畢業(yè)答辯楊敏

1、Kisspeptin在犬肝和脾內(nèi)在犬肝和脾內(nèi)的表達(dá)和分布研究的表達(dá)和分布研究指導(dǎo)老師：位蘭老師指導(dǎo)老師：位蘭老師匯報(bào)人：匯報(bào)人： 楊敏楊敏專業(yè)班級(jí)：動(dòng)藥專業(yè)班級(jí)：動(dòng)藥112112匯報(bào)提綱匯報(bào)提綱 一、研究目的與意義一、研究目的與意義 二、材料與方法二、材料與方法 三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析 四、實(shí)四、實(shí) 驗(yàn)驗(yàn) 結(jié)結(jié) 論論研究目的與意義研究目的與意義1.犬類的養(yǎng)殖特點(diǎn)：犬的種類繁多，尤其是寵物犬類的養(yǎng)殖特點(diǎn)：犬的種類繁多，尤其是寵物狗更是倍受人們青睞。我國(guó)寵物行業(yè)是一個(gè)新興狗更是倍受人們青睞。我國(guó)寵物行業(yè)是一個(gè)新興行業(yè)，具有很大的發(fā)展空間。行業(yè)，具有很大的發(fā)展空間。2. Kisspep

2、tin的作用：的作用：Kisspeptin是由是由KISS-1基因編碼肽類激素，在腦和多種器官組織分布，基因編碼肽類激素，在腦和多種器官組織分布，具有影響癌細(xì)胞的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移、調(diào)節(jié)生殖功能和具有影響癌細(xì)胞的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移、調(diào)節(jié)生殖功能和影響內(nèi)分泌等作用。影響內(nèi)分泌等作用。研究目的與意義研究目的與意義3.目的與意義：目的與意義： 目前關(guān)于目前關(guān)于Kisspeptin在生殖調(diào)控的作用已有大在生殖調(diào)控的作用已有大量報(bào)道，但其對(duì)肝臟和脾臟的作用研究較少。量報(bào)道，但其對(duì)肝臟和脾臟的作用研究較少。本實(shí)驗(yàn)對(duì)本實(shí)驗(yàn)對(duì)Kisspeptin在肝臟及脾臟各組織的分布在肝臟及脾臟各組織的分布和定位進(jìn)行研究對(duì)進(jìn)一步研究其在肝

3、臟和脾臟和定位進(jìn)行研究對(duì)進(jìn)一步研究其在肝臟和脾臟中的作用機(jī)制具有重要意義。中的作用機(jī)制具有重要意義。材料與方法材料與方法1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的處死：選取犬三只。將動(dòng)物全麻后，靜實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的處死：選取犬三只。將動(dòng)物全麻后，靜脈放血脈放血 將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物致死，迅速解剖取出肝臟和脾臟。將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物致死，迅速解剖取出肝臟和脾臟。用甲醛固定用甲醛固定24 h以上。以上。2.實(shí)驗(yàn)方法：實(shí)驗(yàn)方法： 石蠟切片技術(shù)石蠟切片技術(shù) HE染色染色 免疫組化染色方法免疫組化染色方法3.免疫組化試劑盒的選用：免疫組化試劑盒的選用：一抗：兔一抗：兔IgG二抗：羊抗兔二抗：羊抗兔IgG顯色：顯色：DAB顯色顯色實(shí)實(shí) 驗(yàn)驗(yàn) 結(jié)結(jié) 果果 肝臟肝

4、臟HEHE圖片圖片 HE染色染色 1010 HE染色染色 104012肝的組織結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：肝的組織結(jié)構(gòu)特點(diǎn)： 顯微鏡下可見(jiàn)肝小葉呈大小不一的多邊形，中央有圓形顯微鏡下可見(jiàn)肝小葉呈大小不一的多邊形，中央有圓形或橢圓形的腔，為中央靜脈，周圍是放射狀排列的條索狀結(jié)或橢圓形的腔，為中央靜脈，周圍是放射狀排列的條索狀結(jié)構(gòu)，染為粉紅色，為肝細(xì)胞索（肝索）。構(gòu)，染為粉紅色，為肝細(xì)胞索（肝索）。門管區(qū)門管區(qū)位于相鄰幾位于相鄰幾個(gè)肝小葉之間，伴行有小葉間動(dòng)脈、小葉間靜脈和小葉間膽個(gè)肝小葉之間，伴行有小葉間動(dòng)脈、小葉間靜脈和小葉間膽管的區(qū)域管的區(qū)域。 免疫組化陽(yáng)性免疫組化陽(yáng)性 1010 免疫組化陽(yáng)性免疫組化陽(yáng)性 1

