POWERPOINT 演示文稿 - 藥物分析

1、藥物分析 甄 漢 深 注：甄-音“真”zhen普通高等教育“十五”國家級規(guī)劃教材藥物分析供藥學(xué)類專業(yè)用第五版劉文英 主編人民衛(wèi)生出社 2003年7月普通高等教育“十五”國家級規(guī)劃教材中藥制劑分析 供中藥類專業(yè)用中國中醫(yī)藥出社 2003年月第三章 藥物的雜質(zhì)檢查 藥物的雜質(zhì)是指藥物中存在的無治療作用、或影響藥物的穩(wěn)定性和療效、甚至對人體健康有害的物質(zhì)。 第一節(jié) 概 述 一、藥物的純度要求 藥物的純度即純凈程度，是反映藥品質(zhì)量的一項重要指標(biāo)。 對藥物質(zhì)量的評價 ： 三效：高效、長效、速效; 三?。憾拘浴⒂昧?、副作用小。藥物的純度 通?？梢詮?（）藥物的結(jié)構(gòu)，（）外觀性狀， （）理化常數(shù)，（）雜質(zhì)檢

2、查，（）含量測定等方面作為一個有聯(lián)系的整體來表明和評定藥物的純度。所以在藥物的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中就規(guī)定藥物的純度要求。但是雜質(zhì)多了： ）藥物的理化常數(shù)變化 ）外觀性狀變化 ）穩(wěn)定性下降 ）含量下降、活性下降 ）毒副作用上升 二、雜質(zhì)的來源和種類 （一）雜質(zhì)的來源 1、生產(chǎn)過程中引入的雜質(zhì)：來源 于制備 原料、溶劑 、試劑、中間產(chǎn)品、副產(chǎn)品、器械等等。 2、貯存過程中引入的雜質(zhì)：來源于外界條件 包裝、運輸、保管不妥（受光線、溫度、空氣、微生物的影響等等）。 （二） 雜質(zhì)的種類 藥物中的雜質(zhì)來源可分為一般雜質(zhì)和特殊雜質(zhì)。 一般雜質(zhì)是指在自然界分布較廣泛，在多種藥物的生產(chǎn)和貯藏過程中容易引入的雜質(zhì)，如酸、堿

3、、水分、氯化物、硫酸鹽、砷鹽、重金屬等。 特殊雜質(zhì)是指在特定藥物的生產(chǎn)和貯藏過程中引入的雜質(zhì)。容許量。三、雜質(zhì)的限量的檢查 （一）、沒有必要把藥物中的雜質(zhì)完全除去從雜質(zhì)的來源考慮，完全除去藥物中的雜質(zhì)，即不可能也沒有必要。 （二）、藥物中雜質(zhì)允許最大限度的原則： 在不影響藥物的療效和不發(fā)生毒性的前提下，允許藥物中存在有一定量的雜質(zhì)。這一允許量被稱為雜質(zhì)的限量。 雜質(zhì)限量 指藥物中所含雜質(zhì)的最大容許量。 藥物中雜質(zhì)的檢查多數(shù)采用限量檢查（limit test ），該檢查不要求測定雜質(zhì)的含量，而只檢查其是否超過限量。 由于以上的原因， 因此，藥物的雜質(zhì) 檢查又稱純度檢查，限度（限量）檢查。 A、取

4、一定量供試品 結(jié)果 （產(chǎn)生色或渾濁） B、取一定量與 被檢雜質(zhì)相同 同上處理 的純物質(zhì)或其他對照品標(biāo)準(zhǔn)液 結(jié)果 （色或渾濁 ） 藥物的限量檢查的方法：比色法或比濁法當(dāng) A B 時：本項不合格。當(dāng) A B 時： 本項合格。當(dāng) A = B 時： 重做。依法處理 然后比較A和B： 雜質(zhì)的限量 通常用百分之幾 (%) 或百萬分之幾 ( 10-6 ) 來表示。 1 g = 10-6g = 10-3mg雜質(zhì)限量的計算： 雜質(zhì)限量（L）= 100% 雜質(zhì)限量= 100% L = 100%雜質(zhì)的最大允許量供試品量標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積（V） 標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度（C） 供試品的量（S）C V S 應(yīng)用示例一 對乙酰氨基酚中

