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1、1第二章第二章 原核微生物原核微生物22.1 細(xì)菌細(xì)菌2.1.1 細(xì)菌的細(xì)菌的形態(tài)和大小形態(tài)和大小w細(xì)菌:是一類結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、細(xì)胞壁堅(jiān)韌、主要以細(xì)菌:是一類結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、細(xì)胞壁堅(jiān)韌、主要以二分裂方式繁殖和水生性較強(qiáng)的原核微生物,二分裂方式繁殖和水生性較強(qiáng)的原核微生物,也是原核微生物中最具代表性的一類。也是原核微生物中最具代表性的一類。圖圖1-1 常見的三種細(xì)菌典型形態(tài)常見的三種細(xì)菌典型形態(tài)A.球菌球菌 B.桿菌桿菌 C.螺旋菌螺旋菌32.1.1.1 形態(tài)形態(tài)(一)球菌(一)球菌w球菌就是球形的細(xì)球菌就是球形的細(xì)菌菌,它是這類細(xì)菌的總稱,細(xì)胞呈球形或橢圓形。wl 單球菌單球菌w2 雙球菌雙球菌w3鏈球菌
2、鏈球菌w4 四聯(lián)球菌四聯(lián)球菌w5八疊球菌八疊球菌w6 葡萄球菌葡萄球菌圖圖1-24球菌的直徑一般在之間,以下是一些球菌的電鏡照片。鏈球菌鏈球菌這種菌為志賀氏菌屬,能夠引起細(xì)菌性痢疾單球菌和雙球菌單球菌和雙球菌5金金黃黃色色葡葡萄萄球球菌菌引起傷口化膿性感染6(二)桿菌w細(xì)胞呈,菌體直或稍彎,粗短或細(xì)長(zhǎng)。末端鈍圓、尖、膨大或平裁狀。w桿菌細(xì)胞常沿一個(gè)平面分裂,菌體單個(gè)分散存在,或以短鍵狀、長(zhǎng)鏈狀、柵欄狀、絲狀等方式排列。w十分長(zhǎng)的桿狀細(xì)菌又稱為絲菌。7形態(tài):形態(tài):1單桿菌、雙桿菌、鏈桿菌單桿菌、雙桿菌、鏈桿菌2長(zhǎng)桿菌、短桿菌、梭桿菌、芽孢桿菌長(zhǎng)桿菌、短桿菌、梭桿菌、芽孢桿菌屬于炭疽熱桿菌,引起皮
3、膚惡瘡及肺部損害8屬與肉毒桿菌屬,可引起食物中毒9細(xì)胞兩端形狀細(xì)胞兩端形狀w桿菌的兩端常呈各種小同的形狀,有半圓形的,有鈍圓形的,還有平截的和略尖的,也有一端大另一端小的。對(duì)同一種桿菌的成熟細(xì)胞來說,細(xì)胞兩端的形狀是穩(wěn)定的。10桿菌的排列桿菌的排列w桿菌細(xì)胞常沿一個(gè)平面桿菌細(xì)胞常沿一個(gè)平面分裂。大多數(shù)茵體分散分裂。大多數(shù)茵體分散為單個(gè)或成對(duì)存在,也為單個(gè)或成對(duì)存在,也有呈長(zhǎng)短不同的鏈狀、有呈長(zhǎng)短不同的鏈狀、柵狀或八字形的排列的,柵狀或八字形的排列的,這些排列方式,有時(shí)并這些排列方式,有時(shí)并非形態(tài)學(xué)特征,而是由非形態(tài)學(xué)特征,而是由生長(zhǎng)階段或培養(yǎng)條件等生長(zhǎng)階段或培養(yǎng)條件等原因造成的,往往是不原因造
