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文檔簡介
1、高三生物第二講細(xì)胞工程的原理及應(yīng)用課件胚胎或幼齡動(dòng)物的組織器官細(xì)胞懸液剪碎胰蛋白酶原代培養(yǎng)貼壁生長接觸抑制傳代培養(yǎng)洗滌、稀釋、分離動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不能最終培養(yǎng)成生物體原代細(xì)胞傳代細(xì)胞2.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)細(xì)胞懸浮液10代細(xì)胞50代細(xì)胞無限傳代原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)多數(shù)組織細(xì)胞固定在表面生長和分裂隨細(xì)胞增多,細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖3.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件3.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件(1)無菌、無毒的環(huán)境3.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件(1)無菌、無毒的環(huán)境(2)必須的營養(yǎng)物質(zhì) (葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素、激素、促生長因子、動(dòng)物血清等。)3.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件(1)無菌、無毒的環(huán)境(2)必須的營養(yǎng)物質(zhì) (
2、葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素、激素、促生長因子、動(dòng)物血清等。)(3)適宜的溫度: 36.50.5度3.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件(1)無菌、無毒的環(huán)境(2)必須的營養(yǎng)物質(zhì) (葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素、激素、促生長因子、動(dòng)物血清等。)(3)適宜的溫度: 36.50.5度(4)充足的氧氣和適宜的酸堿度: O2和CO2(95%空氣和5% CO2 )4.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)的比較項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)培養(yǎng)基的物理性質(zhì)培養(yǎng)基的成分結(jié)果目的取材其他條件植株快速繁殖脫毒植株的培人工種子生產(chǎn)藥物、殺蟲劑等轉(zhuǎn)基因植物的培育蛋白質(zhì)生物制品的生產(chǎn)皮膚移植材料的培育檢測有毒物質(zhì)生理、病理、藥理學(xué)研究植物幼
3、嫩的部位或花藥等動(dòng)物胚胎或出生不久的幼齡動(dòng)物的器官或組織均為無菌操作,需要適宜的溫度、pH等條件4.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)的比較項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)培養(yǎng)基的物理性質(zhì)培養(yǎng)基的成分結(jié)果目的取材其他條件固體液體植株快速繁殖脫毒植株的培人工種子生產(chǎn)藥物、殺蟲劑等轉(zhuǎn)基因植物的培育蛋白質(zhì)生物制品的生產(chǎn)皮膚移植材料的培育檢測有毒物質(zhì)生理、病理、藥理學(xué)研究植物幼嫩的部位或花藥等動(dòng)物胚胎或出生不久的幼齡動(dòng)物的器官或組織均為無菌操作,需要適宜的溫度、pH等條件4.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)的比較項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)培養(yǎng)基的物理性質(zhì)培養(yǎng)基的成分結(jié)果目的取材其他條件固體液體水、礦質(zhì)元素、維生素、蔗
4、糖、氨基酸、激素、瓊脂等葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素、動(dòng)物血清等植株快速繁殖脫毒植株的培人工種子生產(chǎn)藥物、殺蟲劑等轉(zhuǎn)基因植物的培育蛋白質(zhì)生物制品的生產(chǎn)皮膚移植材料的培育檢測有毒物質(zhì)生理、病理、藥理學(xué)研究植物幼嫩的部位或花藥等動(dòng)物胚胎或出生不久的幼齡動(dòng)物的器官或組織均為無菌操作,需要適宜的溫度、pH等條件4.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)的比較項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)培養(yǎng)基的物理性質(zhì)培養(yǎng)基的成分結(jié)果目的取材其他條件固體液體水、礦質(zhì)元素、維生素、蔗糖、氨基酸、激素、瓊脂等葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素、動(dòng)物血清等新的植株或組織新的細(xì)胞系或細(xì)胞株植株快速繁殖脫毒植株的培人工種子生產(chǎn)藥物、殺蟲劑等轉(zhuǎn)
