痛風(fēng)高尿酸血癥論文開題報告書

1、開 題 報 告 書姓名 學(xué)號 專業(yè) 導(dǎo)師姓名 所在單位 填表時間： 2010 年 12月28日擬定論文題目：痛風(fēng)動物模型的研究論文類型（）1. 基礎(chǔ)研究 2. 應(yīng)用基礎(chǔ) 3. 應(yīng)用（開發(fā)）研究 4. 其他一、選題依據(jù)（包括研究意義、國內(nèi)外研究現(xiàn)狀、本研究的創(chuàng)新點等。參考文獻(xiàn)請另附頁）： 痛風(fēng)(gout)是由于嘌呤代謝紊亂和(或)尿酸排泄障礙所導(dǎo)致的一種異質(zhì)性疾病，其臨床特點是高尿酸血癥、痛風(fēng)性急性關(guān)節(jié)炎反復(fù)發(fā)作、痛風(fēng)石沉積、特征性慢性關(guān)節(jié)炎和關(guān)節(jié)畸形，常累及腎引起慢性間質(zhì)性腎炎和腎尿酸結(jié)石形成。隨著人們生活方式的改變，痛風(fēng)患病率有明顯上升趨勢，20年間，痛風(fēng)在我國發(fā)病率已上升至7610萬，患病

2、率在男性為51 000281 000，女性患病率為11 00061 000，南方和沿海經(jīng)濟(jì)發(fā)達(dá)地區(qū)發(fā)病率尤高 , 且隨著社會的發(fā)展，人類生活水平的提高，發(fā)病年齡有低齡化的趨勢，因此越來越受到醫(yī)學(xué)界的重視。痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎(尿酸性關(guān)節(jié)炎)包括無癥狀期、急性關(guān)節(jié)炎期、間歇期和慢性關(guān)節(jié)炎期(骨關(guān)節(jié)病期)4個階段，急性期治療藥物主要有秋水仙堿、非甾體類抗炎藥(NSAIDs)、糖皮質(zhì)激素等。但是，這些能控制急性關(guān)節(jié)炎的藥物無降尿酸作用，同時由于這些藥物的副作用使得臨床醫(yī)師在使用時需要更仔細(xì)的考慮患者對它們的耐受性及依從性。對痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎，痛風(fēng)性腎病等進(jìn)行研究,常借助于實驗性動物模型的建立。早在19世紀(jì)80年

3、代，Coderre等 就采用MSU 02 ml注射大鼠踝關(guān)節(jié)的方法，造出急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的動物模型。陳文照等在研究痛風(fēng)寧療效時，采用MSU溶液02 ml注入大鼠右側(cè)踝關(guān)節(jié)腔，模型動物受試關(guān)節(jié)周圍軟組織明顯充血水腫，受試關(guān)節(jié)滑膜細(xì)胞內(nèi)線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器明顯腫脹，確認(rèn)造模成功。1993年，國外學(xué)者M(jìn)e CartneyFrancis N等即通過注射尿酸鈉結(jié)晶造成兔的急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎模型。徐曼等將腺嘌呤混入2 淀粉液，按每日03 mg100 g的劑量給雌性Wistar大鼠灌胃，結(jié)果發(fā)現(xiàn)模型組大鼠血尿酸、尿素氮、肌酐濃度升高，與正常組相比有統(tǒng)計學(xué)意義。對于急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的治療：1.早期運(yùn)用秋水仙堿

4、。常用口服法：初始劑量為lmg，隨后每小時05mg或每2小時1mg，直到癥狀緩解或出現(xiàn)惡心、嘔吐、水樣腹瀉等胃腸道不良反應(yīng)。2. 非甾體類抗炎藥物：吲哚美辛(消炎痛)初始劑量75-100mg，隨后每次50mg，6-8小時一次。3.以上藥物無效或者由于副作用強(qiáng)烈無法治療時，可考慮糖皮質(zhì)激素或ACTH進(jìn)行治療發(fā)作間歇期或慢性期的治療：1. 排尿酸藥物，如苯溴馬隆25mg-100mg，每日一次。丙磺舒0.25g，每日兩次2. 抑制尿酸生成藥物，如別嘌呤醇，每次100mg，每日2-4次以上藥物常出現(xiàn)副作用強(qiáng)烈或者易反跳，造成治療的不便。因此,發(fā)揮中醫(yī)中藥和其他天然藥物的優(yōu)勢就顯得十分重要。目前對抗痛風(fēng)

