果蠅的綜合實(shí)驗(yàn)_第1頁(yè)
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1、目的要求目的要求v掌握果蠅的飼養(yǎng)管理及實(shí)驗(yàn)操作;掌握果蠅的飼養(yǎng)管理及實(shí)驗(yàn)操作;v區(qū)別果蠅雌、雄及幾種常見(jiàn)突變型區(qū)別果蠅雌、雄及幾種常見(jiàn)突變型的特征;的特征;v了解果蠅的生活史及各個(gè)發(fā)育階段了解果蠅的生活史及各個(gè)發(fā)育階段的外部形態(tài)特征。的外部形態(tài)特征。實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理果蠅為雙翅目昆蟲(chóng)。具有生活史短(果蠅為雙翅目昆蟲(chóng)。具有生活史短(25 ,約約12天完成一個(gè)世代),突變型多且多為形天完成一個(gè)世代),突變型多且多為形態(tài)突變,染色體數(shù)目少(態(tài)突變,染色體數(shù)目少(2n = 8),而且有巨),而且有巨大的唾腺染色體,繁殖率高(每個(gè)雌果蠅可大的唾腺染色體,繁殖率高(每個(gè)雌果蠅可產(chǎn)卵產(chǎn)卵400 - 500個(gè))

2、,飼養(yǎng)簡(jiǎn)便等特點(diǎn),是進(jìn)個(gè)),飼養(yǎng)簡(jiǎn)便等特點(diǎn),是進(jìn)行遺傳學(xué)研究和實(shí)驗(yàn)的好材料。行遺傳學(xué)研究和實(shí)驗(yàn)的好材料。實(shí)驗(yàn)用品和材料實(shí)驗(yàn)用品和材料v實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)材料果蠅果蠅v實(shí)驗(yàn)藥品實(shí)驗(yàn)藥品玉米粉,瓊脂,蔗糖,乙酸,酵母,水,乙醚玉米粉,瓊脂,蔗糖,乙酸,酵母,水,乙醚v實(shí)驗(yàn)儀器實(shí)驗(yàn)儀器恒溫培養(yǎng)箱,培養(yǎng)瓶,顯微鏡,托盤(pán)(電子)恒溫培養(yǎng)箱,培養(yǎng)瓶,顯微鏡,托盤(pán)(電子) 天平,標(biāo)簽,量筒,紗布,燒杯,電爐,放大天平,標(biāo)簽,量筒,紗布,燒杯,電爐,放大鏡,解剖鏡,毛筆鏡,解剖鏡,毛筆果蠅飼料的幾種配方果蠅飼料的幾種配方玉米飼料玉米飼料米粉飼料米粉飼料香蕉飼料香蕉飼料水(毫升)水(毫升)20020010010050

3、50瓊脂(克)瓊脂(克)1.51.52 21.61.6蔗糖(克)蔗糖(克)13131010香蕉漿(克)香蕉漿(克)5050玉米粉(克)玉米粉(克)1717米粉(克)米粉(克)8 8麩皮(克)麩皮(克)8 8酵母粉(克)酵母粉(克)1.41.41.41.41.41.4丙酸(毫升)丙酸(毫升)1 11 10.50.51 1實(shí)驗(yàn)內(nèi)容實(shí)驗(yàn)內(nèi)容1 1果蠅捕獲與飼養(yǎng);果蠅捕獲與飼養(yǎng);2 2果蠅處理;果蠅處理;3 3果蠅性別鑒定;果蠅性別鑒定;4 4常見(jiàn)的突變類(lèi)型觀察;常見(jiàn)的突變類(lèi)型觀察;5 5生活史的觀察。生活史的觀察。果蠅捕獲與飼養(yǎng)果蠅捕獲與飼養(yǎng) 實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備工作:用實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備工作:用70%酒精棉球?qū)?/p>

4、鑷子、白酒精棉球?qū)㈣囎?、白瓷、毛筆尖板等用具消毒;瓷、毛筆尖板等用具消毒; 果蠅的轉(zhuǎn)移:將培養(yǎng)瓶與麻醉瓶口對(duì)接,培養(yǎng)瓶果蠅的轉(zhuǎn)移:將培養(yǎng)瓶與麻醉瓶口對(duì)接,培養(yǎng)瓶在上,輕拍瓶身,將果蠅震落在麻醉瓶中,燃后用在上,輕拍瓶身,將果蠅震落在麻醉瓶中,燃后用棉塞塞住瓶口。棉塞塞住瓶口。 如培養(yǎng)基呈流體狀,瓶口對(duì)接后,培養(yǎng)瓶在下,如培養(yǎng)基呈流體狀,瓶口對(duì)接后,培養(yǎng)瓶在下,可用手或黑紙遮光,利用果蠅趨光性轉(zhuǎn)移??捎檬只蚝诩堈诠猓霉壼吂庑赞D(zhuǎn)移。 果蠅麻醉:果蠅麻醉:先將果蠅震落在麻醉瓶底,打開(kāi)棉塞(部分),在先將果蠅震落在麻醉瓶底,打開(kāi)棉塞(部分),在棉塞上滴棉塞上滴2-3滴乙醚后立即塞緊,待果蠅全部昏