5、基因植物的培育蛋白質(zhì)生物制品的生產(chǎn)皮膚移植材料的培育檢測有毒物質(zhì)生理、病理、藥理學(xué)研究植物幼嫩的部位或花藥等動(dòng)物胚胎或出生不久的幼齡動(dòng)物的器官或組織均為無菌操作,需要適宜的溫度、pH等條件1、概念(二) 動(dòng)物細(xì)胞核移植1、概念 將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞核,移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中,使其重組并發(fā)育成為一個(gè)新的胚胎,這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體(克隆動(dòng)物)。(二) 動(dòng)物細(xì)胞核移植2、分類胚胎細(xì)胞核移植:體細(xì)胞核移植:2、分類胚胎細(xì)胞核移植:體細(xì)胞核移植:細(xì)胞分化程度低,恢復(fù)全能性容易2、分類胚胎細(xì)胞核移植:體細(xì)胞核移植:細(xì)胞分化程度低,恢復(fù)全能性容易細(xì)胞分化程度高,恢復(fù)全能性不容易2、分類3體
6、細(xì)胞核移植過程卵細(xì)胞A母綿羊B母綿羊乳腺細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)細(xì)胞核細(xì)胞核移植早期胚胎卵裂C母綿羊子宮胚胎移植多莉羊分娩妊娠融合后的卵細(xì)胞1.核移植的受體細(xì)胞是什么?處在什么時(shí)期?思考2.通過什么手段激活受體細(xì)胞,構(gòu)建重組胚胎? 1.核移植的受體細(xì)胞是什么?處在什么時(shí)期?M中期卵母細(xì)胞思考2.通過什么手段激活受體細(xì)胞,構(gòu)建重組胚胎? 1.核移植的受體細(xì)胞是什么?處在什么時(shí)期?M中期卵母細(xì)胞誘導(dǎo)方法:物理或化學(xué)方法激活受體細(xì)胞,完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程。思考2.通過什么手段激活受體細(xì)胞,構(gòu)建重組胚胎? 4、體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景:在畜牧業(yè)中可以加速家畜遺傳改良的進(jìn)程保護(hù)瀕危物種醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域生產(chǎn)醫(yī)用蛋白質(zhì)及
7、組織器官的移植了解胚胎發(fā)育和衰老過程;追蹤研究疾病的發(fā)展過程和治療疾病細(xì)胞A細(xì)胞B雜種細(xì)胞(三) 動(dòng)物細(xì)胞融合細(xì)胞A細(xì)胞B雜種細(xì)胞物理法化學(xué)法(三) 動(dòng)物細(xì)胞融合細(xì)胞A細(xì)胞B雜種細(xì)胞物理法化學(xué)法(三) 動(dòng)物細(xì)胞融合滅活的病毒1.概念:2.結(jié)果:3.原理:4.誘導(dǎo)方式(三) 動(dòng)物細(xì)胞融合1.概念:2.結(jié)果:3.原理:4.誘導(dǎo)方式指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程。(三) 動(dòng)物細(xì)胞融合1.概念:2.結(jié)果:3.原理:4.誘導(dǎo)方式指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程。形成單核的雜交細(xì)胞(三) 動(dòng)物細(xì)胞融合1.概念:2.結(jié)果:3.原理:4.誘導(dǎo)方式指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程
8、。形成單核的雜交細(xì)胞細(xì)胞膜的流動(dòng)性(三) 動(dòng)物細(xì)胞融合1.概念:2.結(jié)果:3.原理:4.誘導(dǎo)方式指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程。形成單核的雜交細(xì)胞細(xì)胞膜的流動(dòng)性物理法:離心、振動(dòng)、電激(三) 動(dòng)物細(xì)胞融合1.概念:2.結(jié)果:3.原理:4.誘導(dǎo)方式指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程。形成單核的雜交細(xì)胞細(xì)胞膜的流動(dòng)性物理法:離心、振動(dòng)、電激化學(xué)法:聚乙二醇(PEG)(三) 動(dòng)物細(xì)胞融合1.概念:2.結(jié)果:3.原理:4.誘導(dǎo)方式指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程。形成單核的雜交細(xì)胞細(xì)胞膜的流動(dòng)性物理法:離心、振動(dòng)、電激化學(xué)法:聚乙二醇(PEG)生物法:滅活的病毒(三) 動(dòng)
9、物細(xì)胞融合5.意義:6. 應(yīng)用:5.意義:突破了有性雜交方法的局限,使遠(yuǎn)緣雜交(種間、屬間、科間、動(dòng)植物之間)成為可能。6. 應(yīng)用:5.意義:突破了有性雜交方法的局限,使遠(yuǎn)緣雜交(種間、屬間、科間、動(dòng)植物之間)成為可能。6. 應(yīng)用:成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段5.意義:突破了有性雜交方法的局限,使遠(yuǎn)緣雜交(種間、屬間、科間、動(dòng)植物之間)成為可能。6. 應(yīng)用:成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段特別是利用雜交瘤技術(shù)制造單克隆抗體7植物體細(xì)胞雜交與動(dòng)物細(xì)胞融合的比較項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合細(xì)胞融合原理細(xì)胞融合方法誘導(dǎo)手段用途7植物體細(xì)胞
