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文檔簡介
1、目 錄 TOC o 1-3 h z u HYPERLINK l _Toc219358212 FT-200動(dòng)物跑步機(jī)實(shí)驗(yàn)簡明指導(dǎo) PAGEREF _Toc219358212 h 2 HYPERLINK l _Toc219358213 ZB-200小鼠轉(zhuǎn)棒儀實(shí)驗(yàn)簡明指導(dǎo) PAGEREF _Toc219358213 h 3 HYPERLINK l _Toc219358214 BA-200避暗儀實(shí)驗(yàn)簡明指導(dǎo) PAGEREF _Toc219358214 h 4 HYPERLINK l _Toc219358215 DT-200小鼠跳臺(tái)儀實(shí)驗(yàn)簡明指導(dǎo) PAGEREF _Toc219358215 h 5 HY
2、PERLINK l _Toc219358216 MT-200水迷宮實(shí)驗(yàn)指導(dǎo) PAGEREF _Toc219358216 h 6 HYPERLINK l _Toc219358217 RM-200八臂迷宮實(shí)驗(yàn)簡明指導(dǎo) PAGEREF _Toc219358217 h 9 HYPERLINK l _Toc219358218 CPP-100條件位置偏愛實(shí)驗(yàn)簡明指導(dǎo) PAGEREF _Toc219358218 h 10 HYPERLINK l _Toc219358219 PH-200雙足平衡測(cè)痛儀操作簡明指導(dǎo) PAGEREF _Toc219358219 h 11 HYPERLINK l _Toc21935
3、8220 PL-200熱刺痛儀實(shí)驗(yàn)簡明指導(dǎo) PAGEREF _Toc219358220 h 12 HYPERLINK l _Toc219358221 PV-200足趾容積測(cè)量儀實(shí)驗(yàn)簡明指導(dǎo) PAGEREF _Toc219358221 h 13 HYPERLINK l _Toc219358222 RB-200智能熱板儀實(shí)驗(yàn)簡明指導(dǎo) PAGEREF _Toc219358222 h 14 HYPERLINK l _Toc219358223 SW-200光熱尾痛儀實(shí)驗(yàn)簡明指導(dǎo) PAGEREF _Toc219358223 h 15 HYPERLINK l _Toc219358224 BP-6無創(chuàng)血壓測(cè)量
4、儀實(shí)驗(yàn)簡明指導(dǎo) PAGEREF _Toc219358224 h 16 HYPERLINK l _Toc219358225 HV-4離體組織器官灌流實(shí)驗(yàn)簡明指導(dǎo) PAGEREF _Toc219358225 h 18 HYPERLINK l _Toc219358226 GL-2離體心臟灌流系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)簡明指導(dǎo) PAGEREF _Toc219358226 h 19 HYPERLINK l _Toc219358227 PM-200高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)簡明指導(dǎo) PAGEREF _Toc219358227 h 22 HYPERLINK l _Toc219358228 ZZ-6小鼠自主活動(dòng)儀實(shí)驗(yàn)簡明指導(dǎo) PAGER
5、EF _Toc219358228 h 24 HYPERLINK l _Toc219358229 TS-200懸尾測(cè)試儀實(shí)驗(yàn)指導(dǎo) PAGEREF _Toc219358229 h 25 HYPERLINK l _Toc219358230 HX-300S動(dòng)物呼吸機(jī)快速操作指南 PAGEREF _Toc219358230 h 26注:有“ ”符號(hào)標(biāo)記的指實(shí)驗(yàn)室沒有配備的儀器設(shè)備FT-200動(dòng)物跑步機(jī)實(shí)驗(yàn)簡明指導(dǎo)一、實(shí)驗(yàn)原理FT-200動(dòng)物跑步機(jī)配備有動(dòng)物跑道,通過后端一個(gè)刺激裝置來強(qiáng)迫動(dòng)物持續(xù)奔跑,儀器自動(dòng)記錄動(dòng)物所受電擊次數(shù)和跑道上的奔跑總時(shí)間??捎糜谄趯?shí)驗(yàn)、運(yùn)動(dòng)協(xié)調(diào)實(shí)驗(yàn)、中樞神經(jīng)抑制實(shí)驗(yàn)、骨骼肌
