腦缺血論文：缺血后處理對腦缺血再灌注大鼠TLR4和NF-κB表達的影響

1、腦缺血論文：缺血后處理對腦缺血再灌注大鼠TLR4和NF-kB表達的影響【中文摘要】第一部分大鼠局灶性腦缺血后處理動物模型的建立建立大鼠局灶性腦缺血后處理(ischemicpostconditioning,IP)模型，并確定IP對局灶性腦缺血再灌注(ischemicreperfusion,l/R)損傷發(fā)揮神經(jīng)保護的最佳時間窗。方法：將成年健康雄性SD大鼠60只,隨機分為6組(n=10),假手術(shù)組、缺血再灌注組(I/R)組、IP-15S組、IP-30S組、IP-45s組和IP-60S組。采用線栓法阻塞大腦中動脈(middlecerebralarteryocclusion,MCAO)建立局灶性腦缺血

2、再灌注模型。IP方法為在MCAO2f后對每個亞組大鼠分別給與3個循環(huán)的15s/15s、30s/30s、45s/45s、60s/60s再灌注/缺血。所有動物于再灌注24h進行神經(jīng)功能缺損評分，并測定腦梗死體積及細胞凋亡的變化。結(jié)果：用線栓法成功建立大鼠缺血再灌注模型。與I/R組相比,IP-15s組、IP-30S組、IP-45S組大鼠神經(jīng)功能缺損評分明顯降低(PV0.05),其中IP-15S神經(jīng)功能缺損評分低于IP-30S、IP-45s(P<0.05)OI/R組腦梗死體積及凋亡細胞計數(shù)顯著增加,IP-15s組、IP-30S組、IP-45S組較I/R組顯著降低，特別以IP-15S組明顯(PvO

3、.05)。IP-60S組與I/R組無顯著性差異(P>0.05)。結(jié)論：改良的線栓法效果可靠，是制備MCA再灌注的理想模型；缺血后處理能減輕局灶性的腦缺血再灌注損傷，其最佳時間窗為反復(fù)3次,15s/15s再灌注/缺血。第二部分缺血后處理對腦缺血再灌注大鼠TLR4和NF-kB表達的影響探討缺血后處理(IP)對大鼠局灶性腦缺血再灌注時Toll樣受體4(TLR4)和核因子-kB(NF-kB)表達的影響，闡明TLR4-NF-KB信號通路在腦缺血后處理中的作用。方法：將成年健康雄性SD大鼠110只,隨機分為假手術(shù)組(n=10)、缺血再灌注(I/R)組(n=50)和缺血后處理組(IP)(n=50)。后

4、兩組根據(jù)再灌注時間每組又分為6h、12h、24h、48h、72h五個亞組(n=10)。采用線栓法阻塞大腦中動脈(MACO)2h建立局灶腦缺血模型，后處理方法為大腦中動脈阻閉2h后持續(xù)再灌注前，行3個循環(huán)的15s/15s再灌注/缺血。對各組進行神經(jīng)功能缺損評分,TTC染色測定腦梗死體積，免疫組化法檢測腦組織TLR4和NF-kB蛋白的表達，原位雜交法檢測TLR4和NF-kmRNA勺表達。結(jié)果：(1)I/R組和IP組大鼠均可見神經(jīng)功能缺損及缺血側(cè)大腦半球梗死。與I/R組相比,IP組大鼠腦梗死體積明顯減少(PV0.05),神經(jīng)功能缺失評分明顯改善(P<0.05)。I/R組TLR4蛋白及mRNA在

5、再灌注6h開始升高,24h達高峰，之后逐漸下降。IP組TLR4蛋白及mRNA!達時間曲線與I/R組相一致，但與I/R組各相應(yīng)亞組比較,IP組的TLR4蛋白及mRNA表達均明顯降低(P<0.05)。(3)NF-kB蛋白及mRN在I/R組和IP組均與再灌注6h升高,24h達高峰后下降，與TLR4時間變化曲線相一致。與I/R組各相應(yīng)亞組比較,TLR4蛋白及mRNA表達在IP組均明顯降低(P<0.05)。結(jié)論：(1)缺血再灌注可引起TLR4和NF-kB的表達。(2)IP能抑制缺血再灌注后TLR4和NF-kB的表達，減小缺血再灌注損傷，改善神經(jīng)行為功能【英文摘要】Partl:Establis

6、hmentofanimalmodelsoffocalischemicpostconditioning:Toestablishanimalmodeloffocalcerebralischemicpostconditioningandtoinvestigatetheopticaltimewindowsofischemicpostconditioningagainstfocalcerebralischemicinjuryinrats.Methods:Atotalof60healthy,male,SDratswererandomlyassignedtosixgroups(n=10each):shams

7、urgerygroup,I/RgroupandIPgroupwithdifferenttimeintervals(15s,30s,4sand1min).Focalcerebralischemicreperfusionmodelwereformedviamiddlecerebralarteryocclusion(MACO).IPgroupwereestablishedbytherecyclesofreperfusion/ischemiaatdifferenttimeintervals(10s,15s,30s,45sand60srespectively)aftermiddlecerebralart

8、eryocclusion(MCAO)for2hours.Themodelswereevaluatedwithexaminatingneurologicdeficitscores,infarctvolumeandnervecellapoptosisat24hafterreperfusion.Results:Theischemicreperfusionmodelsintheratsweresuccessfullyestablishedbyintraluminalsuturemethod.ComparedwiththeI/Rgroup,theneurologicdeficitscoressignificantlydecreasedinIP-15s,IP-30sandIP-45s