植物組培快繁和脫毒技術(shù)

1、 植物組織培養(yǎng)和脫毒技術(shù)正是實(shí)現(xiàn)這一重要前題的快繁技術(shù)。它已被廣泛用于各種優(yōu)良品種的迅速繁殖和推廣，在花卉、園藝、農(nóng)林等方面發(fā)揮重要作用。 良種的快速繁殖和推廣應(yīng)用是實(shí)良種的快速繁殖和推廣應(yīng)用是實(shí)現(xiàn)農(nóng)業(yè)高效生產(chǎn)的一個重要前題?，F(xiàn)農(nóng)業(yè)高效生產(chǎn)的一個重要前題。 由植物的一個器官、組織甚至細(xì)胞，通過離體培養(yǎng)，獲得一個完整的植株。 打破有性生殖的限制，極大提高植物的繁殖效率。 植物離體快繁（植物離體快繁（MicropropagationMicropropagation）又叫微型繁殖或試管繁殖，它是把植物又叫微型繁殖或試管繁殖，它是把植物材料放在試管內(nèi)，給予人工培養(yǎng)基和合材料放在試管內(nèi)，給予人工培養(yǎng)基和

2、合適培養(yǎng)條件，達(dá)到高速增殖，屬離體無適培養(yǎng)條件，達(dá)到高速增殖，屬離體無性繁殖。性繁殖。 其特點(diǎn)是快速，每年能以千百萬倍其特點(diǎn)是快速，每年能以千百萬倍的速度繁殖后代，比常規(guī)繁殖方法快萬的速度繁殖后代，比常規(guī)繁殖方法快萬倍到數(shù)十萬倍。倍到數(shù)十萬倍。 第一節(jié)第一節(jié) 植物的離體快繁植物的離體快繁 良種快繁良種快繁 脫毒良種苗快繁和無病毒苗大量快繁；脫毒良種苗快繁和無病毒苗大量快繁； 特殊育種材料快繁；特殊育種材料快繁； 制種材料快速繁殖；制種材料快速繁殖； 自然和人工誘變有用突變體的快繁；自然和人工誘變有用突變體的快繁； 基因工程植株的快繁；基因工程植株的快繁； 離體保存種質(zhì)的快繁；離體保存種質(zhì)的快繁

3、； 瀕危植物的離體快繁瀕危植物的離體快繁. .一一 . .離體快繁的應(yīng)用離體快繁的應(yīng)用快速繁殖新品種，迅速推廣快速繁殖新品種，迅速推廣 周期短（周期短（1-3月）月） 不受季節(jié)限制不受季節(jié)限制 繁殖系數(shù)高繁殖系數(shù)高有效保持優(yōu)良品種的特性有效保持優(yōu)良品種的特性 離體無性繁殖離體無性繁殖 性狀不分離，也不退化性狀不分離，也不退化 避免病蟲害侵染避免病蟲害侵染 是異交作物和無性繁殖品種繁育的是異交作物和無性繁殖品種繁育的理想途徑理想途徑生產(chǎn)無病毒種苗，防治品種退化節(jié)約耕地，提高農(nóng)產(chǎn)品附加值 以變態(tài)器官作為繁以變態(tài)器官作為繁殖體的作物年產(chǎn)品殖體的作物年產(chǎn)品用留作種的比例用留作種的比例 大蒜大蒜 1/8

4、-1/51/8-1/5 馬鈴薯馬鈴薯 1/101/10 貝母貝母1/31/3 魔芋魔芋1/51/5便于運(yùn)輸便于運(yùn)輸 種苗體積小，自帶容器，便于攜帶和種苗體積小，自帶容器，便于攜帶和運(yùn)輸。運(yùn)輸。 以馬鈴薯為例，一畝地以馬鈴薯為例，一畝地40004000株計(jì)算，株計(jì)算，常規(guī)薯常規(guī)薯40004000個重個重200kg200kg（50g/50g/個）個）, ,試試管薯只有管薯只有1kg1kg（100-200mg/100-200mg/個）個）二二 .離體快繁的一般技術(shù)離體快繁的一般技術(shù)150.jpg離體快繁的一般技術(shù)離體快繁的一般技術(shù) 培養(yǎng)材料選擇及消毒培養(yǎng)材料選擇及消毒材料的初代培養(yǎng)材料的初代培養(yǎng)(

