初始污染菌方法學驗證報告

1、起草打印體姓名/職位簽名日期起草人簽署該文件即說明本文件的所有信息是準確的,且與公司的程序文件、指導方針以 及現(xiàn)行的質(zhì)量體系要求一致帶格式的：縮進：首行縮進：0. 74厘米，行距：多倍行距1.25字行：帶格式的：無，行距：多倍行距1.25字行,無工程符號或編號，與下段不同頁，制表位：不在7. 97 字符帶格式的：縮進：首行縮進：0.74厘米，行距：多：倍行距1.25字行帶格式的：縮進：首行縮進：0. 74厘米，行距：多 倍行距1.25字行帶格式的：縮進：首行縮進：0. 74厘米，行距：多 倍行距1.25字行帶格式的；縮進：首行縮進：。74厘米，行距：多倍行距1.25字行評審打印體姓名/職位簽名

2、日期4打印體姓名/職位簽名日期負責評審該文件的技術代表或相關小組成員簽署該文件,即說明同意該文件的內(nèi)容及其堆 確性,且該文件符合公司程序文件、指導方針以及現(xiàn)行質(zhì)量體系的要求帶格式的：縮進：首行縮進: 倍行距1.25字行0. 74厘米，行距：多帶格式的：無，行距：多倍行距1.25字行，無工程 符號或編號，與下段不同頁，制表位：不在7.97字 符帶格式的：縮進：首行縮進: 倍行距1.25字行0. 74厘米，行距：多帶格式的：縮進：首行縮進: 倍行距1.25字行0. 74厘米，行距：多帶格式的：縮進：首行縮進: 倍行距1.25字行0. 74厘米，行距：多帶格式的：縮進：首行縮進：0. 74厘米， 倍

3、行距1.25字行行距：多帶格式的：縮進：首行縮進：0. 74厘米， 倍行距1.25字行行距：多批準打印體姓名/職位簽名日期-負責批準該文件的部門經(jīng)理及質(zhì)量代表簽署該文件,即說明同意該文件的內(nèi)容及其準確性, 且該文件符合公司程序文件、指導方針以及現(xiàn)行質(zhì)量體系的要求帶格式的：縮進：首行縮進：0. 74厘米，行距：多 倍行距1.25字行帶格式的：無，行距：多倍行距1.25字行，無工程 符號或編號，與下段不同頁，制表位：不在7.97字 符帶格式的：縮進：首行縮進：0. 74厘米，行距：多 倍行距1.25字行帶格式的：縮進：首行縮進：0. 74厘米，行距：多 倍行距1.25字行變更歷史版本1. 1. 1

4、.4 日期1. 1，1.5變更原因1. 1. 1.6 變 更人帶格式的：縮進：首行縮進：0. 74厘米，行距：多 倍行距1.25字行帶格百的行距：多倍行距1.25字行帶格氐的;無，行距：多倍行距1.25字行，無工程：符號或編號，與下段不同頁，制表位：不在7. 97字符：帶格式的：縮進：首行縮進：0.74厘米，行距：多倍行距1.25字行帶格式的：縮進：首行縮進：0. 74厘米，行距：多 倍行距1.25字行帶格式的：縮進：首行縮進：0. 74厘米，行距：多 倍行距1.25字行帶格式的：縮進：首行縮進：0. 74厘米，行距：多 倍行距1.25字行6. 5. 1. 5陰性對照組：取無菌生理鹽水20ml

5、,不加菌株，分成兩份，過濾，每種培養(yǎng)基 制備一張濾膜。6. 5. 1.6結(jié)果判斷陰性對照組應無菌生長，試驗組菌落數(shù)減去供試品對照組菌落數(shù)的值與菌液對照組 菌落數(shù)的比值應在0. 5、2范圍內(nèi)。連2透析紙的計數(shù)方法適用性試驗石46. 5.2. 1 試驗組：取7份0.9ml的供試液。a）其中3份分別加入0. 1ml的金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽胞桿菌，混勻， 轉(zhuǎn)移到無菌平皿內(nèi)，傾注約1520ml的45c的胰酪大豆陳瓊脂培養(yǎng)，置3035, 培養(yǎng)時間不超過3天；b）其中2份分別加入0.1ml的白色念珠菌、黑曲霉，混勻，轉(zhuǎn)移到無菌平皿內(nèi)，傾注 約1520ml的45的胰酪大豆陳瓊脂培養(yǎng)，置30、35

