動(dòng)生化簡答題

1、動(dòng)生化簡答題1.-螺旋的特征是什么?如何以通式表示-螺旋?答: -螺旋結(jié)構(gòu)特征:每一圈包含3.6個(gè)殘基,螺距0.54nm,殘基高度0.15nm,螺旋半徑。1每一個(gè)角等于-57,每一個(gè)角等于-47。2相鄰螺距之間形成鏈內(nèi)氫鍵。即一個(gè)胎單位C=O基氧原子與其前的第三肽單位的N-H基氫原子生成一個(gè)氫鍵。氫鍵的取向與螺軸幾乎平行。氫鍵封閉環(huán)本身包含13個(gè)原子。-螺旋構(gòu)想允許所有的肽鍵都能參與鏈內(nèi)氫鍵的形成。因此,-螺旋構(gòu)象是相當(dāng)穩(wěn)定的,是最普遍的螺旋形式。-螺旋依靠氫鍵維持。若破壞氫鍵,則-螺旋構(gòu)象遭到破壞,而變成伸展的多肽鏈。-螺旋表示為3.613-螺旋。2.蛋白質(zhì)-折疊二級結(jié)構(gòu)的主要特點(diǎn)?答:二條

2、-折疊股平行排布,彼此以氫鍵相連,可以構(gòu)成-折疊片。-折疊片又稱為-折疊。為了在相鄰主鏈骨架之間形成最多的氫鍵,避免相鄰側(cè)鏈間的空間障礙,各主鏈骨架同時(shí)作一定程度的折疊,從而產(chǎn)生一個(gè)折疊的片層。其側(cè)鏈近似垂直相鄰兩個(gè)平面的交線,交替地位于片層的兩側(cè)。-折疊片分為平行-折疊片和反平行-折疊片兩種類型。3.參與維持蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)的化學(xué)鍵有哪些?其作用如何?答:參與維持蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)的化學(xué)鍵有:1范德華力:參與維持蛋白質(zhì)分子的三、四級結(jié)構(gòu)。2氫鍵:對維持蛋白質(zhì)分子的二級結(jié)構(gòu)起主要作用,對維持三四級結(jié)構(gòu)也起到一定的作用。3疏水作用力:對維持蛋白質(zhì)分子的三、四級結(jié)構(gòu)其主要作用。4離子鍵:參與維持蛋白質(zhì)分

3、子的三、四級結(jié)構(gòu)。5配位鍵:在一些蛋白質(zhì)分子中參與維持三、四級結(jié)構(gòu)。6二硫鍵:對穩(wěn)定蛋白質(zhì)分子的構(gòu)象起重要作用。4.胰島素原與胰島素在一級結(jié)構(gòu)上有哪些差異?胰島素原是如何變成有活性的胰島素?答:從胰島細(xì)胞中合成的胰島素原是胰島素的前體。它是一條多肽鏈,包含84個(gè)左右的氨基酸殘基(因種屬而異。對胰島素原與胰島素的化學(xué)結(jié)構(gòu)加以對比,可以看出,胰島素原和胰島素的區(qū)別就在于:胰島素原多一個(gè)C肽鏈。通過C肽鏈將胰島素的A、B 兩條肽鏈?zhǔn)孜蚕噙B(B鏈-C鏈-A鏈,便是胰島素的一條多肽鏈了。因此,胰島素原沒有生理活性與C肽鏈有關(guān)。如果用胰蛋白酶和羧肽酶從胰島素原的多肽鏈上切除C肽鏈,就可以變成有生理活性的胰

4、島素了。5.血紅蛋白的氧結(jié)合曲線為什么是S形的?此S形曲線有何生理意義?答:血紅蛋白分子是寡聚蛋白,在結(jié)合氧的過程中,存在著亞基之間的相互作用,即變構(gòu)效應(yīng),因此,其氧結(jié)合曲線是S形的。生理意義:在肺部,它有利于脫氧血紅蛋白結(jié)合更多的氧;在肌肉中,它有利于氧結(jié)合血紅蛋白分子釋放更多的氧,以滿足肌肉中生物氧化的需要。6.為什么用電泳法能將不同蛋白質(zhì)的混合物分離開來?答:蛋白質(zhì)分子在直流電場中的遷移率與蛋白質(zhì)分子本身的大小、形狀和凈電荷量有關(guān)。凈電荷量愈大,則遷移率愈大;分子愈大,則遷移率愈小;球狀分子的遷移率大于纖維狀分子的遷移率。在一定的電泳條件下,不同的蛋白質(zhì)分子,由于其凈電荷量、大小、形狀的

5、不同,一般有不同的遷移率,因此,可以采用電泳法將蛋白質(zhì)分離開來。7.蛋白質(zhì)為什么能在水溶液中穩(wěn)定存在?答:蛋白質(zhì)大小在膠體溶液的顆粒大小范圍之內(nèi)。絕大多數(shù)親水基團(tuán)在球蛋白分子的表面上。在水溶液中,能與極性水分子結(jié)合,從而使許多水分子在球蛋白分子的周圍形成一層水化層9水膜。由于水膜的分隔作用,使許多球蛋白分子不能相互結(jié)合,而以分子的形式,均勻地分布在水溶液中,從而形成親水膠體溶液,比較穩(wěn)定。此外,蛋白質(zhì)分子帶有相同的電荷,由于同性相斥,使大分子不能結(jié)合成較大的顆粒。上述兩個(gè)穩(wěn)定因素是蛋白質(zhì)分子能夠在水溶液中穩(wěn)定存在。8.蛋白質(zhì)分子為什么具有紫外吸收光譜?答:蛋白質(zhì)之所以能夠產(chǎn)生紫外吸收光譜,原因

6、是:1多肽鏈中所有的肽鍵紫外光區(qū)(220nm波長有很強(qiáng)的光吸收;2Trp、Try、和Phe殘基,由于其側(cè)鏈基團(tuán)含有共軛雙鍵系統(tǒng),在近紫外區(qū)(220300nm波長,有吸收光的能力。9.使用酶作催化劑的優(yōu)缺點(diǎn)?答:優(yōu)點(diǎn):1高度專一性;2高催化效率:3條件溫和;4易調(diào)控。缺點(diǎn):酶易變性失活。10.在全酶分子中金屬離子有何作用?答:在全酶分子中,金屬離子可能有下列作用:1作為酶活性部位的組成成分,參與催化底物反應(yīng);2對酶活性所必需的分子構(gòu)想起穩(wěn)定作用;3在酶與底物分子之間起橋梁作用。11.輔基與輔酶有何異同?答:不同點(diǎn):即他們與酶蛋白結(jié)合的牢固程度不同。在酶的輔助因子當(dāng)中把那些與酶蛋白結(jié)合比較牢固的,