5、(無菌母株制備無菌母株制備) ) 試管苗的增殖與繼代培養(yǎng)（不定芽增殖）試管苗的增殖與繼代培養(yǎng)（不定芽增殖） 試管苗的生根與移栽（完整植株形成）試管苗的生根與移栽（完整植株形成） 再生植株鑒定再生植株鑒定蘆薈的植物組織培養(yǎng)過程蘆薈的植物組織培養(yǎng)過程1 2 3 4 56 7 8 910 111 1、培養(yǎng)材料選擇及消毒、培養(yǎng)材料選擇及消毒種和品種選擇種和品種選擇 1）、培養(yǎng)材料的選擇）、培養(yǎng)材料的選擇n 培養(yǎng)部位選擇培養(yǎng)部位選擇n取材季節(jié)選擇取材季節(jié)選擇n器官的生理狀態(tài)和發(fā)育年齡器官的生理狀態(tài)和發(fā)育年齡n材料的大小材料的大小增殖方式增殖方式腋芽增殖腋芽增殖不定芽增殖不定芽增殖體細(xì)胞胚增殖體細(xì)胞胚增殖

6、愈傷組織增殖愈傷組織增殖腋芽增殖 培養(yǎng)方法簡單，能高度保持遺傳穩(wěn)定培養(yǎng)方法簡單，能高度保持遺傳穩(wěn)定性，能長期繼代增殖。性，能長期繼代增殖。 一般不需要添加外源激素，即使加也一般不需要添加外源激素，即使加也要嚴(yán)格控制濃度，防治產(chǎn)生愈傷組織。要嚴(yán)格控制濃度，防治產(chǎn)生愈傷組織。不定芽增殖 從現(xiàn)存的芽以外的任從現(xiàn)存的芽以外的任何器官、組織上通過何器官、組織上通過器官發(fā)生重新形成芽。器官發(fā)生重新形成芽。 繁殖系數(shù)高繁殖系數(shù)高 遺傳穩(wěn)定性較好遺傳穩(wěn)定性較好 繼代次數(shù)有限繼代次數(shù)有限體胚增殖體胚增殖 增長率高，雙極性免去生根環(huán)節(jié)增長率高，雙極性免去生根環(huán)節(jié) 但胚狀體休眠的誘導(dǎo)和接觸難以把握，成但胚狀體休眠的

7、誘導(dǎo)和接觸難以把握，成苗率不高。苗率不高。 除特殊用途（人工種子），還不用于快繁除特殊用途（人工種子），還不用于快繁愈傷組織增殖所有植物通過組培方法均可誘導(dǎo)愈傷組織，再進(jìn)一步分化形成植株。所有植物通過組培方法均可誘導(dǎo)愈傷組織，再進(jìn)一步分化形成植株。一切通過其它方式不能成功的植物，均可通過此途徑獲得組培苗。一切通過其它方式不能成功的植物，均可通過此途徑獲得組培苗。成功率高，繁殖系數(shù)大，但遺傳穩(wěn)定性差。成功率高，繁殖系數(shù)大，但遺傳穩(wěn)定性差。對品種遺傳穩(wěn)定性要求高的作物一般不采用這一途徑。對品種遺傳穩(wěn)定性要求高的作物一般不采用這一途徑。2 2）、培養(yǎng)材料的滅菌）、培養(yǎng)材料的滅菌 A A、常用消毒劑、