4、成的,往往是不穩(wěn)定的。因此,桿菌的穩(wěn)定的。因此,桿菌的排列在分類鑒定中僅作排列在分類鑒定中僅作參考。參考。11(三)螺旋菌 螺旋菌細(xì)胞呈,其中若菌體只有一個(gè)彎曲,。直徑在,長(zhǎng)度不等。根據(jù)彎曲的程度分為弧菌和螺旋菌。 12弧菌:弧菌:菌體略彎曲,弧形不足一周,呈香蕉狀,往往偏端菌體略彎曲,弧形不足一周,呈香蕉狀,往往偏端 單生或叢生鞭毛,與略彎曲的桿菌在形態(tài)上不易區(qū)分。單生或叢生鞭毛,與略彎曲的桿菌在形態(tài)上不易區(qū)分。螺旋菌:螺旋菌:菌體會(huì)轉(zhuǎn)為螺旋狀,一般旋轉(zhuǎn)菌體會(huì)轉(zhuǎn)為螺旋狀,一般旋轉(zhuǎn)26周,兩端生有周,兩端生有鞭毛。鞭毛。13(四)細(xì)菌的特殊形態(tài)(四)細(xì)菌的特殊形態(tài) 除了球狀、桿狀和螺旋狀以外,
5、自然界中還有其他形態(tài)的細(xì)菌,除了球狀、桿狀和螺旋狀以外,自然界中還有其他形態(tài)的細(xì)菌,如柄細(xì)菌,其細(xì)胞為桿狀或梭狀,且細(xì)胞上有柄、菌絲等伸出物。如柄細(xì)菌,其細(xì)胞為桿狀或梭狀,且細(xì)胞上有柄、菌絲等伸出物。近年來,還陸續(xù)發(fā)現(xiàn)少數(shù)三角形、方形和圓盤形等形態(tài)的細(xì)菌。近年來,還陸續(xù)發(fā)現(xiàn)少數(shù)三角形、方形和圓盤形等形態(tài)的細(xì)菌。142.1.1.2 細(xì)菌細(xì)胞的大小細(xì)菌細(xì)胞的大小 細(xì)菌大小的度量單位是細(xì)菌大小的度量單位是m,度量其亞細(xì),度量其亞細(xì)胞構(gòu)造則用胞構(gòu)造則用nm。球菌大小以其直徑表示,桿。球菌大小以其直徑表示,桿菌和螺旋菌以其長(zhǎng)度和寬度表示。菌和螺旋菌以其長(zhǎng)度和寬度表示。 通常,球菌直徑多為通常,球菌直徑多
6、為0.51 m;小型桿;小型桿菌(菌(0.20.4) mm ;中桿;中桿菌(菌(0.51) m mmm;螺旋菌;螺旋菌(0.31) m m15w 細(xì)菌細(xì)胞一般包括:、。2.1. 2細(xì)菌的細(xì)胞結(jié)構(gòu)細(xì)菌的細(xì)胞結(jié)構(gòu)2.1.2.1 細(xì)菌的一般結(jié)構(gòu)細(xì)菌的一般結(jié)構(gòu)16()細(xì)胞壁()細(xì)胞壁w細(xì)胞壁位于菌體外表面,較堅(jiān)韌而富有彈性。其功能主要有: w革蘭氏染色革蘭氏染色w 細(xì)胞壁在細(xì)菌分類鑒別中有著十分重要的地位。w 在細(xì)菌染色中有一種常用的染色方法稱為,所有的細(xì)菌通過革蘭氏染色被區(qū)分為兩類。171.染色染色 2.-溶液浸濕溶液浸濕3. 進(jìn)行顏色洗脫進(jìn)行顏色洗脫4.第二次染色第二次染色染色的結(jié)果有兩種,一種情
7、況,細(xì)菌呈現(xiàn)第一次染色的效果,稱(G+),這一類細(xì)菌稱;另一種情況,細(xì)菌呈現(xiàn)第二次染色的效果;稱(G-),這類細(xì)菌稱。 不同種類的細(xì)菌的革蘭氏染色反應(yīng)是特定的,這種區(qū)別。如圖1819w G+細(xì)菌的細(xì)胞壁厚度在2025nm,結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單只有一層,化學(xué)組成中為75%肽聚糖肽聚糖,其余為胞壁酸胞壁酸,肽聚糖是由肽鏈中的氨基酸殘基與糖鏈中的單糖分子連接而成,;磷壁酸是由磷酸與多糖通過脂鍵形成的磷酸多糖,為革蘭氏陽性菌所特有。w 在第一次染色時(shí),細(xì)菌吸附染料分子顯示紫色,當(dāng)用,由于兩種物質(zhì)均不被溶解,而且細(xì)胞壁被乙醇吸去了結(jié)合水,細(xì)胞內(nèi)的,細(xì)菌仍呈,第二次染色染不上去新顏色。最終顯示為G+。 20w G-細(xì)
