TM-083細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法

1、檢驗(yàn)方法文件編號:TM-083版本號: 01細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法頁碼: 18 /11生效日期:細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法起草人審核人審核人批準(zhǔn)人部門QCQAQC質(zhì)量管理部姓名饒濤黃祥彪汪大才鄧志軍簽名日期分發(fā)部門：質(zhì)量管理部QC1. 目的建立細(xì)菌內(nèi)毒素檢查的標(biāo)準(zhǔn)操作程序,規(guī)范細(xì)菌內(nèi)毒素的檢驗(yàn)操作。2. 范圍細(xì)菌內(nèi)毒素檢查。3. 職責(zé)QC4. 操作內(nèi)容4.1 簡述；4.1.1 本規(guī)范適用于細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法凝膠法。4.1.2 鱟試劑靈敏度復(fù)核試驗(yàn)項(xiàng)的目的不僅是考察鱟試劑和細(xì)菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品的效價(jià)是否準(zhǔn)確，也是考察檢驗(yàn)人員操作方法是否正確和實(shí)驗(yàn)條件是否符合規(guī)定。因此要求每個(gè)實(shí)驗(yàn)室在將一批新的鱟試劑用于干擾試驗(yàn)或

2、供試品細(xì)菌內(nèi)毒素檢查前應(yīng)進(jìn)行鱟試劑靈敏度復(fù)核試驗(yàn)。4.1.3 供試品干擾試驗(yàn)項(xiàng)用于建立新品種細(xì)菌內(nèi)毒素檢查方法以及供試品的配方和工藝有變化，鱟試劑來源不同或供試品陽性對照結(jié)果呈陰性時(shí)確定供試品是否存在抑制或增強(qiáng)作用。4.1.4 檢查法項(xiàng)為供試品細(xì)菌內(nèi)毒素檢查方法，陰性對照、陽性對照和供試品陽性對照必須同時(shí)進(jìn)行，否則試驗(yàn)結(jié)果無效。4.2 實(shí)驗(yàn)材料及用具4.2.1 電熱干燥箱除外源性內(nèi)毒素用，溫度應(yīng)能維持250以上至少一小時(shí)。4.2.2 試管恒溫儀，精度在±0.2。在37±1保持一小時(shí)。4.2.3 旋渦混合器4.2.4 鱟試劑，應(yīng)具有國家主管部門的批準(zhǔn)文號。4.2.5 細(xì)菌內(nèi)毒

3、素國家標(biāo)準(zhǔn)品(NSE)，細(xì)菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品(CSE)，除另有規(guī)定外應(yīng)由中國藥品生物制品檢定所統(tǒng)一發(fā)放。4.2.6 細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水(BET水)系指與靈敏度為0.03EU/ml或更高靈敏度的鱟試劑在37±1條件下不產(chǎn)生凝集反應(yīng)的滅菌注射用水。其內(nèi)毒素含量小于0.015EU/ml的滅菌注射用水。4.2.7 實(shí)驗(yàn)用具移液管(或刻度吸管，定量移液器)、凝集管(10×75mm)、三角瓶、小試管(16×100 mm)、試管架、洗耳球、封口膜或金屬試管帽、脫脂棉、吸水紙、剪刀、砂輪。所用玻璃器皿須經(jīng)250干烤至少l小時(shí)。塑料用具應(yīng)使用其它適宜的除細(xì)菌內(nèi)毒素方法。4.2.8

4、試劑75%乙醇、蒸餾水、鉻酸洗液。4.3 操作方法4.3.1 試驗(yàn)準(zhǔn)備4.3.1.1 洗液的配制見“玻璃儀器的清潔標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程”4.3.1.2 玻璃器皿的洗滌 將被洗滌的玻璃器皿用洗滌劑和自來水洗凈并空干水分后，置洗液中浸泡4小時(shí)，取出將洗液濾干，用自來水將殘余的洗液洗凈，再用新鮮蒸餾水沖洗干燥后置適宜的密閉金屬容器中，迅速置烤箱中。4.3.1.3 除去玻璃器皿表面可能存在的外源性內(nèi)毒素玻璃器皿置烤箱后將烤箱調(diào)至250，待烤箱溫度升至設(shè)定的溫度后開始記時(shí)，須干烤至少1小時(shí)。達(dá)到規(guī)定時(shí)間后，關(guān)斷電源。待烤箱溫度自然降至室溫，在不開啟金屬容器的情況下，可在三天內(nèi)使用，否則須再次加熱除去可能存在的外

