XXXX菊花的組織培養(yǎng)(公開)ppt課件

1、影片中導(dǎo)演用300萬朵鮮嫩菊花，陳列成13萬的花海，花農(nóng)們怎樣在較短的時間內(nèi)繁衍出這么多的菊花呢？課題一 菊花的組織培育有絲分裂受精卵細(xì)胞分化 在個體發(fā)育中，由一個或一種細(xì)胞增殖產(chǎn)生的后代，在形狀、構(gòu)造和生理功能上發(fā)生穩(wěn)定性差別的過程。1、細(xì)胞分化的概念一、知識回想 黑色素細(xì)胞在體外培育30多代后仍能合成黑色素；離體培育的上皮細(xì)胞，一直堅(jiān)持為上皮細(xì)胞，而不會變成其他類型的細(xì)胞。 2、穩(wěn)定性3、不可逆性細(xì)胞分化發(fā)生在整個生命進(jìn)程中。1、耐久性2、細(xì)胞分化的特點(diǎn) 造血干細(xì)胞 原紅細(xì)胞 早幼紅細(xì)胞 中幼紅細(xì)胞 晚幼紅細(xì)胞 成熟紅細(xì)胞 死亡4、普遍性3、細(xì)胞分化的本質(zhì)ABDCEEDCABEDCABED

2、CABEDCAB基因在個體發(fā)育過程中，不同細(xì)胞中遺傳信息的執(zhí)行情況不同即基因的選擇性表達(dá)的過程 紅細(xì)胞合成血紅蛋白 (不合成肌動蛋白)肌細(xì)胞肌動蛋白基因開啟合成肌動蛋白 (不合成血紅蛋白)肌動蛋白基因封鎖血紅蛋白基因封鎖血紅蛋白基因開啟試一試:如今他能解釋這些景象了嗎?4、細(xì)胞分化的結(jié)果 細(xì)胞產(chǎn)生了不同種類的蛋白質(zhì)即出現(xiàn)了不同的構(gòu)造和功能 細(xì)胞分化能否意味著細(xì)胞中遺傳物質(zhì)的改動？ 遺傳物質(zhì)沒有改動，不同組織的細(xì)胞共同來源于受精卵，經(jīng)有絲分裂產(chǎn)生。愈傷組織胚狀體1958，美國，斯圖爾德 植物組織培育離體 根底知識二.植物組織培育的實(shí)際根底-細(xì)胞全能性概念：高度分化的植物細(xì)胞，依然具有發(fā)育成完好個

3、體的潛能。根底：生物體的每一個細(xì)胞都包含有該物種所特有的全套遺傳物質(zhì)。表達(dá)條件：離體條件 適宜物質(zhì)的誘導(dǎo)和調(diào)理植物激素 適宜的營養(yǎng)物質(zhì) 溫度、酸堿度、光照等條件的控制 無菌操作(1)全能性高那么分化程度低 全能性最高的是受精卵，還沒有分化，個體發(fā)育其實(shí)就是受精卵不斷分裂分化的過程，越往后細(xì)胞分化程度越高，體細(xì)胞是高度分化的細(xì)胞也是全能性最低的細(xì)胞。 (2) 全能性的大小受精卵生殖細(xì)胞(卵細(xì)胞、 精子等體細(xì)胞植物細(xì)胞動物細(xì)胞(動物細(xì)胞核具全能性)細(xì)胞的全能性與細(xì)胞分化程度的關(guān)系： 三.植物組織培育概念關(guān)鍵詞： 外植體、脫分化、再分化、愈傷組織 在無菌和人工控制條件下，將離體的植物器官、組織、細(xì)胞

4、，培育在人工配置的培育基上，給予適宜的培育條件，誘導(dǎo)其脫分化產(chǎn)生愈傷組織再分化構(gòu)成叢芽，最終構(gòu)成完好的植株。又稱：植物離體培育脫分化或去分化：由高度分化的植物組織或細(xì)胞產(chǎn)生愈傷組織的過程。再分化：脫分化產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)進(jìn)展培育，又可以重新分化成根或芽等器官的過程。外植體：用于離體培育的植物器官或組織片段。愈傷組織：細(xì)胞陳列疏松、無規(guī)那么、高度液泡化的無定形的薄壁細(xì)胞。切取構(gòu)成層無菌接種誘導(dǎo)愈傷組織的構(gòu)成試管苗的構(gòu)成 根，芽培育室移栽脫分化再分化植物組織培育的根本過程三、影響植物組織培育的要素1、資料的種類、年齡及保管時間長短等2、營養(yǎng)3、植物激素4、PH、溫度、光照等條件1、植物資料的選擇