5、040 陰性對(duì)照陰性對(duì)照 1010 陰性對(duì)照陰性對(duì)照 10403456實(shí)實(shí) 驗(yàn)驗(yàn) 結(jié)結(jié) 果果肝臟免疫組化圖片肝臟免疫組化圖片實(shí)實(shí) 驗(yàn)驗(yàn) 分分 析析 研究發(fā)現(xiàn)：研究發(fā)現(xiàn)：Kisspeptin在機(jī)體消化系統(tǒng)舌、在機(jī)體消化系統(tǒng)舌、瘤胃、網(wǎng)胃、瓣胃、皺胃、肝臟、胰臟、小腸內(nèi)瘤胃、網(wǎng)胃、瓣胃、皺胃、肝臟、胰臟、小腸內(nèi)均有表達(dá)。而肝臟又是機(jī)體重要的消化器官，故均有表達(dá)。而肝臟又是機(jī)體重要的消化器官，故根據(jù)本實(shí)驗(yàn)結(jié)果，我們猜測(cè)根據(jù)本實(shí)驗(yàn)結(jié)果，我們猜測(cè)Kisspeptin對(duì)肝臟的對(duì)肝臟的合成代謝和分解體內(nèi)物質(zhì)起到一定的作用。合成代謝和分解體內(nèi)物質(zhì)起到一定的作用。實(shí)實(shí) 驗(yàn)驗(yàn) 結(jié)結(jié) 果果脾臟脾臟HEHE圖片圖片

6、HE染色染色 104 HE染色染色 104012脾的組織結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：脾的組織結(jié)構(gòu)特點(diǎn)： 脾臟的表面覆蓋著漿膜，漿膜下是被膜。顯微鏡下看見(jiàn)許脾臟的表面覆蓋著漿膜，漿膜下是被膜。顯微鏡下看見(jiàn)許多分支狀小梁的斷面；白髓散在于紅髓間，為略呈圓形、著藍(lán)多分支狀小梁的斷面；白髓散在于紅髓間，為略呈圓形、著藍(lán)紫色；紅髓分布于被膜下、小梁周圍、白髓及邊緣區(qū)的外側(cè)。紫色；紅髓分布于被膜下、小梁周圍、白髓及邊緣區(qū)的外側(cè)。 免疫組化陽(yáng)性免疫組化陽(yáng)性1010 免疫組化陽(yáng)性免疫組化陽(yáng)性1040 陰性對(duì)照陰性對(duì)照1040 陰性對(duì)照陰性對(duì)照10103456實(shí)實(shí) 驗(yàn)驗(yàn) 結(jié)結(jié) 果果脾臟免疫組化圖片脾臟免疫組化圖片實(shí)實(shí) 驗(yàn)驗(yàn) 分分

7、 析析 脾是免疫應(yīng)答的重要場(chǎng)所。研究顯示，脾臟脾是免疫應(yīng)答的重要場(chǎng)所。研究顯示，脾臟與腫瘤的形成存在著很大關(guān)系。與腫瘤的形成存在著很大關(guān)系。大量研究表明，大量研究表明，Kisspeptin具有抑制胰腺癌、卵巢癌、黑色素瘤具有抑制胰腺癌、卵巢癌、黑色素瘤和乳腺癌等多種實(shí)體瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移的作用和乳腺癌等多種實(shí)體瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移的作用。故根據(jù)。故根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果推測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果推測(cè)kisspeptin在脾臟內(nèi)對(duì)其抗腫瘤因在脾臟內(nèi)對(duì)其抗腫瘤因子起到一定的積極作用子起到一定的積極作用 。實(shí)實(shí) 驗(yàn)驗(yàn) 結(jié)結(jié) 論論 本本實(shí)驗(yàn)證實(shí)了實(shí)驗(yàn)證實(shí)了Kisspeptin在犬肝臟的門管區(qū)、肝在犬肝臟的門管區(qū)、肝小葉和中央靜脈以及脾臟的小梁、紅髓內(nèi)均有不同強(qiáng)小葉和中央靜脈以及脾臟的小梁、紅