8、菌的細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)較為復(fù)雜,分為內(nèi)壁層和外壁層。內(nèi)壁層緊貼細(xì)胞膜,由組成,。外壁層可再分為內(nèi)、中、外三層,內(nèi)層為層,中間為,最外層為層。某些細(xì)菌的脂多糖是毒素的主要成分。在第一次染色時(shí),細(xì)菌吸附染料分子顯示紫色,當(dāng)用95%乙醇處理時(shí),細(xì)胞內(nèi)的,細(xì)菌呈無色透明,第二次染色第二次染色時(shí)又吸附新的顏色呈紅色紅色。最終顯示為G-。 2122(二)細(xì)胞膜(二)細(xì)胞膜 w 細(xì)菌的細(xì)胞膜與其他生物的結(jié)構(gòu)與組成類似細(xì)菌的細(xì)胞膜與其他生物的結(jié)構(gòu)與組成類似,為為23細(xì)胞膜的化學(xué)組成與結(jié)構(gòu)細(xì)胞膜的化學(xué)組成與結(jié)構(gòu) 基本成分是整齊排列的兩層磷脂分子。每一磷脂分子有一個(gè)帶基本成分是整齊排列的兩層磷脂分子。每一磷脂分子有一個(gè)帶
9、正電荷的極性頭和一個(gè)不帶電荷的非極性頭。各種蛋白質(zhì)分子鑲嵌正電荷的極性頭和一個(gè)不帶電荷的非極性頭。各種蛋白質(zhì)分子鑲嵌在磷脂雙分子層,深淺不一。在磷脂雙分子層,深淺不一。24細(xì)胞膜的功能細(xì)胞膜的功能可控制細(xì)胞內(nèi)外物質(zhì)(營養(yǎng)物質(zhì)和代謝物質(zhì))的運(yùn)輸可控制細(xì)胞內(nèi)外物質(zhì)(營養(yǎng)物質(zhì)和代謝物質(zhì))的運(yùn)輸起維持細(xì)胞內(nèi)正常滲透壓的屏障作用起維持細(xì)胞內(nèi)正常滲透壓的屏障作用是合成細(xì)胞壁各種組分(脂多糖、肽聚糖、磷壁酸)是合成細(xì)胞壁各種組分(脂多糖、肽聚糖、磷壁酸)和莢膜等大分子物質(zhì)的場(chǎng)所和莢膜等大分子物質(zhì)的場(chǎng)所是進(jìn)行氧化磷酸化或光合磷酸化的產(chǎn)能基地是進(jìn)行氧化磷酸化或光合磷酸化的產(chǎn)能基地?fù)碛性S多酶擁有許多酶是電子傳遞鏈
10、的所在部位是電子傳遞鏈的所在部位是鞭毛的著生點(diǎn)是鞭毛的著生點(diǎn)提供鞭毛運(yùn)動(dòng)所需要的能量提供鞭毛運(yùn)動(dòng)所需要的能量25(三)間體(三)間體26(四)細(xì)胞質(zhì)(四)細(xì)胞質(zhì)w被細(xì)胞膜包圍著的除核質(zhì)體外的一切透明、被細(xì)胞膜包圍著的除核質(zhì)體外的一切透明、膠狀及顆粒狀的物質(zhì),總稱為細(xì)胞質(zhì)。主要膠狀及顆粒狀的物質(zhì),總稱為細(xì)胞質(zhì)。主要包括核糖體、貯藏性顆粒、各種酶類、中間包括核糖體、貯藏性顆粒、各種酶類、中間代謝物、無機(jī)鹽、載色體和質(zhì)粒等。代謝物、無機(jī)鹽、載色體和質(zhì)粒等。27核糖體核糖體 原核微生物的核糖體是分散在細(xì)胞原核微生物的核糖體是分散在細(xì)胞質(zhì)中的亞微顆粒,質(zhì)中的亞微顆粒, 是合成蛋白質(zhì)的部位。是合成蛋白質(zhì)的
