黃地吉仙片中金絲桃苷含量測定方法的建立4700字

1、黃地吉仙片中金絲桃苷含量測定方法的建立4700字 摘要 目的 為了進步黃地吉仙片的質量標準，建立高效液相色譜法HPLC測定其菟絲子含量，并對其進展重金屬及砷鹽的檢查。 方法 色譜柱Symmetry C185 m，6 mm150 mm；流動相：乙腈-0.1%磷酸水1882；流速：1.0 mL/min；檢測波長：353 nm；進樣量10 L。參考?中國藥典?2022年方法對重金屬、砷鹽進展雜質限量檢查。 結果 金絲桃苷在2.0100.0 g/mL范圍內，與峰面積呈良好的線性關系R2 = 0.9998，平均回收率為75.61%。重金屬小于百萬分之十，砷鹽小于百萬分之二，與?中國藥典?2022年對中藥

2、制劑重金屬、砷鹽的要求相符。 結論 HPLC測定金絲桃苷含量方法簡便，靈敏度高，重復性好，可用于黃地吉仙片中金絲桃苷的含量測定；黃地吉仙片的重金屬、砷鹽檢查符合要求，為臨床用藥平安提供了根據。 畢業(yè)關鍵詞 黃地吉仙片；金絲桃苷；高效液相色譜法；含量；重金屬；砷鹽中圖分類號 R285.5 文獻標識碼 A 文章編號 1673-7210202201c-0122-04Abstract Objective To improve the quality standard of Huangdi Jixian Tablets， high performance liquid chromatography HP

3、LC method was established to detect the contents of hyperin and the contents of heavy metal and arsenic salt in Huangdi Jiexian Tablets were detected. Methods Symmetry C18 5 m， 6 mm150 mm column was used. The mobile phase contained acetonitrile and 0.1% phosphoric acid 1882. The flow rate was 1.0 mL

4、/min and the detection wavelength was 353 nm. The injection volume was 10 L. In addition， the impurity of heavy metal and arsenic salt was also detected according to Chinese Pharmacopoeia 2022. Results Within the range from 2.0 to 100.0 g/mL， hyperin presented an ideal linear relationship with the p

5、eak areas R2 = 0.9998. The average recovery rate was 75.61%. Heavy metal was less than 10 parts per million and arsenic salt was less than 2 parts per million. These results conformed to the requirements of Chinese Pharmacopoeia 2022. Conclusion HPLC method for determining the content of hyperin is

6、simple， with high sensitivity and good repeatability， which can be used for the content determination of hyperin in Huangdi Jixian Tablets. The contents of heavy metal and arsenic salt are conformed to the requirement， which provides evidence for the safety of clinical medication.Key words Huangdi J

7、ixian Tablets； Hyperin； High performance liquid chromatography； Content； Heavy metal； Arsenic salt?S地吉仙片為成都軍區(qū)昆明總醫(yī)院以下簡稱“我院研發(fā)的醫(yī)院制劑，由人參、熟地、菟絲子、蒼術、雞血藤等藥材制成，具有健脾補腎、益氣養(yǎng)陰、活血化瘀、降糖消脂的成效，運用于非胰島素依賴型糖尿病，并可用于胰島素依賴型糖尿病的輔助治療。經臨床使用多年，有顯著的效果及良好的平安性。原制劑質量標準中僅對君藥玄參、人參、佐藥大黃和使藥黃連、黃芪進展了薄層鑒別，無含量測定項，因此為更好地控制本制劑質量，現(xiàn)對黃地吉仙片的原

8、質量標準進展完善，參考相關文獻1-10，采用高效液相色譜法HPLC測定菟絲子中金絲桃苷的含量。經方法學驗證，說明其方法簡便，重復性好，靈敏度高。參照?中國藥典?2022年版11重金屬檢查法和砷鹽檢查法及相關文獻12-20，對黃地吉仙片進展重金屬及砷鹽的檢查研究，以理解其重金屬及砷鹽是否超標，為臨床用藥的平安提供根據。1 儀器與試藥WATERS高效液相色譜儀2695-2487，美國waters；電子天平BP121S，德國賽多利斯；超聲機SY1200-T，上海聲源超聲波儀器設備；密理博純水機Z00QSV001，德國默克密理博。鹽酸小檗堿中國食品藥品檢定研究院，110713-202212，含量86.

