ProGRP檢測及臨床應(yīng)用-繼教

1、2022-6-271胃泌素釋放肽前體胃泌素釋放肽前體(ProGRP)檢測檢測及臨床應(yīng)用及臨床應(yīng)用蚌醫(yī)一附院檢驗科蚌醫(yī)一附院檢驗科 朱安友朱安友2022-6-272ProGRP 生物學(xué)特性生物學(xué)特性ProGRP 實驗室檢測實驗室檢測ProGRP 臨床應(yīng)用臨床應(yīng)用內(nèi)內(nèi) 容容2022-6-273是一種神經(jīng)內(nèi)分泌激素。是一種神經(jīng)內(nèi)分泌激素。普遍存在于非胃竇組織、腦和普遍存在于非胃竇組織、腦和肺的神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞、神經(jīng)纖肺的神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞、神經(jīng)纖維中。維中。1. ProGRP 分布特點和功能分布特點和功能 一、一、ProGRP生物學(xué)特性生物學(xué)特性參與刺激胃的參與刺激胃的G細(xì)胞分泌細(xì)胞分泌胃泌素胃泌素；參與

2、平滑肌細(xì)胞的收縮、；參與平滑肌細(xì)胞的收縮、 促進(jìn)細(xì)胞間的相互作用，如上皮細(xì)胞分裂、增殖等。促進(jìn)細(xì)胞間的相互作用，如上皮細(xì)胞分裂、增殖等。胃竇胃竇2022-6-2742. ProGRP 是是GRP穩(wěn)定的前體穩(wěn)定的前體* aa = amino acid 115, 118, 115, 118, 125125proGRPproGRP1 27 31 1 27 31 9898GRPaaaa* *血液中不穩(wěn)定血液中不穩(wěn)定 t1/2 2 min根據(jù)其部分氨基酸的變異可分為3種生物大分子，它們具有共同的具有共同的C C末端序列末端序列(31-98)(31-98)，能夠在血漿中穩(wěn)定表達(dá)多個裂解產(chǎn)物氨基酸鏈氨基酸鏈

3、一、一、ProGRP生物學(xué)特性生物學(xué)特性GRPGRP未被識別的序列GRP穩(wěn)定的前體2022-6-275GRPGRP在成人和胎兒肺在成人和胎兒肺組織和組織和SCLCSCLC中發(fā)現(xiàn)中發(fā)現(xiàn)(Yamaguchi et al.)(Yamaguchi et al.)GRPGRP成為成為SCLCSCLC的的標(biāo)志物標(biāo)志物（Maruno et al.)Maruno et al.)19831983201320131989198919951995二、二、ProGRP實驗室檢測實驗室檢測20092009Production and molecular size heterogeneity of immunoreact

4、ive gastrin-releasing peptide in fetal and adult lungs and primary lung tumors.Yamaguchi K, Abe K, Kameya T, et al.Cancer Res. 1983;43(8):3932-9.1、ProGRP 檢測發(fā)展歷程檢測發(fā)展歷程雅培化學(xué)發(fā)光法雅培化學(xué)發(fā)光法ProGRPProGRP試劑盒試劑盒國食藥監(jiān)械國食藥監(jiān)械( (進(jìn)進(jìn)) )字字20122012第第34002773400277號號第一個第一個ELISAELISA方法方法的的ProGRPProGRP上市上市Elecsys ProGRPElec

5、sys ProGRP檢檢測測試劑盒試劑盒Immunoreactive gastrin-releasing peptide as a specific tumor marker in patients with small cell lung carcinoma.Maruno K, Yamaguchi K, Abe K, et al.Cancer Res. 1989 Feb 1;49(3):629-32.Enzyme immunoassay of immunoreactive progastrin-releasing peptide(31-98) as tumor marker for smal

6、l-cell lung carcinoma: development and evaluation.Aoyagi K, Miyake Y, Urakami K,et al. Clin Chem. 1995;41(4):537-43.Development and analytical performance evaluation of an automated chemiluminescent immunoassay for pro-gastrin releasing peptide (ProGRP).Yoshimura T, Fujita K, Kinukawa H, et al.Clin