6、松弛實(shí)驗(yàn)研究,觀察藥物對(duì)受試動(dòng)物運(yùn)動(dòng)及協(xié)調(diào)能力的影響,也可用于大、小鼠抗疲勞實(shí)驗(yàn),評(píng)測(cè)藥物對(duì)動(dòng)物體能的影響。二、操作步驟1、實(shí)驗(yàn)前一周,在喂食30分鐘后,先進(jìn)行跑步機(jī)適應(yīng)訓(xùn)練;2、將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(大鼠或小鼠)放入跑步帶上,蓋上玻璃蓋;打開電源開關(guān);設(shè)定好“定時(shí)時(shí)間”、“轉(zhuǎn)速”和“大/小鼠”的工作模式及調(diào)節(jié)刺激電流旋鈕,按下“啟/?!卑粹o,系統(tǒng)自動(dòng)開始記錄;3、末次給藥后30、60分鐘,將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物放在跑步機(jī)上,設(shè)置實(shí)驗(yàn)參數(shù),按“啟/?!卑粹o進(jìn)行動(dòng)物體能測(cè)試。 提示:可采用逐漸增加速度與坡度的方法使動(dòng)物奔跑直至力竭(exhaustion),參數(shù)設(shè)置可參考下表(Bedford et al., 1979)
7、 所列。若鼠落入電擊區(qū),而經(jīng)過多次電擊仍無法起身往前跑即判定已經(jīng)力竭,記錄開始跑步至力竭的跑步時(shí)間。 坡度 (%) 速度 (mph) 持續(xù)時(shí)間 (分)0 8.2 3 5 15.2 3 10 19.3 3 10 26.8 3 11 30.3 3 4、當(dāng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在跑步帶一頭落下時(shí),液晶顯示器上對(duì)應(yīng)的該通道將停止計(jì)時(shí),同時(shí)動(dòng)物落帶次數(shù)加1。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物會(huì)因受電擊后離開刺激源,繼續(xù)在跑步帶上活動(dòng),此時(shí)通道計(jì)時(shí)繼續(xù)累加。實(shí)驗(yàn)用時(shí)到達(dá)設(shè)定時(shí)間后,實(shí)驗(yàn)停止。三、適用動(dòng)物環(huán)境及其他要求1、成年標(biāo)準(zhǔn)體重的大小鼠為宜,大鼠體重200g左右,小鼠體重20g左右;2、在通風(fēng)、安靜、相對(duì)昏暗的環(huán)境下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。四、實(shí)驗(yàn)指標(biāo)
8、1、電擊次數(shù):動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)過程中落帶的次數(shù)(即為受到電擊的次數(shù))2、奔跑時(shí)間:實(shí)驗(yàn)過程中動(dòng)物在跑步帶上活動(dòng)的總時(shí)間。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體能較好者電擊次數(shù)相對(duì)較少,而奔跑時(shí)間相對(duì)較長。五、注意事項(xiàng) 跑步機(jī)使用一段時(shí)間后,跑步帶會(huì)出現(xiàn)微量的伸長,如果有打滑現(xiàn)象,說明跑步帶偏松,請(qǐng)?jiān)趯I(yè)人員指導(dǎo)下用緊固調(diào)節(jié)螺栓調(diào)節(jié)。ZB-200小鼠轉(zhuǎn)棒儀實(shí)驗(yàn)簡明指導(dǎo)一、實(shí)驗(yàn)原理動(dòng)物在旋轉(zhuǎn)的棒上為保持身體平衡不致跌下,需要向轉(zhuǎn)動(dòng)棒的反方向移動(dòng),并保持四肢肌肉協(xié)調(diào)運(yùn)動(dòng),否則將從棒上落下。有中樞抑制作用和肌肉松弛作用的藥物,可縮短動(dòng)物從棒上落下的時(shí)間,此法反映動(dòng)物的被動(dòng)活動(dòng)。二、操作步驟1、將6只小鼠分別放在轉(zhuǎn)棒的6個(gè)通道上,設(shè)置好