10、雜交與動(dòng)物細(xì)胞融合的比較項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合細(xì)胞融合原理細(xì)胞融合方法誘導(dǎo)手段用途細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性7植物體細(xì)胞雜交與動(dòng)物細(xì)胞融合的比較項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合細(xì)胞融合原理細(xì)胞融合方法誘導(dǎo)手段用途細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性用纖維素酶、果膠酶去除細(xì)胞壁后,誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合用胰蛋白酶使細(xì)胞分散后,誘導(dǎo)細(xì)胞融合7植物體細(xì)胞雜交與動(dòng)物細(xì)胞融合的比較項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合細(xì)胞融合原理細(xì)胞融合方法誘導(dǎo)手段用途細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性用纖維素酶、果膠酶去除細(xì)胞壁后,誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合用胰蛋白酶使細(xì)胞分散后,誘導(dǎo)細(xì)胞融合離心、電刺激、振動(dòng)、顯微操作、聚乙二醇等誘導(dǎo)與植物體細(xì)
11、胞雜交相比,還可用滅活的病毒誘導(dǎo)7植物體細(xì)胞雜交與動(dòng)物細(xì)胞融合的比較項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合細(xì)胞融合原理細(xì)胞融合方法誘導(dǎo)手段用途細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性用纖維素酶、果膠酶去除細(xì)胞壁后,誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合用胰蛋白酶使細(xì)胞分散后,誘導(dǎo)細(xì)胞融合離心、電刺激、振動(dòng)、顯微操作、聚乙二醇等誘導(dǎo)與植物體細(xì)胞雜交相比,還可用滅活的病毒誘導(dǎo)克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙,擴(kuò)展雜交親本范圍,培育新品種制備單克隆抗體、病毒疫苗、干擾素等(四)單克隆抗體1、概念(四)單克隆抗體1、概念由單個(gè)B淋巴細(xì)胞經(jīng)過無性繁殖(克?。纬苫蛐拖嗤募?xì)胞群,這一細(xì)胞群所產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體稱為單克隆抗體。 2、制
12、備過程2、制備過程注射抗原2、制備過程注射抗原B淋巴細(xì)胞2、制備過程注射抗原B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞2、制備過程注射抗原B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞細(xì)胞融合、篩選2、制備過程注射抗原B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞細(xì)胞融合、篩選雜交瘤細(xì)胞2、制備過程注射抗原B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞細(xì)胞融合、篩選雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)2、制備過程注射抗原B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞細(xì)胞融合、篩選雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)篩選,繼續(xù)培養(yǎng)足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞群2、制備過程注射抗原B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞細(xì)胞融合、篩選雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)篩選,繼續(xù)培養(yǎng)足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞群2、制備過程注射抗原B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞細(xì)胞融合、篩選雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)篩
13、選,繼續(xù)培養(yǎng)足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞群2、制備過程體外培養(yǎng)注射抗原B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞細(xì)胞融合、篩選雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)篩選,繼續(xù)培養(yǎng)足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞群2、制備過程體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔注射抗原B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞細(xì)胞融合、篩選雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)篩選,繼續(xù)培養(yǎng)足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞群單克隆抗體2、制備過程體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔3、單克隆抗體的應(yīng)用單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn):特異性強(qiáng)、靈敏度高3、單克隆抗體的應(yīng)用單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn):特異性強(qiáng)、靈敏度高作為診斷試劑:準(zhǔn)確識別各種抗原物質(zhì),并與抗原特異性結(jié)合3、單克隆抗體的應(yīng)用單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn):特異性強(qiáng)、靈敏度高作為診斷試劑:準(zhǔn)確