8、常用消毒劑 對消毒劑的要求是：對消毒劑的要求是：n有良好消毒作用有良好消毒作用n易沖洗或自行分解易沖洗或自行分解n不損傷材料，不影響生長不損傷材料，不影響生長B B、培養(yǎng)材料滅菌、培養(yǎng)材料滅菌不同材料其帶菌情況不一，選擇不同的消毒劑進(jìn)行處理。通常先用不同材料其帶菌情況不一，選擇不同的消毒劑進(jìn)行處理。通常先用自來水沖洗，有的需用肥皂、洗衣粉或吐溫等進(jìn)行洗滌之后在消毒，自來水沖洗，有的需用肥皂、洗衣粉或吐溫等進(jìn)行洗滌之后在消毒，消毒完后用無菌水多次沖洗后方可接種。值得注意的是，常規(guī)滅菌消毒完后用無菌水多次沖洗后方可接種。值得注意的是，常規(guī)滅菌針對培養(yǎng)材料的外生污染菌，對內(nèi)生菌無效。內(nèi)生菌污染問題很

9、難針對培養(yǎng)材料的外生污染菌，對內(nèi)生菌無效。內(nèi)生菌污染問題很難界定并且很難解決。界定并且很難解決。2 2、材料的初代培養(yǎng)、材料的初代培養(yǎng)1 1）、初代培養(yǎng)物的建立）、初代培養(yǎng)物的建立 做到：做到：保證無菌、條件合適、技術(shù)過關(guān)和防止保證無菌、條件合適、技術(shù)過關(guān)和防止污染和外植體的褐變污染和外植體的褐變 保證無菌是最基本的前提。保證無菌是最基本的前提。選擇合適的種類、品種及培養(yǎng)部位；選擇合適的種類、品種及培養(yǎng)部位；選擇合適的培養(yǎng)基、激素及其它添加物選擇合適的培養(yǎng)基、激素及其它添加物還要注意掌握適宜的培養(yǎng)條件。還要注意掌握適宜的培養(yǎng)條件。2 2）、培養(yǎng)反應(yīng)的觀察與統(tǒng)計(jì)）、培養(yǎng)反應(yīng)的觀察與統(tǒng)計(jì) 植物離體

10、快繁時，由于植物種類不同，所采用的外植體類植物離體快繁時，由于植物種類不同，所采用的外植體類型不同及培養(yǎng)基的化學(xué)組成不同，因而器官再生途徑有很大的差型不同及培養(yǎng)基的化學(xué)組成不同，因而器官再生途徑有很大的差異。異。 外植體接種后，可能通過不同的途徑實(shí)現(xiàn)全能性的實(shí)現(xiàn)。有的外植體接種后，可能通過不同的途徑實(shí)現(xiàn)全能性的實(shí)現(xiàn)。有的先形成愈傷組織再進(jìn)行器官分化；有的直接形成胚狀體；有的先先形成愈傷組織再進(jìn)行器官分化；有的直接形成胚狀體；有的先芽后根；有的先根后芽芽后根；有的先根后芽。愈傷組織發(fā)生愈傷組織發(fā)生 愈傷組織（愈傷組織（CallusCallus） 組織培養(yǎng)中外植體經(jīng)脫分化形組織培養(yǎng)中外植體經(jīng)脫分化

11、形成的一種無組織結(jié)構(gòu)的團(tuán)塊組織，成的一種無組織結(jié)構(gòu)的團(tuán)塊組織，由于這種組織以往常見于受創(chuàng)傷的由于這種組織以往常見于受創(chuàng)傷的植物器官和基干表面，故叫愈傷組植物器官和基干表面，故叫愈傷組織（織（Wound CallusWound Callus）。）。離體培養(yǎng)時，一方面由于材料受切傷后分泌的傷源激離體培養(yǎng)時，一方面由于材料受切傷后分泌的傷源激素作用，另一方面培養(yǎng)基中添加的外源激素的作用，素作用，另一方面培養(yǎng)基中添加的外源激素的作用，往往在切口處產(chǎn)生愈傷組織。生長素往往在切口處產(chǎn)生愈傷組織。生長素, ,尤其是尤其是2 2，4 4D D對愈傷組織誘導(dǎo)形成中作用顯著。對愈傷組織誘導(dǎo)形成中作用顯著。芽形成芽