7、用透析法不易除去的小分子有機(jī)化合物,稱為輔基;把那些與酶蛋白結(jié)合比較松弛的,用透析法可以除去的小分子有機(jī)化合物,稱為輔酶。相同點(diǎn):她們都是有機(jī)小分子,在酶的催化反應(yīng)中都起著傳遞電子、原子和某些化學(xué)基團(tuán)的作用。12.舉出三種維生素,說明其輔酶形式和在酶促反應(yīng)中的主要作用?答:維生素B族,如維生素B1(硫胺素、維生素B2(核黃素、維生素PP(煙酰胺、維生素B6、葉酸、泛酸等,幾乎全部參與輔酶的形成。甚至于有些維生素,如硫辛酸、維生素C等,本身就是輔酶。在酶促反應(yīng)過程中,輔酶作為載體,在供體與受體之間之間傳遞H原子或者某種功能團(tuán)(如:氨基、酰基、磷酸基、一碳基團(tuán)等。13.舉例說明酶原激活的機(jī)理?答:

8、有些酶,如參與消化的各種蛋白酶(如胃蛋白酶、胰蛋白酶,以及胰凝乳蛋白酶等,在最初合成和分泌時(shí),沒有催化活性。這種沒有活性的酶的前體,被稱為酶原。酶原必須經(jīng)過適當(dāng)?shù)那懈铍逆I,才能轉(zhuǎn)變成有催化活性的酶。使無活性的酶原轉(zhuǎn)變成活性酶的過程,稱為酶原激活。這個(gè)過程實(shí)質(zhì)上是酶活性部位組建、完善或者暴露的過程。例如胰凝乳蛋白酶原在胰腺細(xì)胞內(nèi)合成時(shí)沒有催化活性,從胰腺細(xì)胞分泌出來,進(jìn)入小腸之后,就被胰蛋白酶激活,接著自身激活(指酶原被自身的活性酶激活。14.解釋磺胺類藥物的抑菌機(jī)理、有機(jī)磷農(nóng)藥的殺蟲機(jī)理?答:磺胺類藥物是治療細(xì)菌性傳染病的有效藥物。它能抑制細(xì)菌的生長繁殖,而不傷害人和畜禽。細(xì)菌體內(nèi)的葉酸合成酶

9、能夠催化對氨基苯甲酸變成葉酸。磺胺類藥物,由于與對氨基苯甲酸的結(jié)構(gòu),非常相似,因此,對葉酸合成酶有競爭性抑制作用。人和畜禽能夠利用食物中的葉酸,而細(xì)菌不能利用外源的葉酸,必須自己合成。一旦合成葉酸的反應(yīng)受阻,則細(xì)菌由于缺乏葉酸,便停止生長繁殖。因此,磺胺類藥物有抑制細(xì)菌生長繁殖的作用,而不傷害人和畜禽。有些抑制劑,如有機(jī)磷殺蟲劑、有機(jī)汞化合物、有機(jī)砷化合物、一氧化碳、氰化物等劇毒物質(zhì)能比較牢固以共價(jià)鍵與酶分子的必需基團(tuán)相結(jié)合,從而抑制酶活性,用透析、超濾等物理方法,不能除去抑制劑使酶活性恢復(fù)。這種抑制作用稱為不可逆抑制作用;這種抑制劑,稱為不可逆抑制劑。15.可逆性抑制與不可逆性抑制的不同之處

10、?答:可逆抑制作用的抑制劑與酶分子的必需基團(tuán)以非共價(jià)鍵結(jié)合,從而抑制酶活性,用透析等物理方法可以除去抑制劑,便酶活性得到恢復(fù)。而不可逆抑制作用的抑制劑,以共價(jià)鍵與酶分子的必需基團(tuán)相結(jié)合,從而抑制酶活性,用透析、超濾等物理方法,不能除去抑制劑使酶活性恢復(fù)。16.競爭性抑制與非競爭性抑制的不同特征?答:競爭性抑制的一個(gè)重要特征是可以通過加入大量的底物來消除競爭性抑制劑對酶活性的抑制作用。從動(dòng)力學(xué)方面看,在競爭性抑制劑作用下,Vmax不降低;Km增大。非競爭性抑制的特征:加入大量底物不能解除非競爭性抑制劑對酶活性的抑制;在非競爭性抑制劑作用下,Vmax明顯降低,但Km值不改變。17.為何變構(gòu)酶的速度

11、底物動(dòng)力學(xué)曲線不呈雙曲線?答:競爭性抑制的一個(gè)重要特征是可以通過加入大量的底物來消除競爭性抑制劑對酶活性的抑制作用。從動(dòng)力學(xué)方面看,在競爭性抑制劑作用下,Vmax不降低;Km增大。非競爭性抑制的特征:加入大量底物不能解除非競爭性抑制劑對酶活性的抑制;在非競爭性抑制劑作用下,Vmax明顯降低,但Km值不改變。18.如何進(jìn)行酶活力的測定?答:酶活力(酶活性就是指:酶催化底物發(fā)生化學(xué)反應(yīng)的能力。因此,測定酶活力,實(shí)際上就是測定酶促反應(yīng)進(jìn)行的速度。酶促反應(yīng)速度越快,酶活力就越大;反之,速度越慢,酶活力就越小。引起反應(yīng)速度下降的原因很多,例如:底物濃度下降;產(chǎn)物對酶的抑制;由于產(chǎn)物濃度增加而加速了逆反應(yīng)

12、酶變性等。因此,為了排除上述干擾,酶活力應(yīng)該用酶促反應(yīng)的初速度來表示。19.酶活性部位的組成,位置和基團(tuán)構(gòu)成。答:酶分子中能直接與底物分子結(jié)合,并催化底物化學(xué)反應(yīng)的部位,稱為酶的活性部位或活性中心。活性部位是酶分子中的微小區(qū)域。它通常位于酶分子表面的一個(gè)深陷的空穴或一條深溝中。對單純酶來講,活性部位是由一些極性氨基酸殘基的側(cè)鏈基團(tuán)(如:His的咪唑基、Ser的羥基、Cys的巰基、Lys的NH2基、Asp與Glu的羧基等所組成的。有些酶還包括主鏈骨架上的亞氨基和羰基。對于結(jié)合酶來講,除了上述基團(tuán)而外,還包括金屬離子或輔酶分子的某一部分。20.什么是米氏常數(shù)?其意義是什么?怎樣能夠求出米氏常數(shù)?答

