穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)方案

1、穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)方案（參考）診斷原料穩(wěn)定性考核主要包括熱穩(wěn)定性、真實(shí)穩(wěn)定性、運(yùn)輸穩(wěn)定性及凍融穩(wěn)定性四部分工作流程如下圖所示，具體方案見下文。研成部分本身性能本身性能功能性能功能性能本身性能本身性能功能性能功能性能4運(yùn)輸穩(wěn)定性考核熱穩(wěn)定性評價(jià)結(jié)論真實(shí)穩(wěn)定性研究資料說明書的組成部分穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)運(yùn)輸過程驗(yàn)證初步確定運(yùn)輸條件分裝及留樣評價(jià)樣品備5震蕩實(shí)驗(yàn)評價(jià)樣品定期檢驗(yàn)開展評價(jià)開展評價(jià)開展評價(jià)篩選穩(wěn)定性條件輸條件.確定運(yùn)！2真實(shí)穩(wěn)定性考核擬運(yùn)輸過程模：1熱穩(wěn)定性考核3凍融實(shí)驗(yàn)根據(jù)抗原和抗體進(jìn)行分類，此外結(jié)合產(chǎn)品的用途，綜合考慮上述實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的安排和設(shè)計(jì)，以便滿足市場客戶需求，合理調(diào)配公司資源?，F(xiàn)給出各類型開展穩(wěn)

2、定性評價(jià)分具體實(shí)驗(yàn)方案。1蛋白的穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)方案1.1發(fā)貨蛋白的穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)各項(xiàng)目負(fù)責(zé)人根據(jù)項(xiàng)目特點(diǎn)，確定發(fā)貨的蛋白穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)內(nèi)容。因?yàn)榘l(fā)貨濃度一般都是以mg/ml作為單位，所以考核其穩(wěn)定性主要是用于存放條件的確定?？己朔桨敢猿掷m(xù)檢測和對比實(shí)驗(yàn)為主，一般不開展高溫?zé)峒铀賹?shí)驗(yàn)，因?yàn)楦邷責(zé)峒铀賹?shí)驗(yàn)本身就很難保證穩(wěn)定性合格，此外為了使其穩(wěn)定，添加的穩(wěn)定劑或類似物質(zhì)后影響抗原的后期使用。發(fā)貨蛋白初始存放條件為-20°C，可以開展2-8°C穩(wěn)定性對比實(shí)驗(yàn)。以分別在-20°C和2-8°C條件下存放一定時(shí)間（根據(jù)項(xiàng)目而異），采用免疫學(xué)或適宜方法開展平行比較，以平行分析之間

3、的差異評價(jià)蛋白是否可以存放于2-8C條件下。只有在2-8C條件下評價(jià)穩(wěn)定，再根據(jù)項(xiàng)目情況來綜合考慮是否要做37°C下的熱穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)。根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步確定發(fā)貨蛋白的存放條件，以此確保在特定保存條件下的穩(wěn)定性。持續(xù)檢測的實(shí)驗(yàn)主要目的是為了在較長時(shí)間內(nèi)監(jiān)測蛋白真實(shí)穩(wěn)定性而開展的評價(jià)內(nèi)容。主要采用相對穩(wěn)定的檢測方法，對存放在特定條件下的蛋白開展的結(jié)果重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)。例如：采用經(jīng)過熱穩(wěn)定性評價(jià)合格的抗體制備的檢測系統(tǒng)，該檢測系統(tǒng)批間差異在理想范圍內(nèi)，采用該系統(tǒng)對考核蛋白進(jìn)行持續(xù)檢測，持續(xù)檢測的結(jié)果在一定范圍內(nèi)（可以參考繪制質(zhì)控圖，如L-J質(zhì)控圖），判定為穩(wěn)定性是否合格。1.2工作條件下蛋白的穩(wěn)定

4、性實(shí)驗(yàn)各項(xiàng)目負(fù)責(zé)人根據(jù)項(xiàng)目特點(diǎn)，確定工作條件下的蛋白穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)內(nèi)容。工作條件下的穩(wěn)定性考核主要涉及校準(zhǔn)品、質(zhì)控品等的穩(wěn)定性問題，是基于客戶使用的立場開展的用途評價(jià)及相關(guān)研究。工作重點(diǎn)主要是穩(wěn)定性基質(zhì)的篩選和評價(jià)、穩(wěn)定性的持續(xù)監(jiān)測等。根據(jù)項(xiàng)目檢測特點(diǎn)，采用不同的稀釋液制備客戶檢測的工作濃度樣品，一般主要為低值和高值兩個(gè)測值樣本，通過評價(jià)-20C、2-8C以及37C存放一定時(shí)間（根據(jù)各項(xiàng)目確定）的測值相對偏倚來考核其分析內(nèi)穩(wěn)定性結(jié)果。分析間穩(wěn)定性考核主要涉及低值和高值樣本的制備過程，要求將當(dāng)時(shí)制備的高濃度蛋白分裝凍存于-80C條件下，需要開展組間分析時(shí)，采用重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)過程，執(zhí)行過程的重復(fù)制備。分析

