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1、微生物斜面接種實驗微生物斜面接種實驗一、一、微生物無菌操作技術(shù)微生物無菌操作技術(shù)無菌操作技術(shù):指在微生物實驗工作中,控制或防止各類微生物的污染及其干擾的一系列操作方法和有關(guān)措施。u超凈工作臺的使用u斜面接種的操作方法二、二、 微生物接種技術(shù)微生物接種技術(shù)超凈工作臺 超凈工作臺是為實驗室工作提供無菌操作環(huán)境的設(shè)施,以保護實驗免受外部環(huán)境的影響,同時為外部環(huán)境提供某些程度的保護以防污染并保護操作者。 原理:超凈工作臺的潔凈環(huán)境是在特定的空間內(nèi),潔凈空氣( (進濾空氣) )按設(shè)定的方向流動而形成的。以氣流方向來分,現(xiàn)有的超凈工作臺可分為垂直式,由內(nèi)向外式以及側(cè)向式。 無菌環(huán)境的要求與保持無菌環(huán)境的要
2、求與保持超凈臺的使用與維護使用前打開紫外燈照射30min,使用時開啟超凈工作臺照明燈,關(guān)閉紫外燈,并用75%的酒精擦拭臺面,使用完畢,關(guān)閉照明;重新開啟紫外燈照射30min,定期做無菌試驗,以測定凈化臺是否符合無菌要求。無菌環(huán)境的要求與保持無菌環(huán)境的要求與保持 斜面接種: 從已生長好的菌種斜面上挑取少量菌種移植至另一新鮮斜面培養(yǎng)基上的接種方法。 用于好氣性微生物的接種。2 2、常用的接種方法、常用的接種方法1)標記:接種前在試管上注明菌名、接種日期、接種人姓名2)點燃酒精燈。3)接種:(1)手持試管 將菌種管和待接斜面管用大姆指和其他四指握在左手中,中指位于兩管之間。斜面向上,盡量放平。(2)
3、旋松管塞(3)接種環(huán)灼燒滅菌 斜面接種 斜面接種3)接種:(4)拔管塞: 用右手的無名指、小指和手掌邊先后取下菌種管和待接試管的管塞,讓試管口緩緩過火滅菌(切勿燒得過燙) 斜面接種3)接種:(5)取菌: 接種環(huán)冷卻,輕沾取少量菌體或胞子,然后將接種環(huán)移出菌種管,注意不要使接種環(huán)碰到管壁,取出后帶菌接種環(huán)不可通過火焰。 斜面接種3)接種: (6)接種: 在火焰旁迅速將沾有菌種的接種環(huán)伸入待接斜面管。從斜面培養(yǎng)基底部向上作“Z”形來回密集劃線,勿劃破培養(yǎng)基。 有時也可用接種針僅在斜面培養(yǎng)基的中央拉一條直線作斜面接種,直線接種可觀察不同菌種的生長特點。 斜面接種3)接種: (7) 塞管塞: 取出接種環(huán),灼燒試管口,并在火焰旁將管塞旋上。不要用試管去迎棉塞,以免試管在移動時納入不潔空氣。 (8) 將接種環(huán)灼燒滅菌。放下接種環(huán),再將棉花塞旋緊。 斜面接種示意圖斜面接種示意圖1 1、什么是無菌技術(shù)?2 2、如何
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