人工授精站操作規(guī)程

1、湖南美神育種有限公司 人工授精站操作規(guī)程人工授精站操作規(guī)程第一節(jié) 目的與目標(biāo)1、目的規(guī)范種公豬的飼養(yǎng)管理，確保種公豬健康和配種計劃的實現(xiàn)。規(guī)范人工站按照嚴格的操作規(guī)程進行精液生產(chǎn)，減少次品精液的發(fā)生率，確保人工授精所用精液的質(zhì)量得到保證。2、目標(biāo)2.1 公豬原精液精子活力達到70%以上。2.2 公豬原精液精子密度達2.0億/ml以上。2.3 精子畸形率18%以下。2.4 公豬的稀釋精液合格率為100%。2.5 保證后備公豬調(diào)教合格率90%。第二節(jié) 工作流程1、每日工作流程表1：日飼養(yǎng)管理流程序號項目內(nèi)容、管理要點與要求上午1上班巡欄查看豬群整體情況和處理緊急事件2檢查環(huán)境控制設(shè)備檢查環(huán)境控制設(shè)

2、備運行是否正常并做相應(yīng)調(diào)整；觀察舍內(nèi)溫度、濕度、空氣質(zhì)量并記錄3采精按操作規(guī)程要求采精4投料按豬群投料管理投料5檢查豬群與護理發(fā)現(xiàn)問題豬只及時護理和治療，如有疑難，請教獸醫(yī)6衛(wèi)生清理欄舍和采精室的衛(wèi)生7調(diào)教按后備公豬的調(diào)教方法操作8定期有效消毒工作按消毒要求做好有效消毒工作；并更換消毒池、桶的消毒藥水9檢查環(huán)境控制設(shè)備檢查環(huán)境控制設(shè)備運行是否正常并做相應(yīng)調(diào)整；觀察舍內(nèi)溫度、濕度、空氣質(zhì)量并記錄處理和完成上午1-9項所有工作后，才能下班（班清班結(jié)）下午10重復(fù)做好序號1-7項的工作11疫苗注射協(xié)助獸醫(yī)免疫注射，注意觀察免疫后的情況12檢查環(huán)境控制設(shè)備檢查環(huán)境控制設(shè)備運行是否正常并做相應(yīng)調(diào)整；觀察

3、舍內(nèi)溫度、濕度、空氣質(zhì)量并記錄13工作小結(jié)填寫報表，小計當(dāng)天工作內(nèi)容，制定第二天工作計劃處理和完成白班1-13項所有工作后，才能下班休息（日清日結(jié)）2、每周工作流程表2 每周工作流程表星期工作流程星期六淘汰豬鑒定；藥品用具領(lǐng)用星期日大清潔大消毒；更換消毒盆池液 星期一驅(qū)蟲、免疫注射星期二接收后備公豬星期三大清潔大消毒；更換消毒盆池液 星期四計劃下周領(lǐng)用物品星期五設(shè)備檢查維修；周報表，下周工作安排第三節(jié) 工作程序1、種公豬的日常飼養(yǎng)管理要點1.1 不管是在驅(qū)趕過程中或配種過程中均不允許粗暴地對待公豬。1.2 溫度與通風(fēng)：18-25，當(dāng)環(huán)境溫度高于27時注意公豬的防暑降溫，當(dāng)環(huán)境溫度低于15時，注

4、意公豬的保溫。冬季夜間公豬站空氣污濁，早晨應(yīng)適當(dāng)配合風(fēng)機通風(fēng)換氣。 1.3 公豬選用專門的公豬料，日喂2次， 根據(jù)公豬的膘情，7月齡以前每頭每天喂2.22.7公斤，7至8月齡每天喂2.53.0公斤；8月齡以上每天喂2.83.0公斤。每餐不要喂得過飽，以免豬飽食貪睡，影響性欲和清液品質(zhì)。1.4 公豬自調(diào)教開始，要求單欄飼養(yǎng)。1.5 經(jīng)常刷拭、沖洗豬體。在高溫季節(jié)里，于公豬站內(nèi)選擇一大欄，其上方安裝噴水裝置，每天輪流安排公豬到此處進行淋水、刷洗一次，有助于提高公豬生產(chǎn)性能。1.6 調(diào)教公豬：后備公豬達7月齡，體重達120公斤，膘情良好即可開始調(diào)教。1.7 注意工作安全：工作時保持與公豬的距離，不要