5、間評價(jià)主要用于考核-20C條件下存放不穩(wěn)定的蛋白樣品。持續(xù)檢測的實(shí)驗(yàn)主要目的是站在客戶的立場，在較長時(shí)間內(nèi)監(jiān)測工作濃度蛋白真實(shí)穩(wěn)定性而開展的評價(jià)內(nèi)容。主要采用相對穩(wěn)定的檢測方法，對熱穩(wěn)定性合格條件下，開展蛋白的使用效果監(jiān)測，通過重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)對比分析實(shí)現(xiàn)。例如：采用經(jīng)過熱穩(wěn)定性評價(jià)合格的抗體制備的檢測系統(tǒng)，該檢測系統(tǒng)批間差異在理想范圍內(nèi)，采用該系統(tǒng)對考核蛋白進(jìn)行持續(xù)檢測，持續(xù)檢測的結(jié)果在一定范圍內(nèi)（可以參考繪制質(zhì)控圖，如L-J質(zhì)控圖），判定為穩(wěn)定性是否合格。該過程不涉及制備環(huán)節(jié)，是真實(shí)地反應(yīng)蛋白使用時(shí)的穩(wěn)定性，輸出內(nèi)容為校準(zhǔn)品或質(zhì)控品解決方案。注：用于檢測抗體的蛋白，即用于捕獲或標(biāo)記的蛋白，只評價(jià)

6、1.1，不涉及1.2。2抗體的穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)方案2.1發(fā)貨抗體的穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)各項(xiàng)目負(fù)責(zé)人根據(jù)項(xiàng)目特點(diǎn)，確定發(fā)貨的抗體穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)內(nèi)容。因?yàn)榘l(fā)貨濃度一般都是以mg/ml作為單位，所以考核其穩(wěn)定性主要是用于存放條件的確定?？己朔桨敢猿掷m(xù)檢測和對比實(shí)驗(yàn)為主，和發(fā)貨蛋白不同的是一般需要開展高溫?zé)峒铀賹?shí)驗(yàn)，因?yàn)榭贵w本身穩(wěn)定性就非常理想，一般也不需要添加特殊的穩(wěn)定劑，高溫?zé)峒铀賹?shí)驗(yàn)一方面可以短時(shí)間內(nèi)考核抗體的穩(wěn)定性，另一方面也為抗體產(chǎn)品的有效期制定提供了參考發(fā)貨抗體初始存放條件為20°C,可以開展28°C、37°C穩(wěn)定性對比實(shí)驗(yàn)。以分別在20°C、28C和37C條件下存放一

7、定時(shí)間（根據(jù)項(xiàng)目而異），采用免疫學(xué)或適宜方法開展平行比較（這個(gè)比較根據(jù)項(xiàng)目和用于而異，監(jiān)測過程可以通過效價(jià)測試實(shí)現(xiàn)，而最終判定需要以功能性實(shí)驗(yàn)為依據(jù)），以平行分析之間的差異評價(jià)抗體是否可以存放于28C條件下。同時(shí)結(jié)合37C條件下的評價(jià)結(jié)果，給出根據(jù)熱力學(xué)為依據(jù)的抗體參考有效期。根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步確定發(fā)貨抗體的存放條件，以此確保在特定保存條件下的穩(wěn)定性持續(xù)檢測的實(shí)驗(yàn)主要目的是為了在較長時(shí)間內(nèi)監(jiān)測抗體真實(shí)穩(wěn)定性而開展的評價(jià)內(nèi)容。主要采用相對穩(wěn)定的檢測方法，對存放在特定條件下的抗體開展的結(jié)果重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)。例如：采用80C分裝存放的蛋白制備的檢測系統(tǒng)，該檢測系統(tǒng)批間差異在理想范圍內(nèi)，采用該系統(tǒng)對考核抗體