5、-直接關(guān)系實(shí)驗(yàn)的成敗 不同植物的組織培育難度不同eg：煙草和胡蘿卜的組織培育較為容易 枸杞愈傷組織的芽誘導(dǎo)比較難 菊花的組織培育普通選擇未開花植株的莖上部新萌生的側(cè)枝同一種植物資料，資料的年齡、保管時間的長短等也會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。 2、營養(yǎng)-MS培育基A、大量元素: C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、SB、微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、CoC、有機(jī)物：甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖D、植物激素：生長素、細(xì)胞分裂素、赤霉素等 、主要影響蛋白質(zhì)、核酸的合成； K、 Ca、Mg、S主要影響酶的活性。無機(jī)鹽MS固體培育基成分及比例討論：他能說出各種營養(yǎng)物質(zhì)的作用嗎？同專題2中微生物

6、培育基的配方相比，MS培育基的配方有哪些明顯的不同？答：微量元素和大量元素提供植物細(xì)胞生活所必需的無機(jī)鹽；蔗糖提供碳源，同時可以維持細(xì)胞的浸透壓；甘氨酸、維生素等物質(zhì)主要是為了滿足離體植物細(xì)胞在正常代謝途徑遭到一定影響后所產(chǎn)生的特殊營養(yǎng)需求。 微生物培育基以有機(jī)營養(yǎng)為主。與微生物的培育不同，MS培育基那么需提供大量無機(jī)營養(yǎng)，無機(jī)鹽混合物包括植物生長必需的大量元素和微量元素兩大類。常用植物激素：生長素、細(xì)胞分裂素和赤霉素 生長素、細(xì)胞分裂素是啟動細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素在生長素存在的情況下，細(xì)胞分裂素的作用呈加強(qiáng)的趨勢激素的運(yùn)用順序、運(yùn)用的量及比例影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向3、植物激素的

7、影響使用順序?qū)嶒?yàn)結(jié)果先使用生長素，后使用細(xì)胞分裂素有利于細(xì)胞分裂，但不利分化先使用細(xì)胞分裂素后使用生長素細(xì)胞既分裂、也分化同時使用分化頻率高使用比例實(shí)驗(yàn)結(jié)果生長素細(xì)胞分裂素生長素細(xì)胞分裂素生長素細(xì)胞分裂素有利于根的分化有利于芽的分化，抑制根的分化促進(jìn)愈傷組織生長激素的運(yùn)用順序、運(yùn)用量及比例影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向：思索：以下培育基出現(xiàn)的景象反響了什么問題？生長素/細(xì)胞分裂素高 利于根的構(gòu)成適中 利于愈傷組織的構(gòu)成4溫度、光照、pH的影響光照：菊花每日用日光燈照射12h。溫度： 大多數(shù)植物組織培育控制在2327， 低于15時植物組織會表現(xiàn)生長停頓； 高于35時對植物生長不利。 菊花的組織培育控制在

8、1822。pH： 不同植物對培育基最適pH的要求不 同，大多數(shù)控制在56.5。 菊花的組織培育控制在5.8左右。制備MS固體培育基外植體消毒 接種 培 養(yǎng)栽 培四、實(shí)驗(yàn)操作 移 栽沖洗酒精無菌水沖洗氯化汞無菌水沖洗至少三次之上配制各種母液配制培育基滅菌一制備MS固體培育基MS培育基包括20多種營養(yǎng)成分，實(shí)驗(yàn)室普通運(yùn)用4保管配制好的培育基母液來制備1、配制各種母液無機(jī)物中大量元素濃縮10倍，微量元素濃縮100倍，常溫保管激素類、維生素類以及用量較小的有機(jī)物普通可按1mg/ml的質(zhì)量濃度單獨(dú)配制成母液用母液配制培育基時，需求根據(jù)各種母液的濃縮倍數(shù)，計算用量2、配制培育基分裝到錐形瓶中，每瓶分裝50

9、ml或100ml 配制培育液 調(diào)PH 培育基的分裝 由于菊花的莖段的組織培育比較容易，因此不用添加植物激素3、滅菌分裝好的培育基連同其他器械一同進(jìn)展高壓蒸汽滅菌1、選材：菊花莖段，取生長旺盛的嫩枝二外植體消毒2、消毒流水沖洗菊花莖段用流水沖洗后可少許洗衣粉，用軟刷悄然刷洗，刷洗后在流水下沖洗20min左右 酒精處置用無菌吸水紙吸干外植體外表的水分，放入體積分?jǐn)?shù)為70的酒精中搖動23次，繼續(xù)67s，立刻將外植體取出，在無菌水中清洗 消毒液處置取出后用無菌吸水紙吸干外植體外表的水分，放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1的氯化汞溶液中12min，取出后在無菌水中至少清洗3次，漂凈消毒液三接種污染的主要來源是空氣中的