6、,培養(yǎng)時間不超過5天；c）其中2份分別加入0.1ml白色念珠念、黑曲霉，混勻，轉(zhuǎn)移到無菌平皿內(nèi)，傾注約 1520ml的45的沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基，置2025,培養(yǎng)時間不超過5天。帶格式的：字體：（中文）+中文正文（宋體），11磅, 菲突出顯示,帶格式的二字體：（中文）+中文正文（宋體），11磅, 菲突出顯示帶格式的：字體：（中文）+中文正文（宋體），11磅, 非突出顯示帶格式的：tpc_content,字體：（默認）Century, （中文）+中文正文（宋體），11磅，字體顏色：黑色, （中文）中文（中國）6. 5. 2. 2供試品對照組：取國份0. 1ml.的制備好的供試液，分別傾注約152

7、0。的45 的瓊脂培養(yǎng)基，胰酪大豆陳瓊脂培養(yǎng)基，置3035,培養(yǎng)時間不超過3天, 沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基，置2025,培養(yǎng)時間不超過5天J44菌液對照組：取7份0.9ml的無菌生理鹽水。a）其中3份分別加入0. 1血的金黃色葡萄球菌球可綠假單胞菌、枯草芽胞桿菌，混勻， 轉(zhuǎn)移到無菌平皿內(nèi)，傾注約1520ml的45c的胰酪大豆陳瓊脂培養(yǎng)，置3035, 培養(yǎng)時間不超過3天；b）其中2份分別加入0.1ml的白色念珠菌、黑曲霉，混勻，轉(zhuǎn)移到無菌平皿內(nèi)，傾注 約1520ml的45的胰酪大豆陳瓊脂培養(yǎng)，置3035,培養(yǎng)時間不超過5天；c）其中2份分別加入0.1ml白色念珠菌、黑曲霉，混勻，轉(zhuǎn)移到無菌平皿內(nèi)，傾

8、注約 1520ml的45的沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基，置2025,培養(yǎng)時間不超過5天。陰性對照組：取兩份0.1ml的無菌生理鹽水，分別傾注約1520ml的45的 瓊脂培養(yǎng)基，胰酪大豆陳瓊脂培養(yǎng)基，置基35,培養(yǎng)時間不超過3天，沙 氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基，置2025,培養(yǎng)時間不超過5天6. 5. 2. 5結(jié)果判斷陰性對照組應無菌生長，試驗組菌落數(shù)減去供試品對照組菌落數(shù)的值與菌液對照組 菌落數(shù)的比值應在0.52范圍內(nèi)。為了更清晰地表達判定標準要求，計數(shù)方法適用性試驗結(jié)果應滿足以下條件（試蛉組的菌落總數(shù)-供試品對照組的菌落總數(shù)）嗅 2.0菌液對照組的菌落總數(shù)-46. 5. 4 相關結(jié)果見附件3o帶格式的：行距

9、：多倍行距1.25字行不管在任何階段出現(xiàn)的失敗現(xiàn)象都需要記錄，并進行原因分析，制定相關措施。并帶格式的：縮進：首行縮進：0.74厘米，行距：多 倍行距1.25字行在報告完成前所有失敗情況都得成功解決。如果無法解決，也需要在最終報告中說明， 將啟動新方案中重新確認（如需要）。8. 0試驗結(jié)論通過用金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽抱桿菌、白色念珠菌和黑曲霉作為測試， 對中心靜脈導管、導絲、洞巾、透析紙進行初始污染菌檢驗方法適用性試驗，可以得出以下 結(jié)論：9.0_再確認周期產(chǎn)品的組分發(fā)生改變可能影響檢驗結(jié)果時；9.2檢驗條件發(fā)生改變可能影響檢驗結(jié)果時，重新進行方法適用性試驗。100，.附件清單.