9、 “日期”、“轉(zhuǎn)速”、“TRAIN”(訓(xùn)練模式);2、轉(zhuǎn)速設(shè)置為16r/min,按下“啟/?!卑粹o,儀器開始計(jì)時(shí),并勻加速運(yùn)動(dòng)到設(shè)置到的轉(zhuǎn)速后作勻速轉(zhuǎn)動(dòng),選擇能在棒上3min而不落下的動(dòng)物進(jìn)行實(shí)驗(yàn),此時(shí)為篩選適應(yīng)過程,不記錄數(shù)據(jù);3、將已訓(xùn)練的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組,設(shè)置好“轉(zhuǎn)速”、“定時(shí)時(shí)間”、“TEST0”(順時(shí)針)或“TEST”(逆時(shí)針),按下“啟/?!卑粹o,把小鼠放在旋轉(zhuǎn)棒上的同時(shí)遮擋一下本通道落棒感應(yīng)器,系統(tǒng)發(fā)出提示音,觸發(fā)計(jì)時(shí),當(dāng)任意通道的小鼠落棒時(shí),對(duì)應(yīng)的液晶顯示器上的通道將停止計(jì)時(shí)。4、統(tǒng)計(jì)落棒的百分率,并比較對(duì)照組和給藥組的差異;三、適用動(dòng)物、環(huán)境及其他要求1、成年標(biāo)準(zhǔn)體重的小鼠為宜,
10、小鼠體重20g左右;2、在通風(fēng)、安靜、相對(duì)昏暗的環(huán)境下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。四、結(jié)果評(píng)價(jià)1、根據(jù)不同藥物的給藥方式和吸收速率,選擇間隔時(shí)間測(cè)定實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在定時(shí)時(shí)間內(nèi)的落棒率;2、可比較給藥組和對(duì)照組的差異;3、可做疲勞實(shí)驗(yàn)、骨骼肌松馳實(shí)驗(yàn)、中樞神經(jīng)抑制實(shí)驗(yàn)以及其它需用運(yùn)動(dòng)方式檢測(cè)藥物作用的實(shí)驗(yàn),如毒性對(duì)運(yùn)動(dòng)能力的影響,體內(nèi)某種物質(zhì)缺乏對(duì)運(yùn)動(dòng)能力的影響,心腦血管藥物對(duì)運(yùn)動(dòng)能力的影響等等。五、注意事項(xiàng)1、動(dòng)物需要速度從慢到快適應(yīng)過程。2、注意篩選動(dòng)作不協(xié)調(diào)的動(dòng)物;BA-200避暗儀實(shí)驗(yàn)簡明指導(dǎo)一、實(shí)驗(yàn)原理BA-200避暗儀利用鼠類的嗜暗習(xí)性而設(shè)計(jì),以光、電擊為聯(lián)合刺激使實(shí)驗(yàn)動(dòng)物產(chǎn)生由被動(dòng)回避轉(zhuǎn)為主動(dòng)回避的條件反
11、射。記錄此條件反射建立過程中的主動(dòng)回避反應(yīng)指標(biāo)來反映實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的學(xué)習(xí)、記憶能力的變化。 二、操作步驟(一)、訓(xùn)練模式:動(dòng)物學(xué)習(xí)階段,經(jīng)訓(xùn)練后獲得記憶1、打開電源開關(guān),根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求完成實(shí)驗(yàn)條件參數(shù)的設(shè)定(實(shí)驗(yàn)時(shí)間、刺激電壓、實(shí)驗(yàn)日期)。2、拉動(dòng)門控手柄關(guān)閉通道門洞,將小鼠背向洞口放入活動(dòng)箱明室中。3、按下“啟/停”按鍵開始實(shí)驗(yàn),并立即打開門洞。這時(shí)主機(jī)液晶屏顯示實(shí)驗(yàn)時(shí)間開始進(jìn)行倒計(jì)時(shí),同時(shí)各通道的潛伏期開始正向計(jì)時(shí)。4、當(dāng)小鼠第一次從明室進(jìn)入暗室,潛伏期計(jì)時(shí)停止,小鼠進(jìn)入暗室后會(huì)因受到電擊而逃出進(jìn)入明室,同時(shí)液晶屏顯示出錯(cuò)次數(shù)加1。5、到達(dá)實(shí)驗(yàn)設(shè)定時(shí)間或再次按下“啟/?!卑存I,實(shí)驗(yàn)停止(一般情況下