5、源性內(nèi)毒素。4.3.2 鱟試劑靈敏度復(fù)核在使用每一批新的鱟試劑 或試驗(yàn)條件發(fā)生了任何可能影響檢驗(yàn)結(jié)果的改變時(shí)，應(yīng)進(jìn)行鱟試劑靈敏度復(fù)核實(shí)驗(yàn)。4.3.2.1 內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備4.3.2.1.1 取CSE一支，輕彈瓶壁，使粉末落人瓶底，再用砂輪在瓶頸上部輕輕劃痕，75%酒精棉球擦拭后啟開，防止玻璃屑落入瓶內(nèi)。4.3.2.1.2 按標(biāo)準(zhǔn)品使用說明書用移液管加入規(guī)定量的BET水溶解其內(nèi)容物，用封口膜將瓶口，封嚴(yán)。置旋渦混合器上混合15分鐘，然后制備成所需濃度的細(xì)菌內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液即2.0、1.0、0.5、0.25(復(fù)核鱟試劑的標(biāo)示靈敏度)，每稀釋一步均應(yīng)在旋渦混合器上混合30秒(詳細(xì)過程請參見使用說明

6、書)。若為NSE，可按其使用說明書將其稀釋至規(guī)定濃度后分裝并保存。若為CSE，為一次性使用。在上述稀釋過程中，每稀釋一步，均須在旋渦混合器上混合30秒鐘。4.3.2.2 待復(fù)核鱟試劑的準(zhǔn)備4.3.2.2.1 在制備內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液的同時(shí)，取0.1ml/支的鱟試劑18支輕彈瓶壁，使粉末落入瓶底。用砂輪在瓶頸輕輕劃痕，75%乙醇棉球擦拭后啟開備用，防止玻璃屑落入瓶內(nèi)，加入0.1mlBET水復(fù)溶，使內(nèi)容物充分溶解，避免產(chǎn)生氣泡。4.3.2.2.2 若待復(fù)核鱟試劑的規(guī)格不是0.1ml/支時(shí)，按標(biāo)示量加入BET水復(fù)溶，將復(fù)溶后的鱟試劑溶液混勻后每0.lml分配到1075mm凝聚管中，要求至少分配18管備用

7、。4.3.2.3 加樣4.3.2.3.1 將已充分溶解的待復(fù)核鱟試劑18支(管)放在試管架上，排成5列，其中4支(管)4列分別加入2.0、1.0、0.5、0.25的內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液；2支(管)l列分別加入BET水。內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液和BET水的加樣量均為0.1ml/支。4.3.2.4 加樣結(jié)束后，輕輕混勻，避免產(chǎn)生氣泡，放人37±1恒溫器中，保溫60±2分鐘，觀察結(jié)果。4.3.3 干擾試驗(yàn)4.3.3.1 供試品細(xì)菌內(nèi)毒素限值(L)的確定。4.3.3.1.1 按供試品標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定限值4.3.3.1.2 尚無標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的供試品內(nèi)毒素限值，一般按以下公式確定，特殊情況下，可根據(jù)生產(chǎn)和臨床用藥

8、實(shí)際做必要調(diào)整。LK/M式中 L為供試品的細(xì)菌內(nèi)毒素限值，以EU/ml、EU/mg、EU/U表示。K為按規(guī)定的給藥途徑，人用每公斤體重每小時(shí)最大可接受的內(nèi)毒素劑量。以EU/kg/hr表示。注射劑，K5EU/kg/hr，其中放射性藥品注射劑K2.5EU/kg/hr，鞘內(nèi)用藥品，K0.2EU/kg/hr。M為人用每公斤體重每小時(shí)最大劑量，以ml/(kg.h)、mg/(kg.h)或U/(kg.)表示，中國人按人均體重按60kg計(jì)算，注射時(shí)間小于l小時(shí)，按1小時(shí)計(jì)。4.3.3.2 供試品最大有效稀釋倍數(shù)的計(jì)算：MVDC·L/L為供試品的細(xì)菌內(nèi)毒素限值，為測試用鱟試劑的靈敏度標(biāo)示值，C表示供試

