簡答(分子生物學(xué))

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上專心-專注-專業(yè)專心-專注-專業(yè)精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上專心-專注-專業(yè)L111. 如何理解結(jié)構(gòu)決定功能(通過2個以上實例說明)12. 互補測驗的原理及用途。 順反試驗，測定兩個基因突變作用方式的遺傳學(xué)試驗，即互補測驗。通過測驗可確定兩個表型效應(yīng)相似的突變位點是否位于同一個順反子或基因內(nèi)。L27. The specificity determines the blood group for human (illustrate by example) 決定人類血型的特異性（舉例闡述）基因座可能會有不止一條野生型等位基因，即基因座可能會有等位基

2、因的多態(tài)分布，而無任何一條等位基因可以被認為是野生型的。在任何一個遺傳位點上并非一定要有一個野生型基因。ABO血型基因座編碼半乳糖基轉(zhuǎn)移酶，其特異性決定了血型的差別。 功能缺失可由空白型表示，即O型。但是功能性的A型和B型是共顯性的，并且對O型表現(xiàn)出顯性。在所有的個體中都產(chǎn)生O型或者H型抗原，它們含有特殊的碳水化合物基團連接到蛋白質(zhì)。ABO等位基因編碼一種半乳糖基轉(zhuǎn)移酶，能夠在O抗原加上糖基，其特異性決定了血型。A、B等位基因表達相應(yīng)的轉(zhuǎn)移酶并利用相應(yīng)的碳水化合物輔因子產(chǎn)生了A、B抗原，O等位基因無法表達產(chǎn)生轉(zhuǎn)移酶，因此O抗原沒有發(fā)生修飾。A和B都不能被認為是野生型的，因為他們表達出一種功能，

3、而沒有存在功能缺失或者新功能的產(chǎn)生。這種現(xiàn)象，即一個群體中存在多條功能型等位基因，被稱為多態(tài)性L3Conservation of exons and its application（外顯子的保守性及其作用）L4非互補粘性末端DNA分子間的連接方式；1經(jīng)過專門作用于單鏈DNA的Sl核酸酶處理變成平末端之后，可以使用T4 DNA連接酶進行有效連接。2使用附加銜接物or附加接or同聚物加尾技術(shù)的辦法提高平末端間的連接作用的效率L5蛋白質(zhì)組學(xué)研究中所用方法及原理 二維電泳（2ED）試說明每個等位基因具有不同的表型（舉例）限制性位點 孟德爾遺傳定律人類基因組數(shù)目與蛋白質(zhì)組關(guān)系人類基因組的數(shù)目約為3.31

4、09bp，約含有30004000條基因，而人類蛋白質(zhì)組約有5000060000個蛋白質(zhì)成員1）基因表達是不連續(xù)，且受外部環(huán)境影響，存在時間和空間的表達差異。2）存在可變剪切,所以基因的總數(shù)比潛在的蛋白質(zhì)數(shù)目少.L612.動物可以從植物中得到營養(yǎng)的原因。植物可以通過光合作用固定空氣中的CO2，形成葡萄糖等有機物，由于Rubisco的存在，經(jīng)過一系列反應(yīng)，可以把CO2 轉(zhuǎn)變?yōu)榱姿岣视退岬男问剑缓笤诒黄渌缸兂烧崽堑扔袡C物，供植物使用。動物不能固定空氣中的CO2，但動物可以通過食用植物而得到有機物（蛋白質(zhì)、糖類等營養(yǎng)物質(zhì)），并消化利用。L7 and L8To illustrate the deve

5、lopmental control via example. (via globin) 珠蛋白四聚體由兩條相同的 a 鏈和b 鏈構(gòu)成，而胚胎血細胞包含的珠蛋白四聚體與成體中的形式不同，其每個四聚體包含兩條相同的類a 和類b 珠蛋白鏈，每一條都與成體中的肽鏈相關(guān)，并在稍后被其取代。隨著連續(xù)的不同基因的開關(guān)，在不同時期，不同的基因產(chǎn)物會執(zhí)行相同的功能。 Unequal crossing-over can result in what results? 不等交換可以改變基因數(shù)目。如果一條染色體上的基因1與另一條染色體上的基因2 配對，則其他基因拷貝就無法配對。錯配基因間的重組就產(chǎn)生了一條有單一(重組

