實驗室各類移液槍的規(guī)范使用葉繼立

1、實驗室移液槍的規(guī)范使用-葉繼立1.移液槍的簡介2.移液槍的分類3.移液槍、分配器的規(guī)范使用4.各種移液器材的使用注意事項1.移液槍的簡介 移液槍是移液器的一種，常用于實驗室少量或微量液體的移取，在實際應用中解決了移液管較難移取微量試劑的困難，各種移液槍規(guī)格不同，不同規(guī)格的移液槍配套使用不同大小的槍頭，不同生產廠家生產的形狀也略有不同，但工作原理及操作方法基本一致。移液槍屬精密儀器，使用及存放時均要小心謹慎，防止損壞，避免影響其量程。1.1移液槍的工作原理 移液器（微量加樣器）最早出現(xiàn)于1956年，由德國生理化學研究所的科學家Schnitger發(fā)明，其后，在1958年德國Eppendorf公司開

2、始生產按鈕式微量加樣器，成為世界上第一家生產微量加樣器的公司。這些微量加樣器的吸液范圍在11000l之間，適用于臨床常規(guī)化學實驗室使用。微量加樣器發(fā)展到今天，不但加樣更為精確，而且品種也多種多樣，如微量分配器、多通道微量加樣器等，其加樣的物理學原理有下面兩種：使用空氣墊(又稱活塞沖程)加樣；使用無空氣墊的活塞正移動(positivedisplacement)加樣。2.移液槍的分類2.1空氣墊加樣器活塞沖程(空氣墊)加樣器可很方便地用于固定或可調體積液體的加樣。加樣器中的空氣墊的作用是將吸于塑料吸頭內的液體樣本與加樣器內的活塞分隔開來，空氣墊通過加樣器活塞的彈簧樣運動而移動，進而帶動吸頭中的液體

3、，使體積和移液吸頭中高度的增加決定了加樣中這種空氣墊的膨脹程度。溫度、氣壓和空氣濕度的影響必須通過對空氣墊加樣器進行結構上的改良而降低，使得在正常情況下不至于影響加樣的準確度。一次性吸頭是本加樣系統(tǒng)的一個重要組成部分，其形狀、材料特性及與加樣器的吻合程度均對加樣的準確度有很大的影響。2.2活塞正移動加樣器 以活塞正移動為原理的加樣器和分配器與空氣墊加樣器所受物理因素的影響不同，因此，在空氣墊加樣器難以應用的情況下，活塞正移動加樣器可以應用，如具有高蒸汽壓的、高黏稠度以及密度大于20g/cm3的液體；又如在臨床聚合酶鏈反應(PCR)測定中，為防止氣溶膠的產生，最好使用活塞正移動加樣器。活塞正移動

4、加樣器的吸頭與空氣墊加樣器吸頭有所不同，其內含一個可與加樣器的活塞耦合的活塞，這種吸頭一般由生產活塞正移動加樣器的廠家配套生產，不能使用通常的吸頭或不同廠家的吸頭。2.3多通道加樣器和分配器 多通道加樣器和分配器的原理與上述相同。多通道加樣器通常為8通道或12通道，與8X12=96孔微孔板一致。多通道加樣器的使用不但可減少實驗操作人員的加樣操作次數(shù)，而且可提高加樣的精密度。分配器為半自動加樣系統(tǒng)，電子加樣器最大的優(yōu)點是其具有很高的加樣重復性，應用范圍廣。3.移液槍的規(guī)范使用3.1單道與8道移液槍的使用1.量程的調節(jié)在調節(jié)量程時，如果要從大體積調為小體積，則按照正常的調節(jié)方法，逆時針旋轉旋鈕即可

5、；但如果要從小體積調為大體積時，則可先順時針旋轉刻度旋鈕至超過量程的刻度，再回調至設定體積，這樣可以保證量取的最高精確度。在該過程中，千萬不要將按鈕旋出量程，否則會卡住內部機械裝置而損壞了移液槍。2.槍頭（吸液嘴）的裝配在將槍頭（pipette tips）套上移液槍時，很多人會使勁地在槍頭盒子上敲幾下，這時錯誤的做法，因為這樣會導致移液槍的內部配件（如彈簧）因敲擊產生的瞬時撞擊力而變得松散，甚至會導致刻度調節(jié)旋鈕卡住。正確的方法是將移液槍（器）垂直插入槍頭中，稍微用力左右微微轉動即可使其緊密結合。如果是多道（如8道或12道）移液槍，則可以將移液槍的第一道對準第一個槍頭，然后傾斜地插入，往前后方