10、附件1：培養(yǎng)基的適用性檢查記錄附件2：重復處理菌落記錄附件3：計數(shù)方法適用性檢查記錄帶格式的：行距：多倍行距L25字行）一帶格式的：縮進：首行縮進：0. 74厘米，行距：多 倍行距1.25字行帶格式的：縮進：首行縮進：0. 74厘米，行距：多 倍行距1.25字行j帶格式的：縮進：左側(cè)：0厘米，懸掛縮進：3. 24 字符，首行縮進：-3.24字符，行距：多倍行距 1.25字行，多級符號+級別：1 +編號樣式：1, 2, 3,+起始編號：1 +對齊方式：左側(cè)+對齊位 置：0厘米+制表符后于：1.02厘米+縮進位 置：1.2厘米帶格式的：字體：（中文）宋體帶格式的：字體：（中文）宋體|檢驗日期檢驗依

11、據(jù)中國藥典2020版四部 y胰酪大豆陳瓊脂培養(yǎng)基批號胰酪大豆陳液體培養(yǎng)基批號胰酪大豆陳瓊脂對照培養(yǎng)基批號胰酪大豆膝液體瓊脂對照培養(yǎng)基批號培養(yǎng)溫度/時間菌 株培養(yǎng)基銅綠假單胞菌金黃色葡萄球菌草芽胞桿菌胰酪大豆陳 瓊脂培養(yǎng)基1#2#平均胰酪大豆腺瓊脂 對照培養(yǎng)基1#2#平均計算結(jié)果胰酪大豆陳液體 培養(yǎng)基1#2#胰酪大豆陳液體 對照培養(yǎng)基1#2#胰酪大豆陳瓊脂培養(yǎng)基陰性對照胰酪大豆陳液體培養(yǎng)基陰性對照胰酪大豆陳瓊脂對照培養(yǎng)基陰性對照胰酪大豆陳液體瓊脂對照培養(yǎng)基陰性對照陰性對照組應無菌生長，被檢固體培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)與對照培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)的比值在0.52范圍內(nèi)，且菌落形態(tài)大小與對照培養(yǎng)基上的菌落

12、一致。被檢液體培養(yǎng)基管與對照培養(yǎng)基管比擬,試驗菌應生 長良好。檢驗人復核人日期日期1。7 ，附件L培養(yǎng)基的適用性檢查才帶格式的：字體：（默認）+中文正文（宋體）， +中文正文（宋體），（中文）中文（中國）（中文）帶格式的：字體：（默認）+中文正文（宋體）， 中文正文（宋體），（中文）中文（中國）（中文）帶格式的：字體：（默認）+中文正文（宋體）， 中文正文（宋體），（中文）中文（中國）（中文）帶格式的：標題2,縮進：右側(cè)：0. 37厘米, 李格左0帶格式的：行距：多倍行距1.25字行）帶格式的：字體：（默認）+中文正文（宋體），（中文） +中文正文（宋體），（中文）中文（中國）Document

13、 No:VRBS062005Page 1 of 2檢驗日期檢驗依據(jù)中國藥典2020版四部，胰酪大豆陳瓊脂培養(yǎng)基批號沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基批號胰酪大豆陳瓊脂對照培養(yǎng)基批號沙氏葡萄糖瓊脂對照培養(yǎng)基批號胰酪大豆陳瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)溫度/時間沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)溫度/時間菌株培養(yǎng)基白色念珠菌黑曲霉胰酪大田陳 瓊脂培養(yǎng)基1#2#平均胰酪大豆陳瓊 脂對照培養(yǎng)基1#2#平均計算結(jié)果沙氏葡萄糖 瓊脂培養(yǎng)基1#2#平均沙氏葡萄糖瓊 脂對照培養(yǎng)基1#2#平均計算結(jié)果胰酪大豆陳瓊脂培養(yǎng)基陰性對照沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基陰性對照胰酪大豆陳瓊脂對照培養(yǎng)基陰性對照沙氏葡萄糖瓊脂對照培養(yǎng)基陰性對照陰性對照組無菌生長，被檢固體培養(yǎng)