6、）基因拷貝的染色體和一條有三份基因拷貝（包括兩條來自親本的和一條來自重組的）的染色體。地中海DNA fingerprinting：（DNA指紋分析技術(shù)）使用限制性內(nèi)切酶切割每個個體的、含有短重復(fù)序列的區(qū)域后所產(chǎn)生的片段， 通過分析這些片段的異同而得到個體間的遺傳關(guān)系。因為這些片段對于每個個體都是唯一的，任何兩個個體之間所存在的這樣的特殊片段可以用來定義他們之間的遺傳關(guān)系(如父親-孩子之間的遺傳關(guān)系。What is 5-FU? How does 5-FU affect the DNA synthesis? 5-FU：5-氟尿嘧啶。胸苷酸合成酶抑制藥，是尿嘧啶5位上的氫被氟取代的衍生物。5-FU在

7、細胞內(nèi)轉(zhuǎn)變?yōu)?-氟尿嘧啶脫氧核苷酸（5F-dUMP），而抑制脫氧胸苷酸合成酶，阻止脫氧尿苷酸（dUMP）甲基化轉(zhuǎn)變?yōu)槊撗跣剀账幔╠TMP），從而影響DNA的合成。此外，5-FU 在體內(nèi)可轉(zhuǎn)化為5-氟尿嘧啶核苷，以偽代謝產(chǎn)物形式摻入RNA中干擾蛋白質(zhì)的合成，故對其他各期細胞也有作用。The “adapter” is transfer RNA (tRNA)，why.1. 它代表唯一的氨基酸，并與其共價相連2. 它包含了一個三核苷酸反密碼子序列，使tRNA 通過堿基互補配對原則識別密碼子。比較三種RNA的結(jié)構(gòu)及功能。mRNA是信使RNA，一般為單鏈狀，在原核生物中不需要加工修飾，直接用于蛋白質(zhì)翻譯，

8、轉(zhuǎn)錄翻譯同時進行形成多聚核糖體，一條mRNA上翻譯多種蛋白質(zhì)。真核生物中，前體mRNA 5端形成帽子結(jié)構(gòu)、3端加上poly(A)尾巴、拼接除去內(nèi)含子、鏈內(nèi)核苷酸一系列加工修飾后翻譯。一般一條mRNA只翻譯一種蛋白質(zhì)。rRNA是核糖體RNA，它組成了核糖體兩個大小亞基，在真核生物核糖體中40S小亞基含有一條18S rRNA，60S大亞基含28S rRNA、5S rRNA和5.8S rRNA。在原核生物核糖體中30S小亞基含一條16S rRNA，50S大亞基含23S rRNA 和5S rRNA。rRNA主要作用是參與蛋白質(zhì)的合成。tRNA是轉(zhuǎn)運RNA，它在蛋白質(zhì)合成中具有轉(zhuǎn)運氨基酸和識別密碼子的作

9、用。它的二級結(jié)構(gòu)是三葉草型，由氨基酸接受臂、反密碼子環(huán)、D環(huán)、TC環(huán)和額外環(huán)組成。它的三級結(jié)構(gòu)為倒L型結(jié)構(gòu)。Whats its function of poly (A) and how to use it in experimentsL9To compare the process of protein synthesis for prokaryotic and eukaryotic.（比較原核和真核翻譯過程）3. What different features have for the initiator tRNA?fMettRNA作為tRNA 起始子，不同于其他tRNA的特點是1）攜帶一個

10、氨基基團被甲?；募琢虬彼?，稱為氨甲酰甲硫氨酰tRNA。2)tRNA 氨基酸臂末端的幾個面對面的堿基在fMettRNAf 中是不配對的，此位置的不配對堿基能阻止該tRNA 參與延伸，而且這種不配對特性也是甲?；磻?yīng)所需的。3)在反密碼子環(huán)前面的臂上存在一系列3個GC堿基對，它是tRNAfMet所特有的，這些堿基對是fMettRNAf直接插入到P位所必需的。 4. What is Tu-Ts cycle?延伸因子EFTs可以將EF-Tu-GDP轉(zhuǎn)化為EF-Tu-GTP，使其繼續(xù)參與肽鏈延伸，就構(gòu)成了一個Tu-Ts循環(huán)。具體過程是：EF-Ts將GDP移走結(jié)合形成EF-Tu-EF-Ts，然后GTP替

11、換EF-Ts后形成EF-Tu-GTP，該活化的二元復(fù)合體能與氨酰-tRNA結(jié)合，釋放EF-Ts.5. How to demonstrate that inhibiting one step in protein synthesis blocks the next step for kirromycin? (證明在蛋白質(zhì)合成過程中黃色霉素對第一步的阻斷會使下一步合成被阻斷。)黃色霉素是抑制EFTu 作用的抗生素，當(dāng)EFTu 被黃色霉素結(jié)合后，它仍可使氨酰tRNA 結(jié)合到A 位。但EFTu * GDP 復(fù)合體不能從核糖體中釋放，阻止肽酰tRNA 與氨酸 tRNA 間形成肽鍵。結(jié)果，核糖體停滯在mR