5、氯化物檢查 取對乙酰氨基酚2.0g ，加水100ml時，加熱溶解后冷卻，濾過，取濾液25ml ，依法檢查氯化物（中國藥典，附錄VIIIA），所發(fā)生的渾濁與標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液（每1ml 相當(dāng)于10g的cl-）制成的對照液比較，不得更濃。問氯化物的限量是多少？L =CVS 100% = 0.01 52 103 25100100% = 0.01%第二節(jié)一般雜質(zhì)的檢查方法 一、 氯化物的檢查法 1、原理：中國藥典對氯化物的檢查是利用氯化物在硝酸酸性溶液中與硝酸銀試液作用，生成氯化銀白色渾濁液，與一定標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液在相同的條件下生成的氯化銀渾濁液比較，濁度不得更大。 Cl- AgCl （微量時渾濁 ） 稀

6、HNO3AgNO3 2、方法：比濁法 A、取一定量供試品 產(chǎn)生AgCl (渾濁） 依法處理稀HNO3 AgNO3同上處理 B、取一定量標(biāo)準(zhǔn)NaCI 液 同上 （標(biāo)準(zhǔn) NaCI 濃度C= 0.01 mg CI - /ml ） （如 A 濁度比B小則本項合格）。3、注意點：（1）加HNO 3 目的； A、AgCI 不溶于HNO 3 可在HNO 3 中 產(chǎn)生最好 的乳化渾濁； B、加速 AgCI 的 產(chǎn)生； C、防止產(chǎn)生Ag2 0 ，Ag3PO4 , Ag2CO3 因為 這些溶于HNO 3 這樣就可以防止CO 32 -， OH - ，PO43 - 干擾。（2）加HNO 3 的 量要合適 （3）CI

7、- 濃度（4）溫度（6）有干擾物必須消除。 A、如：（有色） 取兩分等量供試品： a、 一份做供試液（A管） 依法檢查 b、另一份 AgCI 濾液（B 管加入 規(guī)定量的標(biāo)準(zhǔn)NaCI溶液作為對照管）。 加稀 HNO 3過濾B、用濾紙過濾時，濾紙中如含有氯化物，可預(yù)先用含 有硝酸的水溶液洗凈后使用。 C、Br - 、I - 與AgNO3 作用均能生成Ag（鹵化銀）； 硫氰酸鹽能與AgNO 3 作用生成硫氰酸銀 ， 以上均有干擾。因此，必須排除。（5）嚴(yán)格按照操作順序進行AgNO3D、存在于有機物結(jié)構(gòu)中的氯化物檢查。 方法： 必須 使結(jié)狀態(tài)的氯變?yōu)橛坞x狀態(tài)的氯。 如 有機破壞的方法： 某些藥物含有有

8、機氯雜質(zhì)可以采用本法。 Cl Cl- （7）、溶于水的有機藥物（如有機酸堿金屬鹽）按藥典附錄方法直接檢查氯化物。不溶于水的有機藥物，多數(shù)加水振搖，使所含氯化物溶解，濾過，取濾液依法檢查（也有用丙酮溶解后檢查的）。 SO4 2 - BaSO 4 （SO 42 - 微量時渾濁）二、 硫酸鹽檢查法 1、原理：藥物中存在的微量硫酸鹽與氯化鋇在鹽酸酸性介質(zhì)中 生 成硫酸鋇白色渾濁，與一定量標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液在相同條件生 成的渾濁比較，濁度不得更大。2、方法：比濁法 依法處理A、供試品一定量 產(chǎn)生BaSO4 的渾濁 HCl，25% BaCI 2 同上B、取一定量K 2 SO 4 標(biāo)準(zhǔn)液 同上HCl25% Ba

9、CI 23、注意點： （1）加HCI 要 適量,防止BaCO 3 ,Ba 3（PO 4 ）2 等 的生成。 （2）本法適宜比濁濃度為0.10.5 mgSO4 2- /50 ml。 （3）BaCl2 試液濃度在10% 25% 范圍內(nèi)。 （4）供試液如需濾過，應(yīng)先用鹽酸使成酸性的蒸餾水洗凈濾紙中硫酸鹽。 （5）有色供試品溶液的處理及其他注意事項與氯化物檢查法相同。1 、原理 鐵鹽在鹽酸酸性溶液中與硫氰酸銨生成紅色可溶性硫氰酸鐵配位離子，再與一定量標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液用同法處理后所呈的顏色比較，顏色不得更深。 H+3 -移至50mI納氏比色管稀HCI 4mI過硫酸銨50mg按上法三、鐵鹽檢查法：Fe3+ +

10、6 SCN-、方法：比色法 （）供試品 水mI加水稀釋或約35mI后 Fe（SCN）6液（30 100）3 mI，再加水適量稀釋成 50mI，搖均如顯色與標(biāo)準(zhǔn)溶液比較。（2）標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液處理顯色（一）硫氰酸鹽法加硫氰酸銨溶（二）巰基醋酸法 （“巰”音“球”） BP采用巰氰醋酸（mercaptoacetic acid）法檢查藥物中鐵鹽。 原理 硫氰醋酸還原Fe 3為Fe 2 ，在氨堿性溶液中進一步與Fe2作用生成紅色配位離子，與一定量標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液經(jīng)同法處理后產(chǎn)生的顏色進行比較，以限制鐵的量。3）注意點： 1）加HCI防止鐵鹽水解 2）加過硫酸銨 （NH4）2S2O8 氧化劑，氧化供試品中 F2+生成

