實(shí)驗(yàn)七實(shí)驗(yàn)七維生素C定量測定26二氯酚靛酚法

1、實(shí)驗(yàn)七維生素C的定量測定-2，6-二氯酚靛酚法 一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩?、?shí)驗(yàn)原理 三、器材儀器和主要試劑四、實(shí)驗(yàn)操作五、思考題1 一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康膹氖称吩系忍崛【S生素C、脫色 2,6-二氯酚靛酚鈉(藍(lán)色)滴定、計(jì)算 2二、實(shí)驗(yàn)原理 染料2,6二氯靛酚的顏色反應(yīng)表現(xiàn)兩種特性,一氧化還原狀態(tài),氧化態(tài)為深藍(lán)色,還原態(tài)變?yōu)闊o色;二介質(zhì)的酸度影響,在堿性溶液中呈深藍(lán)色,在酸性介質(zhì)中呈淺紅色。 用藍(lán)色的堿性染料標(biāo)準(zhǔn)溶液,對含維生素C的酸性浸出液進(jìn)行氧化還原滴定,染料被還原為無色,當(dāng)?shù)竭_(dá)滴定終點(diǎn)時(shí),多余的染料在酸性介質(zhì)中則表現(xiàn)為淺紅色,由染料用量計(jì)算樣品中還原型抗壞血酸的含量。 3當(dāng)抗壞血酸全部被氧化后，稍多加一些染

2、料，使滴定液呈淡紅色，即為終點(diǎn)。VC還原型脫氫VC氧化型2,6-二氯酚靛酚氧化型(酸性溶液中,呈玫瑰色)2,6-二氯酚靛酚還原型(無色)4三、器材儀器和主要試劑偏磷酸:2%溶液(W/V)* , 鹽酸:2%溶液(W/V)抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.2mg/ml):稱取50mg(準(zhǔn)確至0.1mg)抗壞血酸,溶于浸提劑 中并稀至250ml?，F(xiàn)配現(xiàn)用。 2,6二氯靛酚(2,6二氯靛酚吲哚酚鈉鹽)溶液:稱取碳酸氫鈉52mg溶解在200ml 熱蒸餾水中,然后稱取2,6二氯靛酚50mg溶解在上述碳酸氫鈉溶液中。冷卻定容至 250ml,過濾至棕色瓶內(nèi),保存在冰箱中。每次使用前,用標(biāo)準(zhǔn)抗壞血酸標(biāo)定其滴定度。5標(biāo)定吸取

3、1ml抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)溶液于50ml錐形瓶中,加入10ml浸提劑,搖勻,用2 ,6二氯靛酚溶液滴定至溶液呈粉紅色15s不褪色為止。同時(shí),另取10ml浸提劑做空白試驗(yàn)。 滴定度(mg/ml)cv/V1V2 s每毫升2,6二氯靛酚溶液相當(dāng)于抗壞血酸的毫克數(shù); C抗壞血酸的濃度,mg/ml; V吸取抗壞血酸的體積, ml; V1滴定抗壞血酸溶液所用2,6二氯靛酚溶液的體積,ml; V2滴定空白所用2,6二氯靛酚溶液的體積,ml。 白陶土(或稱高嶺土),對維生素C無吸附性。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果為:0.088 mg/ml6四、實(shí)驗(yàn)操作1、提取: 桔子肉10克(獼猴桃或棗5克)于研缽 加2%HCl約10ml 充分研磨

4、提取液通過兩層紗布濾入50ml容量瓶2%HCl定容到50ml 。2、脫色:液干燥錐形瓶 加白陶土一匙(用于吸附生物樣品中的色素 )充分振搖（約10分鐘）過濾 脫色濾液。3、滴定:1）樣品滴定：取三角燒瓶兩只，各加脫色濾液10ml，用2,6-二氯酚靛酚鈉(藍(lán)色)滴定至出現(xiàn)微紅色并保持5秒鐘不褪色為止，記下二份樣品滴定所用的染液毫升數(shù)（滴定過程宜迅速，不超過2分鐘），取其平均值-VA；2）空白滴定用10ml 2%HCl代替脫色濾液，2,6-二氯酚靛酚鈉(藍(lán)色)滴定至出現(xiàn)微紅色并保持5秒鐘不褪色為止，記下滴定所用的染液毫升數(shù)-VB；7計(jì)算維生素（mg/100g）樣品（VA-VB） SV100/WD式中：VA：滴定樣品用去2,6-二氯酚靛酚鈉的平均ml數(shù)VB：滴定空白用去2,6-二氯酚靛酚鈉的ml數(shù) S：每毫升2,6-二氯酚靛酚鈉溶液相當(dāng)于維生素的mg數(shù)V：樣品提取液總毫升（定容后的ml數(shù),50或100 ml ）D：滴定時(shí)所取的樣品提取液