14、基上的菌落平均數(shù)與對照培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)的比值應 在0.52范圍內(nèi)，且菌落形態(tài)大小與對照培養(yǎng)基上的菌落一致。檢驗人復核人日期日期帶格式表格帶格式表格Page 2 of 2Document No:VRBS062005中心靜脈導管口導絲口洞巾透析紙名稱產(chǎn)品批號檢驗日期檢驗依據(jù)GB/T 19973. 1 附錄 C培養(yǎng)溫度培養(yǎng)時間胰酪大豆陳瓊脂培養(yǎng)基批號樣品編號處理菌落數(shù)（cfu）菌落總數(shù) （cfu）第一次處理 回收率ABCD瓊脂覆蓋12345第一次處理的平均回收率： 校正因子：第一次處理最差回收率： 校正因子：陰性對照備注培養(yǎng)結(jié)束后，對每個培養(yǎng)皿進行計數(shù)，透析紙計數(shù)結(jié)果需再乘以稀釋倍數(shù)10檢驗人復

15、核人日期日期10.2 ，附件2重復處理菌落記錄表帶格式的：字體：（默認）宋體，（中文）宋體帶格式的：標題2,右側(cè)：0 37厘米帶格式的：字體：（默認）Arial,（中文）Arial帶格式的：字體：（默認）宋體，（中文）宋體一Document No:VRBS062005Page 1 of 1帶格式的：標題2,右側(cè)：0. 37厘米10. 3 附件3：計數(shù)方法適用性檢查記錄中心靜脈導管口導絲口洞巾透析紙平行試驗一口平行試驗二口平行試驗三名稱產(chǎn)品批號檢驗日期檢驗依據(jù)中國藥典2020版四部胰酪大豆陳瓊脂培養(yǎng)基批號沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基批號細菌計數(shù)培養(yǎng)溫度培養(yǎng)時間菌株銅綠假單胞菌金黃色葡萄球菌枯草芽抱桿菌試

16、驗組菌液對照組供試品對照組計算結(jié)果霉菌和酵母菌計數(shù)胰酪大豆陳瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)溫度/時間溫度:時間：沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)溫度/時間溫度：時間：菌株白色念珠菌黑曲霉白色念珠菌黑曲霉培養(yǎng)基胰酪大豆陳瓊脂培養(yǎng)基沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基試驗組菌液對照組供試品對照組計算結(jié)果胰酪大豆月東瓊脂培養(yǎng)基陰性對照沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基陰性對照陰性對照組無菌生長，試驗組菌落數(shù)減去供試品對照組菌落數(shù)的值與菌液對照組菌落數(shù)的比值在0.5-2 范圍內(nèi)。檢驗人復核人日期日期帶格式的：左，行距：多倍行距1.25字行，不對齊 到網(wǎng)格Document No:VRBS062005Page 1 of 1*0L0目的通過驗證確定初始污染菌的

17、檢驗方法及回收率，為日常初始污染菌檢測提供支持。、帶格式的：行距：多倍行距1.25字行帶格式的：縮進：首行縮進：2.7字符，行距：單倍 行距，到齊到網(wǎng)格3M2.0范圍及背景-H本確認方案適用于上海全安醫(yī)療器械初始污染菌檢驗的控制。，一一:帶格式的：行距：多倍行距1.25字行帶格式的：縮進：首行縮進：2.7字符，行距：多倍 行距1.25字行，到齊到網(wǎng)格便格式的：行距：多倍行距1.25字行4的3. 0參考文件編號4. 1. 1. 1 描述.一4. 1. 1.2 SOP029過程確認程序*DI-T003初始污染菌檢驗規(guī)程GB/T19973.1-2015醫(yī)療器械的滅菌微生物學方法第1局部：產(chǎn)品上微生物

18、總數(shù)的測麓中國藥典四部2020版帶格式的：縮進：首行縮進：0. 74厘米，制表位：不在1.71字符+ 21.6字符帶格式的：兩端對齊，無，縮進：首行縮進：0. 74厘米，無工程符號或編號，與下段不同頁，制表位:21.6/符不在1.71字符+ 7. 97字符+帶格式的：無，縮進：首行縮進：0. 74厘米，無項 目符號或編號，與下段不同頁，制表位：不在1.71 字符+ 7. 97字符+ 21.6字符帶格式的：縮進：首行縮進：0. 74座米，制表位: 不在1.71字符+ 21.6字符帶格式的：縮進：首行縮進：0. 74厘米，制表位: 不在1.71字符+ 21.6字符H設備/過程/系統(tǒng)識別方案簡述本公