5、背對公豬，用公豬試情時或采精結(jié)束時，需要將正在爬跨的公豬從母豬背上（或假母臺）拉下來，這時要小心，不要推其肩、頭部以防遭受攻擊。嚴禁粗暴對待公豬，在驅(qū)趕公豬時，最好使用趕豬板。1.8 防止公豬體溫的異常升高，如高溫環(huán)境、嚴寒、患病、打斗、劇烈運動等均可能導(dǎo)致體溫升高，即使短時間的體溫升高，也可能導(dǎo)致長時間的不育，因為從精原細胞發(fā)育至成熟精子約需40天。1.9 保持圈舍與豬體清潔，及時驅(qū)體內(nèi)外寄生蟲。1.10 性欲低下的可肌注丙酸睪丸素100mg/天，隔天一次，連續(xù)3-5次，情況嚴重的淘汰。1.11 注意保護公豬的肢蹄，控制好地面濕度，減少不必要的沖欄。2、后備公豬的調(diào)教2.1 后備公豬在7月齡

6、開始采精調(diào)教。先調(diào)教性欲旺盛的公豬，下一頭隔欄觀察、學(xué)習(xí)。2.2 擠出包皮積尿，清洗公豬的后腹部及包皮部，按摩公豬的包皮部。2.3 誘發(fā)爬跨：用發(fā)情母豬的尿或陰道分泌物涂在假母豬上，同時模仿母豬叫聲，也可以用其他公豬的尿或口水涂在假母豬上，目的都是誘發(fā)公豬的爬跨欲。2.4 上述方法都不奏效時，可趕來一頭發(fā)情母豬，讓公豬空爬幾次，在公豬很興奮時趕走發(fā)情母豬，也可采取強制將公豬抬上假臺畜的方法。2.5 公豬爬上假母豬后即可進行采精。2.6 對于難調(diào)教的公豬，可實行多次短暫訓(xùn)練，每周45次，每次1520分鐘，調(diào)教成功以后，每天采一次，連采3次，如果公豬的性欲很好，調(diào)教以后7天采一次；公豬性欲一般，則

7、調(diào)教成功后2-3天采一次，連采3次。如果公豬表現(xiàn)任何厭煩、受挫或失去興趣，應(yīng)該立即停止調(diào)教訓(xùn)練。2.7 注意：在公豬很興奮時，要注意公豬和采精員自己的安全，采精欄必須設(shè)有安全角。無論哪種調(diào)教方法，公豬爬跨后一定要進行采精，不然，公豬很容易對爬跨假母豬失去興趣。調(diào)教時，不能讓兩頭或以上公豬同時在一起，以免引起公豬打架等，影響調(diào)教的進行和造成不必要的經(jīng)濟損失。2.8 調(diào)教過程中，要讓公豬養(yǎng)成良好的習(xí)慣，便于今后的采精工作。3、采精3.1 采精杯的制備：先在保溫杯內(nèi)襯一只一次性采精袋，再在杯口覆一層過濾紙，用橡皮筋固定，要松一些，使其能沉入2cm左右。制好后放在37°C恒溫箱備用。為了保證

8、采精杯內(nèi)的實際溫度，采精杯蓋與杯分開放在恒溫箱內(nèi)。3.2 在采精之前先剪去公豬包皮上的被毛，防止干擾采精及細菌污染。3.3 將待采精公豬趕至采精欄，擠出包皮積尿，用0.1KMnO4溶液清洗腹部及包皮部。3.4 用清水洗凈，抹干。按摩公豬的包皮部，待公豬爬上假母豬后，用溫暖清潔的手(有無手套皆可)握緊伸出的龜頭，順公豬前沖時將陰莖的"S"狀彎曲拉直，握緊陰莖螺旋部的第一和第二摺，在公豬前沖時允許陰莖自然伸展，不必強拉。充分伸展后，陰莖將停止推進，達到強直、“鎖定”狀態(tài)，開始射精。射精過程中不要松手，否則壓力減輕將導(dǎo)致射精中斷。（注意在采精時不要碰陰莖體，否則陰莖將迅速縮回。）

9、3.5 有濃份精液出現(xiàn)時開始收集，直至公豬射精完畢（陰莖變軟）時才放手，注意在收集精液過程中防止包皮部液體或其他如雨水等進入采精杯。3.6 下班之前徹底清洗采精欄。3.7 采精頻率：后備公豬調(diào)教合格后，采精間隔天數(shù)為7天；成年公豬每周采精3次；然后每3個月，對供精份數(shù)每次在平均份數(shù)以上的公豬的采精間隔減少1天，采精間隔天數(shù)最低不少于3天。4、精液品質(zhì)檢查4.1 整個檢查過程要迅速、準(zhǔn)確，一般在510分鐘內(nèi)完成，以免時間過長影響精子的活力。精液質(zhì)量檢查的主要指標(biāo)有：精液量、顏色、氣味、精子密度、精子活力、畸形精子率等。4.1.1 精液量：后備公豬的射精量一般為150200毫升，成年公豬為2006