7、Chem Lab Med. 2009;47(12):1557-63.Multicenter evaluation of a new progastrin-releasing peptide (ProGRP) immunoassay across Europe and China.Korse CM, Holdenrieder S, Zhi XY, et al.Clin Chim Acta. 2015 ;438:388-95.北京科美化學(xué)發(fā)光北京科美化學(xué)發(fā)光ProGRP試劑盒，并試劑盒，并申請了國家專利。申請了國家專利。2022-6-2762、ProGRP 檢測原理檢測原理二、二、ProGRP實驗

8、室檢測實驗室檢測GRPGRPProGRP31-98ProGRP31-981 27 31 1 27 31 98 115 118 125 98 115 118 125 采用雙抗體夾心法采用雙抗體夾心法固相載體固相載體標(biāo)記抗體包被抗體2022-6-2773、ProGRP 檢測原理檢測原理二、二、ProGRP實驗室檢測實驗室檢測GRPGRPProGRP31-98ProGRP31-981 27 31 1 27 31 98 115 118 125 98 115 118 125 雙抗體夾心法雙抗體夾心法吖啶酯標(biāo)記抗體磁性微粒子包被抗體71-75 84-8840-60雅培化學(xué)發(fā)光雅培化學(xué)發(fā)光2022-6-27

9、84、ProGRP 檢測原理檢測原理二、二、ProGRP實驗室檢測實驗室檢測GRPGRPProGRP31-98ProGRP31-981 27 31 1 27 31 98 115 118 125 98 115 118 125 雙抗體夾心法雙抗體夾心法三聯(lián)吡錠釕標(biāo)記抗體磁性微粒子包被抗體？-？ ？-？羅氏電化學(xué)發(fā)光羅氏電化學(xué)發(fā)光二者結(jié)合區(qū)均為二者結(jié)合區(qū)均為不易降解區(qū)不易降解區(qū)2022-6-2795、標(biāo)本要求、標(biāo)本要求二、二、ProGRP實驗室檢測實驗室檢測 首選血漿樣本，EDTA和肝素鋰抗凝血漿都適用。血清中的ProGRP可被在凝集進(jìn)程中形成的絲氨酸蛋白酶降解。 羅氏電化學(xué)發(fā)光法也可采用血清標(biāo)本。

10、羅氏電化學(xué)發(fā)光法也可采用血清標(biāo)本。 穩(wěn)定性：2-8保存72小時，20保存9小時，-20保存12周。 勿使用添加疊氮化合物作為穩(wěn)定劑的樣本。2022-6-27106、影響因素影響因素二、二、ProGRP實驗室檢測實驗室檢測 ProGRP在血液中的濃度受活動、飲食和精神等因素影響較小。日內(nèi)和日間波動不大。 隨著年齡增長而升高，同齡女性高于男性; 吸煙人群顯著高于非吸煙人群; 體重指數(shù)( BMI) 是一個重要影響因素，肥胖人群ProGRP 水平較高; 溶血對ProGRP濃度影響不大; 腎衰可以導(dǎo)致血漿腎衰可以導(dǎo)致血漿ProGRP假陽性。假陽性。2022-6-27117、檢測性能檢測性能二、二、Pro

11、GRP實驗室檢測實驗室檢測 ELISA和化學(xué)發(fā)光兩種方法檢測和化學(xué)發(fā)光兩種方法檢測ProGRP的靈敏度和特異性均較好，能夠滿足實的靈敏度和特異性均較好，能夠滿足實驗需要。驗需要。 ARCHITECT i2000SR化學(xué)發(fā)光分析儀檢測胃泌素釋放肽前體的性能評價化學(xué)發(fā)光分析儀檢測胃泌素釋放肽前體的性能評價 結(jié)果表明，各項分析性能指標(biāo)均達(dá)到要求，能滿足臨床需要結(jié)果表明，各項分析性能指標(biāo)均達(dá)到要求，能滿足臨床需要2022-6-27128、Architect和和Roche檢測系統(tǒng)的結(jié)果比對檢測系統(tǒng)的結(jié)果比對二、二、ProGRP實驗室檢測實驗室檢測Multicenter evaluation of a n

12、ew progastrin-releasing peptide (ProGRP) immunoassay across Europe and China.Korse CM, Holdenrieder S, Zhi XY, et al.Clin Chim Acta. 2015 ;438:388-95.Roche檢測可溯源至檢測可溯源至Architect的的ProGRP檢測檢測2022-6-27139、參考范圍和臨界值參考范圍和臨界值二、二、ProGRP實驗室檢測實驗室檢測 Abbot ARCHITECT i2000 分析系統(tǒng)中國人群參考范圍：18歲50歲 ProGRP57.26pg/mL 50歲

