火棉膠制片法新實(shí)用教案

1、關(guān)鍵詞：關(guān)鍵詞：火棉膠 、消化纖維、韌性(rn xn)、簡(jiǎn)便軟硬組織聯(lián)合切片膠棉液旋轉(zhuǎn)切片法第1頁(yè)/共16頁(yè)第一頁(yè)，共17頁(yè)?；鹈弈z簡(jiǎn)介火棉膠制片的優(yōu)點(diǎn)火棉膠制片的局限性軟硬組織聯(lián)合(linh)切片第2頁(yè)/共16頁(yè)第二頁(yè)，共17頁(yè)。火棉膠簡(jiǎn)介火棉膠簡(jiǎn)介(jin ji)(jin ji)火棉膠是一種消化纖維，它易燃燒,且能溶于丙酮，丁香油，無(wú)水酒精乙醚的混合液?；鹈弈z不能遇水，遇水則變成白色乳狀混濁液，所以盛裝(shngzhung)火棉膠的容器不能有水。第3頁(yè)/共16頁(yè)第三頁(yè)，共17頁(yè)?；鹈弈z制片的優(yōu)點(diǎn)火棉膠制片的優(yōu)點(diǎn)(yudin)(yudin) 火棉膠能彌補(bǔ)石蠟制片的不足，其韌性強(qiáng)，在制片過(guò)程中

2、不經(jīng)加工過(guò)程。能減少組織的收縮和硬化，切片不易曲卷及破碎，能保持組織原有結(jié)構(gòu)和形態(tài)(xngti)的完整性，對(duì)于較大的較堅(jiān)硬的組織和囊狀易塌陷的器官等的制作較好，其優(yōu)越性是石蠟切片所不能替代的。此外，切片染色也比較鮮艷。適用于動(dòng)物大腦，眼球等組織的切片，步驟較石蠟簡(jiǎn)便。第4頁(yè)/共16頁(yè)第四頁(yè)，共17頁(yè)?；鹈弈z制片的局限性火棉膠制片的局限性火棉膠制片的浸膠包埋所需時(shí)間長(zhǎng)，所以在病理診斷(zhndun)中應(yīng)用較少，其切片不能太薄，約2040um（石蠟約為10um左右），且不易連成帶。第5頁(yè)/共16頁(yè)第五頁(yè)，共17頁(yè)。 火棉膠制片方法(fngf)的應(yīng)用火棉膠制片方法已在軟硬組織聯(lián)合切片中，在皮膚微血管

3、切片中以及(yj)在人子宮切片等實(shí)例中得到了很好的應(yīng)用，效果頗佳。第6頁(yè)/共16頁(yè)第六頁(yè)，共17頁(yè)。軟硬組織軟硬組織(zzh)(zzh)聯(lián)合切聯(lián)合切片中片中火棉膠切片制作火棉膠切片制作 取材 用10%甲醛或福爾馬林液進(jìn)行固定，時(shí)間一般為1周左右；固定后進(jìn)行沖洗，由于骨質(zhì)中含有大量鈣元素，硬度大，故應(yīng)進(jìn)行脫鈣處理。用8%鹽酸，8%甲醛，4%冰乙酸按2：2：1比例配成混合酸，將標(biāo)本(biobn)浸入其中，每3天換一次新液，直到組織塊成橡膠樣硬度為止。第7頁(yè)/共16頁(yè)第七頁(yè)，共17頁(yè)。脫水 步驟與石蠟制片相同?；鹈弈z的配制 要將固體火棉膠塊放入100%乙醇及乙醚的等量混合液中即可逐漸溶解。若將火棉膠

4、先放入100%乙醇內(nèi)1214h，然后再加入乙醚則溶解的速度更快。浸膠 將組織塊浸2%,4%,8%,12%,15%的火棉膠中各714天。浸膠過(guò)程火棉膠應(yīng)存放在暗處(n ch)，并注意蓋上瓶蓋。第8頁(yè)/共16頁(yè)第八頁(yè)，共17頁(yè)。包埋 選用臥式染缸或硬紙盒作包埋用盒子，缸內(nèi)涂一層凡士林，取出浸膠后的標(biāo)本，將切面朝下放入切片盒中，倒入12%火棉膠溶液(rngy)，高于1cm，防止膠冷卻收縮，材料露在外面。修膠粘膠切片 用推拉式切片機(jī)進(jìn)行切片。第9頁(yè)/共16頁(yè)第九頁(yè)，共17頁(yè)。 染色 用蘇木精伊紅火棉膠切片染色法進(jìn)行染色：切片在染色時(shí)不需要脫去火棉膠，直接(zhji)按以下程序進(jìn)行：1,用一彎頭尖的細(xì)玻