12、訓(xùn)練時(shí)間常設(shè)置為5min,儀器自動(dòng)記錄此時(shí)間段內(nèi)出錯(cuò)次數(shù)可反映動(dòng)物的學(xué)習(xí)成績)。(二)、測(cè)試模式:測(cè)試動(dòng)物的記憶能力1、經(jīng)訓(xùn)練24 h或48 h后進(jìn)行記憶測(cè)驗(yàn),操作步驟同上,記錄每只動(dòng)物進(jìn)入暗室的潛伏期和5 min內(nèi)的電擊次數(shù),并計(jì)算5 min內(nèi)進(jìn)入暗室(錯(cuò)誤反應(yīng))的動(dòng)物百分率(記憶鞏固)。2、停止訓(xùn)練5 d后可以在不同的時(shí)間進(jìn)行一次或多次記憶消退實(shí)驗(yàn)測(cè)試(記憶再現(xiàn))。三、適用動(dòng)物、環(huán)境等其他要求1、20-30g小鼠為宜,過小動(dòng)物探測(cè)可能不靈敏。2、實(shí)驗(yàn)最好在安靜,昏暗下進(jìn)行,環(huán)境溫度為20度左右。四、實(shí)驗(yàn)指標(biāo)潛伏期:動(dòng)物從放入明室按實(shí)驗(yàn)開始到進(jìn)入暗室遭電擊的計(jì)時(shí)時(shí)間。 出錯(cuò)次數(shù):實(shí)驗(yàn)時(shí)間內(nèi)小
13、鼠從明室進(jìn)入暗室受到電擊的次數(shù)。五、注意事項(xiàng)1、動(dòng)物的回避性反應(yīng)差異較大,如需減少差異或少用動(dòng)物,可對(duì)動(dòng)物進(jìn)行預(yù)選或按學(xué)習(xí)成績好壞檔次進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。2、動(dòng)物的個(gè)體差異對(duì)電擊刺激反應(yīng)較大,實(shí)驗(yàn)時(shí)宜先設(shè)置相對(duì)較低的刺激電壓,以免過多電死動(dòng)物。DT-200小鼠跳臺(tái)儀實(shí)驗(yàn)簡明指導(dǎo)一、實(shí)驗(yàn)原理 DT-200小鼠跳臺(tái)儀是以電擊為刺激,利用動(dòng)物對(duì)電擊刺激的逃避反應(yīng),使實(shí)驗(yàn)動(dòng)物產(chǎn)生由被動(dòng)回避轉(zhuǎn)為主動(dòng)回避的條件反射而設(shè)計(jì)的。在一個(gè)底面可以通電的反射箱內(nèi)放置一個(gè)絕緣的跳臺(tái),當(dāng)動(dòng)物在訓(xùn)練中受到電擊時(shí),可以跳上跳臺(tái)逃避電擊,由此獲得記憶,通過測(cè)試動(dòng)物在平臺(tái)上的潛伏期測(cè)試記憶,從而反應(yīng)出實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的學(xué)習(xí)、記憶能力的變化。二、
14、操作步驟 1、將動(dòng)物放入反應(yīng)箱內(nèi)適應(yīng)環(huán)境三分鐘。2、打開電源開關(guān),設(shè)定實(shí)驗(yàn)參數(shù),設(shè)定相對(duì)較低的刺激電壓。3、訓(xùn)練測(cè)試:按下“啟/?!遍_關(guān),系統(tǒng)立即通電。當(dāng)動(dòng)物在底部柵欄上受到電擊后,其正常反應(yīng)是跳回平臺(tái),以逃避電擊。多數(shù)動(dòng)物可能再次或多次跳至銅柵上,當(dāng)它們?cè)俅问艿诫姄艉笥謺?huì)迅速跳回平臺(tái)。訓(xùn)練數(shù)次后,動(dòng)物獲得記憶,可以按固定時(shí)間的錯(cuò)誤次數(shù)(number of errors)作為訓(xùn)練時(shí)動(dòng)物的學(xué)習(xí)成績。4、記憶測(cè)試:設(shè)定好測(cè)試時(shí)間后,按“啟/停”開關(guān),將經(jīng)過訓(xùn)練后篩選分組的動(dòng)物依次放入各通道反應(yīng)箱內(nèi)的平臺(tái)上,系統(tǒng)將依次自動(dòng)觸發(fā)該通道計(jì)時(shí)。當(dāng)某通道動(dòng)物第一次跳下平臺(tái)時(shí),該通道計(jì)時(shí)結(jié)束此即為該動(dòng)物的記憶