13、:將米氏方程式整理后,得:當(dāng)酶促反應(yīng)處于Km S=(vV1 =v V21時(shí),則Km=S。由此可知,Km值是當(dāng)酶反應(yīng)速度為最大反應(yīng)速度一半時(shí)的底物濃度。其單位是底物濃度的單位,一般用mol/L或mmol/L表示。米氏常數(shù)是酶的特征性物理常數(shù)。米氏常數(shù)的求法:最常用的是LineweaverBurk的作圖法(雙倒數(shù)作圖法。將米氏方程式改寫為下列倒數(shù)形式:該方程式相當(dāng)于y=ax+b直線方程。實(shí)驗(yàn)時(shí),選擇不同的S測定相對應(yīng)的V0。然后,以1/S為橫坐標(biāo),以1/v為縱坐標(biāo)作圖,繪出直線。21.什么是單純酶和結(jié)合酶?它們的區(qū)別和聯(lián)系是什么?答:按照化學(xué)組成,酶可以分為單純酶和結(jié)合酶。有些酶,如脲酶、胃蛋白酶

14、、脂肪酶等。其活性僅僅決定于它的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)。這類酶屬于單純酶(簡單蛋白質(zhì)。另一些酶,如乳酶脫氫酶、細(xì)胞色素氧化酶等,除了需要蛋白質(zhì)而外,還需要非蛋白質(zhì)的小分子物質(zhì),才有催化活性。這類酶屬于結(jié)合酶(結(jié)合蛋白質(zhì)。結(jié)合酶中的蛋白質(zhì)稱為酶蛋白;非蛋白質(zhì)的小分子物質(zhì)稱為輔助因子。酶蛋白與輔助因子結(jié)合之后所形成的復(fù)合物,稱為“全酶”。全酶=酶蛋白+輔助因子,只有全酶才有催化活性。將酶蛋白和輔因子分開后均無催化作用。22.血糖的來源和去路。答:血糖的主要來源有腸道吸收、肝糖原分解和非糖物質(zhì)(如氨基酸、甘油等的糖異生。去路則是進(jìn)入各組織細(xì)胞利用,包括在肝臟中合成糖原。還可經(jīng)一系列反應(yīng)轉(zhuǎn)變?yōu)槠渌羌把苌锶绾颂?/p>

15、、脫氧核糖、唾液酸等;轉(zhuǎn)變成非糖物質(zhì),如脂肪、有機(jī)酸和非必需氨基酸等。在某些情況下,當(dāng)血糖含量超過腎糖閾時(shí),部分葡萄糖會(huì)隨尿排出。23.簡述糖酵解途徑的生理意義。答:(1它是生物最普遍的供能反應(yīng)途徑,無論動(dòng)物、植物、微生物(尤其厭氧菌都利用酵解途徑供能。(2人體各組織細(xì)胞中都有糖酵解途徑。如紅細(xì)胞沒有線粒體,只能以糖酵解途徑作為唯一的供能途徑。(3它是機(jī)體應(yīng)急供能方式。雖然動(dòng)物機(jī)體主要靠有氧氧化供能,但當(dāng)供氧不足時(shí),即轉(zhuǎn)為主要依靠糖酵解途徑供能,如劇烈運(yùn)動(dòng),心肺患疾等等。(4糖酵解途徑與糖的其他途徑密切相關(guān)。24.在糖酵解過程中,NAD+的再生是怎樣實(shí)現(xiàn)的?答:酵解途徑中唯一的氧化反應(yīng)是3磷酸

16、甘油醛脫氫生成1,3二磷酸甘油酸。反應(yīng)中脫下的氫還原NAD+生成NADH+H+,后者則作為乳酸脫氫酶的輔酶參與催化丙酮酸還原為乳酸的反應(yīng)。在此反應(yīng)中,NADH+H+被氧化脫氫為NAD+,NAD+又可參加3磷酸甘油醛脫氫酶催化的反應(yīng)再接受氫,使糖酵解可以繼續(xù)下去。25.檸檬酸循環(huán)的生理意義。答:(1檸檬酸循環(huán)主要的功能就是供能。檸檬酸循環(huán)是葡萄糖生成ATP的主要途徑。一分子葡萄糖經(jīng)檸檬酸循環(huán)產(chǎn)能比糖酵解途徑要多的多,是機(jī)體內(nèi)主要的供能方式。(2檸檬酸循環(huán)不僅是脂肪和氨基酸在體內(nèi)徹底氧化分解的共同途徑,還是糖、脂肪、蛋白質(zhì)及其它有機(jī)物質(zhì)互變、聯(lián)系的樞紐。(3檸檬酸循環(huán)中的許多中間代謝產(chǎn)物可以轉(zhuǎn)變?yōu)?/p>

17、其它物質(zhì)。如:酮戊二酸和草酰乙酸可以氨基化為谷氨酸和天冬氨酸;琥珀酰CoA是卟啉分子中碳原子的主要來源等等。26.磷酸戊糖途徑的生理意義。答:(1NADPH是細(xì)胞中易于利用的還原能力,但它不被呼吸鏈氧化產(chǎn)生ATP,而是在還原性的生物合成中作氫和電子的供體。體內(nèi)多種物質(zhì)生物合成均需NADPH作供氫體,如脂肪酸、膽固醇等的生物合成。作為供氫體,NADPH還參加體內(nèi)多種氧化還原反應(yīng),如肝臟生物轉(zhuǎn)化反應(yīng),激素、藥物和毒物的羥化反應(yīng)等等。另外,NADPH還可維持紅細(xì)胞內(nèi)還原型谷胱甘肽的含量,對保證紅細(xì)胞的正常功能有重要作用。GSSG(氧化型谷胱甘肽+NADPH +H+ 2GSH(還原型谷胱甘肽+ NAD

18、P+(25磷酸核糖是生物體合成核苷酸和核酸(DNA和RNA的原料?？梢哉f,磷酸戊糖途徑將糖代謝與核苷酸代謝聯(lián)系。27.糖異生的生理意義。答:葡萄糖異生最重要的生理意義是在體內(nèi)葡萄糖來源不足時(shí),利用非糖物質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)槠咸烟?以維持血糖濃度的相對恒定。葡萄糖異生的另一重要作用就是有利于乳酸的利用。28.乳酸循環(huán)的基本過程。答:乳酸是糖酵解代謝的終產(chǎn)物,如在體內(nèi)大量積累會(huì)產(chǎn)生毒害作用。機(jī)體缺氧或劇烈運(yùn)動(dòng)時(shí)產(chǎn)生的大量乳酸,通過葡萄糖異生作用可被再利用。肌肉收縮時(shí)產(chǎn)生大量的乳酸,乳酸經(jīng)血液運(yùn)到肝臟,通過糖異生作用合成糖原或葡萄糖,來補(bǔ)充血糖,血糖可再被肌肉利用,這種乳酸、葡萄糖在肝臟和肌肉組織的互變循環(huán)就稱