10、00毫升，稱重量算體積，1克計為1毫升。4.1.2 顏色：正常精液的顏色為乳白色或灰白色。如果精液顏色有異常，則說明精液不純或公豬有生殖道病變，凡發(fā)現(xiàn)顏色有異常的精液，均應(yīng)棄去不用。同時，對公豬進行檢查，然后對癥處理、治療。4.1.3 氣味：正常的公豬精液具有其特有的微腥味，無腐敗惡臭氣味。有特殊臭味的精液一般混有尿液或其它異物，一旦發(fā)現(xiàn)，不應(yīng)留用。并檢查采精時是否有失誤，以便下次糾正做法。4.1.4 密度：指每毫升精液中含有的精子數(shù)，它是用來確定精液稀釋倍數(shù)的重要依據(jù)。正常公豬的精子密度為2.03.0億毫升，有的高達5.0億個精子/毫升。檢查精子密度的方法常用以下兩種：A、用精子密度儀測量法

11、：它極為方便，檢查時間短，準(zhǔn)確率高。若用國產(chǎn)分光光度計改裝，也較為適用。該法有一缺點，就是會將精液中的異物按精子來計算，應(yīng)予以重視。B、紅細胞計數(shù)法：該法最準(zhǔn)確，但速度慢，其具體操作步驟為：用不同的微量取樣器分別取具有代表性的原精100微升和3%的KCl溶液900微升，混勻。在計數(shù)板的計數(shù)室上放一蓋玻片，取少量上述混合精液放入計數(shù)板槽中。在高倍顯微下計數(shù)5個中方格內(nèi)精子的總數(shù)，將該數(shù)乘以50萬即得原精液的精子密度。4.1.5精子活力：每次采精后及使用精液前，都要進行活力的檢查，檢查精子活力前必須使用37左右的保溫板預(yù)熱：一般先將載玻片放在38保溫板上預(yù)熱2至3分鐘，再滴上1小滴精液，蓋上蓋玻片

12、，然后在顯微鏡下進行觀察。保存后的精液在精檢時要先在玻片預(yù)熱2分鐘。精子活力一般采用10級制，即在顯微鏡下觀察一個視野內(nèi)作直線運動的精子數(shù)，若有90%的精子呈直線運動則其活力為0.9；有80%呈直線運動，則活力為0.8；依次類推。新鮮精液的精子活力以高于0.7為正常，稀釋后的精液；當(dāng)活力低于0.6時，則棄去不用。4.1.6 畸形精子率：畸形精子包括巨型、短小、斷尾、斷頭、頂體脫落、有原生質(zhì)滴、大頭、雙頭、雙尾、折尾等精子。它們一般不能作直線運動，受精能力差，但不影響精子的密度。公豬的畸形精子率一般不能超過18%，否則應(yīng)棄去。采精公豬要求每兩周檢查一次畸形率。4.2 不合格公豬或精液的處理辦法：

13、公豬站發(fā)現(xiàn)不合格的精液一律作廢，不得用于生產(chǎn)。5、精液稀釋5.1 精液稀釋液的配制5.1.1 常用稀釋劑配方：采用公司指定的成品稀釋粉。5.1.2 配制稀釋劑要用精密電子天平，不得更改稀釋液的配方或?qū)⒉煌南♂屢弘S意混合。配制好后應(yīng)先放置1小時以上才用于稀釋精液，液態(tài)稀釋液在4冰箱中保存不超過24小時，超過貯存期的稀釋液應(yīng)廢棄。抗生素的添加，應(yīng)在稀釋精液前加入到稀釋液里，太早易失去效果。稀釋液的配制的具體操作步驟為：5.1.2.1所用藥品要求選用分析純，對含有結(jié)晶水的試劑按摩爾濃度進行換算。5.1.2.2 按稀釋液配方，用稱量紙和電子天平按1000ml和2000ml劑量準(zhǔn)確稱取所需藥品，稱好后