9、品的濃度，或供試品復(fù)溶后所得溶液的濃度。當(dāng)L以EU/ml表示時(shí)C為1.0ml/ml，當(dāng)L以EU/mg或EU/u表示時(shí)，C為mg/ml或u/ml。如需計(jì)算供試品的測試濃度C，可設(shè)MVD為1，可計(jì)算供試品的最小有效稀釋濃度C=/L。4.3.3.3 內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備同4.3.2.1。4.3.3.4 含供試品的內(nèi)毒素溶液的制備4.3.3.4.1 根據(jù)供試品的限值(L)和使用鱟試劑的靈敏度()計(jì)算供試品測試濃度(C)或MVD。4.3.3.4.2 將供試品稀釋，其稀釋倍數(shù)不應(yīng)超過MVD，并通過預(yù)試驗(yàn)確定正式試驗(yàn)供試品測試濃度。4.3.3.4.3 在制備內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液的同時(shí)用未檢出內(nèi)毒素的供試品溶液或其

10、不超過最大有效稀釋倍數(shù)的稀釋液將CSE以相同方法制備成所需濃度的含供試品的細(xì)菌內(nèi)毒素溶液(2.0、1.0、0.5、0.25)。以注射用頭孢哌酮鈉(1g/vial)為例：取約9.2mlBET水溶解注射用頭孢哌酮鈉即為100mg/ml(凍干品或無菌粉末用BET水溶解后體積若有變化，應(yīng)根據(jù)具體情況定)，再將其稀釋20倍(即5mg/m1)后備用：可用0.3ml(100mg/ml)+5.7ml(水)5mg/ml。取4.3.3.3制備好的內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液0.3ml加上2.7ml 5mg/ml頭孢哌酮鈉溶液，即為110內(nèi)毒素稀釋液。0.4ml110稀釋液加上3.6ml 5mg/ml頭孢哌酮鈉溶液，即為1100

11、內(nèi)毒素稀釋液。其余依次類推。也可寫成下列格式：9000EU/ml0.3ml900EU/ml0.3ml90EU/ml0.3ml9EU/ml0.3ml1EU/ml1ml2.7ml2.7ml2.7ml2.4ml1ml0.5EU/ml1ml0.25EU/ml1ml0.125EU/ml1ml0.0625EU/ml1ml0.03125EU/m1ml1ml1ml1ml4.3.3.4.4 簡化法制備含供試品的細(xì)菌內(nèi)毒素溶液取0.5ml內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)液(1.0EU/m1)+0.5ml供試品溶液(10mg/m1)lml 0.5EU/ml(5 mg/ml)含供試品的內(nèi)毒素溶液。同理分別用0.5ml濃度為0.5EU/ml

12、、0.25EU/ml和0.125EU/ml的內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液加入 0.5ml濃度為10mg/ml的供試品溶液制備0.25EU/ml、0.0125EU/ml和0.0625EU/ml含5mg/ml濃度的供試品陽性對照溶液(其體積大小根據(jù)試驗(yàn)所需量而定)。4.3.3.5 鱟試劑的準(zhǔn)備4.3.3.5.1 在制備內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)對照溶液和含供試品的內(nèi)毒素溶液的同時(shí)，取0.1ml/支的鱟試劑36支輕彈瓶壁使粉末落人瓶底，用砂輪在瓶頸輕輕劃痕，75酒精棉球擦試后啟開，防止玻璃屑落人瓶內(nèi)，加0.1mlBET水復(fù)溶，輕輕搖動(dòng)瓶壁，使內(nèi)容物充分溶解，避免產(chǎn)生氣泡。4.3.3.5.2 若鱟試劑的規(guī)格不是0.1ml/支時(shí)，按