11、部位。它由核糖核酸(它由核糖核酸(RNA)蛋白質(zhì)組成,其)蛋白質(zhì)組成,其中中RNA占占60,蛋白質(zhì)占,蛋白質(zhì)占40。28w這些顆粒通常較大,為單層膜所包圍,這些顆粒通常較大,為單層膜所包圍,在營養(yǎng)過剩是積累,在營養(yǎng)物質(zhì)貧乏時(shí)在營養(yǎng)過剩是積累,在營養(yǎng)物質(zhì)貧乏時(shí)消耗。一般而言,一種細(xì)菌只有一種貯消耗。一般而言,一種細(xì)菌只有一種貯藏性顆粒,也有兩種或多種貯藏性顆粒藏性顆粒,也有兩種或多種貯藏性顆粒存在的存在的 細(xì)菌。細(xì)菌。貯藏性顆粒貯藏性顆粒29w聚聚 -羥基丁酸(羥基丁酸(poly一一hydroxybutyric acid簡(jiǎn)稱簡(jiǎn)稱 PHB)顆粒顆粒 w 聚聚 -羥丁酸是羥丁酸是 -羥丁酸的多聚體,
12、是脂類代謝產(chǎn)羥丁酸的多聚體,是脂類代謝產(chǎn)物物的一種,不溶于水,易被脂溶性染料著色,的一種,不溶于水,易被脂溶性染料著色,光學(xué)顯微鏡下可見。羥基丁酸分子呈酸性,當(dāng)其光學(xué)顯微鏡下可見。羥基丁酸分子呈酸性,當(dāng)其聚合為聚聚合為聚 -羥基丁酸時(shí),成為中性脂肪酸,從而羥基丁酸時(shí),成為中性脂肪酸,從而維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境中性。維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境中性。,可直接或間接用作還原力。,可直接或間接用作還原力。在許多細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)內(nèi)經(jīng)??砂l(fā)現(xiàn)在許多細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)內(nèi)經(jīng)??砂l(fā)現(xiàn)PHB顆粒。顆粒。30異染顆粒異染顆粒 異染顆粒是異染顆粒是。用藍(lán)色。用藍(lán)色染料染色后,不呈藍(lán)色而呈紫紅色,故稱異染料染色后,不呈藍(lán)色而呈紫紅色,故稱異染粒。它染粒
13、。它,。在菌種鑒定上有一定意義。在菌種鑒定上有一定意義。31硫粒硫粒,硫磺細(xì)菌生活在含,硫磺細(xì)菌生活在含H2S的環(huán)境中時(shí),如腐臭的污泥中,它們細(xì)胞的環(huán)境中時(shí),如腐臭的污泥中,它們細(xì)胞內(nèi)積累折光性很強(qiáng)的硫粒,作為內(nèi)積累折光性很強(qiáng)的硫粒,作為;硫粒也是某些;硫粒也是某些,如氧化硫,如氧化硫硫桿菌貯存的硫桿菌貯存的,能通過氧化元素硫?yàn)?,能通過氧化元素硫?yàn)榱蛩岫@取能量。這些顆粒不是所有細(xì)菌都同硫酸而獲取能量。這些顆粒不是所有細(xì)菌都同樣具有,樣具有,。32 又稱羧酶體,某些化能自養(yǎng)細(xì)菌菌體中含又稱羧酶體,某些化能自養(yǎng)細(xì)菌菌體中含有一類多角形的細(xì)胞內(nèi)含物,它的大小與噬菌有一類多角形的細(xì)胞內(nèi)含物,它的大小