14、裝入密閉袋。5.1.2.3 使用1小時前將稱好的稀釋劑溶于定量的雙蒸水中，用磁力攪拌器加速其溶解。5.1.2.4 如有雜質(zhì)需要用濾紙過濾。5.1.2.5 稀釋液配好后及時貼上標(biāo)簽，標(biāo)明品名、配制時間和經(jīng)手人等。5.1.2.6 放在水浴鍋內(nèi)進行預(yù)熱，以備使用,水浴鍋溫度設(shè)置不能超過39。5.1.2.7 認真檢查配好的稀釋液，發(fā)現(xiàn)問題及時糾正。5.2 精液的稀釋處理處理精液必須在恒溫環(huán)境中進行，品質(zhì)檢查后的精液和稀釋液都要在37恒溫下預(yù)熱，稀釋處理時，嚴禁太陽光直射精液。稀釋液應(yīng)在采精前準(zhǔn)備好，并預(yù)熱好。精液采集后要盡快稀釋，精子活力在0.7以下的精液不得用于稀釋。具體的稀釋程序為：5.2.1 精

15、液稀釋頭份的確定：人工授精的正常劑量一般為40億個精子/頭份，體積為80ml，假如有一份公豬的原精液，密度為2億/ml，采精量為150ml，稀釋后密度要求為40億80ml頭份。則此公豬精液可稀釋150×2/407.5頭份，需加稀釋液量為（80×7.50150）ml450ml。測量精液和稀釋液的溫度，調(diào)節(jié)稀釋液的溫度與精液一致（兩者相差1以內(nèi)）。注意：必須以精液的溫度為標(biāo)準(zhǔn)來調(diào)節(jié)稀釋液的溫度，不可逆操作。5.2.2 將精液移至2000ml大塑料杯中，稀釋液沿杯壁緩緩加入精液中，輕輕攪勻或搖勻。5.2.3 如需高倍稀釋，先進行1：1低倍稀釋，1分鐘后再將余下的稀釋液緩慢分步加入

16、。因精子需要一個適應(yīng)過程，不能將稀釋液直接倒入精液。5.2.4 精液稀釋的每一步操作均要檢查活力，稀釋后要求靜置片刻再作活力檢查?；盍ο陆当仨毑槊髟虿⒓右愿倪M。5.2.5 混精的制作：兩頭或兩頭以上公豬的精液1：1稀釋或完全稀釋以后可以做混精。做混精之前需各倒一小部分混合起來，檢查活力是否有下降，如有下降則不能做混精。把溫度較高的精液倒入溫度較低的精液內(nèi)。每一步都需檢查活力。5.2.6 用具的洗滌：精液稀釋的成敗，與所用儀器的清潔衛(wèi)生有很大關(guān)系。所有使用過的燒杯、玻璃棒及溫度計，都要及時用蒸餾水洗滌，并進行高溫消毒，以保證稀釋后的精液能適期保存和利用。5.2.7 精液的分裝：稀釋好的精液，檢

17、查其活力，前后一致便可以進行分裝。稀釋后的精液也可以采用大包裝集中貯存。但要在包裝上貼好標(biāo)簽，注明公豬的品種、耳號以及采精的日期和時間。5.2.8 精液活力的檢查：精液生產(chǎn)出來以后，需保存1-2份精液，持續(xù)1-2天的活力檢查，并做好記錄，定期總結(jié)。5.2.9 記錄：精液稀釋記錄見附表。6、精液的分裝6.1 精液瓶和輸精管必須為對精子無毒害作用的塑料制品。6.2 稀釋好精液后，先檢查精子的活力，活力無明顯下降則可進行分裝。6.3 按每頭份60-80ml進行分裝。如果精液需要運輸，應(yīng)對瓶子進行排空，以減少運輸中震蕩。6.4 分裝后的精液，將精液瓶加蓋密封，貼上標(biāo)簽，清楚標(biāo)明公豬站號、公豬品種、采精

18、日期及精液編號。7、精液的保存7.1 需保存的精液應(yīng)先在22左右室溫下放置12小時后放入17（變動范圍1618）冰箱中，或用4層干毛巾包好直接放在17冰箱中。冰箱中必須放有靈敏溫度計，隨時檢查其溫度。分裝精液放入冰箱時，不同品種精液應(yīng)分開放置，以免拿錯精液。精液應(yīng)平放，可疊放。7.2 查看：從放入冰箱開始，每隔12小時，要小心搖勻精液一次（上下顛倒），防止精子沉淀聚集造成精子死亡。一般可在早上上班、下午下班時各搖勻一次，并做好搖勻時間和人員的記錄。夜間超過12小時應(yīng)安排夜班于凌晨搖勻一次。7.3 冰箱應(yīng)一直處于通電狀態(tài)，盡量減少冰箱門的開關(guān)次數(shù)，防止頻繁升降溫對精子的打擊。保存過程中，一定要隨時觀察冰箱內(nèi)溫度的變化，出現(xiàn)溫度異?；蛲ｋ?，必須普查貯存精液的品質(zhì)。7.4 精液一般可成功保存37天8、精液的運輸8.1 精液運輸