19、司原材料及成品均需進行初始污染菌檢測，本次驗證選取其中代表性物料進行初始 污染菌方法學驗證及回收率確實認。產(chǎn)品選擇4. 2. 1根據(jù)GB/T 19973.L2015要求，需選擇能代表產(chǎn)品材質(zhì)的相關組件或部位進行驗證，以確保驗證的代表性。本公司現(xiàn)有9個注冊產(chǎn)品，產(chǎn)品類別和主要材質(zhì)信息見表lo 表1：產(chǎn)品類別和主要材質(zhì)信息產(chǎn)品名稱5. 1. 1. 1 注 冊類別5. 1. 1.2主要組件材質(zhì)：中心靜脈導管套裝三類中心靜脈導管（TPE）穿刺針（不銹鋼）藍空針（PP+橡膠）導絲（不銹鋼）擴張器（PE）肝素帽（PC） 洞巾（無紡布）包裝盒（透析紙）帶格式的：縮進：首行縮進：0. 74厘米，制表位: 不在

20、1.71字符+ 21.6字符帶格式的：居中，縮進：首行縮進：0字符，制表 位：不在1.71字符+ 21.6字符帶格式的：縮進：首行縮進：0. 74厘米，行距：多 倍行距1.25字行帶格式的：縮進：左側(cè)：0厘米，懸掛縮進：6. 83 字符，行距：多倍行距1.25字行帶格式的：縮進：首行縮進：0. 74厘米，行距：多 倍行距1.25字行帶格式的：無，行距：多倍行距1.25字行,符號或編號，與下段不同頁，制表位：不在 符無工程7. 97 字帶格式的：縮進：首行縮進：0. 74厘米，行距：多 倍行距1.25字行產(chǎn)品名稱-k-4 注 冊類別5. 1. 1.5主要組件材質(zhì)：5. 1. 1.6 一次性使用有

21、創(chuàng)血 壓傳感器三類灌注器(PC+PVC)灌注閥(PC+TPE) 氣管插管二類管身（PVC）氣管切開插管二類管身（PVC）小經(jīng)皮擴張氣管切開管套 件二類氣管切開插管（PVC）注射器（PP+橡膠）：導絲（不銹鋼）擴張器（PP） 加強型氣管插管二類管身（PVC+不銹鋼）支氣管雙腔插管套件二類管身(PVC)插管接頭（HDPE）連接器（ABS）堵塞帽（TPE）醫(yī)用貼二類離型紙、無紡布、PU膜1 線面布、木基材、醫(yī)用丙烯酸酯膠 占扣和泡棉一次性使用穿刺護理輔 助包二類手術衣、孔巾（無紡布）醫(yī)用膠帶（無紡布）：醫(yī)用貼敷料剪（不銹鋼）表1續(xù)4 2. 3綜合表1所述信息，本公司產(chǎn)品“中心靜脈導管套裝”風險等級較

22、高，且其組件涵蓋 本公司所有產(chǎn)品材料類別。因此選擇“中心靜脈導管套裝”作為本次驗證的樣品，相 關組件作為組件代表進行驗證。具體組件信息見表2。帶格式的：無，行距：多倍行距1.25字行，無工程符號或編號，與下段不同頁，制表位：不在7.97字符產(chǎn)品代表.7組件代表5. 1. 1.8組件材質(zhì)5. 1.1. 9中心靜脈導管套裝中心靜脈導管高分子導絲不銹鋼洞巾無紡布透析紙?zhí)匦l(wèi)強表24.檢測儀器本次驗證所需檢測儀器信息見表3o儀器編號5. 1. 1. 10儀器名稱5. 1. 1. 11計量有效5. 1. 1. 12確認信息表3（帶格式的：居中，行距：多倍行距1.25字行帶格式的：無，行距：多倍行距1.25

23、字行，無工程 符號或編號，與下段不同頁，制表位：不在7. 97字符帶格式的：居中，行距：多倍行距1.25字行帶格式的：行距：多倍行距1.25字行j帶格式的：居中，行距：多倍行距1.25字行帶格式的：縮進：首行縮進：0. 74厘米，行距：多 倍行距1.25字行帶格式的：行距：多倍行距1.25字行帶格式的：居中，縮進：首行縮進：0. 74厘米，行 、距：多倍行距1.25字行帶格式的：縮進：首行縮進：0. 74厘米，行距：多 倍行距1.25字行（帶格式的：行距：多倍行距1.25字行.帶格式的匚丁j帶格式的：居中，行距：多倍行距1.25字行ji帶格式的（.帶格式的：行距：多倍行距1.25字行帶格式的：