12、形成芽的產(chǎn)生方式有兩種：芽的產(chǎn)生方式有兩種：從愈傷組織上產(chǎn)生從愈傷組織上產(chǎn)生不定芽不定芽（除現(xiàn)有的芽之外，在任何器官上的（除現(xiàn)有的芽之外，在任何器官上的通過器官發(fā)生重新形成的芽通過器官發(fā)生重新形成的芽 ）；）；從莖尖、側(cè)枝上產(chǎn)生，即腋芽萌發(fā)形成從莖尖、側(cè)枝上產(chǎn)生，即腋芽萌發(fā)形成叢生芽叢生芽。（由于培養(yǎng)基由于培養(yǎng)基中添加高細(xì)胞分裂素的作用，促進(jìn)了腋芽的萌發(fā)中添加高細(xì)胞分裂素的作用，促進(jìn)了腋芽的萌發(fā) ）. .根形成根形成 根的起源有兩種：根的起源有兩種：一種是起源于苗基部切口處形成的愈傷組織上，由一種是起源于苗基部切口處形成的愈傷組織上，由愈傷組織內(nèi)部愈傷組織內(nèi)部形成；形成；另一種是起源于苗基部切

13、口處愈傷組織的上部，直接起源于另一種是起源于苗基部切口處愈傷組織的上部，直接起源于中柱中柱鞘細(xì)胞鞘細(xì)胞，由于發(fā)生與莖的中柱相連，故利于移栽成活。，由于發(fā)生與莖的中柱相連，故利于移栽成活。 胚狀體形成胚狀體形成 概念：概念： 離體離體培養(yǎng)下培養(yǎng)下起源起源于非合子細(xì)胞，于非合子細(xì)胞，經(jīng)歷經(jīng)歷了胚胎發(fā)生和胚胎發(fā)了胚胎發(fā)生和胚胎發(fā)育過程所形成的類胚育過程所形成的類胚結(jié)構(gòu)。結(jié)構(gòu)。原球莖形成原球莖形成3 3、試管苗的增殖與繼代培養(yǎng)、試管苗的增殖與繼代培養(yǎng)1 1）、試管繁殖速率及計(jì)算）、試管繁殖速率及計(jì)算 理論計(jì)算理論計(jì)算： 接種一個芽或一塊增殖的培養(yǎng)物，經(jīng)一段時間的培養(yǎng)后看能接種一個芽或一塊增殖的培養(yǎng)物，

14、經(jīng)一段時間的培養(yǎng)后看能得到多少個芽或苗，從而推算理論上一年能繁殖出多少苗。得到多少個芽或苗，從而推算理論上一年能繁殖出多少苗。 實(shí)際計(jì)算實(shí)際計(jì)算： 接種一個芽或轉(zhuǎn)接一個苗，經(jīng)過一定的實(shí)際繁殖周期看實(shí)際接種一個芽或轉(zhuǎn)接一個苗，經(jīng)過一定的實(shí)際繁殖周期看實(shí)際得到多少個苗或成苗，再換算成每個周期實(shí)際繁殖的數(shù)量。得到多少個苗或成苗，再換算成每個周期實(shí)際繁殖的數(shù)量。 Y Ym mX Xn nmXmXn n Y Y年繁殖數(shù)年繁殖數(shù) m m無菌母株苗數(shù)無菌母株苗數(shù) X X每個培養(yǎng)周期增殖的倍數(shù)每個培養(yǎng)周期增殖的倍數(shù) n n全年增殖次數(shù)全年增殖次數(shù)理論計(jì)算：月季繁殖速率計(jì)算月季繁殖速率計(jì)算每每5 5周轉(zhuǎn)接一次（