13、 ProGRP81.42pg/mLReference intervals for plasma pro-gastrin releasing peptide (ProGRP) levels in healthy adults of Chinese Han ethnicity.Zhang J, Zhao Y, Chen Y.Zhang J, Zhao Y, Chen Y.Int J Biol Markers. 2014;29(4):436-9 Bubanovi等的研究認(rèn)為以65.89pg/mL作為SCLC診斷的最佳臨界值2022-6-2714ProGRP是診斷神經(jīng)內(nèi)分泌癌的腫瘤標(biāo)志物是診斷神經(jīng)內(nèi)分

14、泌癌的腫瘤標(biāo)志物三、三、ProGRP臨床應(yīng)用臨床應(yīng)用小細(xì)胞神經(jīng)內(nèi)分泌癌小細(xì)胞神經(jīng)內(nèi)分泌癌（SCNEC)大細(xì)胞神經(jīng)內(nèi)分泌癌（大細(xì)胞神經(jīng)內(nèi)分泌癌（LCNEC)2022-6-2715病理生理學(xué)病理生理學(xué)診斷診斷監(jiān)測監(jiān)測預(yù)后預(yù)后ProGRPProGRPSCLC是一種神經(jīng)內(nèi)分泌癌是一種神經(jīng)內(nèi)分泌癌ProGRP SCLC的特異性標(biāo)志物的特異性標(biāo)志物三、三、ProGRP臨床應(yīng)用臨床應(yīng)用小細(xì)胞肺癌（小細(xì)胞肺癌（SCLC)繼續(xù)關(guān)注繼續(xù)關(guān)注.?2022-6-2716ProGRP對SCLC診斷有很高的特異性SCLC存在存在ProGRP顯著釋放和升高顯著釋放和升高source: Petra Stieber, Inst

15、. F. Klin. Chemie, Klinikum der Universitt Mnchen Grosshadern，2010cut-off ProGRP: 50 pg/mLProGRPProGRP在各種腫瘤升高的頻率在各種腫瘤升高的頻率SCLCSCLC三、三、ProGRP臨床應(yīng)用臨床應(yīng)用小細(xì)胞肺癌（小細(xì)胞肺癌（SCLC)2022-6-2717ProGRP對SCLC診斷的敏感性最高! !肺癌標(biāo)志物SCLC和NSCLC的敏感性. 結(jié)果來自Molina et al. 2009等人的研究. Copied from a book from Molina R et al. Clinical val

16、ue of tumormarkers current status and future prospectsProGRP與其他標(biāo)志物的比較與其他標(biāo)志物的比較三、三、ProGRP臨床應(yīng)用臨床應(yīng)用小細(xì)胞肺癌（小細(xì)胞肺癌（SCLC)2022-6-2718ProGRP與其他標(biāo)志物的比較與其他標(biāo)志物的比較ProGRP與其他標(biāo)志物相比與其他標(biāo)志物相比ROC曲線下面積最大曲線下面積最大source: Molina et al. Tumor Biol. 2008; 30, 121129ProGRP對SCLC鑒別診斷價值最高三、三、ProGRP臨床應(yīng)用臨床應(yīng)用小細(xì)胞肺癌（小細(xì)胞肺癌（SCLC)ProGRP150

17、ProGRP150，敏感性，敏感性65%65%，特異性，特異性94%94%ProGRP300ProGRP300，敏感性，敏感性60%60%，特異性，特異性98%98%2022-6-2719source: Sunaga et al. Oncology 1999, 57, 143148如果治療有效，ProGRP水平顯著下降；如果治療無效ProGRP保持穩(wěn)定或升高。ProGRP監(jiān)測監(jiān)測SCLC的療效價值的療效價值三、三、ProGRP臨床應(yīng)用臨床應(yīng)用小細(xì)胞肺癌（小細(xì)胞肺癌（SCLC)2022-6-2720source: Sunaga et al. Oncology 1999, 57, 143148Pr