24、居中，行距：多倍行距1.25字行,帶格式的匚?。◣Ц袷降模盒芯啵憾啾缎芯?.25字行（帶格式的（.（帶格式的.（帶格式的（.（帶格式的：行距：多倍行距1.25字行:j帶格式的：居中，行距：多倍行距1.25字行j（帶格式的（.（帶格式的：行距：多倍行距1.25字行:j帶格式的：居中，行距：多倍行距1.25字行i帶格式的（.帶格式的.行距：多倍行距1.25字行j帶格式的：居中，行距：多倍行距1.25字行j帶格式的（帶格式的（.（帶格式的（.帶格式的：行距：多倍行距1.25字行|帶格式的：行距：多倍行距1.25字行.帶格式的匚丁j帶格式的：行距：多倍行距1.25字行:j帶格式的：行距：多倍行距1.2

25、5字行j帶格式的（.j帶格式的（.i帶格式的匚丁j帶格式的匚丁j帶格式的匚丁帶格式的：縮進：首行縮進：0. 74厘米，行距：多 倍行距1.25字行期至5. 1. 1. 13符合J不 符合X帶格式的：縮進：首行縮進：0. 74厘米，行距：多 倍行距1.25字行帶格式的：縮進：首行縮進：0. 74厘米，行距：多 倍行距1.25字行帶格式的：縮進：首行縮進：0. 74厘米，行距：多 倍行距1.25字行 -帶格式的：縮進：首行縮進：0. 74厘米，行距：多 倍行距1.25字行帶格式的：縮進：首行縮進：0. 74厘米，行距：多 倍行距1.25字行帶格式的：縮進：首行縮進：0. 74厘米，行距：多 倍行距

26、1.25字行帶格式的：縮進：首行縮進：0. 74厘米，行距：多 倍行距1.25字行一 一帶格式的：縮進：首行縮進：0. 74厘米，行距：多 倍行距1.25字行帶格式的：縮進：首行縮進：0. 74厘米，行距：多 倍行距1.25字行帶格式的：縮進：首行縮進：0. 74厘米，行距：多 倍行距1.25字行檢查人/日期復核人/日期.帶格式的：縮進：首行縮進：0. 74厘米，行距：多 倍行距1.25字行酊05.0材料.一帶格式的：行距：多倍行距1.25字行)本次驗證所用培養(yǎng)基、菌種信息見表4。表4培養(yǎng)基信息-w帶格式的：縮進：首行縮進：0. 74厘米，行距：多 倍行距1.25字行培養(yǎng)基名稱規(guī)格批號有效期是

27、否通過適用 性試驗帶格式的：行距：多倍行距1.25字行:帶格式的：行距：多倍行距1.25字行胰酪大豆豚液體培養(yǎng)基口是口許帶格式的：縮進：首行縮進：0. 74厘米，行距：多 倍行距1.25字行:帶格式的：行距：多倍行距1.25字行沙氏葡萄糖液體沙氏葡 萄糖瓊脂培養(yǎng)基是喜帶格式的：縮進：首行縮進：0. 74厘米，行距：多 倍行距1.25字行:帶格式的：行距：多倍行距1.25字行j:帶格式的：行距：多倍行距1.25字行帶格式的：縮進：首行縮進：0. 74厘米，行距：多倍行距1.25字行:帶格式的：行距：多倍行距1.25字行帶格式的：行距：多倍行距1.25字行胰酪大豆陳瓊脂成品培 養(yǎng)基是相沙氏葡萄糖瓊

28、脂 成品培養(yǎng)基是臼 否胰酪大豆陳液體對照培 養(yǎng)基帶格式的：縮進：首行縮進：0. 74厘米，行距：多 倍行距1.25字行1帶格式的：行距：多倍行距1.25字行帶格式的：縮進：首行縮進：0. 74厘米，行距：多 倍行距1.25字行國格式的：行距：多倍行距1.25字行帶格式表格帶格式的：縮進：首行縮進：0. 74厘米，行距：多 倍行距1.25字行:帶格式的：行距：多倍行距1.25字行j沙氏葡萄糖瓊脂對照培 養(yǎng)基- 11 1胰酪大豆陳瓊脂對照培 養(yǎng)基生理鹽水菌種信息:帶格式的：行距：多倍行距1.25字行j帶格式的：縮進：首行縮進：0. 74厘米，行距：多 倍行距1.25字行1帶格式的：行距：多倍行距1