19、為乳酸循環(huán)。29.糖原合成的過程(結(jié)合反應(yīng)的關(guān)鍵酶。答:糖原的合成包括4個(gè)步驟:(1葡萄糖被ATP磷酸化為6磷酸葡萄糖;(26磷酸葡萄糖轉(zhuǎn)變?yōu)?磷酸葡萄糖;(31磷酸葡萄糖生成UDP葡萄糖;(4糖原的生成。(具體反應(yīng)過程和酶略。30.糖原分解的過程(結(jié)合反應(yīng)的關(guān)鍵酶。答:首先,磷酸化酶催化糖原磷酸解,產(chǎn)生1磷酸葡萄糖。從糖原非還原性末端開始,依次移去葡萄糖,但到距分枝點(diǎn)還剩4個(gè)葡萄糖殘基時(shí),此酶失去作用。此時(shí),轉(zhuǎn)移酶將3個(gè)為一組葡萄糖殘基從外面的分枝轉(zhuǎn)移至靠近糖原核心的分枝上。余下的一個(gè)以1,6糖苷鍵連接的葡萄糖,在脫枝酶的催化下,水解生成游離的葡萄糖。這樣,在磷酸化酶、轉(zhuǎn)移酶和脫枝酶的配合作

20、用下,糖原分子由原來的分枝結(jié)構(gòu)逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)榫€型結(jié)構(gòu),分枝逐步減少,最后分解為1磷酸葡萄糖和少量游離的葡萄糖。31.以磷酸化酶的調(diào)節(jié)為例,說明酶的級聯(lián)機(jī)制。答:磷酸化酶b轉(zhuǎn)變?yōu)閍型需要磷酸化酶激酶的催化,使磷酸化酶b每個(gè)亞基的一個(gè)絲氨酸殘基發(fā)生磷酸化;然而,磷酸化酶激酶只有在一種蛋白激酶催化下,經(jīng)磷酸化后才從無活性變?yōu)橛谢钚?不僅如此,蛋白激酶又只有與cAMP(環(huán)腺苷酸結(jié)合后,才會(huì)引起變構(gòu)從無活性變?yōu)橛谢钚?而cAMP則由與細(xì)胞質(zhì)膜相結(jié)合的一種腺苷酸環(huán)化酶催化ATP生成;但腺苷酸環(huán)化酶又只有在激素(如腎上腺素的作用下才能活化。由此可見,這里形成了一個(gè)酶促酶的級聯(lián)式機(jī)制。32.在體內(nèi)ATP有哪些生理

21、作用?答:ATP在體內(nèi)有許多重要的生理作用,概括如下:(1是機(jī)體能量的暫時(shí)貯存形式的來源:在生物氧化中,ADP能將呼吸鏈上電子傳遞過程中所釋放的電化學(xué)能以磷酸化生成ATP的方式貯存起來,因此ATP是生物氧化中能量的暫時(shí)貯存形式。(2是機(jī)體其它能量形式的來源:ATP分子內(nèi)所含有的高能鍵可轉(zhuǎn)化成其它能量形式,以維持機(jī)體的正常生理機(jī)能,例如可轉(zhuǎn)化成機(jī)械能、生物電能、熱能、滲透能化學(xué)合成能等。體內(nèi)某些合成反應(yīng)不一定都直接利用ATP供能,而以其他三磷酸核苷作為能量的直接來源。如糖原合成需UTP供能。這些三磷酸核苷分子中的高能磷酸鍵并不是在生物氧化過程中直接生成的,而是來源于ATP。(3可生成cAMP參與

22、激素作用:ATP在細(xì)胞膜上的腺苷酸環(huán)化酶催化下,可生成cAMP,作為許多肽類激素在細(xì)胞內(nèi)體現(xiàn)生理效應(yīng)的第二信使。33.生物體內(nèi)有哪些重要的高能化合物?答:生物體內(nèi)除ATP外還有一些化合物也有很高的轉(zhuǎn)移磷酸基的潛勢。如磷酸烯醇式丙酮酸、乙酰基磷酸、磷酸肌酸、焦磷酸等的磷酸基轉(zhuǎn)移潛勢比ATP高。意味著它們能將磷酸基轉(zhuǎn)移給ADP而生成ATP。糖降解中許多產(chǎn)物都如此。34.何謂呼吸鏈?答:線粒體內(nèi)膜的最基本的功能是將代謝物脫下的成對氫原子或電子通過多種酶或輔酶所組成的連鎖反應(yīng)的逐步傳遞,最終與氧結(jié)合成水。這種由遞氫體和遞電子體按一定順序構(gòu)成的傳遞體系稱為呼吸鏈或電子傳遞鏈。從線粒體呼吸酶集合體分離得到

23、:4個(gè)復(fù)合體和2個(gè)單獨(dú)的成分。NADHQ還原酶、琥珀酸Q還原酶、輔酶Q、QH2細(xì)胞色素c還原酶、細(xì)胞色素c、細(xì)胞色素c氧化酶。35.化學(xué)滲透假說。答:化學(xué)滲透假說的解釋:電子沿呼吸鏈傳遞時(shí),把H+由線粒體的間基(基質(zhì)穿過內(nèi)膜泵到線粒體內(nèi)膜和外膜之間的膜間腔中,因而使膜間腔中的H+濃度高于間基中的H+濃度,于是產(chǎn)生了膜電勢,線粒體的內(nèi)膜外側(cè)為正、內(nèi)側(cè)為負(fù),就是說,質(zhì)子(H+跨越線粒體內(nèi)膜運(yùn)動(dòng)時(shí),已經(jīng)形成貯藏能量的質(zhì)子梯度,即電化學(xué)質(zhì)子梯度(包括膜兩側(cè)的H+梯度和膜兩側(cè)的電勢梯度。正是由這種電化學(xué)質(zhì)子梯度推動(dòng)H+由膜間又穿過內(nèi)膜上的ATP酶復(fù)合體返回到間質(zhì)(基質(zhì)中。此時(shí)發(fā)生ATP酶催化ADP磷酸化

24、為ATP 的反應(yīng)。36.常見的呼吸鏈電子傳遞抑制劑有哪些?它們的作用機(jī)制是什么?答:(1魚藤酮、阿米妥、以及殺粉蝶菌素A,它們的作用是阻斷電子由NADH向輔酶Q的傳遞。魚藤酮能和NADH脫氫酶牢固結(jié)合,因而能阻斷呼吸鏈的電子傳遞。魚藤酮對黃素蛋白不起作用,所以魚藤酮可以用來鑒別NADH呼吸鏈與FADH2呼吸鏈。阿米妥的作用與魚藤酮相似,但作用較弱,可用作麻醉藥。殺粉蝶菌素A是輔酶Q的結(jié)構(gòu)類似物,由此可以與輔酶Q相競爭,從而抑制電子傳遞。(2抗酶素A是從鏈霉素分離出來的抗菌素,它抑制電子從細(xì)胞色素b到細(xì)胞色素C1的傳遞作用。(3氰化物、一氧化碳、疊氮化合物及硫化氫可以阻斷電子由細(xì)胞色素aa3向氧