15、周轉(zhuǎn)接一次（N=10N=10）甲品種每次增殖甲品種每次增殖3 3倍，乙品種每次增殖倍，乙品種每次增殖5 5倍，丙品種倍，丙品種7 7倍。倍。X=3X=3，5 5，7 7假定一開始都是假定一開始都是1 1個芽（個芽（M=1M=1）那么三品種一年能增殖苗數(shù)：那么三品種一年能增殖苗數(shù)： Y Y甲甲1 13 310105.905.9010104 4 （萬萬） Y Y乙乙1 15 510109.769.7610106 6 （百萬百萬） Y Y丙丙1 17 710102.822.8210108 8 （億億）2 2）、提高繁殖速度的方法）、提高繁殖速度的方法A A、改進(jìn)培養(yǎng)基、改進(jìn)培養(yǎng)基 培養(yǎng)基種類、無機(jī)及

16、有機(jī)成分、糖濃度、瓊脂，培養(yǎng)基種類、無機(jī)及有機(jī)成分、糖濃度、瓊脂，特別是特別是植物激素植物激素都影響試管苗增殖和分化。都影響試管苗增殖和分化。B B、改善培養(yǎng)條件、改善培養(yǎng)條件 252522恒溫培養(yǎng)；光對增殖的影響；培養(yǎng)基的恒溫培養(yǎng)；光對增殖的影響；培養(yǎng)基的PHPH值一般在值一般在5.65.66.06.0之間；氣體條件也影響增殖，氧氣不足也會影之間；氣體條件也影響增殖，氧氣不足也會影響增殖和生長。響增殖和生長。 細(xì)胞分裂素細(xì)胞分裂素可打破頂端優(yōu)勢對腋芽的抑制作用，組培中常添可打破頂端優(yōu)勢對腋芽的抑制作用，組培中常添加細(xì)胞分裂素促進(jìn)腋芽的不斷分化和生長，逐漸形成芽叢；加細(xì)胞分裂素促進(jìn)腋芽的不斷分

17、化和生長，逐漸形成芽叢； 不定芽（除現(xiàn)有的芽之外，在任何器官上的通過器官發(fā)生重新形成不定芽（除現(xiàn)有的芽之外，在任何器官上的通過器官發(fā)生重新形成的芽）形成，一般使用的芽）形成，一般使用細(xì)胞分裂素高于生長素細(xì)胞分裂素高于生長素的配比，兩者配比的配比，兩者配比接近接近1 1的也用得很多；的也用得很多； 一般在含豐富一般在含豐富還原氮還原氮的培養(yǎng)基上誘導(dǎo)胚狀體的培養(yǎng)基上誘導(dǎo)胚狀體形成，加生長素，特別是形成，加生長素，特別是2 2，4 4D D能誘導(dǎo)能誘導(dǎo)胚狀體發(fā)生，然后轉(zhuǎn)移到降低濃度或沒有生胚狀體發(fā)生，然后轉(zhuǎn)移到降低濃度或沒有生長素的培養(yǎng)基上使其成熟長素的培養(yǎng)基上使其成熟 。3 3、繼代和增殖中應(yīng)注意

18、的問題、繼代和增殖中應(yīng)注意的問題外源激素的積累：外源激素的積累： 由于長期反復(fù)的繼代增殖，外源激素大量積累，會導(dǎo)致不正常生長和由于長期反復(fù)的繼代增殖，外源激素大量積累，會導(dǎo)致不正常生長和分化，形成各種畸形芽、畸形莖、透明芽等，影響再生植株的質(zhì)量。分化，形成各種畸形芽、畸形莖、透明芽等，影響再生植株的質(zhì)量。解決方法：解決方法： 繼代培養(yǎng)中降低激素的水平繼代培養(yǎng)中降低激素的水平。4 4、試管苗的生根與移栽、試管苗的生根與移栽1 1、生根、生根 A A、試管內(nèi)生根、試管內(nèi)生根B B、試管外生根、試管外生根2 2、移栽、移栽 試管苗從試管內(nèi)移到試管外，經(jīng)歷了三個重要的轉(zhuǎn)變： 由異養(yǎng)變成自養(yǎng)； 由無菌變

