多功能酶標(biāo)儀SpectraMaxi3的操作規(guī)程

1、多功能幅標(biāo)儀SpectraMaxi3的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程StandardOperationofSpectraMaxi3部門簽名/日期DepartmentSignature/Date起草人：Preparedby樊小川，XiaochuanFanQC審核人：Reviewedby黃思佳，SijiaHuangQC審核人：Reviewedby褚夫蘭，F(xiàn)ulanChuQA批準(zhǔn)人：Approvedby張伯彥,BoyanZhang質(zhì)量負(fù)責(zé)人頒發(fā)部門Issuedby質(zhì)量保證部-QA執(zhí)行日期EffectiveDate替換文件ReplacedForVersion00復(fù)審日期ReviewDate分發(fā)部門Distributed

2、toQA,QCI建立多功能酶標(biāo)儀SpectraMaxi3的標(biāo)準(zhǔn)操作程序，規(guī)范SpectraMaxi3多功能酶標(biāo)儀檢測時(shí)的操作。適用范圍本規(guī)程適用于所有對多功能酶標(biāo)儀SpectraMaxi3的操作術(shù)語或定義多功能酶標(biāo)儀：指功能較強(qiáng)、精度較高的單體臺(tái)式酶標(biāo)儀，可檢測吸光度（Abs）、熒光強(qiáng)度（FL時(shí)間分期熒光（TRF）化學(xué)發(fā)光（Lum）等。責(zé)任儀器負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)多功能酶標(biāo)儀的日常及定期維護(hù)，出現(xiàn)故障時(shí)負(fù)責(zé)聯(lián)系廠家維修，保證運(yùn)行正常。實(shí)驗(yàn)操作人員需嚴(yán)格按照本規(guī)程執(zhí)行，保證儀器正常使用，每次用完后填寫儀器使用記錄，且使用后及時(shí)清理臺(tái)面，保持儀器潔凈。EHS要求N/A程序儀器安裝儀器與電腦連接完畢并連接電源

3、以后，按儀器背面的按鈕可以直接啟動(dòng)儀器，經(jīng)過幾分鐘后的儀器自檢后就可以開始用于檢測。在連有電源的情況下，保持24小時(shí)開機(jī)，不要罩防塵罩以保持透氣，隔1-2月關(guān)機(jī)重啟一次。SoftMaxPro軟件操作基本步驟打開軟件連接儀器Chooseadiffecientinstrument點(diǎn)擊“SoftMaxPro”圖標(biāo)，打開SoftMaxPro軟件，出現(xiàn)"PlateSetupHelper"對話框。若無則點(diǎn)擊LSI圖標(biāo)。，打開InstrumentConnection"對話框,“AvailibleInstruments"菜單中選擇儀器連接線與電腦所接的串口號(hào)（COM選擇

4、所購買的酶標(biāo)儀型號(hào)SpectraMaxi3或添加模塊卡盒型號(hào)。最后點(diǎn)擊“OK'鍵連接。儀器檢測參數(shù)設(shè)定點(diǎn)擊L一圖標(biāo)后出現(xiàn)“Settings”對話框，對話框最上方出現(xiàn)ReadMode（讀板模式）和ReadType（讀板類型）兩個(gè)選項(xiàng)，讀板模式有ABS憂吸收）、FL供光強(qiáng)度）、LUM（化學(xué)發(fā)光）和TRF時(shí)間分辨熒光），讀板類型有終點(diǎn)檢測（Endpoint）、動(dòng)力學(xué)（Kinetic）、單孔掃描（WellScan）和光譜掃描（Spectrum）四種。使用者根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇合適的讀板模式和讀板類型。對話框下方左側(cè)列表有如下選項(xiàng)，從上往下依次用鼠標(biāo)點(diǎn)中選項(xiàng)，并在右欄中選擇對應(yīng)的參數(shù)設(shè)定。1） Wa

5、velengths（波長）可以選擇檢測幾種波長，光吸收模式最多為6種，其他模式均為4種。a）對于光吸收模式，可以在Lm1后面的框中填入檢測所用波長。b）對于熒光強(qiáng)度，時(shí)間分辨熒光和熒光偏振模式，可以在2個(gè)框中分別填入激發(fā)波長和發(fā)射波長。Cutoff一般選為自動(dòng)（Auto）。c）對于化學(xué)發(fā)光模式，一般使用All'。當(dāng)同時(shí)檢測不止一色化學(xué)發(fā)光的時(shí)候可填入相應(yīng)的檢測波長。2） PlateType（板型）對于不同實(shí)驗(yàn)可以選擇6-384孔板及其具體的板型。3） ReadArea（讀板區(qū)域）可用鼠標(biāo)先選中起始孔按住不放，進(jìn)行拖曳直到選中微孔板上所有需要檢測的孔。4） PathCheck（光徑校正）