14、與噬菌體相仿。體相仿。羧化體羧化體 許多營光合作用、無鞭毛運(yùn)動(dòng)的水生細(xì)菌許多營光合作用、無鞭毛運(yùn)動(dòng)的水生細(xì)菌的細(xì)胞內(nèi),常含有為數(shù)眾多的充滿氣體的小泡的細(xì)胞內(nèi),常含有為數(shù)眾多的充滿氣體的小泡囊,稱為氣泡。氣泡由厚約囊,稱為氣泡。氣泡由厚約2nm的蛋白質(zhì)膜所的蛋白質(zhì)膜所包圍,包圍,具有,具有。氣泡氣泡33(五)核質(zhì)體(五)核質(zhì)體w 核質(zhì)體是原核生物所特有的原始細(xì)胞核。,為細(xì)菌遺傳物質(zhì),卷曲折疊于核區(qū)。,這是原核生物與真核生物一個(gè)主要的區(qū)別之處。核質(zhì)體342.1.2.2 細(xì)菌細(xì)胞的特殊結(jié)構(gòu)細(xì)菌細(xì)胞的特殊結(jié)構(gòu)(一一)莢膜莢膜w是某些細(xì)菌在新陳代謝過程中形成的,是某些細(xì)菌在新陳代謝過程中形成的,。w厚約
15、200nm,稱為莢膜莢膜或或大莢膜大莢膜;w厚度小于小于200nm稱稱為微莢膜為微莢膜;w無明顯邊緣,疏松地向周圍環(huán)境擴(kuò)散的,稱為粘液粘液層層。w若粘液層局限化于細(xì)胞一端,就稱為粘接物粘接物,可可使細(xì)胞特異性地附著在物體表面使細(xì)胞特異性地附著在物體表面。35,即成為菌膠團(tuán)菌膠團(tuán)。36w1.莢膜的化學(xué)組成莢膜的化學(xué)組成w 莢膜的含水率在細(xì)菌莢膜有的含 、;還有的含脂類或脂類蛋白的復(fù)合體。w2.染色觀察染色觀察w 莢膜含水率太高,很難著色,可用(亦稱襯托法),先用染料染菌體,然后用墨汁將背景涂黑。這樣就可襯托出菌體和背景之間的透明區(qū),這透明區(qū)就是莢膜。w3.莢膜的功能莢膜的功能當(dāng),莢膜可被,含蛋白
16、質(zhì)的莢膜還可作;病原菌具有莢膜有助于其侵染人體;莢膜保護(hù)致病菌免受宿主吞噬細(xì)胞的吞噬,同時(shí)保護(hù)細(xì)菌免受干燥的影響。37w 。猶如一條長(zhǎng)鞭,故稱之為鞭毛。鞭毛長(zhǎng)度往往超過長(zhǎng)度往往超過菌體若干倍,菌體若干倍,在之間,但直徑很細(xì)直徑很細(xì),一般為10nm20nm,需用電鏡才能觀察。著生方式見左圖。38實(shí)驗(yàn)室可采用特殊染色,使染料的復(fù)合物附著并積累在鞭毛上,加粗其直徑, 可用普通光學(xué)顯微鏡觀察。3940w菌毛是長(zhǎng)在細(xì)菌體表的一種、(250根300根)的蛋白質(zhì)附屬物,長(zhǎng)度一般在0.22.0um,外形上,如兔毛、狗毛、鴨毛等等,故稱為菌毛。革蘭氏陰性細(xì)菌,少數(shù)革蘭氏陽性細(xì)菌亦有。菌毛有很多類型,具不同功能,
17、主主。w形狀介于鞭毛與上述普通菌毛之間的一種特殊菌毛稱為性菌毛,或稱,每一個(gè)有性細(xì)菌有1根4根,。41w芽孢有多層結(jié)構(gòu),可分別剝離。如圖由內(nèi)至外,依次為 主要由蛋白質(zhì)、脂類和糖組成;一層或幾層 主要成分是角蛋白,非常致密,通透性差,能夠阻止各類化學(xué)物質(zhì)包括殺菌劑的進(jìn)入;42w 很厚,主要成分為芽孢特有的肽聚糖,其中含有一種特殊的物質(zhì)二者形成了一種極為耐熱的凝膠狀物質(zhì),在沸水中芽孢也可存活數(shù)小時(shí)。 中含水量極低,細(xì)胞內(nèi)代謝極為緩慢,處于休眠狀態(tài)。43。當(dāng)將芽孢置于一個(gè)合適的環(huán)境中,芽孢萌發(fā),又會(huì)變?yōu)槠胀ǖ募?xì)胞結(jié)構(gòu),失去各類抵抗功能。一個(gè)細(xì)菌細(xì)胞只能形成一個(gè)芽孢,。w能否形成芽孢,芽孢的形狀、大小