12、NA 上，使蛋白質(zhì)合成終止。6. How to reveal the nature of the transfer reaction via the antibiotic puromycin? (嘌呤霉素是如何抑制蛋白質(zhì)的合成)嘌呤霉素的結(jié)構(gòu)類似于氨酰tRNA。該抗生素進入核糖體后，肽酰tRNA 的肽鏈將被轉(zhuǎn)移到嘌呤霉素的氨基基團上。嘌呤霉素不能與核糖體A 位結(jié)合，所以多肽酰嘌呤霉素合成物以多肽酰嘌呤霉素的形式從核糖體上放出，蛋白質(zhì)合成在成熟之前被終止帽子0，帽子1如何加上去的以及其功能作用L10The stability of peptidyl-tRNA is higher than of

13、aminoacyl-tRNA，why?16S rRNA與P位上的tRNA 比A位上的tRNA有更多的接觸，這可能是肽酰-tRNA比氨酰-tRNA具有更高穩(wěn)定性的原因。一旦tRNA到達P位，核糖體就已經(jīng)認為它是被正確結(jié)合的，而它在A位時，還處于評估這個結(jié)合是否正確階段。How to inhibit the process of the protein synthesis at particular stages by using antibiotics?（抗生素如何在蛋白質(zhì)合成的特殊階段抑制其合成）一些抗生素作用于單一的核糖體蛋白，而另一些作用于rRNA 。鏈霉素能與小亞基的S12蛋白結(jié)合，抑制

14、蛋白質(zhì)的合成。而突變體的S12蛋白失去了與鏈霉素結(jié)合的特性，從而表現(xiàn)出對鏈霉素的抗性。目前已通過這類方法選擇出5種小亞基蛋白質(zhì)和4種大亞基蛋白質(zhì)的突變體。利用這些突變體可以研究有關(guān)的核糖體蛋白質(zhì)的功能。How to process the 3 end and the the 5 end of a tRNA?在大腸桿菌中核酸內(nèi)切酶首先引發(fā)前體下游的裂解反應(yīng)，幾個核酸外切酶隨之沿3 到5 方向降解前體，修剪3 端。在真核生物中，這個反應(yīng)也是由多個酶來完成的。這個過程形成了3 端加上CCA 的tRNA 。tRNA 3 端通過切割、修整，再加上CCA而成；5 端由切割產(chǎn)生。Inosine can pa

15、ir with any of U, C, and A，why?次黃嘌呤核苷酸常存在于有嘌呤生物合成途徑的細胞中，依靠RNA中對A的修飾而成的。對A的修飾還包括許多復(fù)雜基團的加人。它通常出現(xiàn)在反密碼子的第一位，能同U、C和A中的任何一種堿基配對。To illustrate missense suppressors completed with wild-type.反密碼子為CCU的tRNA攜帶甘氨酸，當(dāng)它突變?yōu)閁CU時依舊攜帶甘氨酸。這時正常的UCU的tRNA攜帶精氨酸，突變的tRNA攜帶甘氨酸，兩種tRNA相互競爭與突變后密碼子為AGA的mRNA結(jié)合。當(dāng)突變的tRNA攜帶甘氨酸與突變的mRNA

16、結(jié)合時，二次突變正好相互抵消，使翻譯正常進行。如何證明16S rRNA3端的作用。L11The signal sequence provides what between the ribosomes and the membrane.（信號序列提供給核糖體能結(jié)合在膜上的必要聯(lián)系）游離的核糖體與膜結(jié)合核糖體沒有本質(zhì)的區(qū)別。核糖體開始合成蛋白質(zhì)時并不知曉其到底是在細胞質(zhì)內(nèi)合成或是轉(zhuǎn)運到膜上合成，信號肽的合成引發(fā)了核糖體與膜的結(jié)合。Explain the nuclear pores are used for both import and export of material.細胞核與細胞質(zhì)間的運輸