29、.25字行菌株名稱菌種代碼菌株代次菌株來源金黃色葡萄球菌、帶格式的：行距：多倍行距1.25字行帶格式的：縮進：首行縮進：0. 74厘米，行距：多 倍行距1.25字行銅綠假單胞菌帶格式的：行距：多倍行距1.25字行j帶格式的：縮進：首行縮進：0. 74厘米，行距：多 倍行距1.25字行帶格式的：縮進：首行縮進：0. 74厘米，行距：多 倍行距1.25字行帶格式的：縮進：首行縮進：0. 74厘米，行距：多倍行距1.25字行枯草芽抱桿菌白色念珠菌黑曲霉帶格式的：縮進：首行縮進：0. 74厘米，行距：多 倍行距1.25字行檢查人/日期復核人/日期帶格式的：縮進：首行縮進：0. 74厘米，行距：多 倍行

30、距1.25字行帶格式的：縮進：首行縮進：0. 74厘米，行距：多 倍行距1.25字行帶格式的：縮進：首行縮進：0. 74厘米，行距：多 倍行距1.25字行帶格式的：縮進：首行縮進：0. 74厘米，行距：多 倍行距1.25字行帶格式的：縮進：首行縮進：0. 74厘米，行距：多 倍行距1.25字行入06. 0確認過程fij一試驗環(huán)境本次無菌檢驗方法適用性試驗中在環(huán)境潔凈度10000級的陽性操作室的100級本次天 工作臺及生物平安柜內(nèi)生物平安柜上進行。試驗環(huán)境溫度應符合1828,相對濕 度應符合45%65%。、微生物限度室、超凈工作臺、陽性操作室及生物平安柜的 工作臺面應定期按照本公司文件進行懸浮粒

31、子、沉降菌和換氣次數(shù)的監(jiān)測?？贚2操作室應每周用0.設新潔爾滅或75%乙醇全面擦拭墻壁、設備及地面進行消毒。每次 實驗前、后均應開啟紫外燈消毒至少30min；在每次實驗后，用0. K新潔爾滅或75% 乙醉溶液擦拭工作臺面進行清場，所有實驗用品經(jīng)濕熱滅菌后處理。口L3試驗過程中應同時檢查超凈工作臺單向流空氣中的菌落數(shù)：每次操作時在超凈工作臺 面的左中右放置3個胰酪大豆陳瓊脂培養(yǎng)基平板，翻開碟蓋，試驗結(jié)束后收集置30C 35培養(yǎng)48小時后取出檢查，3只雙碟上生長的平均菌落數(shù)應Wlcfu。6.2菌懸液制備0.45 Mm濾膜全部過濾一培養(yǎng)濾膜e）所有被檢培養(yǎng)基中不加菌液做陰性對照。f）用相對應的對照培

32、養(yǎng)基代替被檢培養(yǎng)基進行上述試驗。結(jié)果判定a）陰性對照無菌生長，被檢固體培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)與對照培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)的比 值在0.52范圍內(nèi)，且菌落形態(tài)大小與對照培養(yǎng)基上的菌落一致。被檢液體培養(yǎng)基管與 對照培養(yǎng)基管比擬，試驗菌應生長良好。b）相關結(jié)果見附件1。.校正因子計算通過預試驗說明試驗產(chǎn)品的生物負載非常低，依據(jù)GB/T 199739附錄C的要求，選擇 產(chǎn)品接種法。本次驗證隨即抽取5套經(jīng)E0滅菌的無菌中心靜脈導管套裝，并根據(jù)組件 材質(zhì)選擇中心靜脈導管、導絲、洞巾、透析紙做為組件代表進行試驗。口T中心靜脈導管、導絲、洞巾的校正因子計算依據(jù)GB/4管9al附錄G的要求，進行產(chǎn)品上生物負載方法確