5、中成藥主要有通風(fēng)寧，痛風(fēng)康之類的藥物。對這類藥物研究主要分以下兩部分：1. 抗炎研究:陳氏等應(yīng)用痛風(fēng)寧抑制大鼠角叉菜膠性足跖腫脹、小鼠耳殼二甲苯致腫和大鼠甲醛性足跖腫脹實驗。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，痛風(fēng)寧高(15g/kg)中(10g/kg)低(5g/kg)三個劑量均有一定的抗炎作用，以高劑量組抗炎作用最好，中、低劑量組次之，呈現(xiàn)量-效正比關(guān)系。李氏通過實驗證明痛風(fēng)寧口服液能抑制尿酸鈉結(jié)晶引起的大鼠足跖腫脹，對Msu誘導(dǎo)的家兔急性痛風(fēng)關(guān)節(jié)炎能顯著降低其關(guān)節(jié)液中的白細(xì)胞數(shù)，并能顯著抑制角叉菜膠引起的大鼠足腫脹與二甲苯所致的小鼠足腫脹，對小鼠因化學(xué)刺激與熱刺激所引起的痛反應(yīng)亦有抑制作用。陳氏等關(guān)于痛風(fēng)寧消炎鎮(zhèn)痛的

6、實驗研究顯示，模型動物受試關(guān)節(jié)周圍軟組織有大量白細(xì)胞浸潤，經(jīng)治療后白細(xì)胞浸潤減少，關(guān)節(jié)周徑縮小，腫脹減輕，毛細(xì)血管充血滑膜細(xì)胞內(nèi)線粒體內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器水腫均明顯改善；該實驗還發(fā)現(xiàn)痛風(fēng)寧比秋水仙堿起效慢，但作用持久。2. 鎮(zhèn)痛研究:陳氏等發(fā)現(xiàn)，痛風(fēng)寧能使尿酸鈉所致關(guān)節(jié)炎局部組織PGE2,6-K-PGF1#及血漿中升高的6-K-PGF1明顯下降，故其抗炎機(jī)理與關(guān)節(jié)周圍局部PGE2,PGI2等炎癥介質(zhì)降低有關(guān)；該實驗亦顯示，痛風(fēng)寧能使實驗性急性痛風(fēng)大鼠低下的5-HT與正常水平的DA同時升高，而5-HT代謝產(chǎn)物5-HIAA 不隨5-HT變化而變化，提示痛風(fēng)寧對急性痛風(fēng)的中樞性鎮(zhèn)痛作用除與其升高低下的鎮(zhèn)痛

7、介質(zhì)5-HT 有關(guān)外，還與其升高中樞DA有關(guān)，與5-HT代謝過程關(guān)系不大，可能與其合成過程關(guān)系密切，即實驗用中藥可能主要通過促進(jìn)5-HT的合成而使5-HT升高，發(fā)揮中樞性鎮(zhèn)痛作用。張氏等8 66 9發(fā)現(xiàn)，應(yīng)用痛風(fēng)洗劑對大鼠痛風(fēng)關(guān)節(jié)炎進(jìn)行治療后，顯示其能明顯降低大鼠周圍軟組織K,NE,DA, 5-HT, PGE2濃度，從而起到鎮(zhèn)痛作用。 綜上所述，中醫(yī)藥治療痛風(fēng)能改善癥狀、延緩發(fā)作，其近期療效與同類西藥接近，或優(yōu)于西藥；遠(yuǎn)期療效則更好。目前關(guān)于中藥治療痛風(fēng)的作用機(jī)理及對照研究報道尚較少，今后應(yīng)注重上述兩方面的研究，以便開發(fā)出更多科學(xué)、高效、方便、依從性好的中藥。參考文獻(xiàn)：1 熊湘明，曲竹秋大鼠高

8、尿酸血癥模型建立J天津中醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2001，20(4)：282 孫咸茂B 黃精治療痛風(fēng)高尿酸血癥及頓咳效著J。中醫(yī)雜志，2001，42（1）：133 劉志勤，呂蕾中醫(yī)分期治療痛風(fēng)體會J浙江中西醫(yī)結(jié)合雜志，2003，13(3)：1784 蘇其貴，胡成發(fā)辨證治療痛風(fēng)38例J實用中醫(yī)藥雜志，2004，20(11)：625 申海莉，文紹敦酸脂清膠囊治療尿酸性腎病的實驗研究J青海醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2005，26(1)：576 孔錫容，張光榮，楊 曦尿酸性腎病動物模型十年研究概況J中國中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志，2007，8(9)：5577 范琴書痛風(fēng)病機(jī)與分期證治探討J浙江中醫(yī)雜志，2007，42(2)：78朱君，