25、的傳遞作用,這也就是氰化物及一氧化碳中毒的原因。37.何謂氧化磷酸化作用?NADH呼吸鏈中有幾個(gè)氧化磷酸化偶聯(lián)部位?答:在線粒體內(nèi)伴隨著電子在呼吸鏈傳遞過程中所發(fā)生的ADP磷酸化成ATP的過程稱為氧化磷酸化作用。在NADH呼吸鏈有三個(gè)偶聯(lián)部位,第一個(gè)偶聯(lián)部位是在NADH CoQ之間,第二個(gè)偶聯(lián)部位是在細(xì)胞色素b到細(xì)胞色素c1之間,第三個(gè)偶聯(lián)部位是在細(xì)胞色素aa3 O2之間。38. NADH和FADH電子傳遞鏈的過程及其關(guān)鍵酶。2答:NADH呼吸鏈:FADH2電子傳遞鏈:電子的傳遞是由FADH2傳給鐵硫中心,然后再傳給輔酶Q ,由輔酶Q 到O2之間的電子傳遞與NADH 呼吸鏈完全相同。39.脂類

26、的生理功能。答:(1脂肪是動(dòng)物機(jī)體用以貯存能量的主要形式。(2脂肪可以為機(jī)體提供物理保護(hù)。(3磷脂、糖脂和膽固醇是構(gòu)成組織細(xì)胞的膜系統(tǒng)的主要成分。(4類脂還能轉(zhuǎn)變?yōu)槎喾N生理活性分子。性激素、腎上腺皮質(zhì)激素、維生素D3和促進(jìn)脂類消化吸收的膽汁酸,可以由膽固醇衍生而來。磷脂的代謝中間物,如甘油二酯、肌醇磷酸作為信號分子參與細(xì)胞代謝的調(diào)節(jié)過程。(5脂類代謝的中間產(chǎn)物異戊烯衍生物可轉(zhuǎn)變成維生素A 、E 、K 及植物次生物質(zhì)如橡膠,桉樹油等。由此可見,脂類具有多方面的功能,是動(dòng)物體內(nèi)不可缺乏的物質(zhì)。40.酮體的生理意義。答:酮體是脂肪酸在肝臟中氧化分解時(shí)產(chǎn)生的正常中間代謝物,是肝臟輸出能源的一種形式,與

27、脂肪酸相比酮體能更為有效地代替葡萄糖。(1當(dāng)動(dòng)物機(jī)體缺少葡萄糖時(shí),須動(dòng)員脂肪供應(yīng)能量,但肌肉組織對脂肪酸只有有限的利用能力,于是可以優(yōu)先利用酮體以節(jié)約葡萄糖,從而滿足如大腦等組織對葡萄糖的需要。(2大腦,不能利用脂肪酸,但能利用顯著量的酮體。特別在饑餓時(shí),人的大腦可利用酮體代替其所需葡萄糖量的約25%左右。酮體是小分子,溶于水,能通過肌肉毛細(xì)血管壁和血腦屏障,因此可以成為適合于肌肉和腦組織利用的能源物質(zhì)。41.脂肪組織中脂肪的合成與分解的調(diào)節(jié)。 Q NADH Q 氧化型FeS 還原 型FM NH 2FM N Q FeS NAD 還原酶化型還原 型(+2 (+3 1 (+3(+2 (+2 (+3

28、 (+3(+2Cytc 1Cytc QH Q c QH -細(xì)胞色素 還原酶2 CoQ10 琥珀 酸Cytc NADH 2答:脂肪組織中同時(shí)進(jìn)行的脂解和酯化并不是簡單的可逆過程,而是用以調(diào)控脂肪酸動(dòng)員或貯存。當(dāng)葡萄糖供應(yīng)不足而血糖降低時(shí),葡萄糖進(jìn)入脂肪細(xì)胞的速度降低,這將使酵解速度減慢,因而降低磷酸甘油的產(chǎn)量,于是脂肪酸的酯化作用也減弱。此時(shí),脂肪動(dòng)員釋入血漿中的脂肪酸增加。反之,當(dāng)血糖水平升高,攝入脂肪組織的葡萄糖增加時(shí),葡萄糖降解后產(chǎn)生的磷酸甘油也較多,于是酯化作用增強(qiáng),促進(jìn)脂肪的沉積,降低了脂肪動(dòng)員和游離脂肪酸釋放進(jìn)入血漿的速度。42.肌肉組織利用動(dòng)員的脂肪酸以節(jié)約糖的機(jī)制。答:肌肉組織利

29、用動(dòng)員的脂肪酸以節(jié)約糖的機(jī)制是,當(dāng)肌肉以脂肪酸為燃料氧化供能時(shí),抑制了葡萄糖進(jìn)入肌細(xì)胞和酵解作用。脂肪酸氧化增加了細(xì)胞中檸檬酸的濃度,檸檬酸可以通過抑制磷酸果糖激酶以減慢酵解過程。43.肝臟對于脂肪代謝的調(diào)節(jié)作用。答:肝臟的調(diào)控機(jī)制在于不斷地探測著門靜脈中血糖的含量,糖原的貯存量,以及酵解和糖異生之間的平衡,最終依據(jù)機(jī)體的需求決定脂肪酸代謝分支點(diǎn)上的中間產(chǎn)物的去向。脂肪酸在肝臟中的代謝有三個(gè)重要的分支點(diǎn):(1脂酰CoA。肝臟可以根據(jù)機(jī)體的能源供應(yīng)狀況,或者使脂酰CoA在胞液中再酯化生成甘油三酯,再以極低密度脂蛋白(VLDL的形式釋放入血液,送回到脂肪組織中去貯存,或者轉(zhuǎn)入線粒體進(jìn)行氧化為機(jī)體供

30、能。(2氧化的產(chǎn)物乙酰CoA。乙酰CoA既可以直接進(jìn)入三羧酸循環(huán)進(jìn)一步分解,也可以轉(zhuǎn)變成酮體以提高其在肝外組織中的利用率。(3檸檬酸。檸檬酸是脂肪酸在肝中代謝的,也是三羧酸循環(huán)的第一個(gè)代謝中間物。它或者通過循環(huán)被進(jìn)一步降解,或者經(jīng)由檸檬酸/丙酮酸途徑轉(zhuǎn)入胞液再產(chǎn)生乙酰CoA,用以脂肪酸和膽固醇的合成。肝臟可以決定脂肪酸分解代謝過程中的各級代謝中間物在何種生理狀態(tài)下該往何處去,而不做無效和無用的工作。從這個(gè)意義上說,肝臟是調(diào)控脂肪酸代謝去向最理想的器官。44.血漿脂蛋白有哪兩種分類?各種血漿脂蛋白的功能有什么特點(diǎn)?答:(1利用醋酸纖維素膜,瓊脂糖或聚丙烯酰胺凝膠作為電泳支持物,血漿脂蛋白在電場中