13、標(biāo)示量加入水復(fù)溶，將復(fù)溶后的鱟試劑混勻后每0.1m1分配到1075mm凝集管中，要求至少分配36管備用。4.3.3.6 加樣4.3.3.6.1 將準(zhǔn)備好的鱟試劑18支(管)放在試管架上，排成5列，其中4支(管)4列分別加入2.0、1.0、0.5、0.25的內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)對照溶液，2支(管)1列加BET水。4.3.3.6.2 將準(zhǔn)備好的另外18支(管)放在試管架上，排成5列，其中4支(管)4列分別加入2.0、1.0、0.5、0.25的含供試品的內(nèi)毒素溶液：2支(管)l列加入供試品溶液。4.3.3.6.3 內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液和BET水、含供試品的內(nèi)毒素溶液和供試品溶液的加樣量均為0.1ml。4.3.3.7

14、 加樣結(jié)束后，輕輕混勻，避免產(chǎn)生氣泡，放入試管恒溫儀中，保溫60±2分鐘后觀察結(jié)果。4.3.3.8 在進(jìn)行正式干擾試驗(yàn)前可進(jìn)行預(yù)試驗(yàn)，用L和(通常用0.50.03EU/m1)計(jì)算出C的范圍，以l：2的濃度比例，制備含2和0.25的系列濃度供試品溶液，每一濃度取2支(管)鱟試劑進(jìn)行試驗(yàn)，判定無干擾濃度進(jìn)行正式干擾試驗(yàn)。4.3.4 供試品細(xì)菌內(nèi)毒素的檢查4.3.4.1 供試品溶液的制備4.3.4.1.1 計(jì)算 MVDC·L/C、L、的意義同4.3.3.24.3.4.1.2 稀釋 其稀釋倍數(shù)不得超過MVD。4.3.4.2 陽性對照溶液的制備 按4.3.2.1用檢查用水（BET水）

15、將制成2濃度的內(nèi)毒素溶液。4.3.4.3 供試品陽性對照液的制備用被測供試品將（內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品）CSE制成2濃度的內(nèi)毒素溶液。方法同4.3.3.4 含供試品的內(nèi)毒素溶液制備。其中利用簡化法時(shí)，由于供試品原液必須稀釋一倍，采用的鱟試劑靈敏度要提高一倍(如輸液)，供試品濃度也相應(yīng)調(diào)正。4.3.4.4 鱟試劑的制備4.3.4.4.1 在制備供試品溶液、內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液和供試品陽性對照溶液的同時(shí)，取0.1 ml/支的鱟試劑8支，手指輕彈瓶壁，使頸部瓶壁上的粉末落入瓶內(nèi)，用砂輪在瓶頸輕輕劃痕，75%乙醇棉球擦拭后啟開備用，防止玻璃屑落人瓶內(nèi)，加入0.1mlBET水復(fù)溶，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)瓶壁，使內(nèi)容物充分溶解，避

16、免產(chǎn)生氣泡。4.3.4.4.2 若使用的鱟試劑的規(guī)格不是0.1ml/支時(shí)，按標(biāo)示量加入BET水復(fù)溶，將復(fù)溶后的鱟試劑溶液混勻后每0.1m1分配到10×75mm凝集管中，要求至少分配8管備用。4.3.4.5 加樣取裝有0.1ml鱟試劑溶液的10×75mm試管或復(fù)溶后的0.lml/支規(guī)格的鱟試劑原安瓿8支，其中2支加入0.1ml按最大有效稀釋倍數(shù)稀釋的供試品溶液作為供試品管，2支加入01ml用BET水將CSE制成的2濃度的內(nèi)毒素溶液作為陽性對照，2支加入0.1ml BET水作為陰性對照，2支加入0.lml供試品陽性對照溶液(相當(dāng)于用被測供試品溶液將CSE制成2入濃度的內(nèi)毒素溶液

17、)作為供試品陽性對照管。4.3.4.6 將試管中溶液輕輕混勻后，垂直放入37±1試管恒溫儀中，保溫60±2分鐘。保溫和拿取試管過程應(yīng)避免受到震動(dòng)，造成假陰性結(jié)果。4.3.4.7 將試管從試管恒溫儀 中輕輕取出，緩緩倒轉(zhuǎn)180°時(shí)，管內(nèi)凝膠不變形，不從管壁滑脫者為陽性，記錄為(+)；凝膠不能保持完整并從管壁滑脫者為陰性，記錄為()。4.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算4.4.1 鱟試劑靈敏度復(fù)核如最大濃度2.04管均為陽性，最低濃度0. 254管均為陰性，陰性對照為陰性，按下式計(jì)算反應(yīng)終點(diǎn)濃度的幾何平均值即為鱟試劑靈敏度的復(fù)核結(jié)果(c)。c = lg-1(X/4)式中X為反應(yīng)終點(diǎn)濃