9、7%；金絲桃苷中國食品藥品檢定研究院，111521-202206，含量92.5%；甲醇、磷酸為分析純；乙腈為色譜純；硝酸鉛分析純；酚酞指示劑；硫酸分析純；硝酸分析純；鹽酸分析純；醋酸鹽緩沖液pH=3.5；標準砷貯備液100 g/mL；三氧化二砷分析純；氫氧化鈣分析純；碘化鉀分析純；氯化亞錫分析純；黃地吉仙片我院消費，批號：150601、150602、150603。 2 方法與結果2.1 含量測定2.1.1 色譜條件色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動相為乙腈-0.1%磷酸水1882；檢測波長為353 nm。理論板數(shù)按金絲桃苷峰計應不低于5000。2.1.2 樣品制備2

10、.1.2.1 對照品溶液的制備 取對照品金絲桃苷適量，精細稱定，用甲醇制成每1 mL含30 g的溶液，即得。2.1.2.2 供試品溶液的制備 取本品，研細，精細稱定6 g，加80%甲醇50 mL，稱重，超聲處理功率250 W，頻率40 kHz1 h，放冷，稱定重量，80%甲醇補足減少的重量，搖勻，濾過，續(xù)濾液用0.45 m的微孔濾膜濾過，即得。2.1.2.3 陰性對照溶液的制備 取不含菟絲子的陰性樣品按“1.2.2.2同法制備。2.1.2.4 檢測波長的選擇 將金絲桃苷對照品溶液100 g/mL在200400 nm下全掃，254.1 nm及353.2 nm有最大吸收。又因在353 nm下樣品的

11、干擾峰最小，所以最終確定掃描波長為353 nm。與?中國藥典?2022年版11菟絲子項下一致。2.1.3 專屬性試驗取陰性對照樣品照含量測定方法進展試驗，色譜圖見圖1。結果說明，在對照品主峰相應位置上陰性對照樣品無色譜峰，樣品與對照品主峰保存時間一致，說明該項檢測專屬性良好。2.1.4 線性關系考察精細稱定適量金絲桃苷對照品，用甲醇配置成2.0、5.0、10.0、20.0、50.0、100.0 g/mL的對照品溶液，注入高效液相色譜儀，進展含量測定。以峰面積A為縱坐標Y，金絲桃苷的濃度g/mL為橫坐標X，繪制標準曲線，得到回歸方程：Y = 20455X + 31 162，R2 = 0.9998

12、。結果顯示，黃地吉仙片金絲桃苷含量在2.0100.0 g/mL范圍內線性關系良好。2.1.5 精細度試驗取濃度為20 g/mL的金絲桃苷對照品溶液連續(xù)測定6次，結果見表1。結果RSD%為0.24%，小于2%。說明該法精細度良好。2.1.6 重復性試驗取同一批號150601樣品6份，按照“1.2.2.2項下供試品制備方法制備測定，結果見表2。RSD為0.83%，小于2%。說明該法重復性良好。2.1.7 加樣回收試驗精細稱取同一批150601樣品6份，分別參加一定量的金絲桃苷對照品，按照“1.2.2.2項下供試品溶液制備方法制備，各取10 L進樣，計算加樣回收率，結果見表3，金絲桃苷的平均回收率為

13、75.61%，RSD%為2.69%，說明該方法較準確可靠。2.1.8 穩(wěn)定性試驗取供試品溶液150601，分別在0、2、4、6、8 h進樣，記錄峰面積。結果峰面積平均值為433 579，RSD為0.42%。說明供試品溶液在8 h內穩(wěn)定。2.1.9 含量測定取3批樣品，每批樣品平行制樣2份進展含量測定，結果見表4。2.2 重金屬及砷鹽檢查2.2.1 檢測方法參照?中國藥典?2022年版11一部附錄重金屬檢查法IXE、砷鹽檢查法IXF，進展三批樣品中重金屬和砷鹽的測定，并按測定方法制備儀器空白溶液及試劑，分別按照上述重金屬、砷鹽的檢查方法進展陰性空白樣品的測定。2.2.2 樣品測定2.2.2.1