31、可按其表面所帶電荷不同,以不同的速度泳動(dòng)。電泳結(jié)果分出四種脂蛋白,由乳糜微粒起,、前和脂蛋白的泳動(dòng)速度依次增加。乳糜微粒在電泳結(jié)束時(shí)基本仍在原點(diǎn)不動(dòng)。(2由于各種脂蛋白所含脂質(zhì)與蛋白質(zhì)量的差異,利用密度梯度超速離心技術(shù),也可以把血漿脂蛋白根據(jù)其密度由小至大分為乳糜微粒(CM、極低密度脂蛋白(VLDL、低密度脂蛋白(LDL和高密度脂蛋白(HDL四類。CM是運(yùn)輸外源甘油三酯和膽固醇酯的脂蛋白形式。VLDL的功能與CM相似,是把內(nèi)源的,即肝內(nèi)合成的甘油三酯、磷脂、膽固醇與apo B100、E等載脂蛋白結(jié)合形成脂蛋白,運(yùn)到肝外組織去貯存或利用。LDL是由VLDL轉(zhuǎn)變來的。LDL富含膽固醇酯,因此它是向

32、組織轉(zhuǎn)運(yùn)肝臟合成的內(nèi)源膽固醇的主要形式。HDL負(fù)責(zé)把膽固醇運(yùn)回肝臟代謝轉(zhuǎn)變。45.膽固醇在動(dòng)物體內(nèi)有哪些生物轉(zhuǎn)變?答:(1血中膽固醇的一部分運(yùn)送到組織,構(gòu)成細(xì)胞膜的組成成分。(2膽固醇可以經(jīng)修飾后轉(zhuǎn)變?yōu)?脫氫膽固醇,后者在紫外線照射下,在動(dòng)物皮下轉(zhuǎn)變?yōu)榫S生素D3。(3機(jī)體合成的約2/5的膽固醇在肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞中經(jīng)羧化酶作用轉(zhuǎn)化為膽酸和脫氧膽酸。(4膽固醇是腎上腺皮質(zhì)、睪丸和卵巢等內(nèi)分泌腺合成類固醇激素的原料。46.脂肪分解產(chǎn)生的甘油的代謝去向。答:脂肪動(dòng)員的結(jié)果使貯存在脂肪細(xì)胞中的甘油三酯分解成游離脂肪酸和甘油,然后釋放進(jìn)入血液。脂肪組織中缺乏甘油激酶活性,不能使甘油分解,因此溶于水的甘油直接經(jīng)血

33、液運(yùn)送至肝、腎、腸等組織,主要在肝中甘油激酶的催化下,轉(zhuǎn)變?yōu)榱姿岣视?然后脫氫生成磷酸二羥丙酮,后者循糖的分解途徑進(jìn)一步代謝或者進(jìn)入糖的異生途徑轉(zhuǎn)變?yōu)槠咸烟腔蛱窃?7.反芻動(dòng)物丙酸代謝的意義。答:反芻動(dòng)物體內(nèi)的葡萄糖,約有50%來自丙酸的異生作用,其余的大部分來自氨基酸?？梢姳岽x對于反芻動(dòng)物是非常重要的。丙酸代謝中還需要維生素B12,因此反芻動(dòng)物對這種維生素的需要量比其他動(dòng)物大,不過瘤胃中的微生物能夠合成并提供足量的維生素B12。48.蛋白質(zhì)在動(dòng)物體中有何生物學(xué)功能。答:(1維持組織細(xì)胞的生長、修補(bǔ)和更新;(2轉(zhuǎn)變?yōu)樯砘钚苑肿?(3氧化供能。49.動(dòng)物體內(nèi)氨的來源、轉(zhuǎn)運(yùn)和去路。答:氨的

34、來源:(1氨基酸及胺的脫氨基作用;(2嘌呤、嘧啶等含氮物的的分解;(3可由消化道吸收一些氨,即腸內(nèi)氨基酸在腸道細(xì)菌作用下產(chǎn)生的氨和腸道尿素經(jīng)腸道細(xì)菌尿素酶水解產(chǎn)生的氨;(4腎小管上皮細(xì)胞分泌的氨,主要是谷氨酰胺水解產(chǎn)生的。氨的去路:(1合成某些非必需氨基酸,并參與嘌呤、嘧啶等重要含氮化合物的合成;(2可以在動(dòng)物體內(nèi)形成無毒的谷氨酰胺;(3形成血氨;(4通過轉(zhuǎn)變成尿酸(禽類、尿素(哺乳動(dòng)物排出體外。50.氨基酸脫氨基后生成的酮酸的代謝去向。答:酮酸的具體代謝有三種去路:(1氨基化;(2轉(zhuǎn)變成糖和脂類;(3氧化供能。51.氨基酸的代謝去向有哪些?答:(1變成蛋白質(zhì)和多肽。(2轉(zhuǎn)變成多種含氮生理活性

35、物質(zhì),如嘌呤、嘧啶、卟啉和兒茶酚胺類激素等。(3進(jìn)入代謝途徑,大多數(shù)氨基酸脫去氨基生成氨和酮酸,氨可轉(zhuǎn)變成尿素、尿酸排出體外,而生成的酮酸則可以再轉(zhuǎn)變?yōu)榘被?或是徹底分解為二氧化碳和水并釋放能量,或是轉(zhuǎn)變?yōu)樘腔蛑咀鳛槟芰康膬洹?2.動(dòng)物體內(nèi)可生成游離氨的氨基酸脫氨方式有哪些?各有何特點(diǎn)?答:(1氧化脫氨基作用:動(dòng)物體只有L谷氨酸脫氫酶催化反應(yīng),其它D氨基酸氧化酶,L氨基酸氧化酶的作用不大。(2聯(lián)合脫氨基作用:轉(zhuǎn)氨基作用和L谷氨酸氧化脫氨基同時(shí)作用,是肝臟等器官的主要作用方式。(3嘌呤核苷酸循環(huán):骨骼肌和心肌的作用方式,因骨骼肌缺乏L谷氨酸脫氫酶,而腺苷酸脫氨酶活性高,催化氨基酸脫氨基反應(yīng)

36、。53.天冬氨酸在尿素循環(huán)中的作用。答:天冬氨酸在尿素循環(huán)中起了氨基供給體的作用。天冬氨酸可由草酰乙酸與谷氨酸經(jīng)轉(zhuǎn)氨基作用生成,尿素循環(huán)中精氨代琥珀酸裂解產(chǎn)生的延胡索酸可以經(jīng)過三羧酸循環(huán)轉(zhuǎn)變?yōu)椴蒗Ｒ宜?后者接受轉(zhuǎn)氨基作用產(chǎn)生的氨基合成天冬氨酸,因此,通過天冬氨酸和延胡索酸使尿素循環(huán)與三羧酸循環(huán)聯(lián)接在一起。54.舉出三種氨基酸脫羧基作用的產(chǎn)物,說明其生理功能?答:谷氨酸氨基丁酸(G A B A抑制性神經(jīng)遞質(zhì)組氨酸組胺血管舒張劑,促胃液分泌色氨酸5羥色胺抑制性神經(jīng)遞質(zhì),縮血管精氨酸精胺、腐胺等促進(jìn)細(xì)胞增殖等半胱氨酸牛磺酸形成?；悄懼?脂類消化55.谷胱甘肽的分子組成及何生理機(jī)能?答:谷胱甘肽是由