17、以兩個方向進行。由于所有的蛋白質(zhì)都在細胞質(zhì)中合成，所以細胞核內(nèi)需要的蛋白質(zhì)必須從細胞質(zhì)轉(zhuǎn)運；因為所有的RNA 都在細胞核內(nèi)合成，所以細胞質(zhì)所有的RNA必須由細胞核內(nèi)運出。核孔負責(zé)這些物質(zhì)的輸入及輸出。The function and mechanism of ubiquitin.（泛素的功能與作用機理）泛素能標記需要分解掉的蛋白質(zhì)，使其被水解。當(dāng)附有泛素的蛋白質(zhì)移動到桶狀的蛋白酶的時候，蛋白酶就會將該蛋白質(zhì)水解。泛素也可以標記跨膜蛋白，如受體，將其從細胞膜上除去。泛素的作用機理：泛素共價地結(jié)合于蛋白質(zhì)的賴氨酸殘基，之后被特異性地識別并迅速降解，泛素的這種標記作用是非底物特異性的。How doe

18、s rho factor work?因子是rho基因編碼的蛋白質(zhì)，活性形式為六聚體。具有促進轉(zhuǎn)錄終止的活性和NTPase活性，因子結(jié)合正在合成中的RNA鏈的5末端，利用水解NTP放出的能量從5向3方向移動，而RNA聚合酶在終止子處的較長時間的延宕給予因子以追趕的機會。然后因子便與RNA聚合酶相互作用而造成轉(zhuǎn)錄的終止，之后RNA聚合酶和因子游離。轉(zhuǎn)錄受阻停止后體系能否再恢復(fù)繼續(xù)轉(zhuǎn)錄以及所使用機制是什么。L12 and L13The E. coli tryptophan operon is controlled by attenuation，describe its mechanism pleas

19、e.(大腸桿菌色氨酸操縱子由衰減作用調(diào)控，簡述其機理。)在色氨酸操縱子的前導(dǎo)區(qū)有一個由14 個密碼子組成的可讀框，衰減子處的RNA結(jié)構(gòu)取決于這個讀框是否被翻譯。當(dāng)存在色氨酸時，核糖體能夠合成前導(dǎo)肽，這一過程從mRNA 的前導(dǎo)區(qū)開始，一直延續(xù)到1區(qū)和2 區(qū)之間的UGA 密碼子。核糖體延伸覆蓋了2 區(qū)，并阻止其進行堿基配對，結(jié)果使得3 區(qū)可以與4 區(qū)配對，產(chǎn)生終止子發(fā)夾結(jié)構(gòu)。此時，RNA 聚合酶就會在衰減子處停止。當(dāng)不存在色氨酸時，核糖體停在1 區(qū)內(nèi)的色氨酸密碼子處，1 區(qū)就不能與2 區(qū)配對，2區(qū)和3區(qū)可以在4區(qū)還未被轉(zhuǎn)錄之前進行配對，于是4 區(qū)只能保持單鏈狀態(tài)。無法形成終止子發(fā)夾結(jié)構(gòu)，RNA 聚

20、合酶就繼續(xù)轉(zhuǎn)錄越過衰減子。Antisense RNA offers a powerful approach for turning off genes at will，give an example please. （反義RNA提供了一種高效的按意愿關(guān)閉基因功能的方法，舉例子）反義RNA 可以通過反向與啟動子一致的基因方向而產(chǎn)生，能夠與野生型轉(zhuǎn)錄物復(fù)性配對形成雙鏈體RNA，反義RNA 處于自身受調(diào)控的啟動子的控制之下，這樣便可以通過調(diào)控反義RNA 的產(chǎn)物量來控制靶基因的開和關(guān)，使得我們進而可以研究靶基因表達的時相重要性。Whats RNAi? Give an example please. R

21、NA silencingRNA干擾，為了消除或減少目標基因的活性而將雙鏈RNA被注入細胞，利用與雙鏈RNA序列的互補從而使相關(guān)基因的mRNA降解。RNA silencing（RNA沉默）描述雙鏈RNA在植物中的雙鏈RNA系統(tǒng)抑制相關(guān)基因的表達。The cll and clll genes are needed to establish lysogeny，why?(為什么cll 和 clll是建立溶源態(tài)所必須的？)RNA 聚合酶在啟動子 PRE 上起始轉(zhuǎn)錄需要遲早期基因產(chǎn)物C 和C。1）C蛋白在體內(nèi)非常不穩(wěn)定，會被宿主內(nèi)的HflA蛋白降解，需要C 蛋白保護。2）啟動子PRE有一個較弱的-10 區(qū)啟動子序列，也缺少-35 區(qū)的共有序列，因此對c蛋白具有依賴性。c 蛋白結(jié)合-35 區(qū)附近序列后，RNA 聚合酶才能結(jié)合啟動子PRE