5、迷后,滴乙醚后立即塞緊,待果蠅全部昏迷后,將果蠅倒在白瓷板上進(jìn)行觀察。將果蠅倒在白瓷板上進(jìn)行觀察。果蠅處理果蠅處理性別鑒定性別鑒定突變型突變型突突 變變名名 稱(chēng)稱(chēng)基因基因符號(hào)符號(hào)性性 狀狀 特特 征征在染色體在染色體上座位上座位野生型野生型+ +灰身、長(zhǎng)翅、紅眼、直剛毛灰身、長(zhǎng)翅、紅眼、直剛毛白白 眼眼W W復(fù)眼白色復(fù)眼白色X1.5X1.5棒棒 眼眼B B復(fù)眼橫條形,小眼數(shù)少?gòu)?fù)眼橫條形,小眼數(shù)少X57.0X57.0黑檀體黑檀體e e身體成烏木色,黑亮身體成烏木色,黑亮R70.7R70.7黑黑 體體b b體黑色,比黑檀體深體黑色,比黑檀體深L48.5L48.5黃黃 體體y y全身呈淺橙黃色全身呈

6、淺橙黃色X0.0X0.0殘殘 翅翅vgvg翅明顯退化,部分殘留,不能飛翅明顯退化,部分殘留,不能飛R67.0R67.0焦剛毛焦剛毛sn3sn3剛毛卷曲如燒焦?fàn)顒偯砬鐭範(fàn)頧21.0X21.0卷曲翅卷曲翅cy翅膀向上卷曲,純合致死翅膀向上卷曲,純合致死LL 6. 1叉叉 毛毛f毛和剛毛分叉且彎曲毛和剛毛分叉且彎曲X X 56. 7 野生型:野生型:體色灰,翅膀呈圓體色灰,翅膀呈圓卵型,靜止時(shí)平放卵型,靜止時(shí)平放交叉重疊,長(zhǎng)度約交叉重疊,長(zhǎng)度約為腹部長(zhǎng)度的兩倍為腹部長(zhǎng)度的兩倍突變型:突變型:黃體(黃體(y)果蠅常見(jiàn)的突變表型1體色突變型:突變型:黑檀體黑檀體(e)果蠅常見(jiàn)的突變表型果蠅常見(jiàn)的突

7、變表型2 2眼色眼色突變型:突變型:白眼(白眼(w)突變型:突變型:朱紅眼(朱紅眼(v v)果蠅常見(jiàn)的突變表型果蠅常見(jiàn)的突變表型3 3 眼色眼色突變型:突變型:墨黑眼墨黑眼(se)(se)突變型:突變型:棒眼棒眼(B)(B)果蠅常見(jiàn)的突變表型果蠅常見(jiàn)的突變表型4 4翅型翅型 野生型:長(zhǎng)翅野生型:長(zhǎng)翅卷翅卷翅果蠅常見(jiàn)的突變表型果蠅常見(jiàn)的突變表型4 4翅型翅型突變型:突變型:小翅小翅(m)(m)突變型:突變型:卷翅卷翅(Cy)(Cy)果蠅常見(jiàn)的突變表型果蠅常見(jiàn)的突變表型5 5 翅型翅型突變型:突變型:殘翅殘翅(Vg)(Vg)突變型:突變型:短翅短翅(dp(dp) )果蠅常見(jiàn)的突變表型果蠅常見(jiàn)的突變