18、及其在細(xì)胞內(nèi)的位置(如圖),在分類鑒定上有一定意義。44w能形成芽孢的細(xì)菌種類不多,(Bacillus)和(Cletridium)。它們都是,很多都是強(qiáng)致病菌,如肉毒梭菌、破傷風(fēng)梭菌,有些形成的芽孢膨大,寬度明顯超過菌體。 芽孢寬度超過菌體,使細(xì)胞呈梭狀45他有這樣幾個(gè)過程46w芽孢的形成對(duì)于產(chǎn)芽孢菌度過困境有著極為芽孢的形成對(duì)于產(chǎn)芽孢菌度過困境有著極為重要的意義,芽孢可在普通條件下保存幾年重要的意義,芽孢可在普通條件下保存幾年甚至幾十年都依然可以復(fù)活。甚至幾十年都依然可以復(fù)活。w了解芽孢的重要性了解芽孢的重要性在于:47 細(xì)菌的繁殖方式很多,分子生物學(xué)研究表明,細(xì)菌二分裂時(shí),細(xì)菌環(huán)狀DNA懸
19、掛在細(xì)胞膜上,DNA先復(fù)制,形成兩個(gè)環(huán)狀DNA,由于細(xì)胞膜生長(zhǎng),兩個(gè)DNA間的距離拉開,中間細(xì)胞膜向內(nèi)凹陷形成橫隔壁,細(xì)菌一分為二形成兩個(gè)細(xì)菌。4849w由于細(xì)菌個(gè)體很小,單個(gè)細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖不能用肉眼直接觀察,所以通常采用群體生長(zhǎng)的結(jié)果即菌落的特征來描述。培養(yǎng)基就是培養(yǎng)細(xì)菌的物質(zhì),有液體固體之分,固體培養(yǎng)基有的是天然物質(zhì),如土豆、饅頭及其他各種固體食物,微生物學(xué)研究中多使用人工制作的固體瓊脂培養(yǎng)基。w把細(xì)菌生長(zhǎng)必需的營養(yǎng)物質(zhì)如糖、無機(jī)氮有機(jī)氮以及其他物質(zhì)溶解于水,調(diào)整好合適的pH就制成了液體培養(yǎng)基,向其中加入瓊脂(約2)加熱到100,然后再冷卻就制成了固體培養(yǎng)基。常用的固體培養(yǎng)基容器稱為培養(yǎng)皿
20、培養(yǎng)皿。 50細(xì)菌菌落細(xì)菌菌落(a)固體培養(yǎng)基表面形成的細(xì)菌(固體培養(yǎng)基表面形成的細(xì)菌(Staphylccoccus aureus)菌落;)菌落; (b)細(xì)菌(細(xì)菌(Staphylccoccus aureus)細(xì)胞的電子顯微鏡圖片()細(xì)胞的電子顯微鏡圖片(X 57,000)(a) (b) 51(a) (b)細(xì)菌菌落中的細(xì)胞形態(tài)細(xì)菌菌落中的細(xì)胞形態(tài)(a)固體培養(yǎng)基上鏈球菌菌落的電鏡掃描圖片()固體培養(yǎng)基上鏈球菌菌落的電鏡掃描圖片(X4800););(b) 固體培養(yǎng)基上固體培養(yǎng)基上Vibrio cholerae菌落的邊緣(菌落的邊緣(X5400)52是一種盛放固體培養(yǎng)基的圓形帶蓋兒內(nèi)空的玻璃容器,其中加入培養(yǎng)基后,細(xì)菌在培養(yǎng)基上生長(zhǎng),會(huì)形成各種顏色和外觀的菌落。53,當(dāng)固定培養(yǎng)基成分及培養(yǎng)條件相同時(shí),不同種類微生物形成的菌落特征是固定的,可作為微生物鑒定的重要依據(jù)。54細(xì)菌菌落特征細(xì)菌菌落特征正面觀正面觀:1.扁平扁平 2.隆起隆起 3.低凸起低凸起 4.高凸起高凸起
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