第十章高效液相色譜法

1、儀器分析儀器分析高職高專高職高?！笆迨濉币?guī)劃教材規(guī)劃教材儀器分析儀器分析高職高專高職高專“十二五十二五”規(guī)劃教材規(guī)劃教材儀器分析儀器分析高職高專高職高?！笆迨濉币?guī)劃教材規(guī)劃教材儀器分析儀器分析高職高專高職高專“十二五十二五”規(guī)劃教材規(guī)劃教材高壓輸液系統(tǒng)高壓輸液系統(tǒng)分離系統(tǒng)分離系統(tǒng)數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)進(jìn)樣系統(tǒng)進(jìn)樣系統(tǒng)檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)系統(tǒng)儀器分析儀器分析高職高專高職高專“十二五十二五”規(guī)劃教材規(guī)劃教材儀器分析儀器分析高職高專高職高?！笆迨濉币?guī)劃教材規(guī)劃教材儀器分析儀器分析高職高專高職高?！笆迨濉币?guī)劃教材規(guī)劃教材儀器分析儀器分析高職高專高職高?！笆迨濉币?guī)劃教材

2、規(guī)劃教材儀器分析儀器分析高職高專高職高?！笆迨濉币?guī)劃教材規(guī)劃教材儀器分析儀器分析高職高專高職高?！笆迨濉币?guī)劃教材規(guī)劃教材儀器分析儀器分析高職高專高職高專“十二五十二五”規(guī)劃教材規(guī)劃教材超聲脫氣超聲脫氣儀器分析儀器分析高職高專高職高?！笆迨濉币?guī)劃教材規(guī)劃教材儀器分析儀器分析高職高專高職高專“十二五十二五”規(guī)劃教材規(guī)劃教材儀器分析儀器分析高職高專高職高?！笆迨濉币?guī)劃教材規(guī)劃教材流動(dòng)相的注意事項(xiàng)：流動(dòng)相的注意事項(xiàng)：防止固體微粒進(jìn)入泵體防止固體微粒進(jìn)入泵體流動(dòng)相和樣品必須流動(dòng)相和樣品必須過濾過濾 有機(jī)系有機(jī)系0.45m濾膜，水系濾膜，水系0.45m濾膜濾膜流動(dòng)相不應(yīng)含有

3、腐蝕性物質(zhì)，緩沖液不能保留在泵流動(dòng)相不應(yīng)含有腐蝕性物質(zhì)，緩沖液不能保留在泵內(nèi)內(nèi)純水清洗純水清洗防止溶劑瓶?jī)?nèi)的流動(dòng)相被用完防止溶劑瓶?jī)?nèi)的流動(dòng)相被用完不超過規(guī)定的最高壓力不超過規(guī)定的最高壓力儀器分析儀器分析高職高專高職高?！笆迨濉币?guī)劃教材規(guī)劃教材儀器分析儀器分析高職高專高職高?！笆迨濉币?guī)劃教材規(guī)劃教材（1）等度等度洗脫：流動(dòng)相組成洗脫：流動(dòng)相組成恒定恒定（2）梯度梯度洗脫：流動(dòng)相組成洗脫：流動(dòng)相組成改變改變儀器分析儀器分析高職高專高職高?！笆迨濉币?guī)劃教材規(guī)劃教材梯度洗脫梯度洗脫的特點(diǎn)的特點(diǎn)改善分離改善分離, , 加快分析速度；加快分析速度；改善峰形改善峰形, , 減少拖尾減

4、少拖尾; ;基線漂移、重現(xiàn)性差。基線漂移、重現(xiàn)性差。 適用于組分多，適用于組分多，極性范圍寬的復(fù)雜樣品極性范圍寬的復(fù)雜樣品二、二、 進(jìn)樣系統(tǒng)進(jìn)樣系統(tǒng)六通閥Load狀態(tài)注入樣品液Inject狀態(tài)進(jìn)樣操作：load時(shí)，注入樣品扳至Inject約1min后，扳回load，拔針儀器分析儀器分析高職高專高職高專“十二五十二五”規(guī)劃教材規(guī)劃教材儀器分析儀器分析高職高專高職高?！笆迨濉币?guī)劃教材規(guī)劃教材儀器分析儀器分析高職高專高職高專“十二五十二五”規(guī)劃教材規(guī)劃教材儀器分析儀器分析高職高專高職高?！笆迨濉币?guī)劃教材規(guī)劃教材儀器分析儀器分析高職高專高職高?！笆迨濉币?guī)劃教材規(guī)劃教材儀器分析儀

5、器分析高職高專高職高?！笆迨濉币?guī)劃教材規(guī)劃教材儀器分析儀器分析高職高專高職高專“十二五十二五”規(guī)劃教材規(guī)劃教材圖圖10-8 流通池示意圖流通池示意圖儀器分析儀器分析高職高專高職高?！笆迨濉币?guī)劃教材規(guī)劃教材儀器分析儀器分析高職高專高職高專“十二五十二五”規(guī)劃教材規(guī)劃教材三維色譜-光譜圖儀器分析儀器分析高職高專高職高?！笆迨濉币?guī)劃教材規(guī)劃教材儀器分析儀器分析高職高專高職高專“十二五十二五”規(guī)劃教材規(guī)劃教材儀器分析儀器分析高職高專高職高?！笆迨濉币?guī)劃教材規(guī)劃教材儀器分析儀器分析高職高專高職高?！笆迨濉币?guī)劃教材規(guī)劃教材儀器分析儀器分析高職高專高職高?！笆迨?/p>