8、表型6 6剛毛剛毛直剛毛果蠅常見(jiàn)的突變表型6剛毛突變型:突變型:短剛毛短剛毛(Sb(Sb) )突變型:突變型:叉毛(叉毛(f f)果蠅生活史中各個(gè)階段的形態(tài)特征果蠅生活史中各個(gè)階段的形態(tài)特征a a成蟲(chóng)成蟲(chóng) b b一齡幼蟲(chóng)一齡幼蟲(chóng)c c三齡幼蟲(chóng)三齡幼蟲(chóng) d d蛹蛹完全變態(tài)發(fā)育完全變態(tài)發(fā)育實(shí)驗(yàn)報(bào)告實(shí)驗(yàn)報(bào)告6. 果蠅作為遺傳學(xué)模式材料的優(yōu)點(diǎn)有哪些?果蠅作為遺傳學(xué)模式材料的優(yōu)點(diǎn)有哪些? 感興趣的同學(xué)自己,可查找資料,自己感興趣的同學(xué)自己,可查找資料,自己繼續(xù)學(xué)習(xí)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn),完成果蠅的雜交實(shí)驗(yàn),繼續(xù)學(xué)習(xí)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn),完成果蠅的雜交實(shí)驗(yàn),并分析寫(xiě)出實(shí)驗(yàn)報(bào)告,雜交實(shí)驗(yàn)報(bào)告不做要并分析寫(xiě)出實(shí)驗(yàn)報(bào)告,雜交實(shí)驗(yàn)報(bào)告不做

9、要求,愿意做的同學(xué)可網(wǎng)上提交實(shí)驗(yàn)報(bào)告,沒(méi)求,愿意做的同學(xué)可網(wǎng)上提交實(shí)驗(yàn)報(bào)告,沒(méi)有時(shí)間要求。有時(shí)間要求。目的要求目的要求1. 設(shè)計(jì)與創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)2. 掌握果蠅的雜交技術(shù)和統(tǒng)計(jì)處理方法掌握果蠅的雜交技術(shù)和統(tǒng)計(jì)處理方法3. 加深理解遺傳的分離規(guī)律、自由組合規(guī)律及伴加深理解遺傳的分離規(guī)律、自由組合規(guī)律及伴性遺傳。性遺傳。4. 培養(yǎng)運(yùn)用所掌握的理論知識(shí)獨(dú)立設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)和完培養(yǎng)運(yùn)用所掌握的理論知識(shí)獨(dú)立設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)和完成實(shí)驗(yàn)的能力。成實(shí)驗(yàn)的能力。附:果蠅綜合大實(shí)驗(yàn)雜交設(shè)計(jì)附:果蠅綜合大實(shí)驗(yàn)雜交設(shè)計(jì)1. 果蠅的單因子雜交實(shí)驗(yàn)(分離定律的實(shí)驗(yàn)分析)果蠅的單因子雜交實(shí)驗(yàn)(分離定律的實(shí)驗(yàn)分析)2. 果蠅的二對(duì)

10、因子雜交實(shí)驗(yàn)(自由組合的實(shí)驗(yàn)分)果蠅的二對(duì)因子雜交實(shí)驗(yàn)(自由組合的實(shí)驗(yàn)分)3. 果蠅的連鎖互換雜交實(shí)驗(yàn)果蠅的連鎖互換雜交實(shí)驗(yàn)4. 果蠅的伴性遺傳雜交實(shí)驗(yàn)果蠅的伴性遺傳雜交實(shí)驗(yàn)5. 果蠅的三點(diǎn)測(cè)交實(shí)驗(yàn)果蠅的三點(diǎn)測(cè)交實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)原理:實(shí)驗(yàn)原理:同源染色體上等位基因的分離同源染色體上等位基因的分離非同源染色體上非等位基因的自由組合非同源染色體上非等位基因的自由組合同源染色體上非等位基因間交換重同源染色體上非等位基因間交換重性染色體上的基因遺傳行為與性別性染色體上的基因遺傳行為與性別 有關(guān)(有關(guān)(F2中正反交結(jié)果不同)中正反交結(jié)果不同)連鎖基因間的距離與重組值的大小有連鎖基因間的距離與重組值的大小有 關(guān),

11、則根據(jù)重組值可確定基因在染色體關(guān),則根據(jù)重組值可確定基因在染色體 上的位置和排列順序,從而作出連鎖圖上的位置和排列順序,從而作出連鎖圖 %100)(重組型數(shù)目親組型數(shù)目重組型數(shù)目重組值 RF實(shí)驗(yàn)說(shuō)明:實(shí)驗(yàn)說(shuō)明:(一)單因子實(shí)驗(yàn)(一)單因子實(shí)驗(yàn) P 長(zhǎng)翅長(zhǎng)翅 + + 殘翅殘翅 vg vg F1 長(zhǎng)翅長(zhǎng)翅 + vg F2 1 + + : 2 + vg : 1 vg vg(長(zhǎng)長(zhǎng):殘殘=3:1)(二)二對(duì)因子實(shí)驗(yàn)(二)二對(duì)因子實(shí)驗(yàn) P 黑檀體黑檀體 + + ee vg vg + + 殘翅殘翅 F1 野生型野生型+e vg + F2 野生型野生型 :黑檀體:黑檀體 :殘翅:殘翅 :黑檀體、殘翅:黑檀體、