18、度的對數(shù)值(1g)。反應(yīng)終點(diǎn)濃度是系列濃度遞減的內(nèi)毒素溶液中最后一個(gè)呈陽性結(jié)果的濃度。4.4.2 干擾實(shí)驗(yàn)如標(biāo)準(zhǔn)溶液最大濃度2.04管均為陽性，最低濃度0254管均為陰性，陰性對照為陰性，按下式計(jì)算用BET水制成的內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液的反應(yīng)終點(diǎn)濃度的幾何平均值(Es)和用供試品溶液或稀釋液制成的內(nèi)毒素溶液的反應(yīng)終點(diǎn)濃度的幾何平均值(Et)。Es = lg-1(Xs/4)Et = lg-1(Xt/4)式中Xs、Xt分別為BET水和供試品溶液或稀釋液制成的內(nèi)毒素溶液的反應(yīng)終點(diǎn)濃度的對數(shù)值(1g)。4.5 結(jié)果判斷4.5.1 鱟試劑靈敏度復(fù)核當(dāng)c在0.52.0(包括0.5和2.0)時(shí)，方可用于干擾實(shí)驗(yàn)和供

19、試品細(xì)菌內(nèi)毒素檢查，并以(標(biāo)示靈敏度)為該批鱟試劑的靈敏度。4.5.2 干擾實(shí)驗(yàn)當(dāng)Es在0.52.0(包括0.5和2.0)時(shí)，且當(dāng)Et在0.5Es2.0Es(包括0.5Es和2.0Es)時(shí)，則認(rèn)為供試品在該濃度下不干擾實(shí)驗(yàn)，否則使用更靈敏的鱟試劑，對供試品進(jìn)行更大倍數(shù)稀釋，這是排除干擾因素的簡單有效的方法(也可采用過濾法，干擾因素去除法等其他方法)。建立新品種細(xì)菌內(nèi)毒素檢查方法時(shí)，每個(gè)廠家至少取三個(gè)批號(不包括亞批)的供試品，用兩個(gè)以上生產(chǎn)廠家的鱟試劑進(jìn)行干擾試驗(yàn)。若各批供試品干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果差別較大時(shí)應(yīng)考慮供試品內(nèi)毒素的影響。若鱟試劑的來源、供試品的配方或生產(chǎn)工藝有變化時(shí)，須重復(fù)進(jìn)行干擾實(shí)驗(yàn)。4

20、.5.3 供試品細(xì)菌內(nèi)毒素檢查供試品2管均為()，應(yīng)認(rèn)為符合規(guī)定。如2管均為(+)，應(yīng)認(rèn)為不符合規(guī)定；如2管中1管為(+)，l管為()，按上述方法另取4支供試品復(fù)試，4管中l(wèi)管為(+)，即認(rèn)為不符合規(guī)定。若第一次實(shí)驗(yàn)時(shí)供試品的稀釋倍數(shù)小于MVD而結(jié)果出現(xiàn)2管為(+)或2管中l(wèi)管為(+)，l管為()時(shí)，按同樣方法復(fù)試和判定，復(fù)試時(shí)要求將其稀釋至MVD。陽性對照為()或供試品陽性對照為()或陰性對照為(+)，試驗(yàn)無效。4.6 結(jié)果計(jì)算和判斷舉例4.6.1 鱟試劑靈敏度復(fù)核設(shè)待復(fù)核的鱟試劑的標(biāo)示靈敏度為0.125EU/ml。內(nèi)毒素濃度EU/ml0.250.1250.06250.03125N反應(yīng)終點(diǎn)濃