37、谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸所組成的三肽,它的生物合成不需要由RNA編碼。還原型谷胱甘肽主要功能是保護(hù)含有功能巰基的酶和蛋白質(zhì)不易被氧化,保持紅細(xì)胞膜的完整性,防止亞鐵血紅蛋白氧化成高鐵血紅蛋白,還可以結(jié)合藥物,毒物,促進(jìn)它們的生物轉(zhuǎn)化,消除過氧化物和自由基對細(xì)胞的損害作用。56.DNA 堿基當(dāng)量定律。答:在各種 DNA 中腺嘌呤與胸腺嘧啶的摩爾數(shù)相等,即 A=T,鳥嘌呤與胞嘧啶(包括5甲基胞嘧啶的摩爾數(shù)相等,即G=C + m5C;因此嘌呤堿基的總摩爾數(shù)等于嘧啶堿基的總數(shù),即A + G=T + C + m5C。這個(gè)堿基摩爾比例規(guī)律稱為DNA的堿基當(dāng)量定律。57.什么是DNA熱變性?DNA熱變性后有

38、何特點(diǎn)?Tm值表示什么?答:將DNA的稀鹽溶液加熱到70100,幾分鐘后,雙螺旋結(jié)構(gòu)即發(fā)生破壞,氫鍵斷裂,兩條鏈彼此分開,形成無規(guī)則線團(tuán)狀,此過程就是DNA的熱變性。DNA熱變性后有很多特點(diǎn)如:變性溫度范圍很窄;260nm的紫外吸收增加;粘度下降;生物活性喪失;比旋度下降等。Tm值代表核酸的變性溫度(熔解溫度、熔點(diǎn)。在數(shù)值上等于摩爾消光系數(shù)值(紫外吸收達(dá)到最大變化值半數(shù)時(shí)所對應(yīng)的溫度。58. DNA堿基組成特點(diǎn)。答:DNA的堿基組成的特點(diǎn):(1具有種的特異性;(2沒有器官和組織的特異性;(3DNA 的堿基組成符合堿基摩爾比例規(guī)律;(4年齡、營養(yǎng)狀況和環(huán)境的改變不影響DNA的堿基組成。59.核酸

39、的概念、分類、特點(diǎn)及功能。答:核酸是生物體的基本組成物質(zhì),是重要的生物大分子,從高等的動(dòng)、植物到簡單的病毒都含有核酸。核酸可分為DNA和RNA兩大類。DNA分子的特點(diǎn)為:DNA分子能夠自我復(fù)制,將遺傳信息傳遞給子代;通過轉(zhuǎn)錄,再翻譯,把DNA上的遺傳信息經(jīng)RNA傳遞到蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)上。它在生物的生長、發(fā)育、繁殖、遺傳和變異等生物活動(dòng)過程中都占有極其重要的地位。但最為重要的是在生物遺傳中的作用。RNA在各種生物的細(xì)胞中,依不同的功能和性質(zhì),都含有三類主要的RNA:信使RNA,核糖體 RNA 和轉(zhuǎn)運(yùn) RNA。他們都參與蛋白質(zhì)的生物合成。近年來也有許多報(bào)道認(rèn)為 RNA 具有催化活性。 60.DNA 與

40、RNA 的一級結(jié)構(gòu)有何異同？ 答： 不同點(diǎn):DNA的一級結(jié)構(gòu)中組成部分為脫氧核糖核苷酸， 核苷酸殘基的數(shù)目有幾千至 幾萬個(gè)；而RNA的組成成分是核糖核苷酸，核苷酸的數(shù)目僅有幾十個(gè)到幾千個(gè)。另外在 DNA分子中A=T，G=C；而在RNA分子中A，。 共同點(diǎn)： 它們都是以單核苷酸作為基本組成單位， 核苷酸殘基之間都是由 35 磷酸二酯鍵相連而成。 61核酸的逐步水解過程。 答：若將核酸（DNA 或 RNA）逐步水解，則可生成多種中間產(chǎn)物。首先生成的是低聚（或 稱寡聚）核苷酸。低聚核苷酸為分子量較小的多核苷酸片段，一般由 20 個(gè)以下核苷酸 組成，并可進(jìn)一步水解生成核苷酸；核苷酸進(jìn)一步水解生成核苷及

41、磷酸；核苷水解后則 生成戊糖和堿基。 62.DNA 復(fù)制時(shí)，隨后鏈復(fù)制的基本過程。 答： 隨后鏈?zhǔn)侵敢詫槠魏铣傻淖渔湣?隨后鏈的模板是通過聚合酶全酶二聚體的一 亞基，形成一個(gè)環(huán)，使隨后鏈的方向與另一個(gè)亞基中的先導(dǎo)鏈模板的方向相同。DNA聚 合酶全酶合成先導(dǎo)鏈的同時(shí)也合成隨后鏈。當(dāng)大約1000個(gè)核苷酸加在隨后鏈上之后， 隨后鏈的模板就離開，然后再形成一個(gè)新的環(huán)，引物酶再合成一段RNA引物，另一岡崎 片段再開始合成， 這樣使兩條鏈同時(shí)同方向合成。 已合成的岡崎片段由DNA聚合酶I發(fā)揮 5 、3 核酸外切活性從5 端除去RNA引物，并用脫氧核苷酸填滿形成的缺口，最 后由DNA連接酶將各片段連接起

42、來，形成完整的隨后鏈。 63.DNA 切除修復(fù)的基本過程。 答：切除修復(fù)發(fā)生在DNA復(fù)制之前，故稱為復(fù)制前修復(fù)。它是一種多酶的 催化過 程，包括4個(gè)步驟，可以概括為切補(bǔ)切封。以胸腺嘧啶二聚體為例： （1）由特異的內(nèi)切核酸酶識別嘧啶二聚體，并在嘧啶二聚體前的糖磷酸骨架 上切開一個(gè)裂口。裂口處有3OH 和含有嘧啶二聚體的5 端。 （2）DNA聚合酶以3OH為引物，以另一條完好的互補(bǔ)鏈為模板進(jìn)行修復(fù)，合成 一段新片段。 （3）嘧啶二聚體區(qū)被DNA聚合酶的5 3 外切酶活性作用切除。 （4）新合成的DNA片段和原存在的DNA部分由連接酶催化相連。 在大腸桿菌中，修復(fù)時(shí)合成與切除均由 DNA 聚合酶 I

