兩種不同提取方法對赤芍中丹皮酚含量

1、兩種差異提取要領(lǐng)對赤芍中丹皮酚含量【摘要】目的創(chuàng)立以高效液相色譜法測定赤芍中丹皮酚含量的要領(lǐng)。要領(lǐng)接納超聲和回流兩種要領(lǐng)提取赤芍藥材中的丹皮酚,接納高效液相色譜法測定其含量。色譜柱為agilentzrbaxsb-18(stablebndanalytial4.6250,5),活動相為甲醇-水(4555),流速為1l/in,柱溫25,檢測波長274n。效果線性回歸方程為：y=1.01105x-9.84102,r=0.9999(n=5),在0.1040.52g范疇內(nèi)丹皮酚的峰面積與進樣量有精良的線性干系。結(jié)論本法操縱輕便、正確、重復(fù)性好,可用于赤芍藥材中丹皮酚含量的測定,同時可作為赤芍藥材在炮制前后

2、的質(zhì)量操縱要領(lǐng)之一?！娟P(guān)鍵詞】赤芍;丹皮酚;高效液相色譜法;含量測定effetftextratingethdsnntentfpaenlinpaenialatiflrapall.byhplpengxia-xia,zhangzhen-ei,hidng,etal(gansullegeft,lanzhu730000,hina)keyrds：paenialatiflrapall.;paenl;hpl;ntentdeterinatin赤芍為毛茛科芍藥屬植物芍藥(paenialatiflrapall.)或川赤芍(paeniaveithiilynh)的枯燥根,其有用身分中含有丹皮酚1。丹皮酚易溶于乙醇和甲醇,

3、可溶于乙醚、丙酮、苯、氯仿及二硫化碳,稍溶于水,在熱水中溶解,不溶于冷水,能隨水蒸氣揮發(fā),呈白色針狀結(jié)晶,具有熔點低、易揮發(fā)及水溶性差的特性2。研究表白,丹皮酚具有平靜、鎮(zhèn)痛、解熱、解痙、抗炎等作用,并具有抗心律變態(tài)、抗動脈粥樣硬化、改進微循環(huán)、庇護缺血構(gòu)造、抗菌和按捺皮膚色素合成等作用。比年來還創(chuàng)造丹皮酚具有抗腫瘤作用,同時能進步機體免疫力且無顯著不良反響。丹皮酚的提取要領(lǐng)重要有醇提法、水蒸氣蒸餾法、2超臨界流體萃取法等3。本試驗根據(jù)2022年版?中華人民共和國藥典?牡丹皮和徐長卿中丹皮酚的測定要領(lǐng),接納超聲提取,根據(jù)有關(guān)報道接納乙醇回流提取4-5,以高效液相色譜法(hpl)測定其含量,并比

4、擬兩種差異要領(lǐng)提取對其含量的影響,通過創(chuàng)立赤芍中丹皮酚的含量測定要領(lǐng),多角度操縱赤芍藥材的質(zhì)量。1儀器與試藥aters600高效液相色譜儀(aters600泵,aters2487雙波長檢測器,aterseper色譜事情站);超聲洗濯儀(200,50hz,天津奧特賽恩斯儀器as7240b);混淆纖維素酯微孔濾膜(孔徑：0.45);聚偏氟乙烯微孔濾膜(f型,孔徑：0.45);電子闡發(fā)天平(sartriusbs224s);超等恒溫水浴(dkb-50常州榮冠實行闡發(fā)儀器廠)。丹皮酚比擬品由中國藥品生物成品檢定所提供(批號110708-202205,供含量測定利用);藥材赤芍(購于甘肅中醫(yī)學(xué)院隸屬病院)

5、經(jīng)中藥斷定教研室主任楊扶德傳授斷定為毛茛科植物芍藥paenialatiflrapall.的枯燥根。甲醇(色譜純,山東禹王,批號20220315112),乙醇(闡發(fā)純,批號20220827093),水為娃哈哈純潔水。2要領(lǐng)與效果2.1色譜條件與體系實用性agilentzrbaxsb-18(stablebndanalytial4.6250,5)色譜柱;活動相：甲醇-水(4555);流速：1l/in;柱溫25;檢測波長274n。在此色譜條件下,理論塔板數(shù)大于13000,分散度大于1.5。2.2比擬品溶液的制備細(xì)密稱取丹皮酚比擬品2.6g置25l量瓶中,加甲醇溶解并稀釋至刻度,搖勻,即得每1l比擬品溶

