實(shí)驗(yàn)三__紅細(xì)胞和白細(xì)胞計(jì)數(shù)

1、紅細(xì)胞和白細(xì)胞計(jì)數(shù)紅細(xì)胞和白細(xì)胞計(jì)數(shù)血細(xì)胞血細(xì)胞(45%) 血漿血漿(55%)紅細(xì)胞紅細(xì)胞白細(xì)胞白細(xì)胞血小板血小板中性粒細(xì)胞中性粒細(xì)胞嗜酸性粒細(xì)胞嗜酸性粒細(xì)胞嗜堿性粒細(xì)胞嗜堿性粒細(xì)胞淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞單核細(xì)胞單核細(xì)胞固體成分固體成分 (8 89 9%)水水(9192%)血漿蛋白血漿蛋白非蛋白類非蛋白類無機(jī)鹽無機(jī)鹽纖維蛋白原纖維蛋白原清蛋白清蛋白球蛋白球蛋白血血 液液血血 清清血血 漿漿全全 血血一、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)一、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)l目的目的 掌握顯微鏡手工計(jì)數(shù)的方法。l原理原理 用等滲稀釋液將血液稀釋一定倍數(shù)，沖入計(jì)數(shù)池后，在顯微鏡下計(jì)數(shù)一定體積內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù)量，經(jīng)換算求出每升血液中的紅細(xì)胞數(shù)。一、紅細(xì)胞

2、計(jì)數(shù)一、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)l器材器材 顯微鏡、改良計(jì)數(shù)板、試管、微量吸管、移液管、洗耳球l試劑試劑 生理鹽水l標(biāo)本標(biāo)本 EDTA抗凝血2為紅細(xì)胞計(jì)數(shù)區(qū)域?yàn)榧t細(xì)胞計(jì)數(shù)區(qū)域壓線細(xì)胞的計(jì)數(shù)原則壓線細(xì)胞的計(jì)數(shù)原則：數(shù)左不數(shù)右數(shù)左不數(shù)右，數(shù)上不數(shù)下數(shù)上不數(shù)下10操作操作l1 加稀釋液 取小試管1支，加紅細(xì)胞稀釋液2ml。l2 加血 用清潔干燥微量吸管吸取抗凝血10l，擦去管外余血，輕輕加至紅細(xì)胞稀釋液底部，再輕吸上清液清洗吸管23次，立即混勻。l3 充池 混勻后用微量吸管將紅細(xì)胞懸液沖入計(jì)數(shù)池，室溫下平放35分鐘，待細(xì)胞下沉后于顯微鏡下計(jì)數(shù)。l4 計(jì)數(shù) 用高倍鏡依次計(jì)數(shù)中央大方格內(nèi)4角和正中5個(gè)中方格內(nèi)的紅細(xì)胞

3、數(shù)。 5計(jì)算 紅細(xì)胞/L=N25/510106200=N1010 =N/1001012充液位置充液位置充液位置充液位置注意事項(xiàng)注意事項(xiàng) 1. 將紅細(xì)胞稀釋液充入計(jì)數(shù)池時(shí)要一次完成，不能產(chǎn)生滿溢、氣泡或充池不足的現(xiàn)象。 2. 紅細(xì)胞在計(jì)數(shù)池中若分布不均，每個(gè)中方格之間相差超過20個(gè)以上時(shí)要重新充池計(jì)數(shù)。正常數(shù)值范圍內(nèi)，2次紅細(xì)胞計(jì)數(shù)相差不得超過5%。二、白細(xì)胞計(jì)數(shù)二、白細(xì)胞計(jì)數(shù)l目的 掌握顯微鏡白細(xì)胞計(jì)數(shù)的方法。l原理 用白細(xì)胞稀釋液將血液稀釋一定倍數(shù)，同時(shí)破壞溶解紅細(xì)胞。將稀釋的血液沖入計(jì)數(shù)池后，在顯微鏡下計(jì)數(shù)一定體積內(nèi)的白細(xì)胞數(shù)，經(jīng)換算求出每升血液中的白細(xì)胞數(shù)。l器材 顯微鏡、改良計(jì)數(shù)板、試

4、管、微量吸管、移液管、洗耳球l試劑 白細(xì)胞稀釋液l標(biāo)本 EDTA抗凝血二、白細(xì)胞計(jì)數(shù)二、白細(xì)胞計(jì)數(shù)l1.加稀釋液 用吸管吸取白細(xì)胞稀釋液0.38ml于小試管中。l2.加血 用清潔干燥微量吸管吸取抗凝血20l，擦去管外余血，輕輕加至白細(xì)胞稀釋液底部，再輕吸上清液清洗吸管23次，混勻。l3.充池 混勻后用微量吸管將完全變?yōu)樽睾稚募?xì)胞懸液沖入計(jì)數(shù)池，室溫下平放35分鐘，待細(xì)胞下沉后于顯微鏡下計(jì)數(shù)。l 4. 計(jì)數(shù) 用低倍鏡依次計(jì)數(shù)4個(gè)大方格內(nèi)的白細(xì)胞數(shù)。l 5.計(jì)算 紅細(xì)胞/L=N/41010620=N/20109/L 操作操作五五. 計(jì)算計(jì)算WBC/L所數(shù)所數(shù)WBC總數(shù)總數(shù)/4/4所數(shù)所數(shù)WBC總數(shù)總數(shù)/20/2010109 91010202010106 6l 1.在充池時(shí)要一次完成，不能產(chǎn)生滿溢、氣泡或充池不足及充液后玻片移動(dòng)的現(xiàn)象。l 2.白細(xì)胞在計(jì)數(shù)池中若分布不均，大方格間細(xì)胞計(jì)數(shù)相差一般不超過10%。l 3.白細(xì)胞數(shù)量過多時(shí)，可采取加大稀釋倍數(shù)的方法。l 4.白細(xì)胞稀釋液不能破壞有核紅細(xì)胞，它可使白細(xì)胞計(jì)數(shù)偏高，此時(shí)應(yīng)計(jì)算白細(xì)胞校正值。注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)l作業(yè)作業(yè) l1.本次實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵環(huán)