實驗三__紅細(xì)胞和白細(xì)胞計數(shù)

1、紅細(xì)胞和白細(xì)胞計數(shù)紅細(xì)胞和白細(xì)胞計數(shù)血細(xì)胞血細(xì)胞(45%) 血漿血漿(55%)紅細(xì)胞紅細(xì)胞白細(xì)胞白細(xì)胞血小板血小板中性粒細(xì)胞中性粒細(xì)胞嗜酸性粒細(xì)胞嗜酸性粒細(xì)胞嗜堿性粒細(xì)胞嗜堿性粒細(xì)胞淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞單核細(xì)胞單核細(xì)胞固體成分固體成分 (8 89 9%)水水(9192%)血漿蛋白血漿蛋白非蛋白類非蛋白類無機鹽無機鹽纖維蛋白原纖維蛋白原清蛋白清蛋白球蛋白球蛋白血血 液液血血 清清血血 漿漿全全 血血一、紅細(xì)胞計數(shù)一、紅細(xì)胞計數(shù)l目的目的 掌握顯微鏡手工計數(shù)的方法。l原理原理 用等滲稀釋液將血液稀釋一定倍數(shù)，沖入計數(shù)池后，在顯微鏡下計數(shù)一定體積內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù)量，經(jīng)換算求出每升血液中的紅細(xì)胞數(shù)。一、紅細(xì)胞

2、計數(shù)一、紅細(xì)胞計數(shù)l器材器材 顯微鏡、改良計數(shù)板、試管、微量吸管、移液管、洗耳球l試劑試劑 生理鹽水l標(biāo)本標(biāo)本 EDTA抗凝血2為紅細(xì)胞計數(shù)區(qū)域為紅細(xì)胞計數(shù)區(qū)域壓線細(xì)胞的計數(shù)原則壓線細(xì)胞的計數(shù)原則：數(shù)左不數(shù)右數(shù)左不數(shù)右，數(shù)上不數(shù)下數(shù)上不數(shù)下10操作操作l1 加稀釋液 取小試管1支，加紅細(xì)胞稀釋液2ml。l2 加血 用清潔干燥微量吸管吸取抗凝血10l，擦去管外余血，輕輕加至紅細(xì)胞稀釋液底部，再輕吸上清液清洗吸管23次，立即混勻。l3 充池 混勻后用微量吸管將紅細(xì)胞懸液沖入計數(shù)池，室溫下平放35分鐘，待細(xì)胞下沉后于顯微鏡下計數(shù)。l4 計數(shù) 用高倍鏡依次計數(shù)中央大方格內(nèi)4角和正中5個中方格內(nèi)的紅細(xì)胞

3、數(shù)。 5計算 紅細(xì)胞/L=N25/510106200=N1010 =N/1001012充液位置充液位置充液位置充液位置注意事項注意事項 1. 將紅細(xì)胞稀釋液充入計數(shù)池時要一次完成，不能產(chǎn)生滿溢、氣泡或充池不足的現(xiàn)象。 2. 紅細(xì)胞在計數(shù)池中若分布不均，每個中方格之間相差超過20個以上時要重新充池計數(shù)。正常數(shù)值范圍內(nèi)，2次紅細(xì)胞計數(shù)相差不得超過5%。二、白細(xì)胞計數(shù)二、白細(xì)胞計數(shù)l目的 掌握顯微鏡白細(xì)胞計數(shù)的方法。l原理 用白細(xì)胞稀釋液將血液稀釋一定倍數(shù)，同時破壞溶解紅細(xì)胞。將稀釋的血液沖入計數(shù)池后，在顯微鏡下計數(shù)一定體積內(nèi)的白細(xì)胞數(shù)，經(jīng)換算求出每升血液中的白細(xì)胞數(shù)。l器材 顯微鏡、改良計數(shù)板、試

4、管、微量吸管、移液管、洗耳球l試劑 白細(xì)胞稀釋液l標(biāo)本 EDTA抗凝血二、白細(xì)胞計數(shù)二、白細(xì)胞計數(shù)l1.加稀釋液 用吸管吸取白細(xì)胞稀釋液0.38ml于小試管中。l2.加血 用清潔干燥微量吸管吸取抗凝血20l，擦去管外余血，輕輕加至白細(xì)胞稀釋液底部，再輕吸上清液清洗吸管23次，混勻。l3.充池 混勻后用微量吸管將完全變?yōu)樽睾稚募?xì)胞懸液沖入計數(shù)池，室溫下平放35分鐘，待細(xì)胞下沉后于顯微鏡下計數(shù)。l 4. 計數(shù) 用低倍鏡依次計數(shù)4個大方格內(nèi)的白細(xì)胞數(shù)。l 5.計算 紅細(xì)胞/L=N/41010620=N/20109/L 操作操作五五. 計算計算WBC/L所數(shù)所數(shù)WBC總數(shù)總數(shù)/4/4所數(shù)所數(shù)WBC總數(shù)總數(shù)/20/2010109 91010202010106 6l 1.在充池時要一次完成，不能產(chǎn)生滿溢、氣泡或充池不足及充液后玻片移動的現(xiàn)象。l 2.白細(xì)胞在計數(shù)池中若分布不均，大方格間細(xì)胞計數(shù)相差一般不超過10%。l 3.白細(xì)胞數(shù)量過多時，可采取加大稀釋倍數(shù)的方法。l 4.白細(xì)胞稀釋液不能破壞有核紅細(xì)胞，它可使白細(xì)胞計數(shù)偏高，此時應(yīng)計算白細(xì)胞校正值。注意事項注意事項l作業(yè)作業(yè) l1.本次實驗的關(guān)鍵環(huán)