11、 Fe3+ ; 防止光線使硫氰酸鐵還原或分解退色。 3）有干擾要排除。2Fe3 2HSCH2COOH 2Fe2SCH2COOH 2H SCH2COOH2Fe3 2HSCH2COOH Fe（SCH2COOH）2 HFe（SCH2COOH）2 Fe（SCH2COO）22 2H20 2OH- 紅色1、原理 H+（1）Pb2+ PbS （量少時，呈色 黃 黑） H2S（2）、凡溶于堿不溶于稀酸的藥物，如磺胺類，巴比妥類等，均在堿性溶液中以硫化鈉試液為顯色劑 。四、重金屬檢查法： OH- Pb2+ PbS Na2S（3）含芳環(huán)或雜環(huán)的有機藥物，先進行結(jié)構(gòu)破壞，使共價的鉛變?yōu)橛坞x的鉛，再采取上述的（1）或

12、者（2）法檢查。 .方法 第一法 硫代乙酰胺法 原理 硫代乙酰胺在弱酸性（p醋酸鹽緩沖液）條件下水解，產(chǎn)生硫化氫，與微量重金屬離子生成黃色到棕黑色的硫化物均勻混懸液，與一定量標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液經(jīng)同法處理后所呈現(xiàn)顏色比較，顏色不得更深。 CH3CSNH2 H20 CH3CONH2H2S H2S Pb2 PbS 2H 操作方法（比色法）： 依法處理 A、一定量供試品 PbS HAC、H2S 注意點： pH：pH3.5 在此條件下沉淀完全 ；不溶于HAC的檢品在OH- 中進行。 同上 B、取一定標(biāo)準(zhǔn)鉛液 PbSPb(NO3)2 第二法 適用于在水、乙醇中難溶，或能與金屬離子形成配位化合物的有機藥物。 原理

13、將供試品熾灼破壞后 ，加硝酸加熱處理，使有機物分解，破壞完全后，再按第一法進行檢查。 第三法 適用于難溶于稀酸但能溶解于堿性水溶液的藥物，如磺胺類、巴比妥類藥物等。 原理 在堿性介質(zhì)中，以硫化鈉為顯色劑，使Pb2 生 成PbS 微粒的混懸液，與一定標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液經(jīng)同法處理后所呈顏色比較不得更深。注意點： A、加HNO3目的： 水解 鹽 + H 2 O 酸 + 堿 中和 B、臨用前配制：溶液愈釋愈易水解，所以臨用前稀釋。（3）排除干擾物質(zhì)（4）含芳環(huán)或雜環(huán)有機物，按藥典方法先熾灼破環(huán)使 與有機物分子結(jié)合的重金屬游離，再依法檢查。（5）微孔濾膜過濾法 。 第四法 微孔濾膜法。 適用于重金屬限量低的藥物

14、。（含25g重金屬）的檢查。 。 原理 使重金屬生成的硫化物富集于微孔濾膜上，比較供試品和一定量的標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液同法處理后產(chǎn)生的色斑深淺，確定重金屬是否超過限量 。 試驗裝置圖見下頁 五、 砷鹽檢查法 （一）古蔡（Gutzeit）氏法 原理 金屬鋅與酸作用產(chǎn)生新生態(tài)的氫，與藥物中微量砷鹽反應(yīng)生成具有揮發(fā)性的砷化氫，遇溴化汞試紙，產(chǎn)生黃色至棕色的砷斑，與一定量標(biāo)準(zhǔn)砷溶液所生成的砷斑比較，顏色不得更深。原理： ASO33 - （亞砷酸鹽） ASH3 AsH（HgBr）2 黃色 As（HgBr）3 棕色 Zn + HCI新生態(tài)H2HgBr2試紙砷斑： As3 3Zn 3H 3Zn2 AsH3AsO3 -

