癌調(diào)蛋白ocmelisa試劑盒說明書

1、癌調(diào)蛋白（OCM）ELISA試劑盒說明書本試劑僅供研究使用標本：體液癌調(diào)蛋白（OCM）ELISA試劑盒試驗原理：BFGF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.已知BFGF濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將BFGF和生物素標記的抗體同時溫育。人堿性成纖維細胞生長因子ELISA檢測試劑盒洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中BFGF的濃度呈比例關(guān)系。癌調(diào)蛋白（OCM）ELISA試劑盒自備材料.蒸鐳水。.加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、5

2、00ul、1000ul。.振蕩器及磁力攪拌器等。安全性.避免直接接觸終止液和底物A、Bo一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。.實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。癌調(diào)蛋白（OCM）ELISA試劑盒操作注意事項.試劑應(yīng)按標簽儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄，不可保存。.實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。.使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。.

3、洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。.底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。.加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。.按照中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。癌調(diào)蛋白（OCM）ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法1、血清-操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000橇心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2、血漿-EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000離g30分鐘去除顆粒。3、細胞上清液-1000離，IX10分鐘去除

4、顆粒和聚合物。4、保存-如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70C保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37c或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準備標準品：標準品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準備，不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。2.洗滌緩沖液（50戶的稀釋：蒸儲水50倍稀釋。癌調(diào)蛋白（OCM）ELISA試劑盒操作步驟.使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根

5、據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。.加入稀釋好后的標準品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37c溫育1小時。.甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻，37c溫育30分鐘.甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻，37c溫育10分鐘。避免光照。.取出酶標板，迅

6、速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。.在450nm波長處測定各孔的OD值。局限6號標準品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標準曲線無法得到精確的結(jié)果。癌調(diào)蛋白（OCM）ELISA試劑盒性能.靈敏度：最小的木測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.9900.特異性：不與其它細胞因子反應(yīng)。.重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。癌調(diào)蛋白（OCM）ELISA試劑盒結(jié)果判斷與分析1、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標（Y）,相應(yīng)的BFGF標準品濃度為橫坐標（X）,做得相應(yīng)的曲線，樣品的BFGF含量可由I（據(jù)其OD值

7、由標準曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍：0-800pg/ml4、敏感度：1.0pg/mlPGE1小鼠前列腺素E1規(guī)格：48T/96TGIP小鼠葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽規(guī)格：48T/96TODF小鼠破骨細胞分化因子規(guī)格：48T/96TCORT小鼠皮質(zhì)酮/腎上腺酮規(guī)格：48T/96TCortisol小鼠皮質(zhì)醇規(guī)格:48T/96TM30小鼠胚胎干細胞系MESPU30規(guī)格：48T/96TCIAP小鼠牛小腸堿性磷酸酶規(guī)格：48T/96TFX小鼠凝血因子X規(guī)格：48T/96TFIX小鼠凝血因子IX規(guī)格：48T/96TFW-Ag小鼠凝血因子叩相關(guān)抗原規(guī)格：48T/96TFII小鼠凝血因子n規(guī)格：48T/96TTR小鼠凝血酶受體規(guī)格：48T/96T