14、重金屬檢查 取3批樣品，按上述方法測定，供試品溶液、空白對照溶液的顏色均比對照品溶液淺，測定結果見表5。2.2.2.2 砷鹽檢查 取3批樣品，按上述方法測定，供試品及空白對照樣品的砷斑顏色均比標準砷斑淺，測定結果見表6、圖2。3 討論3.1 金絲桃苷的含量測定從3批樣品測定結果看，含量最高為0.1594 mg/g，最低為0.1538 mg/g，平均值為0.1570 mg/g。本品每片重0.3 g，因此，將本品的金絲桃苷含量定為每片不得少于0.3 g0.1570 mg/g80%=0.03768 mg。本品每片含菟絲子以金絲桃苷計C21H20O12，不得少于0.03 mg。在含量測定中，對流動相乙

15、腈-0.1%磷酸水的不同比例進展了考察，結果以乙腈-0.1%磷酸水1882為最正確，基線平穩(wěn)，金絲桃苷的色譜峰別離最好，峰形最好。在質量標準提升過程中，首先對君藥人參進展了人參皂苷Re、人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1的含量測定研究。實驗結果說明，在對照品出峰?，陰性樣品有干擾，因此將人參的含量測定排除，進展了菟絲子中金絲桃苷的研究。3.2 重金屬及砷鹽的檢查研究中藥新藥制劑假設重金屬10 ppm，砷鹽2 ppm，可以不收入質量標準中20。因此未將此局部列入黃地吉仙片的質量標準中。中藥重金屬及砷鹽的質量控制在種植、制劑、炮制加工、貯藏與運輸?shù)热^程都應重視。近些年來，環(huán)境污染越來越嚴重，要控制好

16、中藥及其成方制劑的重金屬及砷鹽等超標的情況，須從源頭抓起，因此我院在中藥自制制劑的原材料采購時嚴把關，并從輔料、消費、運輸?shù)榷鄠€環(huán)節(jié)控制，保證制劑的質量和平安。參考文獻1 鄭一敏，胥秀英，楊艷紅，等.HPLC測定菟絲子中金絲桃苷與槲皮苷的含量J.華西藥學雜志，2022，203：261-262.2 孫笑宇，程序，賈天柱.HPLC法優(yōu)選不同產地菟絲子J.中國現(xiàn)代藥物應用，2022，713：221-223. 3 田雨霏，劉嬌，李晉，等.高效液相色譜法測定菟絲子中綠原酸、對-香豆酸和金絲桃苷的含量J.天津中醫(yī)藥大學學報，2022，336：372-374.4 李懷國，葉家宏，李子鴻，等.HPLC法同時測

17、定菟絲子中5種成分的含量J.中藥新藥與臨床藥理，2022，251：64-67.5 韓霖，劉研如，楊建云，等.貫葉連翹提取物中金絲桃苷含量的RP-HPLC法測定J.時珍國醫(yī)國藥，2022，2310：2432-2434.6 李秋莉，劉艷芳，閆夢曉，等.不同工藝炮制酒菟絲子時4種主要活性成分動態(tài)變化J.中國藥師，2022，1910：1882-1884.7 周華春，周仲霞.HPLC同時測定菟絲子不同炮制品中5種主要活性成分含量J.世界中醫(yī)藥，2022，10A01：78-79.8 劉艷芳，姚惠鳳，陳文舉，等.不同炮制工藝鹽菟絲子中4種黃酮類成分的定量分析J.中國藥房，2022，2715：2128-213

18、0.9 雷昌，孟盼，謝瑜，等.HPLC法同時測定百事樂膠囊中5種成分的含量J.中藥材，2022，401：143-146.10 沙拉麥提?艾力，王亞麗.菟絲草質量標準研究J.中國藥事，2022，315：501-505.11 國家藥典委員會.中國藥典S.一部.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2022.12 李敏，劉渝，周睿，等.國內外有關中藥中重金屬和砷鹽的限量標準及分析J.時珍國醫(yī)國藥，2022，1811：2859-2860.13 韓潔，鄒金凱.含重金屬元素中藥制劑的平安性討論J.中華中醫(yī)藥雜志，2022，308：2665-2666.14 元偉，張皓.風熱感冒顆粒重金屬、砷鹽檢查方法研究J.北方藥學，2022，98：10-11.15 戴筱瑛，?娟華，劉良玉，等.舒筋活血丸中重金屬與砷鹽檢查J.江西中醫(yī)藥，2