DNA文庫的構(gòu)建學(xué)習(xí)教案

1、會(huì)計(jì)學(xué)1DNA文庫的構(gòu)建文庫的構(gòu)建第一頁，編輯于星期六：六點(diǎn) 十五分。第1頁/共46頁第二頁，編輯于星期六：六點(diǎn) 十五分。第2頁/共46頁第三頁，編輯于星期六：六點(diǎn) 十五分。第3頁/共46頁第四頁，編輯于星期六：六點(diǎn) 十五分。限制性限制性內(nèi)切酶內(nèi)切酶克隆、轉(zhuǎn)化、培養(yǎng)、鑒定克隆、轉(zhuǎn)化、培養(yǎng)、鑒定基因組基因組DNA基因組文庫基因組文庫第4頁/共46頁第五頁，編輯于星期六：六點(diǎn) 十五分。第5頁/共46頁第六頁，編輯于星期六：六點(diǎn) 十五分。第6頁/共46頁第七頁，編輯于星期六：六點(diǎn) 十五分。第7頁/共46頁第八頁，編輯于星期六：六點(diǎn) 十五分。第8頁/共46頁第九頁，編輯于星期六：六點(diǎn) 十五分。第9頁/

2、共46頁第十頁，編輯于星期六：六點(diǎn) 十五分。第10頁/共46頁第十一頁，編輯于星期六：六點(diǎn) 十五分。第11頁/共46頁第十二頁，編輯于星期六：六點(diǎn) 十五分。第12頁/共46頁第十三頁，編輯于星期六：六點(diǎn) 十五分。第13頁/共46頁第十四頁，編輯于星期六：六點(diǎn) 十五分。第14頁/共46頁第十五頁，編輯于星期六：六點(diǎn) 十五分。第15頁/共46頁第十六頁，編輯于星期六：六點(diǎn) 十五分。第16頁/共46頁第十七頁，編輯于星期六：六點(diǎn) 十五分。基因組DNA文庫限制性內(nèi)切酶限制性內(nèi)切酶基因組DNA基因重組轉(zhuǎn)化細(xì)菌體外包裝第17頁/共46頁第十八頁，編輯于星期六：六點(diǎn) 十五分。第18頁/共46頁第十九頁，編輯

3、于星期六：六點(diǎn) 十五分。第19頁/共46頁第二十頁，編輯于星期六：六點(diǎn) 十五分?？梢栽谠酥斜磉_(dá)。第20頁/共46頁第二十一頁，編輯于星期六：六點(diǎn) 十五分。第21頁/共46頁第二十二頁，編輯于星期六：六點(diǎn) 十五分。第22頁/共46頁第二十三頁，編輯于星期六：六點(diǎn) 十五分。cDNA文庫的構(gòu)建：基因重組反轉(zhuǎn)錄酶反轉(zhuǎn)錄酶mRNAmRNAcDNAcDNA第23頁/共46頁第二十四頁，編輯于星期六：六點(diǎn) 十五分。第24頁/共46頁第二十五頁，編輯于星期六：六點(diǎn) 十五分。RNA： tRNA、rRNA、mRNA(1%5%） 真核生物的mRNA具有一個(gè)polyA的3末端，可以被用于mRNA的分離； oligo

4、(dT):polyA 雜交鏈在高鹽離子濃度下可以保持，在低鹽離子濃度下或較高溫度下就會(huì)分開，利用這一性質(zhì)從RNA中分離純化mRNA。 第25頁/共46頁第二十六頁，編輯于星期六：六點(diǎn) 十五分。第26頁/共46頁第二十七頁，編輯于星期六：六點(diǎn) 十五分。第27頁/共46頁第二十八頁，編輯于星期六：六點(diǎn) 十五分。第28頁/共46頁第二十九頁，編輯于星期六：六點(diǎn) 十五分。第29頁/共46頁第三十頁，編輯于星期六：六點(diǎn) 十五分。許多位點(diǎn)同時(shí)發(fā)生，而不僅僅從3-末端的oligo(dT)引物一處開始。第30頁/共46頁第三十一頁，編輯于星期六：六點(diǎn) 十五分。第31頁/共46頁第三十二頁，編輯于星期六：六點(diǎn)

5、十五分。第32頁/共46頁第三十三頁，編輯于星期六：六點(diǎn) 十五分。第33頁/共46頁第三十四頁，編輯于星期六：六點(diǎn) 十五分。第34頁/共46頁第三十五頁，編輯于星期六：六點(diǎn) 十五分。RNase H ：特異水解與：特異水解與DNA 雜交的雜交的RNA上的磷酸二酯上的磷酸二酯鍵，產(chǎn)生帶有鍵，產(chǎn)生帶有3OH和和5P的產(chǎn)物的產(chǎn)物第35頁/共46頁第三十六頁，編輯于星期六：六點(diǎn) 十五分。第36頁/共46頁第三十七頁，編輯于星期六：六點(diǎn) 十五分。第37頁/共46頁第三十八頁，編輯于星期六：六點(diǎn) 十五分。第38頁/共46頁第三十九頁，編輯于星期六：六點(diǎn) 十五分。第39頁/共46頁第四十頁，編輯于星期六：六點(diǎn) 十五分。第40頁/共46頁第四十一頁，編輯于星期六：六點(diǎn) 十五分。第41頁/共46頁第四十二頁，編輯于星期六：六點(diǎn) 十五分。第42頁/共46頁第四十三頁，編輯于星期六：六點(diǎn) 十五分。第43頁/共46頁第四十四頁，編輯于星期六：六點(diǎn) 十五分?；蚪M基因組DNADNA文庫文庫cDN