15、 3Zn9H 3Zn2+ 3H2O AsH3AsH3 3HgBr2 3HBr As（HgBr）3 （黃色）2As（HgBr）3 AsH3 3 AsH（HgBr）2 （棕色）As（HgBr）3 AsH3 3HBr As2 Hg3 （棕黑色）裝置: 方法 注意事項 供試品處理 含銻藥物，如葡萄糖酸銻鈉，用古蔡氏法檢查時， 銻鹽也可被還原為銻化氫，與溴化汞試紙作用，產(chǎn)生灰色銻斑，干擾砷斑的檢出： SbH3 HgBr2 SbH2（HgBr）HBr 可改用白道田夫（Betterdorff）法檢查砷鹽。方法原理是氯化亞錫在鹽酸中將砷鹽還原成棕褐色的膠態(tài)砷，與一定量標(biāo)準(zhǔn)砷溶液用同法處理后的顏色比較，可控制

16、供試品中的砷量： 2As3 3SnCl2 6HCl 2As 3 SnCl4 6H 此法的反應(yīng)靈敏度以As2O3 計20g。少量二氯化汞的加入，能提高反應(yīng)靈敏度達20g/10ml。（二）二乙基二硫代氨基甲酸銀法（silve diethyldithiocarbamate）簡稱Ag （DDC）法 本法為中國藥典和USP（24）收載的方法。不僅可用于砷鹽的限量檢查，也可用作微量砷鹽的含量測定。原理 金屬鋅與酸作用，產(chǎn)生新生態(tài)的氫，與微量砷鹽反應(yīng)，生成具有揮發(fā)性的砷化氫； 砷化氫遇二乙基二硫代氨基甲酸銀，AsH3 6Ag（DDC）3As（DDC）3 6Ag 3HDDC使其還原產(chǎn)生紅色的膠態(tài)銀，用目視比色

17、法或在510nm 波長處測定吸收度，再以一定量標(biāo)準(zhǔn)砷溶液用同法處理后得到的有色溶液進行比較。六、溶液顏色檢查法 有色雜質(zhì)可能在藥物的生產(chǎn)過程中引入，也可能由貯藏過程產(chǎn)生。對溶液顏色進行檢查，可控制藥物中有色雜質(zhì)的含量。中國藥典采用的檢查方法有三種。 （一）目視比色法 （二）分光光度法 （三）色差法 原理 方法七、 易炭化物檢查法 易炭化物檢查法是檢查藥物中遇硫酸易炭化或易氧化而呈色的微量有機雜質(zhì)。這類雜質(zhì)多數(shù)結(jié)構(gòu)未知，用硫酸呈色的方法可以簡便地控制他們的總量。方法注意事項八、 溶液澄清度檢查法 澄清度可反應(yīng)藥物溶液中的微量不溶性雜質(zhì)的存在情況，在一定的程度上可反映藥品的質(zhì)量和生產(chǎn)的工藝水平，對

18、于供制備注射液用原料藥物的純度檢查尤為重要。 原理 烏洛托品在偏酸性條件下水解產(chǎn)生甲醛，甲醛與肼縮合生成不溶于水的甲醛白色渾濁。（CH2）6N4 6H2O 6HCHO4NHSHCHOH2N NH2 H2C = N NH2 H2O 方法 注意事項九、 熾灼殘渣檢查法 中國藥典和美國藥典對熾灼殘渣（residue on ignition ）的定義：有機藥物經(jīng)炭化或揮發(fā)性無機藥物加熱分解后，高溫?zé)胱?，所產(chǎn)生的非揮發(fā)性無機雜質(zhì)的硫酸鹽。英國藥典稱去其為硫酸灰分（sulphated ash）。熾灼殘渣檢查用于控制有機藥物和揮發(fā)性無機藥物中存在的非揮發(fā)性無機雜質(zhì)。方法注意事項十、 干燥失重測定法 干燥失重

19、系指藥品在規(guī)定的條件下，經(jīng)干燥后所減少的量，以百分率表示。干燥失重的量應(yīng)恒重。由干燥至恒重的第二次及各次稱重均應(yīng)在規(guī)定的條件下繼續(xù)干燥1h后進行。 （一）常壓恒溫干燥法 本法適用于受熱較穩(wěn)定的藥物。 方法 注意事項 （二）干燥劑干燥法 本法適用于受熱分解、或易于揮發(fā)的供試品。干燥劑：（1）硅膠 ( 吸水力大于硫酸, 使 用方便, 價廉, 變色, 可以反復(fù)使用） （2）硫酸（吸水次之，較便宜） （3）五氧化二磷（吸水力強，但價高）（三） 減壓干燥法 本法適用于熔點低、受熱不穩(wěn)定或難驅(qū)除水分的藥物。原理方法注意事項（四）熱分析法 在程序控制溫度的情況下，測定物質(zhì)的物理、化學(xué)變化與溫度關(guān)系的一類儀器分析方法稱為熱分析法。該方法具有樣品用量少，靈敏、快速等優(yōu)點，在藥物分析中廣泛用于物質(zhì)的熔點、多晶