19、為有菌； 由恒溫、高濕、弱光向自然變溫、低濕、強(qiáng)光過渡。 三、離體快繁的使用范圍三、離體快繁的使用范圍用于加速某些難繁殖或繁殖速率很低的植物，需要加速繁殖的特用于加速某些難繁殖或繁殖速率很低的植物，需要加速繁殖的特殊基因型，如名貴花卉、優(yōu)質(zhì)種源、果樹芽變分離、工程植株等。殊基因型，如名貴花卉、優(yōu)質(zhì)種源、果樹芽變分離、工程植株等。用于自然繁殖極易感染病毒的植株，如馬鈴薯、甘蔗、香蕉、石用于自然繁殖極易感染病毒的植株，如馬鈴薯、甘蔗、香蕉、石竹、百合等。竹、百合等。用于有性繁殖變異范圍大而自然條件下又不易繁殖的植物，如非用于有性繁殖變異范圍大而自然條件下又不易繁殖的植物，如非洲菊、紫羅蘭等。洲菊、

20、紫羅蘭等。四、離體快繁中的有關(guān)問題四、離體快繁中的有關(guān)問題 培養(yǎng)物的增殖方式培養(yǎng)物的增殖方式 外源生長調(diào)節(jié)物質(zhì)對品種典外源生長調(diào)節(jié)物質(zhì)對品種典型性的影響型性的影響 繼代次數(shù)與變異繼代次數(shù)與變異 為什么要脫毒？為什么要脫毒？ 怎樣脫毒？怎樣脫毒？ 怎樣鑒定無病毒植株？怎樣鑒定無病毒植株？ 第二節(jié)第二節(jié) 植物的組培脫毒技植物的組培脫毒技術(shù)術(shù) 病毒不僅使人患病，同樣也侵害植物，使植物出現(xiàn)皺葉、黃病毒不僅使人患病，同樣也侵害植物，使植物出現(xiàn)皺葉、黃葉、落葉，以致品質(zhì)變劣、花色變淡、花數(shù)減少、產(chǎn)量降低。葉、落葉，以致品質(zhì)變劣、花色變淡、花數(shù)減少、產(chǎn)量降低。 多數(shù)農(nóng)作物，特別是無性繁殖作物，都易受到一種或

21、多種病原多數(shù)農(nóng)作物，特別是無性繁殖作物，都易受到一種或多種病原菌的周身浸染。病原菌的浸染不一定都會造成植物的死亡，很多病菌的周身浸染。病原菌的浸染不一定都會造成植物的死亡，很多病毒甚至可能不表現(xiàn)任何可見癥狀。但在植物中病毒的存在會減少作毒甚至可能不表現(xiàn)任何可見癥狀。但在植物中病毒的存在會減少作物的產(chǎn)量和降低作物的品質(zhì)。物的產(chǎn)量和降低作物的品質(zhì)。 植物病毒多經(jīng)無性繁殖而傳遞，有性繁殖的植物除豆類一部植物病毒多經(jīng)無性繁殖而傳遞，有性繁殖的植物除豆類一部分作物外，種子均不會傳遞病毒。若使用未受侵染個體的種子進(jìn)行分作物外，種子均不會傳遞病毒。若使用未受侵染個體的種子進(jìn)行繁殖，就有可能得到無病毒植株。不

22、過有性繁殖后代常表現(xiàn)遺傳變繁殖，就有可能得到無病毒植株。不過有性繁殖后代常表現(xiàn)遺傳變異性。異性。 由于依賴營養(yǎng)繁殖的作物很多，植物的快速繁殖技術(shù)也正是建由于依賴營養(yǎng)繁殖的作物很多，植物的快速繁殖技術(shù)也正是建立在無性繁殖的基礎(chǔ)上，因而脫毒方法就顯得尤為重要。立在無性繁殖的基礎(chǔ)上，因而脫毒方法就顯得尤為重要。 1 1、莖尖培養(yǎng)脫毒、莖尖培養(yǎng)脫毒 2 2、物理學(xué)方法脫毒、物理學(xué)方法脫毒 3 3、化學(xué)療法脫毒、化學(xué)療法脫毒 4 4、其他方法脫毒、其他方法脫毒 愈傷組織培養(yǎng)脫毒愈傷組織培養(yǎng)脫毒 珠心胚培養(yǎng)脫毒珠心胚培養(yǎng)脫毒 莖尖微體嫁接（莖尖微體嫁接（MGSTMGST）一、一、 快速繁殖中去除病毒的方法