18、oGRP 評估評估SCLC的復(fù)發(fā)的復(fù)發(fā)能夠反映患者是否出現(xiàn)疾病的復(fù)發(fā)能夠反映患者是否出現(xiàn)疾病的復(fù)發(fā)三、三、ProGRP臨床應(yīng)用臨床應(yīng)用小細(xì)胞肺癌（小細(xì)胞肺癌（SCLC)復(fù)發(fā)的患者，ProGRP顯著升高ProGRP是復(fù)發(fā)監(jiān)測敏感性最高的標(biāo)志物（74%）2022-6-2721ProGRP是是SCLC生存的獨立預(yù)后因子生存的獨立預(yù)后因子 可對高危患者進(jìn)行密切的監(jiān)測！SCLC的生存與治療后ProGRP的水平存在相關(guān)性如果如果SCLCSCLC治療后治療后ProGRPProGRP升高，提示患者生存不佳或預(yù)后不良。升高，提示患者生存不佳或預(yù)后不良。 source: Shibayama et al. Lung

19、 Cancer 2001, 32, 6169三、三、ProGRP臨床應(yīng)用臨床應(yīng)用小細(xì)胞肺癌（小細(xì)胞肺癌（SCLC)2022-6-2722ProGRP vs. NSE在SCLC鑒別診斷的作用 NSE NSE的局限性的局限性在局限期SCLC低敏感性神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤特異的腫瘤標(biāo)志物，其他惡性腫瘤也可出現(xiàn)一場升高， 10-15%的NSCLC升高紅細(xì)胞和血小板含有NSE 溶血易出現(xiàn)假陽性 溶血的樣本檢測沒有意義 血清快速分離是必須的 標(biāo)本需要快速儲存在+4 (短期儲存，不能超過1h) 或 -30 (長期儲存）source: Molina R. EJCMO 2009, 1, 25-32 and refere

20、nces cited therein三、三、ProGRP臨床應(yīng)用臨床應(yīng)用小細(xì)胞肺癌（小細(xì)胞肺癌（SCLC)2022-6-2723ProGRPProGRP的優(yōu)勢的優(yōu)勢在正常人和SCLC人群存在較大差異在SCLC的中位值顯著高于NSE臨床更容易進(jìn)行決策比NSE敏感性高，包括對局限期溶血樣本不會出現(xiàn)假陽性對其他惡性腫瘤，有更高的特異性source: Molina R. EJCMO 2009, 1, 25-32 and references cited therein三、三、ProGRP臨床應(yīng)用臨床應(yīng)用小細(xì)胞肺癌（小細(xì)胞肺癌（SCLC)ProGRP vs. NSE在SCLC鑒別診斷的作用2022-6-

21、2724ProGRP和NSE具有互補性同時使用兩個標(biāo)志物同時使用兩個標(biāo)志物 局限期敏感性增加約13% 廣泛期的敏感性增加約15%source: Molina R. EJCMO 2009, 1, 25-32 and references cited thereinProGRPProGRP不能完全替代不能完全替代NSENSE在在SCLCSCLC的應(yīng)用價值的應(yīng)用價值三、三、ProGRP臨床應(yīng)用臨床應(yīng)用小細(xì)胞肺癌（小細(xì)胞肺癌（SCLC)ProGRP vs. NSE在SCLC鑒別診斷的作用2022-6-2725肺癌標(biāo)志物臨床指南NACB推薦推薦組織學(xué)組織學(xué)治療前治療前治療后和隨訪治療后和隨訪未知CYFR

22、A 21-1, NSE, ProGRPProGRP, CEA術(shù)后：根據(jù)組織學(xué)結(jié)果選擇標(biāo)志物晚期腫瘤：選擇首選的標(biāo)志物腺癌CYFRA 21-1 和 CEACYFRA 21-1和/或 CEA鱗癌CYFRA 21-1 和 CEA (and SCC)CYFRA 21-1和/或 CEA大細(xì)胞癌CYFRA 21-1 和 CEACYFRA 21-1和/或 CEAsource: NACB: Practice Guidelines And Recommendations For Use Of Tumor Markers In The Clinic: Lung Cancer (Section 3P) 三、三、ProGRP臨床應(yīng)用臨床應(yīng)用小細(xì)胞肺癌（小細(xì)胞肺癌（SCLC)2022-6-2726三、三、ProGRP臨床應(yīng)用臨床應(yīng)用前列腺前列腺小細(xì)胞神經(jīng)內(nèi)分泌癌小細(xì)胞神經(jīng)內(nèi)分泌癌Prostatic small-cell neuroendocrine carcinoma with disease progression monitored by measurement of serum progastrin-releasing peptide.Yashi