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實驗十五:需氧革蘭陽性桿菌1實驗?zāi)康恼莆仗烤已挎邨U菌和蠟樣芽孢桿菌的形態(tài)、菌落特點和常用鑒定試驗。掌握白喉棒狀桿菌的培養(yǎng)特點及形態(tài)特征,熟悉常用染色方法(ALBERT染色法)。2實驗內(nèi)容炭疽桿菌:1、GS:+大桿菌,呈矩形,短鏈狀或竹節(jié)狀,陳舊培養(yǎng)物上可見芽孢.2、菌落形態(tài):粗糙,灰白色,邊緣不整齊,低倍鏡下直接觀察卷發(fā)狀菌落,或看卷發(fā)狀菌落示教片。3、串珠試驗:將新鮮炭疽桿菌肉湯培養(yǎng)物用棉簽均勻涂布于血平板上,干后貼5-6張青霉素藥敏紙片,35C孵育2小時左右,用接種環(huán)在紙片周邊盲目刮取培養(yǎng)物(注意不可刮到瓊脂)進行涂片,注意涂片范圍小些,盡量涂厚些,涂片固定后進行GS,可見炭疽桿菌因細(xì)胞壁受損,菌體膨大形成串珠樣。34蠟樣芽孢桿菌1、GS:+大桿菌,兩端鈍圓.6小時后可見小于菌體的圓形芽孢.2、菌落形態(tài):直接觀察在卵黃瓊脂平板上的菌落,圓形突起,表面粗糙有蠟光,不透明。3、乳光反應(yīng):蠟樣芽孢桿菌能產(chǎn)生卵磷脂酶,在有鈣離子存在時,能迅速分解培養(yǎng)基中的卵磷脂,生成甘油酯和水溶性磷脂酰膽堿,在菌落周圍出現(xiàn)乳白色混濁環(huán),稱乳光反應(yīng)或卵黃反應(yīng)。一般3小時即可觀察結(jié)果。5白喉棒狀桿菌1、觀察白喉棒狀桿菌在雞蛋斜面上的菌落表現(xiàn)。2、GS3、Albert染色:最為常用的異染顆粒染色法。涂片干燥固定后,滴加甲液染10分鐘,水洗,滴加乙液染5分鐘,水洗,吸干水分后油鏡下觀察
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