33、實認按表2所述選取 樣品，采用反復洗脫的方法確認樣品上微生物負載回收率本次臉證每種樣品分別隨叢整套b）將上述接種了菌懸液的中心靜脈導管、導絲、5*5cm的洞巾分別投入裝有100mL無 菌生理鹽水的錐形瓶中，浸泡，手工振搖80次，制成1:100的供試液。投入裝有10mL的無菌氯化鈉蛋白陳緩沖溶液的試管中,用漩渦混合器（2800Mmin）, 振蕩2分鐘a）取1:100的供試液A,全部用0. 45 u m的微孔濾膜過濾后貼于無菌培養(yǎng)基上培養(yǎng)。 如此反復洗脫四次，或者洗脫到笫次的回收率到達90%以上，同法過濾后培養(yǎng)濾 膜。試驗流程如下：b）反復洗脫次后，將產(chǎn)品瀝干，置于無菌培養(yǎng)皿內(nèi)，澆注小于45的無菌

34、培養(yǎng)基， 同上述濾膜一并置于適宜的溫度下培養(yǎng)后計數(shù)。吩立陰性對照：取無菌生理鹽水100ml,過濾后貼于無菌培養(yǎng)基上培養(yǎng)。UH.6.4. 1.3 結(jié)果計算培養(yǎng)結(jié)束后，對每個培養(yǎng)皿進行計數(shù)，并計算回收率及校正因子，計算公式如下:回收率（%）=洗脫液A菌落數(shù)菌落總數(shù)X1OO%帶格式的：標題4,行距：單倍行距，到齊到網(wǎng)格, 制表位：不在3. 43字符帶格式的：列出段落，縮進：左側(cè)：0.5厘米，首行 縮進：0厘米，行距：單倍行距，編號+級別：1 + 編號樣式：a, b, c,+起始編號：1 +對齊方式： 左側(cè)+對齊位置：0. 74厘米+縮進位置：1.48 厘米，到齊到網(wǎng)格，制表位：不在3.43字符帶格式

35、的：居中，縮進：首行縮進：0. 74厘米，行 距：多倍行距1.25字行校正因子（CF）=回收率（%）入46. 4. 2 透析紙的校正因子計算1樣品處理,叢整套b）透析紙采用擦拭法制備其供試液，擦拭時,將棉簽頭按在取樣外表上,用力使其彎曲 與擦拭外表成45.,平穩(wěn)而緩慢地擦拭取樣外表,在向前移動的同時,將其從一邊移 到另一邊,擦拭過程應覆蓋整個外表。翻轉(zhuǎn)棉簽,讓棉簽的另一面也進行擦拭，但與 前次擦拭移動方向垂直,每支棉簽分別擦拭取樣5*5cm,擦拭完成后,將棉簽頭剪下 放入裝有10ml無菌生理鹽水的試管中，浸泡，手工振搖80次，制成1:10的供試 液。71-6 4. 2. 2 試驗步驟a） 1:

36、10的供試液，取1ml洗脫液A,傾注約45的瓊脂培養(yǎng)基到平板放至凝固。如 此反復洗脫四次，或者洗脫到者次的回收率到達9096以到同法制備平板傾注后 培養(yǎng)。試驗流程如下：b）反復洗脫次后，將產(chǎn)品瀝干，置于無菌培養(yǎng)皿內(nèi)，澆注小于45c的無菌培養(yǎng)基，帶格式的：列出段落，行距：單倍行距？銅號+級 剜：1 +編號樣式：a, b, c,+超始編號：1 + 對齊方式：左側(cè)+對齊位置：（）.74厘米+縮進位 置：1.48厘米，制表位：不在3.43字符置于適宜的溫度下培養(yǎng)后計數(shù)。豈陰性對照：取1ml無菌生理鹽水，置于無菌培養(yǎng)皿內(nèi)，澆注小于45C的無菌培養(yǎng) 基，置于適宜的溫度下培養(yǎng)后計數(shù)。培養(yǎng)結(jié)束后，對每個培養(yǎng)皿進行計數(shù)，計數(shù)結(jié)果需乘以稀釋倍數(shù)培，并計算回收 率及校正因子，計算公式如下：相格式的：居中，行距：多倍行距1.25字行回收率（%）=洗脫液A前落數(shù)X100%校正因子（CF）=函落總數(shù)100回收率（%）6. 4. 3相關結(jié)果見附