43、 來完成。在真核細(xì)胞中 DNA 聚合酶沒有外切酶活性，切除由另外的酶來完成。 64.DNA 重組修復(fù)的基本過程。 答： 重組修復(fù)是指復(fù)制后通過分子內(nèi)重組或稱為姐妹鏈交換， 從完整的親代鏈上把相應(yīng) 堿基順序的片段移至子代鏈缺口處， 使之成為完整的分子。 親鏈上的缺口由聚合酶 I 和 連接酶填補(bǔ)完整。 65.DNA SOS 修復(fù)的基本過程。 答：SOS 修復(fù)是指允許子鏈 DNA 復(fù)制合成時(shí)越過親鏈上受損傷的片段而不形成缺口，這 種修復(fù)以犧牲復(fù)制的忠實(shí)性為代價(jià)。SOS 修復(fù)的詳細(xì)機(jī)理還不十分清楚。 66.光修復(fù)的基本過程。 答：光修復(fù)也稱光復(fù)活，它是由可見光（300400nm）激活光復(fù)活酶，該酶能分

44、解胸腺 嘧啶二聚體。 已從細(xì)菌和動(dòng)物的細(xì)胞中分裂出一種光復(fù)活酶。 此酶與 DNA 形成的復(fù)合物 以一種尚未了解的方式吸收光，并利用光能裂解二聚體中的環(huán)丁基的 CC 鍵，以達(dá)到 復(fù)活胸腺嘧啶。哺乳動(dòng)物和人體內(nèi)缺乏此酶。 67.真核生物 RNA 轉(zhuǎn)錄生成后，是如何進(jìn)行加工修飾的？ 答：真核生物的 mRNA 在 5 和 3 兩個(gè)末端都要受到修飾，分別是加“帽子”和“尾 巴”的修飾；真核生物 mRNA 前體物的剪切加工，包括內(nèi)含子的剪除及 留下的片段拼接 成成熟 mRNA 等過程。真核生物所有的 rRNA 轉(zhuǎn)錄物都需要加工，過程與原核相似，即剪 切 5 、3 末端和切除轉(zhuǎn)錄物中不需要的區(qū)域。真核生物的

45、 tRNA 也是一個(gè)大轉(zhuǎn)錄物 （tRNA 前體轉(zhuǎn)錄物），這些轉(zhuǎn)錄物可能含有一個(gè)或多個(gè) tRNA 的順序。成熟的 tRNA 也 是在轉(zhuǎn)錄后經(jīng)剪切加工而成。 68.蛋白質(zhì)生物合成后的加工修飾方式有哪些？ 答：蛋白質(zhì)加工包括修飾和折疊。蛋白質(zhì)修飾包括 N端修飾，多肽鏈的水解和切除， 氨基酸側(cè)鏈的修飾，糖基化修飾。 69.中心法則路線圖。 蛋白質(zhì) 答： DNA RNA 70.結(jié)合鋅指的結(jié)構(gòu)，說明鋅指的作用。 答： 鋅指基元是指在保守的半胱氨酸和組氨酸殘基形成的四面體結(jié)構(gòu)中鑲著一個(gè)鋅原子。 本身由約 23 個(gè)氨基酸組成。在含鋅指的蛋白中鋅指通常是成串的重復(fù)排列。鋅指間的 聯(lián)接物通常是 78 氨基酸， 不

46、同蛋白質(zhì)的鋅指數(shù)目不同。 含有鋅指的調(diào)控蛋白在與 DNA 結(jié)合時(shí)， 是鋅指的尖端進(jìn)入到 DNA 的大溝或小溝， 以識別它特異結(jié)合的 DNA 序列并與之 結(jié)合。 71.結(jié)合亮氨酸拉鏈的結(jié)構(gòu)，說明亮氨酸的作用。 答：亮氨酸拉鏈基元是在蛋白質(zhì)的 螺旋一側(cè)集中了許多疏水氨基酸，一般約每7個(gè) 氨基酸殘基出現(xiàn)一個(gè)亮氨酸。即亮氨酸都出現(xiàn)在 螺旋的疏水一側(cè)，呈直線排列。當(dāng) 蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)相互作用時(shí)亮氨酸殘基是肩并肩地排列起來有如拉鏈， 因而稱為亮氨酸 拉鏈。兩個(gè)相互作用的兩個(gè) 螺旋還彼此纏繞在一起，形成螺旋的再螺旋。 亮氨酸拉鏈區(qū)的氨基端還有約 30 個(gè)殘基的堿性區(qū)（富含賴氨酸和精氨酸），作用 是與 DNA 結(jié)

47、合。 兩個(gè)亮氨酸拉鏈蛋白形成二聚體時(shí)構(gòu)成 Y 字型， 螺旋的再螺旋是 Y 字的 干，堿性區(qū)成為臂。每個(gè)堿性區(qū)形成 螺旋，并發(fā)生彎曲以便纏繞在 DNA 的大溝中。 72.表達(dá)載體具有哪些特點(diǎn)？ 答： 表達(dá)載體是適于在受體細(xì)胞中表達(dá)外源基因的載體。 保留了轉(zhuǎn)化和感染活細(xì)胞的能 力， 又具有多處攜帶外源 DNA 的酶切位點(diǎn)， 并含有特殊的篩選標(biāo)記。 可使外源基因復(fù)制、 轉(zhuǎn)錄和翻譯出基因的蛋白質(zhì)產(chǎn)物。 73.擺動(dòng)學(xué)說的主要內(nèi)容。 答：密碼子反密碼子相互作用，首先要求前兩個(gè)堿基對是標(biāo)準(zhǔn)型的堿基互補(bǔ)，以保證 結(jié)合有最大限度的穩(wěn)定性， 第三個(gè)堿基則要求不那么嚴(yán)格， 可以允許結(jié)構(gòu)上有小小的波 動(dòng)（即擺動(dòng)），并

48、允許有某些特異的堿基參與。 74.Southern 雜交的基本過程。 答：將混合在一起的限制性酶切 DNA 片段，用瓊脂糖電泳分開，并變性為單鏈 DNA，再 轉(zhuǎn)移到一張硝酸纖維素膜上。 在膜上的這些 DNA 片段可以用 32P 標(biāo)記的單鏈 DNA 探針雜 交。 再用放射自顯影方法顯示出與探針順序互補(bǔ)的限制性酶切 DNA 片段的位置。 用這個(gè) 方法能很容易地將上百萬片段中的一個(gè)特殊片段鑒定出來， 像從一堆干草中尋找出一顆 針一樣，十分靈敏有效。 75.Nouthern 雜交的基本過程。 答：用凝膠電泳分離 RNA，將其轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素膜上，之后用雜交法來鑒定它，此法 稱為 Northern 雜交或稱 Northern 印跡