5、璃棒將切片從80%的乙醇內(nèi)挑出，放入蒸餾水中洗去乙醇。2,置蘇木精中1020min。3,水洗5min。4,用1%的乙醇鹽酸液脫色，直到褪去顏色為止。然后將切片挑起，待滴下乙醇染液不再有色。 封固 用樹(shù)膠進(jìn)行封固，注意用明膠粘貼劑進(jìn)行粘貼。第10頁(yè)/共16頁(yè)第十頁(yè)，共17頁(yè)。切片切片(qi pin)(qi pin)法中的一法中的一些改良些改良傳統(tǒng)的火棉膠配制比較繁瑣，費(fèi)時(shí)費(fèi)力，現(xiàn)在市售的火棉膠一般是液態(tài)的膠棉液，便于使用，省時(shí)省力。在火棉膠的切片制作的步驟中，還可以用旋轉(zhuǎn)切片機(jī)進(jìn)行切片。旋轉(zhuǎn)式切片機(jī)主要用于石蠟切片，所以人們又稱之為石蠟切片機(jī)。但旋轉(zhuǎn)式切片機(jī)代替滑動(dòng)切片機(jī)切火棉膠切片，使用起來(lái)十

6、分方便，效果(xiogu)也好。第11頁(yè)/共16頁(yè)第十一頁(yè)，共17頁(yè)。附：旋轉(zhuǎn)附：旋轉(zhuǎn)(xunzhun)(xunzhun)切片切片機(jī)使用方法機(jī)使用方法 同石蠟切片法相似，但得采用濕切的方法，每切一片時(shí)需用蘸有70%究竟的濕毛筆濕潤(rùn)一下刀口及材料切面。如果做連續(xù)切片，可以用吸水紙將一張張切開(kāi)隔開(kāi)，按順序疊放在70%酒精中保存。 用火棉膠包埋的含骨質(zhì)等較硬的組織材料，則要采用拉切的辦法(bnf)，即將切片機(jī)微調(diào)裝置上僅僅有25個(gè)刻度，即25微米，則可采用“順-逆-順”旋轉(zhuǎn)手輪的辦法(bnf)來(lái)解決。第12頁(yè)/共16頁(yè)第十二頁(yè)，共17頁(yè)。在包埋前的材料準(zhǔn)備過(guò)程中，某些步驟可依據(jù)所選材料及實(shí)驗(yàn)特點(diǎn)而作

7、簡(jiǎn)化，如在觀察皮膚微血管切片中，由于只研究血管，不觀察細(xì)胞的微細(xì)(wix)結(jié)構(gòu)，所以脫水過(guò)程僅以脫水徹底及不影響切片操作為宜，所以并不需要由低到高濃度逐步進(jìn)行酒精脫水而直接進(jìn)行高濃度酒精脫水。第13頁(yè)/共16頁(yè)第十三頁(yè)，共17頁(yè)?；鹈弈z切片火棉膠切片(qi pin)(qi pin)的的保存保存火棉膠切片的保存常規(guī)應(yīng)浸于70%80%酒精中，用有機(jī)玻璃做容器，但經(jīng)實(shí)驗(yàn)，兩周后出現(xiàn)了“溶脹現(xiàn)象”，有機(jī)玻璃標(biāo)本盒變形(bin xng)，變軟，表面粗糙發(fā)毛，有時(shí)呈乳白色；火棉膠切片干縮，變形(bin xng)。其原因使因?yàn)?0%酒精分子滲透力最強(qiáng)，最活潑。故最易被有機(jī)玻璃吸收。若改用30%和25%酒精及切片封裝于有機(jī)玻璃標(biāo)本盒內(nèi)則一切基本正常。第14頁(yè)/共16頁(yè)第十四頁(yè)，共17頁(yè)。 綜述(zngsh)火棉膠切片法有著廣泛的用途，雖然仍存在缺陷，但已成為各種切片制作(zhzu)的重要方法。第15頁(yè)/共16頁(yè)第十五頁(yè)，共17頁(yè)。謝謝您的觀看(gunkn)！第16頁(yè)/共16頁(yè)第十六頁(yè)，共17頁(yè)。NoImage內(nèi)容(nirng)總結(jié)關(guān)鍵詞：。第2頁(yè)/共16頁(yè)。適用于動(dòng)物大腦，眼球等組織的切片(qi pin)，步驟較石蠟簡(jiǎn)便。軟硬組織聯(lián)合切片(qi pin)中火棉膠切片(qi pin)制作。旋轉(zhuǎn)