6、向搖動即可卡緊。槍頭卡緊的標志是略為超過O型環(huán)，并可以看到連接部分形成清晰的密封圈。3.移液的方法 移液之前，要保證移液器、槍頭和液體處于相同溫度。吸取液體時，移液器保持豎直狀態(tài)，將槍頭插入液面下23毫米（不同規(guī)格移液槍對此要求不同）。在吸液之前，可以先吸放幾次液體以潤濕吸液嘴（尤其是要吸取粘稠或密度與水不同的液體時）。這時可以采取兩種移液方法。 一是前進移液法。用大拇指將按鈕按下至第一停點，然后慢慢松開按鈕回原點（吸取固定體積的液體）。接著將按鈕按至第一停點排出液體，稍停片刻繼續(xù)按按鈕至第二停點吹出殘余的液體。最后松開按鈕。 二是反向移液法。此法一般用于轉移高粘液體、生物活性液體、易起泡液體

7、或極微量的液體，其原理就是先吸入多于設置量程的液體，轉移液體的時候不用吹出殘余的液體。先按下按鈕至第二停點，慢慢松開按鈕至原點，吸上之后，斜靠一下容器壁將多余液體沿器壁流回容器。接著將按鈕按至第一停點排出設置好量程的液體，繼續(xù)保持按住按鈕位于第一停點（千萬別再往下按），取下有殘留液體的槍頭，棄之。4.移液器的正確放置 使用完畢，可以將其豎直掛在移液槍架上，但要小心別掉下來。當移液器槍頭里有液體時，切勿將移液器水平放置或倒置，以免液體倒流腐蝕活塞彈簧。4.分配器的使用1.槍頭的選擇（瓶口分配器不需要此不操作） 根據(jù)實驗的需要，選擇適用的分配器槍頭（本實驗室的槍頭有1=2L，1=20L，1=50L

8、，1=100L，1=200L，1=250L，1=0.5mL，1=1mL），同一實驗中的同一種試劑最好用統(tǒng)一規(guī)格的分配器槍頭移取，盡量減少槍頭更換帶來的誤差；若移取試劑的體積范圍較大，也應盡量減少更換分配器槍頭規(guī)格的次數(shù)。2.槍頭的安裝 （實際演示）3.液體的移取 將選定的槍頭裝在分配器上，將槍頭伸入液面以下2-3處，吸取少量液體，將槍頭進行潤洗，潤洗過后的液體打入廢液杯中。 潤洗過后的槍頭伸入液面吸取液體，根據(jù)實驗需要大致吸取液體體積，但最好將液體吸至清透總體積的1/3-2/3處。將槍頭拔出液面，若槍頭最前端掛有大量液體，用吸水紙將其擦干，并將分配器調至1檔，將第一槍液體打入廢液杯中，然后開始

9、實驗中試劑的添加。在加液體過程中，應保持打每一槍的速度一致，避免速度不同而液體被慣性帶出而造成的誤差。 試劑移取結束后，將槍頭內多余的液體放回原試劑瓶中，將槍頭取下，清洗。4.瓶口分配器的使用 瓶口分配器在本實驗室中只有一臺，用于黃曲霉毒素含量檢測過程中的甲醇的加液，瓶口分配器被裝于4L的旋口瓶上，使用時，先將頂部的旋鈕調節(jié)至需要的刻度，此調節(jié)與移液槍刻度的調節(jié)相同，旋開嘴部的旋塞，打開安全閥，進行移液工作，移液結束后，關閉安全閥，旋上旋塞。4.各種移液器材的使用注意事項 一設定移液體積：1.從大體積調節(jié)到小體積時，為正常調節(jié)方法，逆時針旋轉刻度即可；2.從小體積調節(jié)至大體積時，可先順時針調至

10、超過設定體積的刻度，再回調至設定體積，這樣可以保證最佳的精確度。 二裝配移液器吸頭：1.單道移液器，將移液端垂直插入吸頭，左右微微轉動，上緊即可2.用移液器反復撞擊吸頭來上緊的方法是不可取的，這樣操作會導致移液器部件因強烈撞擊而松散，嚴重的情況會導致調節(jié)刻度的旋鈕卡住。3.多道移液器，將移液器的第一道對準第一個吸頭，傾斜插入，前后稍許搖動上緊，吸頭插入后略超過O型環(huán)即可。4.分配器在安裝槍頭時一定要按照專業(yè)人員教授方法進行。 三. 在移液槍與分配器的使用過程中，嚴禁暴力使用儀器。 四養(yǎng)護：1、如液體不小心進入活塞室應及時清除污染物；2、移液器使用完畢后，把移液器量程調至最大值，且將移液器垂直放置在移液器架上；3、根據(jù)使用頻率所有的移液器應定期用肥皂水清洗或用60%的異丙醇消毒，再用雙蒸水清洗并晾干；4、避免放在溫度較高處以防變形致漏液或不準；5、發(fā)現(xiàn)問題及時找專業(yè)人員處理；6、當移液器吸嘴有液體時切勿將移液器水平或倒置放置，以防液體流入活塞室腐蝕移液器活塞；7