8、進(jìn)行持續(xù)檢測，持續(xù)檢測的結(jié)果在一定范圍內(nèi)（可以參考繪制質(zhì)控圖，如LJ質(zhì)控圖），判定為穩(wěn)定性是否合格；也可開展功能性實(shí)驗(yàn)評價(jià)，將長期存放或經(jīng)過熱處理的抗體，按照確定的條件制備成檢測系統(tǒng)，通過評價(jià)檢測系統(tǒng)的重現(xiàn)性，客觀反應(yīng)抗體的穩(wěn)定性。2.2工作條件下的抗體穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)工作條件下的穩(wěn)定性考核主要涉及檢測系統(tǒng)的穩(wěn)定性問題，是基于客戶使用的立場開展的用途評價(jià)及相關(guān)研究。工作重點(diǎn)主要是采用抗體制備的診斷試劑本身的穩(wěn)定性評價(jià)、穩(wěn)定性的持續(xù)監(jiān)測等。根據(jù)項(xiàng)目檢測特點(diǎn)以及檢測系統(tǒng)平臺方法學(xué)而異，采用不同的制備方案建立檢測系統(tǒng)對該檢測系統(tǒng)開展的穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)，包括熱穩(wěn)定性和真實(shí)的穩(wěn)定性監(jiān)測兩塊。最終輸出結(jié)果為檢測系統(tǒng)的

9、穩(wěn)定性結(jié)論，客戶根據(jù)該結(jié)果可以作為建立檢測系統(tǒng)的參照。將檢測系統(tǒng)相關(guān)的試劑，分別放于28C以及37C存放一定時(shí)間（根據(jù)各項(xiàng)目確定），通過功能性實(shí)驗(yàn)來評價(jià)檢測系統(tǒng)的穩(wěn)定性，一般以28C和37C之間的相對偏倚來標(biāo)識，此外檢測系統(tǒng)本身的功能性能也至關(guān)重要（如靈敏度、精密度等）。上述指標(biāo)的檢測結(jié)果以報(bào)告的形式給出，最終達(dá)到我們對產(chǎn)品后續(xù)性能的足夠了解，以便完善售后服務(wù)體系，提高售后服務(wù)水平（這個(gè)結(jié)果不一定要告訴客戶）。檢測系統(tǒng)的持續(xù)監(jiān)測的實(shí)驗(yàn)主要目的是站在客戶的立場，在較長時(shí)間內(nèi)監(jiān)測采用我們的診斷原料制備的診斷試劑的真實(shí)穩(wěn)定性而開展的評價(jià)內(nèi)容。主要采用相對穩(wěn)定的檢測方法，對熱穩(wěn)定性合格條件下，開展抗體

10、的使用效果監(jiān)測，通過真實(shí)存放檢測試劑的重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)對比分析實(shí)現(xiàn)。例如：采用經(jīng)過-80°C存放的蛋白制備的檢測樣品開展評價(jià)結(jié)果和先前剛制備出的檢測試劑檢測結(jié)果的一致性，說明檢測系統(tǒng)的真實(shí)穩(wěn)定性。上述穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)內(nèi)容根據(jù)各項(xiàng)目的原料的用途和具體情況而異。3凍融實(shí)驗(yàn)、運(yùn)輸模擬、震蕩實(shí)驗(yàn)通過上述1.1或2.1開展的相關(guān)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，進(jìn)一步確定凍融、運(yùn)輸、震蕩實(shí)驗(yàn)的保存條件。在特定條件下，開展凍融、運(yùn)輸、震蕩實(shí)驗(yàn)才是有效的，否則一方面會增加運(yùn)輸成本或使用過程中的風(fēng)險(xiǎn)，另一方面也不能客觀反映診斷原料本身的性能。凍融實(shí)驗(yàn)、運(yùn)輸模擬和震蕩實(shí)驗(yàn)均以未處理的成品作為對照，處理后的成品作為考核對象，開展兩者之間的

11、比較分析，這個(gè)分析可以是本身性能的，也可以是功能性能，最終均以功能性能的評價(jià)為判定依據(jù)。如果考核結(jié)果顯示不理想，通過凍融控制、運(yùn)輸過程改善、減緩震蕩或特殊標(biāo)識等進(jìn)行改善，改善后重新開展相關(guān)評價(jià)。特殊的實(shí)驗(yàn)結(jié)果需要特殊評價(jià)和討論，例如：一般凍融實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示凍融一次就不合格，這個(gè)結(jié)果需重新開展1.1或1.2相關(guān)實(shí)驗(yàn)，而本身2-8C保存非常穩(wěn)定，根據(jù)情況評審討論刪減凍融實(shí)驗(yàn)過程。與此類似，運(yùn)輸條件的確定和產(chǎn)品本身的穩(wěn)定性有很大關(guān)系，必須建立在1.1或2.1結(jié)果的基礎(chǔ)上開展，運(yùn)輸模擬實(shí)驗(yàn)是在提前確定的運(yùn)輸條件下，模擬整個(gè)過程，評價(jià)最終客戶收到的貨物和從廠家發(fā)出時(shí)的一致性。而震蕩實(shí)驗(yàn)，對于-20C以下的條件，本身應(yīng)該確保成品處在不凍融的狀態(tài)，如果不能保證，結(jié)合凍融實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，開展