14、識別各種抗原物質(zhì),并與抗原特異性結(jié)合優(yōu)點(diǎn):準(zhǔn)確、高效、簡易、快速3、單克隆抗體的應(yīng)用單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn):特異性強(qiáng)、靈敏度高作為診斷試劑:準(zhǔn)確識別各種抗原物質(zhì),并與抗原特異性結(jié)合用于運(yùn)載藥物:制成“生物導(dǎo)彈”治療疾?。褐饕糜诎┌Y治療優(yōu)點(diǎn):準(zhǔn)確、高效、簡易、快速3、單克隆抗體的應(yīng)用單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn):特異性強(qiáng)、靈敏度高作為診斷試劑:準(zhǔn)確識別各種抗原物質(zhì),并與抗原特異性結(jié)合用于運(yùn)載藥物:制成“生物導(dǎo)彈”治療疾?。褐饕糜诎┌Y治療優(yōu)點(diǎn):準(zhǔn)確、高效、簡易、快速優(yōu)點(diǎn):療效高、毒副作用小3、單克隆抗體的應(yīng)用易錯(cuò)點(diǎn)辨析1.容易混淆的三種細(xì)胞雜種細(xì)胞、重組細(xì)胞和雜交細(xì)胞易錯(cuò)點(diǎn)辨析1.容易混淆的三種細(xì)胞雜種細(xì)胞、重
15、組細(xì)胞和雜交細(xì)胞(1)雜種細(xì)胞:植物體細(xì)胞雜交過程中,兩種細(xì)胞去掉細(xì)胞壁之后形成的原生質(zhì)體融合,融合的原生質(zhì)體形成細(xì)胞壁之后形成的細(xì)胞叫雜種細(xì)胞。易錯(cuò)點(diǎn)辨析1.容易混淆的三種細(xì)胞雜種細(xì)胞、重組細(xì)胞和雜交細(xì)胞(1)雜種細(xì)胞:植物體細(xì)胞雜交過程中,兩種細(xì)胞去掉細(xì)胞壁之后形成的原生質(zhì)體融合,融合的原生質(zhì)體形成細(xì)胞壁之后形成的細(xì)胞叫雜種細(xì)胞。(2)重組細(xì)胞:體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核卵母細(xì)胞之后形成的細(xì)胞叫重組細(xì)胞。易錯(cuò)點(diǎn)辨析1.容易混淆的三種細(xì)胞雜種細(xì)胞、重組細(xì)胞和雜交細(xì)胞(1)雜種細(xì)胞:植物體細(xì)胞雜交過程中,兩種細(xì)胞去掉細(xì)胞壁之后形成的原生質(zhì)體融合,融合的原生質(zhì)體形成細(xì)胞壁之后形成的細(xì)胞叫雜種細(xì)胞。
16、(2)重組細(xì)胞:體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核卵母細(xì)胞之后形成的細(xì)胞叫重組細(xì)胞。(3)雜交細(xì)胞:動(dòng)物細(xì)胞融合形成的細(xì)胞常稱為雜交細(xì)胞。2.植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合的結(jié)果及原理(1)植物體細(xì)胞雜交過程: 結(jié)果:原理:2.植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合的結(jié)果及原理(1)植物體細(xì)胞雜交過程: a.植物細(xì)胞融合;b.雜種細(xì)胞的植物組織培養(yǎng)。結(jié)果:原理:2.植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合的結(jié)果及原理(1)植物體細(xì)胞雜交過程: a.植物細(xì)胞融合;b.雜種細(xì)胞的植物組織培養(yǎng)。結(jié)果:形成雜種植株,產(chǎn)生了一個(gè)生物體。原理:2.植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合的結(jié)果及原理(1)植物體細(xì)胞雜交過程: a.植物細(xì)胞融合;b.雜
17、種細(xì)胞的植物組織培養(yǎng)。結(jié)果:形成雜種植株,產(chǎn)生了一個(gè)生物體。原理:細(xì)胞膜的流動(dòng)性和細(xì)胞的全能性。(2)動(dòng)物細(xì)胞融合結(jié)果:原理:(2)動(dòng)物細(xì)胞融合結(jié)果: 動(dòng)物細(xì)胞融合形成雜交細(xì)胞,雜交細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),獲得大量的克隆細(xì)胞,但沒有形成生物體。原理:(2)動(dòng)物細(xì)胞融合結(jié)果: 動(dòng)物細(xì)胞融合形成雜交細(xì)胞,雜交細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),獲得大量的克隆細(xì)胞,但沒有形成生物體。原理: 細(xì)胞增殖和細(xì)胞膜的流動(dòng)性,不包含細(xì)胞全能性。3.克隆動(dòng)物與試管動(dòng)物認(rèn)識的誤區(qū)(1)誤區(qū)一:試管動(dòng)物與克隆動(dòng)物的產(chǎn)生都是無性生殖。(2)誤區(qū)二:試管動(dòng)物(哺乳類)的產(chǎn)生是在體外進(jìn)行的,克隆動(dòng)物(哺乳類)的產(chǎn)生是在體內(nèi)進(jìn)行的。3.克隆動(dòng)物與試管動(dòng)物認(rèn)識的誤區(qū)(1)誤區(qū)一:試管動(dòng)物與克隆動(dòng)物的產(chǎn)生都是無性生殖。糾正:試管動(dòng)物的產(chǎn)生是有性生殖,克隆動(dòng)物的產(chǎn)生是無性生殖。(2)
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