21、度重復(fù)管數(shù)1+0.1252+0.253+0.06254+0.125= lg-1(Xs/4) = lg-1(lg0.125+lg0.25+lg0.0625+lg0.125)/4 =0.125(EU/ml)s在0.52.0范圍內(nèi)，符合規(guī)定。其靈敏度為標(biāo)示靈敏度0.125EU/ml。4.6.2 干擾實(shí)驗(yàn) 設(shè)所用鱟試劑的標(biāo)示靈敏度為0.125EU/ml，供試品為××注射液(14)。內(nèi)毒素濃度EU/ml0.250.1250.06250.03125N反應(yīng)終點(diǎn)濃度1內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液+0.06252+0.06253+0.06254+0.06251含供試品的內(nèi)毒素溶液+0.252+0.253+

22、0.254+0.125= lg-1(Xs/4) = lg-1(lg0.0625+lg0.0625+lg0.0625+lg0.625)/4 = 0.625(EU/ml)Et= lg-1(Xt/4) = lg-1(lg0.25+lg0.25+lg0.25+lg0.125)/4 = 0.210(EU/ml)雖然Es在0.52.0范圍內(nèi)，Et不在0.5Es2.0Es范圍，該供試品在14濃度下有干擾，需進(jìn)行適當(dāng)處理后重復(fù)試驗(yàn)，或?qū)┰嚻愤M(jìn)行更大倍數(shù)稀釋后進(jìn)行干擾試驗(yàn)。4.6.3 供試品細(xì)菌內(nèi)毒素檢查設(shè)所用鱟試劑的標(biāo)示靈敏度為0.125EU/ml，供試品為××注射液(14)。供試品管供

23、試品管陰性對照2.0陽性對照供試品陽性對照+結(jié)果是否有效無效計(jì)算結(jié)果無效結(jié)果判斷需重做檢驗(yàn)人員簽名4.7 注意事項(xiàng)4.7.1 實(shí)驗(yàn)前，須用肥皂洗手，用75%乙醇棉球消毒。4.7.2 實(shí)驗(yàn)時(shí)，須戴工作帽和口罩。尤其在配制洗液和洗滌玻璃器皿時(shí)一定要戴手套、工作帽和口罩。4.7.3 試驗(yàn)應(yīng)在潔凈室或潔凈工作臺內(nèi)進(jìn)行，過程中應(yīng)防止微生物的污染。4.7.4 用移液管或刻度吸管等吸取樣品時(shí)，須使用洗耳球，勿用嘴吸、吹，防止唾液濺入，防止氣體中的內(nèi)毒素進(jìn)入供試液。也可使用加樣器等其它方法。4.7.5 注意所用鱟試劑的批號、有效期、規(guī)格、靈敏度等。4.7.6 進(jìn)行干擾實(shí)驗(yàn)時(shí)，標(biāo)準(zhǔn)對照和供試品陽性對照(含供試品

24、的內(nèi)毒素溶液)應(yīng)同時(shí)進(jìn)行。4.7.7 在進(jìn)行靈敏度復(fù)核、干擾試驗(yàn)和供試品內(nèi)毒素檢查時(shí)，各個(gè)實(shí)驗(yàn)所要求的對照應(yīng)同時(shí)進(jìn)行，并在有效的條件下才能進(jìn)行計(jì)算和判斷。4.7.8 溶解鱟試劑及混勻供試品及鱟試劑時(shí)，不要?jiǎng)×艺袷幈苊猱a(chǎn)生氣泡。4.7.9 由于凝集反應(yīng)是不可逆的，所以在反應(yīng)過程中及觀察結(jié)果時(shí)應(yīng)注意不要使試管受到振動(dòng)，以免使凝膠破碎產(chǎn)生假陰性結(jié)果。5. 附件 細(xì)菌內(nèi)毒素檢驗(yàn)記錄 鱟試劑靈敏度試驗(yàn)記錄 干擾試驗(yàn)記錄6. 參考文件中國藥典2010版二部附錄XI E 7.文件修訂歷史版本號生效日期修訂原因和內(nèi)容01按新版GMP認(rèn)證修訂，替換00版本文件。 鱟試劑靈敏度復(fù)核記錄檢驗(yàn)?zāi)康臋z驗(yàn)日期 年 月 日檢驗(yàn)依據(jù)室 溫 試劑名稱生產(chǎn)單位批 號靈敏度/效價(jià)鱟 試 劑 EU/ml細(xì)菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品中國生物制品檢定所 EU/支細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水-細(xì)菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品稀釋：