6、五”規(guī)劃教材規(guī)劃教材儀器分析儀器分析高職高專高職高?！笆迨濉币?guī)劃教材規(guī)劃教材 一、液-固吸附色譜 流動(dòng)相為液體，固定相為固體吸附劑流動(dòng)相為液體，固定相為固體吸附劑1、基本原理：、基本原理：利用各組分吸附能力的差異吸附能力的差異而分離的；吸附能力大的組分，分配系數(shù)大，保留值就大（后出峰）。 2、固定相：、固定相： 極性固定相：硅膠、氧化鋁、氧化鎂、分子篩； 非極性固定相：活性炭 較常使用的是510m的全多孔型硅膠吸附劑。 以極性吸附劑為固定相時(shí)，組分的極性越大，保留值就越大。 不同類型的有機(jī)物在極性吸附劑上的保留時(shí)間如下： 氟碳化合物飽和烴烯烴芳烴有機(jī)鹵化物醚硝基化合物腈酯、醛、酮醇羧酸

7、硅膠固定相分離苯，甲苯，硅膠固定相分離苯，甲苯，乙苯，丙苯，丁苯乙苯，丙苯，丁苯流動(dòng)相：流動(dòng)相：干燥正庚烷干燥正庚烷1份水飽和的正庚烷份水飽和的正庚烷2份干燥正庚烷份干燥正庚烷水飽和的正庚烷水飽和的正庚烷流動(dòng)相影響分離流動(dòng)相影響分離的選擇性的選擇性3、流動(dòng)相（也稱洗脫液）：、流動(dòng)相（也稱洗脫液）：l極性大的樣品用極性大的流動(dòng)相，極性大的樣品用極性大的流動(dòng)相，l極性小的樣品用極性小的流動(dòng)相；極性小的樣品用極性小的流動(dòng)相； 4、應(yīng)用應(yīng)用具有具有不同官能團(tuán)的化合物不同官能團(tuán)的化合物油溶性試樣油溶性試樣同分同分異構(gòu)體異構(gòu)體思考：（鄰、間、對(duì)）硝基苯胺思考：（鄰、間、對(duì)）硝基苯胺的的三種異構(gòu)體三種異構(gòu)體

8、極性大小？極性大小？鄰位鄰位 間位間位 流動(dòng)相極性流動(dòng)相極性 固定相：固定相：極性鍵合相（氰基、氨基、二醇基極性鍵合相（氰基、氨基、二醇基鍵合相）鍵合相） 流動(dòng)相：流動(dòng)相：非極性或弱極性有機(jī)溶劑非極性或弱極性有機(jī)溶劑 分離中等極性至強(qiáng)極性的化合物分離中等極性至強(qiáng)極性的化合物 極性極性強(qiáng)強(qiáng)的組分的組分K tR 出峰出峰 大大長(zhǎng)長(zhǎng)后后 反相鍵合相色譜：反相鍵合相色譜： 固定相極性固定相極性3,4-二羥基苯甲酸二羥基苯甲酸沒食子酸先出峰（保留值較?。]食子酸先出峰（保留值較小）儀器分析儀器分析高職高專高職高?！笆迨濉币?guī)劃教材規(guī)劃教材儀器分析儀器分析高職高專高職高專“十二五十二五”規(guī)劃教材規(guī)劃

9、教材儀器分析儀器分析高職高專高職高?！笆迨濉币?guī)劃教材規(guī)劃教材答錯(cuò)了，再來一次答錯(cuò)了，再來一次答對(duì)了，點(diǎn)擊此處進(jìn)入下一題答對(duì)了，點(diǎn)擊此處進(jìn)入下一題儀器分析儀器分析高職高專高職高?！笆迨濉币?guī)劃教材規(guī)劃教材答錯(cuò)了，再來一次答錯(cuò)了，再來一次答對(duì)了，點(diǎn)擊此處進(jìn)入下一題答對(duì)了，點(diǎn)擊此處進(jìn)入下一題儀器分析儀器分析高職高專高職高?！笆迨濉币?guī)劃教材規(guī)劃教材答錯(cuò)了，再來一次答錯(cuò)了，再來一次答對(duì)了，點(diǎn)擊此處進(jìn)入下一題答對(duì)了，點(diǎn)擊此處進(jìn)入下一題儀器分析儀器分析高職高專高職高?！笆迨濉币?guī)劃教材規(guī)劃教材答錯(cuò)了，再來一次答錯(cuò)了，再來一次答對(duì)了，點(diǎn)擊此處進(jìn)入下一題答對(duì)了，點(diǎn)擊此處進(jìn)入下一題儀器

10、分析儀器分析高職高專高職高?！笆迨濉币?guī)劃教材規(guī)劃教材答錯(cuò)了，再來一次答錯(cuò)了，再來一次答對(duì)了，點(diǎn)擊此處進(jìn)入下一題答對(duì)了，點(diǎn)擊此處進(jìn)入下一題儀器分析儀器分析高職高專高職高專“十二五十二五”規(guī)劃教材規(guī)劃教材答錯(cuò)了，再來一次答錯(cuò)了，再來一次答對(duì)了，點(diǎn)擊此處進(jìn)入下一題答對(duì)了，點(diǎn)擊此處進(jìn)入下一題儀器分析儀器分析高職高專高職高?！笆迨濉币?guī)劃教材規(guī)劃教材答錯(cuò)了，答錯(cuò)了，再來一次再來一次答對(duì)了，點(diǎn)擊此處進(jìn)入下一題答對(duì)了，點(diǎn)擊此處進(jìn)入下一題儀器分析儀器分析高職高專高職高?！笆迨濉币?guī)劃教材規(guī)劃教材答錯(cuò)了，再來一次答錯(cuò)了，再來一次答對(duì)了，點(diǎn)擊此處進(jìn)入下一題答對(duì)了，點(diǎn)擊此處進(jìn)入下一題儀器分析儀器分析高