12、殘翅 9 : 3 : 3 : 1(三)連鎖互換實(shí)驗(yàn)(三)連鎖互換實(shí)驗(yàn)P 黑體黑體 + b/ + b vg + /vg + 殘翅殘翅 F1 野生型野生型 + b/ vg + b vg/ b vg 野生型野生型 :黑體:黑體 :殘翅:殘翅 :黑體、殘翅:黑體、殘翅 親組型重組型親組型重組型 交換交換重組重組%100)(重組型數(shù)目親組型數(shù)目重組型數(shù)目重組值 RF(四)伴性遺傳實(shí)驗(yàn)(四)伴性遺傳實(shí)驗(yàn)正交:正交: P 紅眼紅眼 X+X+ 白眼白眼XwY F1 紅眼紅眼 X+Xw 、 X+Y (、(、 ) F2 X+X+ :X+Xw :X+Y : XwY 紅眼:白眼紅眼:白眼 = 3 :1 雌性:雄性雌性

13、:雄性 = 1 :1反交:反交:P 白眼白眼XwXw 紅眼紅眼 X+Y F1 紅眼紅眼 X+Xw 、 白眼白眼Xw Y F2 X+ Xw :Xw Xw :X+Y : XwY 紅眼:白眼紅眼:白眼 = 1 :1 雌性:雄性雌性:雄性 = 1 :1 正反交結(jié)果不同正反交結(jié)果不同 (五)三點(diǎn)測(cè)驗(yàn)(五)三點(diǎn)測(cè)驗(yàn) P 三隱性三隱性 w m sn3 + + + 野生型野生型 w m sn3 F1 w m sn3 w m sn3 + + + 測(cè)交后代:測(cè)交后代: w m sn3 + m sn3 w + sn3 w m + + + + w + + + m + + + sn3 根據(jù)測(cè)交后代根據(jù)測(cè)交后代8種表現(xiàn)型

14、的相對(duì)頻率可計(jì)算重種表現(xiàn)型的相對(duì)頻率可計(jì)算重組值,并確定基因排列順序。組值,并確定基因排列順序。(六)(六) 反交:反交: P P 三隱性三隱性 + w m sn+ w m sn3 3 e + + + e + + +黑檀體黑檀體 + w m sn+ w m sn3 3 e e F F1 1 + w m sn+ w m sn3 3 + w m sn + w m sn3 3 e + + + ee + + + e F F2 2 在在F F1 1的雜交中:的雜交中: 對(duì)對(duì)e e基因(基因() F F1 1自交自交 對(duì)對(duì)w m snw m sn3 3 (X X)基因)基因 F F1 1測(cè)交測(cè)交實(shí)驗(yàn)步驟(

15、技術(shù)路線)實(shí)驗(yàn)步驟(技術(shù)路線) 請(qǐng)有興趣的同學(xué)自行設(shè)計(jì):請(qǐng)有興趣的同學(xué)自行設(shè)計(jì): 選用適當(dāng)?shù)墓壨蛔兤废底饔H本,一次實(shí)驗(yàn)選用適當(dāng)?shù)墓壨蛔兤废底饔H本,一次實(shí)驗(yàn)即可驗(yàn)證前述四個(gè)遺傳基本定律,即可驗(yàn)證前述四個(gè)遺傳基本定律,即在一次雜在一次雜交實(shí)交實(shí) 驗(yàn)中包括并完成相關(guān)的驗(yàn)中包括并完成相關(guān)的5個(gè)果蠅雜交實(shí)驗(yàn)。個(gè)果蠅雜交實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)步驟:實(shí)驗(yàn)步驟: 1、分別培養(yǎng)三隱性和黑檀體果蠅,從子代中分、分別培養(yǎng)三隱性和黑檀體果蠅,從子代中分 別挑選出處女蠅和雄果蠅。別挑選出處女蠅和雄果蠅。 2、三隱性和黑檀體果蠅進(jìn)行正反交,、三隱性和黑檀體果蠅進(jìn)行正反交,23培養(yǎng)。培養(yǎng)。 3、78天后移去親本,待天后移去親本,待F F1 1成蠅出來(lái)后觀察記成蠅出來(lái)后觀察記 錄錄F F1 1的性狀。正反交產(chǎn)生的的性狀。正反交產(chǎn)生的F F1 1不必挑處女蠅。不必挑處女蠅。 4、將、將F F1 1雌雄果蠅進(jìn)行自交(反交實(shí)際上是

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