6、僅用于光吸收模式，即將微孔板檢測得到的原始光吸收值通過參比校正到1cm光徑長度時(shí)的光吸收值?？蛇x擇“WaterConstant”（以水做參比）和“CuvetteRefence'（在比色皿中加入相應(yīng)溶液預(yù)讀一次作為參比)。一般情況下可以不用校正。5） shake選中BeforeFirstRead后可以選擇讀板之前震板，可選擇0-999秒。一般不選擇。6） SpeedRead可加速讀數(shù)速度，為準(zhǔn)確所讀數(shù)值，默認(rèn)不加速，一般不選擇。7） MoreSettingReadorder可按實(shí)驗(yàn)要求選擇按列(Column)、排(Row)或者孔(Well)掃描讀數(shù)。全部設(shè)定完后按對話框右下角的“OK”確

7、認(rèn)，回至卜'PlateSetupHelper%話框。檢測樣品分組設(shè)定按臼鍵后出現(xiàn)TemplateEdite'對話框，先用鼠標(biāo)拖曳選中要進(jìn)行編輯的孔，被選中的空會(huì)變黑，然后點(diǎn)擊Groups欄中的下拉菜單選擇所要進(jìn)行的分組。具體設(shè)定步驟如下：設(shè)定本底參照(BLANK)進(jìn)入上述界面后，點(diǎn)擊AssignmentOption欄中的下拉菜單選中“Plateblank”，則其他的數(shù)據(jù)結(jié)果均顯示為扣除本底平均值的結(jié)果。設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)樣品(Standards)當(dāng)有一系列已知濃度梯度的樣品做為標(biāo)準(zhǔn)樣品時(shí)，點(diǎn)擊Groups欄中的“Standard,再點(diǎn)擊“assign'進(jìn)行標(biāo)記，繼而點(diǎn)擊“seri

8、es”進(jìn)行設(shè)定，新出現(xiàn)的對話框中“Startfrom”中“ToptoBottom"、“BottomtoTop"、“LefttoRight”或“RighttoLeft”表示該組內(nèi)樣品排列次序，根據(jù)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行選擇；右上方的“patternofReplicates”會(huì)自動(dòng)顯示復(fù)孔數(shù)目；下方的“Startingvalue”表示起始樣品的濃度，可以在框內(nèi)填入相應(yīng)數(shù)值，"Stepby”表示以什么方式設(shè)置濃度梯度，前面下拉框可以選擇“+、-、*、/"，后面框內(nèi)可以填入相應(yīng)的值，比如起始濃度是2,增加2,則選擇“+”，輸入“2”。設(shè)定完畢，點(diǎn)對話框右下角“OK'確

9、認(rèn)。在上一界面中點(diǎn)右邊的“Edit”，新對話框中“SampleDescriptor下的“Columnname”根據(jù)實(shí)驗(yàn)情況命名，默認(rèn)是“Concentration","Units”后面可以填入適當(dāng)?shù)臐舛葐挝?，設(shè)置好后退出“TemplateEdite”。3)設(shè)定未知樣品(Unknowns)對未知樣品進(jìn)行分組設(shè)定時(shí)，進(jìn)入“TemplateEdite”界面，選中微孔，點(diǎn)擊“Groups”欄“Unknowns”下的“Unknowns”,若未知樣品已知濃度，選"Unk-dilution”，具體設(shè)定同標(biāo)準(zhǔn)樣品。4)有多個(gè)標(biāo)準(zhǔn)樣品或樣品時(shí)點(diǎn)Groups欄中的“add”，可以添加

10、新組，其它設(shè)置同上。數(shù)據(jù)分析設(shè)定1)在“standardCurve”進(jìn)行數(shù)據(jù)分析設(shè)定，點(diǎn)擊品以圖標(biāo)，進(jìn)入PlotEdite-standardcurve進(jìn)彳亍圖表設(shè)置，在I對話框中，“GrafeTitle”中填入該圖的名稱，即以后在數(shù)據(jù)計(jì)算中要引用的名字?！癙lotName”中填入該條曲線的名稱，“X-AxiS和“Y-AxiS可以通過下拉欄選擇該曲線橫坐標(biāo)和縱坐標(biāo)所引用的數(shù)據(jù)，如選擇“Concentration"和“MeanValue”。在“PlotAttributes"中可選擇圖中每個(gè)點(diǎn)的形狀和顏色。一張圖中可以有多條曲線，按“add”可在該圖中增加曲線。2)“CurveF