10、細(xì)菌和孢子，接種室消毒是至關(guān)重要的。用70的酒精噴霧使空氣消毒， 酒精或新潔爾滅搽洗任務(wù)臺并用紫外線照射20分鐘。1、接種室消毒2、無菌操作要求操作要在酒精燈火焰旁完成，每次運(yùn)用器械后，都需求用火焰灼燒滅菌，接種后立刻蓋好瓶蓋。3、資料的切取和接種 將消過毒的菊花莖段在無菌培育皿中切成0.51cm的小段，用鑷子夾取菊花莖段接種。4、接種本卷須知每接種一塊外植體前，鑷子需放入體積分?jǐn)?shù)為70的酒精溶液中消毒一次，然后在酒精燈火焰上燒一遍，冷卻后再接種外植體在培育基中要分布均勻，放置外植體數(shù)量根據(jù)錐形瓶的大小確定，普通胡蘿卜34塊，菊的莖或葉68塊，也不要太少，以充分利用培育基中的營養(yǎng)成分和光照條件

11、插入時應(yīng)留意方向，形狀學(xué)上端朝上，形狀學(xué)下端朝下，不要倒插。莖段、莖尖基部插入培育基利于吸收水分和營養(yǎng)正常苗污染苗1、外植體帶菌2、培育基及接種器具滅菌不徹底3、接種操作時帶入4、環(huán)境不清潔污染途徑思索：他計劃做幾組反復(fù)？他計劃設(shè)置對照實(shí)驗(yàn)嗎？答：每種資料或配方至少要做一組以上的反復(fù)。設(shè)置對照實(shí)驗(yàn)可以取用一個經(jīng)過滅菌的裝有培育基的錐形瓶，與接種操作后的錐形瓶一同培育，用以闡明培育基制造合格，沒有被雜菌污染。四培育接種后的錐形瓶最好放在無菌箱中培育，培育期間應(yīng)定期消毒培育溫度控制在18-22每日用日光燈光照12h五移栽 移栽生根的菊花試管苗之前，應(yīng)先翻開培育瓶的封口膜，讓試管苗在培育間生長幾日。

12、普通放置在2025的遮蔭環(huán)境中，順應(yīng)57d。試管苗不萎蔫，有新生長的趨勢，便可移栽。1、翻開封口膜2、清洗轉(zhuǎn)移 用流水清洗根部的培育基，將幼苗移植到消過毒的蛭石或珍珠巖等環(huán)境下生活一段時間3、移栽幼苗長壯后，移栽到土壤中固體基質(zhì)型，含水量高、蓄水性強(qiáng)、透性好，適宜栽培珍珠巖 ,珍珠巖是一種火山噴發(fā)的酸性熔巖，經(jīng)急劇冷卻而成的玻璃質(zhì)巖石，有弧形或圓形裂隙，如珍珠的構(gòu)造，所以被命名為珍珠巖 。蛭石是一種天然、無毒的礦物質(zhì)，在高溫作用下會膨脹的礦物。它是一種比較少見的礦物，屬于硅酸鹽。 六栽培 幼苗移栽后，每天察看并記錄幼苗的生長情況，適時澆水、施肥，直至開花1、培育基的滅菌高壓蒸汽滅菌2、外植體的

13、消毒酒精、氯化汞3、接種的無菌操作酒精、酒精燈灼燒4、無菌箱中的培育；5、移栽到消過毒的環(huán)境中生存一段時間。在整個操作過程中，是如何來實(shí)現(xiàn)無菌環(huán)境的？結(jié)果分析與評價一對接種操作中污染情況的分析二能否完成了對植物組織的脫分化和再分化三能否進(jìn)展了統(tǒng)計、對照與記錄四生根苗的移栽能否合格五、課題延伸1、普通來說，容易進(jìn)展無性繁衍的植物，也容易進(jìn)展組織培育2、實(shí)例：蘆薈、豆瓣綠、秋海棠、月季營養(yǎng)繁衍扦插嫁接壓條 扦插嫁接壓條 1、培育無病毒植株2、大規(guī)模培育愈傷組織提取紫草素，治療燙傷和割傷的藥物以及染料和化裝品的原料4、基因工程中亦需用到植物組織培育的方法受體細(xì)胞為植物細(xì)胞四)植物組織培育的運(yùn)用： 3、人工種子處理有些作物種類繁衍才干差，結(jié)子困難或發(fā)芽率低等問題練習(xí)1.答：植物組織培育所利用的植物資料體積小、抗性差，對培育條件的要求較高。用于植物組織培育