9、余俊文高尿酸血癥和痛風(fēng)的流行病學(xué)及其危險因素的研究進(jìn)展J現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2008，12(1)：1919 王斌，侯建平，李敏，等虎杖提取物對模型大鼠滑膜組織黏附分子與核轉(zhuǎn)錄因子的影響J中藥新藥與臨床藥理，2008，19(6)：43410 姚麗，劉樹民，于書儀痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎動物模型的改良J中國實驗動物學(xué)報，2009，17(3)：210二、研究目標(biāo)、研究內(nèi)容、擬解決的關(guān)鍵問題：1 研究目標(biāo)2 研究內(nèi)容3 擬解決的關(guān)鍵問題三、研究方案（擬采取的研究方法、技術(shù)路線、實驗步驟、可行性分析、可能出現(xiàn)的技術(shù)問題及解決辦法）：1 擬采取的研究方法、技術(shù)路線、實驗步驟1.1造模與分組1. 次黃嘌呤痛風(fēng)模型取90只

10、昆明種小鼠，雌雄各半，體質(zhì)量（20±2）g，隨機(jī)進(jìn)行分組，每組15只，分別是正常組（生理鹽水組），別嘌呤醇組，模型組，高、中、低劑量組。開始時生理鹽水組和模型組組均按10ml/kg 劑量ig生理鹽水溶液，連續(xù)5d，其它各給藥組分別ig給予相應(yīng)的藥，連續(xù)5d，別嘌呤醇模型組，高、中、低劑量分別為生藥1.2、0.6、0.3g/kg，于末次給藥1h后模型組，別嘌呤醇模型組，高、中、低劑量組分別ip給予次黃嘌呤，按1000mg/kg 的劑量，生理鹽水組給予等量的生理鹽水。1h 后從小鼠的眼眶后靜脈叢采血 ,血樣在室溫下自然凝血1h ,3000r/min，15min離心，分離血清，存于-20下

11、待測。2. 小鼠高尿酸血癥模型（氧嗪酸鉀鹽）實驗分組和給藥：90只昆明小鼠，體質(zhì)量（20±2）g，隨機(jī)進(jìn)行分組，每組15只，分別是正常組（生理鹽水溶液組），模型組，秋水仙堿，高、中、低劑量組。開始時生理鹽水溶液組和模型組組均按 10ml/kg 劑量ig生理鹽水溶液，連續(xù)5d，其它各給藥組ig給予相應(yīng)的藥，連續(xù)5d，別嘌呤醇組，高、中、低劑量分別為生藥1.2、0.6、0.3g/kg。于末次給藥1h后模型組，別嘌呤醇組，高、中、低劑量組分別ip給予氧嗪酸鉀鹽，按300mg/kg 的劑量，生理鹽水組給予等量的生理鹽水。1h 后從小鼠的眼眶后靜脈叢采血,血樣在室溫下自然凝血1h , 3000

12、r/min，15min離心，分離血清，存于-20下待測。1.2 測定指標(biāo) 1.黃嘌呤氧化酶測定 2.尿酸測定1.3 動物處理 取血后處死，集中處理2 可行性分析2.1 對動物實施灌胃和腹腔注射，操作熟練，基本不會引起動物死亡。2.2 本院具有開展本實驗所需要的人員、儀器設(shè)備和實驗室條件。3可能出現(xiàn)的技術(shù)問題及解決辦法3.1 可能出現(xiàn)的技術(shù)問題：實驗后期進(jìn)行動物眼眶取血，由于小鼠比較難進(jìn)行此項操作，可能會出現(xiàn)取血量不夠的情況。3.2 解決辦法：熟悉眼眶取血，必要時摘除眼球四、基礎(chǔ)及條件（包括已經(jīng)做過的相關(guān)研究工作，本單位或外單位可供使用的儀器設(shè)備和實驗條件等）：1 已經(jīng)做過的相關(guān)研究工作1.1 1.22 儀器設(shè)備和實驗條件提供本實驗所需要的儀器設(shè)備和實驗條件。導(dǎo)師對開題報告的具體意見：