11、it”右邊的下拉菜單可選擇曲線擬合的方式，如四參數(shù)方程“4-Parameter"，根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求進(jìn)行選擇。設(shè)定溫度儀器可以設(shè)定溫度，可在室溫以上加溫。當(dāng)開啟溫度控制后需使儀器的微孔板插槽置于關(guān)閉狀態(tài)保持所設(shè)溫度，如果處于打開狀態(tài)，儀器會(huì)發(fā)出報(bào)警聲，然后自動(dòng)關(guān)閉微孔板插槽。參數(shù)設(shè)置保存實(shí)驗(yàn)檢測參數(shù)都設(shè)定完畢后，所有檢測條件的設(shè)定、樣品類型的設(shè)定、實(shí)驗(yàn)結(jié)果、數(shù)據(jù)分析結(jié)果等，可以另存為兩種格式：1） *.sda格式，即數(shù)據(jù)格式。該文檔含有包括參數(shù)設(shè)定，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，結(jié)果分析等所有實(shí)驗(yàn)內(nèi)容。2） *.spr格式，即模版格式。該文檔含有參數(shù)設(shè)定，分析公式等實(shí)驗(yàn)設(shè)定內(nèi)容，可以應(yīng)用于多次而復(fù)實(shí)驗(yàn)而使用統(tǒng)

12、一模版。為避免覆蓋原有數(shù)據(jù)，每次使用需新建模板或?qū)贆z測模版讀數(shù)，禁止使用已保存的原始檢測數(shù)據(jù)作為模版。運(yùn)行程序按“open/close”可以控制儀器微孔板插槽的打開和關(guān)閉，微孔板插槽打開后，將酶標(biāo)板水平放置到微孔板插槽，點(diǎn)“open/close”關(guān)閉微孔板插槽。點(diǎn)擊3開始讀數(shù)。讀數(shù)完畢后保存文件即可。軟件安裝后默認(rèn)用戶在做完實(shí)驗(yàn)后自己保存數(shù)據(jù)。如果用戶希望每次實(shí)驗(yàn)檢測后自動(dòng)保存可以在“SaveDataAfterRead前打勾。結(jié)果分析在實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，自動(dòng)根據(jù)所設(shè)參數(shù)進(jìn)行結(jié)果分析以及曲線擬合。在結(jié)果中包括了所讀數(shù)值及曲線相關(guān)的數(shù)據(jù)，內(nèi)容包括樣品序號(hào)、樣品數(shù)值（value）、SD（Standard

13、Deviation）值和CV值（coefficientofvariation），在曲線圖下方，軟件還會(huì)自動(dòng)計(jì)算出曲線的各種參數(shù)如EC50值等。數(shù)據(jù)分析完后，建議將其屬性更改為只讀，以防止誤刪。其他分析SpectraMaxi3還包括相關(guān)性分析等分析模塊，可根據(jù)不同實(shí)驗(yàn)需要選用。儀器保養(yǎng)注意1）有良好的電源，保持24小時(shí)開機(jī)。2）保持避光和干凈的室內(nèi)環(huán)境，維持一定的濕度（30%-80%）3）維持室內(nèi)比較恒定的溫度，以20-22度為最適宜。4）適用6-384孔板。96孔微孔板內(nèi)每孔可檢測100-300ul溶液，最佳檢測體積為200ul。384孔微孔板內(nèi)每孔可檢測50-100ul溶液，最佳檢測體積為80uL5）檢測后的微孔板不要長期置于儀器插槽中，檢測完后就從儀器中取出，避免溶液蒸發(fā)腐蝕或損壞儀器內(nèi)部光路系統(tǒng)。如果為有腐蝕性或揮發(fā)性溶液，請帶蓋檢測。6）對于可見光吸收檢測，使用全透明微孔板；紫外光吸收檢測，使用紫外可透全透明微孔板；熒光強(qiáng)度和熒光偏振，使用黑色不透明板，需要檢測底讀的用黑色底透微孔板；化學(xué)發(fā)光和時(shí)間分辨熒光，使用白色不透明微孔板。附件N/A參考或引用文件SoftMax?ProMicroplateDataAcquisition