6、液含丹皮酚104g。2.3供試品溶液的制備取樣品粗粉(過40目)約1.0g,細(xì)密稱定,置具塞錐形瓶中,細(xì)密參加甲醇50l,密塞,搖勻,稱定重量,超聲處置懲罰(功率200,頻率50hz)30in,放冷,再稱定重量,用甲醇補足減失的重量,搖勻濾過。細(xì)密取續(xù)濾液1l,置10l量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,搖勻即得,備用。取樣品粗粉(過40目)約1.0g,細(xì)密稱定,置圓底燒瓶中,參加8倍量75%乙醇,于80回流30in,低溫?fù)]干乙醇,加甲醇溶解,細(xì)密取續(xù)濾液1l,置10l量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,搖勻即得,備用。2.4線性干系觀察別離細(xì)密吸勸2.2項下的丹皮酚比擬品溶液0.5、1.0、1.5、2.0、2.

7、5l置10l量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,搖勻即得,制成一系列濃度的比擬品尺度溶液。別離細(xì)密汲取20l進樣,注入液相色譜儀,記載色譜,以峰面積為縱坐標(biāo),丹皮酚濃度為橫坐標(biāo)舉行回歸盤算,得線性回歸方程為：y=1.01105x-9.84102,r=0.9999(n=5),效果表白,在0.1040.52g范疇內(nèi)丹皮酚的峰面積與進樣量呈精良的線性干系。2.5細(xì)密度試驗細(xì)密汲取比擬品溶液(104g/l)20l,重復(fù)進樣5次,并舉行測定,測定其rsd=0.75%,表白細(xì)密度精良。2.6不變性試驗按“2.3項下要領(lǐng)制備供試品溶液,細(xì)密汲取供試品溶液20l,別離于0、4、8、16、24h進樣,測定其rsd=0.8

8、3%(n=5),效果表白,供試品溶液在24h內(nèi)不變性精良。2.7重復(fù)性試驗按“2.3項下要領(lǐng)制備供試品溶液5份,細(xì)密汲取供試品溶液20l舉行測定,丹皮酚均勻含量為6.705g/g,rsd=0.91%(n=5),說明供試品溶液重復(fù)性精良。2.8加樣接納率試驗細(xì)密稱取丹皮酚含量的供試品1g,每3份為一組,參加比擬品溶液,別離細(xì)密參加5.2g/l比擬品溶液0.5、1.0l,按“2.3項下要領(lǐng)制備供試品溶液,并舉行測定,記載色譜,盤算其rsd=0.81%,表白接納率切合劃定。效果見表1。表1加樣接納率試驗效果(n=6)2.9丹皮酚的含量測定按“2.3項下要領(lǐng)制備供試品溶液,別離進樣20l,測定(n=3

9、),取3次測定均勻值。效果見表2,色譜圖見圖1。由表2可知,接納甲醇超聲提獲得到丹皮酚的含量普及偏高,接納75%乙醇回流得到的含量較低。由于接納回流提取時用到的乙醇溶劑較少,在回流時隨著時間延伸,乙醇不竭揮發(fā),故給藥材身分提取帶來喪失,有大概使提取量較少。表2差異提取要領(lǐng)的赤芍中丹皮酚含量測定效果3討論赤芍中重要有用身分為芍藥苷,本試驗拔取其含量較低的丹皮酚作為參考指標(biāo),目的是對赤芍中丹皮酚做必然量,以到達綜合操縱赤芍藥材質(zhì)量的目的。本試驗在舉行乙醇回流提取的歷程中,接納75%乙醇,只回流30in,目的在于只管制止丹皮酚的喪失。但由于丹皮酚為揮發(fā)性身分,在加熱回流時不免對其造成喪失,故測定效果表現(xiàn),乙醇回流提取后身分的含量普及低于甲醇超聲提齲在2022年版?中華人民共和國藥典?中,赤芍以所含身分芍藥苷作為質(zhì)量操縱的指標(biāo),丹皮酚在藥材中含量較低,在枯燥和加工等炮制歷程中,受到溫度的影響導(dǎo)致其含量低落,因此,在炮制的歷程中應(yīng)得當(dāng)操縱溫度以制止丹皮酚的喪失?！緟⒖嘉墨I】1國度藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)s.北京：化學(xué)產(chǎn)業(yè)出書社,2022.119-120.2趙陸華.中藥高效液相色譜應(yīng)用.北京