光度積分值與對照品吸光度積分值，計(jì)算，即得。積分值與對照品吸光度積分值，計(jì)算，即得。

15、 本品每丸含山楂按本品每丸含山楂按熊果酸熊果酸（C30H48O3）計(jì)，不得少于）計(jì)，不得少于4.5mg血脂寧丸血脂寧丸+甲醇超聲波溶解甲醇超聲波溶解本品20g加甲醇40ml超聲溶解殘?jiān)铀?0ml溶解+鹽酸1ml加熱回流30min乙醚提取2次每次20ml乙醚層合并蒸干水層供試品：大黃素甲醚制何首烏；大黃酚，決明子過濾蒸干殘?jiān)尤燃淄?ml溶解過濾蒸干三氯甲烷振搖提取三氯甲烷振搖提取3次，每次次，每次20ml合并蒸干殘?jiān)冒痹囈簹堅(jiān)冒痹囈?5ml溶解溶解氨液層三氯甲烷三氯甲烷60ml殘?jiān)脷堅(jiān)?.01mol/L鹽酸溶液鹽酸溶液20ml溶解溶解三氯甲烷三氯甲烷20ml振搖提取振搖提取酸水液用濃氨試液調(diào)節(jié)酸水液用濃氨試液調(diào)節(jié)pH值至值至9lO酸水層酸水層三氯甲烷振搖提取三氯甲烷振搖提取2次，每次次，每次20ml殘?jiān)燃淄橐簹堅(jiān)燃淄橐?ml使溶解做使溶解做供試品溶液，荷葉堿供試品溶液，荷葉堿三氯層甲烷棄用合并三氯甲烷液蒸干合并三氯甲烷液蒸干本品本品2g甲醇甲醇30ml溶解溶解超聲處理（功率超聲處理（功率