23、快速繁殖中去除病毒的方法脫毒的方法：脫毒的方法：1. 莖尖培養(yǎng)脫毒莖尖培養(yǎng)脫毒 1 1、 莖尖培養(yǎng)脫毒莖尖培養(yǎng)脫毒分生組織能逃避病毒浸染的原因：分生組織能逃避病毒浸染的原因： 在植物體內(nèi)，病毒易于通過維管系統(tǒng)而移動，但在分生組織中不在植物體內(nèi)，病毒易于通過維管系統(tǒng)而移動，但在分生組織中不存在存在維管系統(tǒng)維管系統(tǒng)。病毒在細(xì)胞間的移動只能通過病毒在細(xì)胞間的移動只能通過胞間連絲，胞間連絲，但它的速度很慢，趕不上但它的速度很慢，趕不上細(xì)胞不斷分裂的生長速度；細(xì)胞不斷分裂的生長速度；在旺盛分裂的分生細(xì)胞中在旺盛分裂的分生細(xì)胞中，代謝活性，代謝活性很高，使病毒無法復(fù)制；在莖很高，使病毒無法復(fù)制；在莖尖中存

24、在高水平的尖中存在高水平的生長素生長素，可抑制病毒的增殖。，可抑制病毒的增殖。 去病毒去病毒莖尖大小莖尖大小成活成活莖尖長莖尖長(mm)(mm)葉原基數(shù)葉原基數(shù)小植株數(shù)小植株數(shù)脫毒植株數(shù)脫毒植株數(shù)脫毒率脫毒率（）（）0.120.121 15050242448480.270.272 24242181842.942.90.60.64 464640 00 02 2、物理學(xué)方法脫毒、物理學(xué)方法脫毒 其原理是將植物組織置于高于或低于正常溫度的環(huán)境其原理是將植物組織置于高于或低于正常溫度的環(huán)境中，使內(nèi)部的病毒受熱（冷）以后部分或全部鈍化（中，使內(nèi)部的病毒受熱（冷）以后部分或全部鈍化（而而非殺死非殺死），但

25、寄主植物的組織很少或不會受到傷害。），但寄主植物的組織很少或不會受到傷害。 A A、高溫處理、高溫處理 又稱溫?zé)岑煼ǎㄓ址Q溫?zé)岑煼ǎ╰hermotherapythermotherapy），有兩種處理方法：），有兩種處理方法：一是一是溫湯浸漬處理溫湯浸漬處理，適用于休眠器官、剪下的接穗或準(zhǔn)備種植的材料，適用于休眠器官、剪下的接穗或準(zhǔn)備種植的材料，在在5050左右的溫水中浸漬數(shù)分鐘至數(shù)小時，方法簡便易行，但易導(dǎo)左右的溫水中浸漬數(shù)分鐘至數(shù)小時，方法簡便易行，但易導(dǎo)致材料受傷。致材料受傷。二是二是熱風(fēng)處理熱風(fēng)處理，將生長的盆栽植物移入溫?zé)嶂委熓遥ㄏ洌﹥?nèi)，處理溫，將生長的盆栽植物移入溫?zé)嶂委熓遥ㄏ洌﹥?nèi)，處理溫度和時間因植物種類和器官的生理狀況而異，一般為度和時間因植物種類和器官的生理狀況而異，一般為35354040，短，短則幾十分鐘，長可達(dá)數(shù)月。則幾十分鐘，長可達(dá)數(shù)月。B B、低溫處理、低溫處理 又稱冷療法（又稱冷療法（cryotherapycryotherapy） 將菊花植株在將菊花植株在55條件下經(jīng)條件下經(jīng)4 47.57.5個月的處理后，切取莖尖進(jìn)行培養(yǎng)，個月的處理后，切取莖尖