15、潛伏期,動(dòng)物在測(cè)試時(shí)間內(nèi)反復(fù)上下的次數(shù)記錄為受到電擊的次數(shù)即出錯(cuò)次數(shù)。5、24 h或48 h以后,將動(dòng)物以同樣方式再次放置于平臺(tái)上,按記憶測(cè)試模式進(jìn)行測(cè)定動(dòng)物的記憶鞏固情況。6、停止訓(xùn)練5 d后(包括第5 d)可以在不同的時(shí)間進(jìn)行一次或多次按記憶測(cè)試測(cè)定動(dòng)物的記憶消退。三、適用動(dòng)物、環(huán)境等其他要求大鼠和小鼠跳臺(tái)法均較常用,實(shí)驗(yàn)在常溫下進(jìn)行即可。四、實(shí)驗(yàn)指標(biāo) 潛伏期:訓(xùn)練后的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物測(cè)試時(shí)第一次跳下平臺(tái)所用的時(shí)間。 錯(cuò)誤次數(shù):為設(shè)定時(shí)間內(nèi)動(dòng)物跳下平臺(tái)受到電擊的次數(shù)。 記憶損傷動(dòng)物由于記憶力下降,表現(xiàn)為潛伏期縮短,同時(shí)錯(cuò)誤次數(shù)增加。而具有益智作用的重要可以改善這種現(xiàn)象,使?jié)摲谘娱L,而錯(cuò)誤次數(shù)減少
16、。五、注意事項(xiàng) 1、動(dòng)物的回避性反應(yīng)差異較大,可對(duì)動(dòng)物進(jìn)行預(yù)篩選或按學(xué)習(xí)成績好壞檔次進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。2、由于個(gè)體差異,實(shí)驗(yàn)宜先施加相對(duì)較低的刺激電壓,以避免電死動(dòng)物的可能性。3、實(shí)驗(yàn)時(shí)間可根據(jù)需要自行調(diào)整設(shè)定。MT-200水迷宮實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)一、實(shí)驗(yàn)原理 大小鼠厭惡處于水中的狀態(tài),同時(shí)游泳對(duì)于大小鼠來說十分消耗體力,因此在水中它們會(huì)本能的尋找水中的休息場(chǎng)所。尋找休息場(chǎng)所的行為涉及到一個(gè)復(fù)雜的記憶過程,包括收集與空間定位有關(guān)的視覺信息,再對(duì)這些信息進(jìn)行處理、整理、記憶、加固、然后再取出,目的是能成功的航行并且找到隱藏在水中的站臺(tái),最終從水中逃脫。Morris水迷宮(Morris water maze, MW
17、M)實(shí)驗(yàn)是一種強(qiáng)迫實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(大鼠、小鼠)游泳,學(xué)習(xí)尋找隱藏在水中平臺(tái)的一種實(shí)驗(yàn),主要用于測(cè)試實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)空間位置感和方向感(空間定位)的學(xué)習(xí)記憶能力。二、實(shí)驗(yàn)操作 (一)實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備與設(shè)置1、將圓形反應(yīng)水箱與固定支架放置在適當(dāng)位置,將攝象頭固定在圓形水箱垂直上方。在水池中注入清水,然后注入適量新鮮牛奶或奶粉,使水池成為不透明的乳白色。2、將平臺(tái)置于某一象限中央,且使水面高于平臺(tái)0.52cm(根據(jù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的大小決定),使動(dòng)物無法憑視覺辨別水中平臺(tái)的位置。將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(大小鼠)用實(shí)驗(yàn)室常見的苦味酸在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的頭部和背部涂抹成較大相連的區(qū)域作為標(biāo)記色。3、將攝像頭用視頻信號(hào)電纜與計(jì)算機(jī)上的捕捉卡相聯(lián)接。
18、完成加密狗和軟件系統(tǒng)的安裝。啟動(dòng)軟件,進(jìn)入軟件主界面。4、調(diào)整攝象鏡頭位置和焦距,使視頻顯示范圍剛好覆蓋整個(gè)容器水區(qū)域。以屏幕上的黑色基準(zhǔn)線為準(zhǔn),移動(dòng)水容器使容器上的標(biāo)記點(diǎn)與準(zhǔn)線相重合。(若屏幕上未出現(xiàn)黑色基準(zhǔn)線則可通過選擇屏幕右側(cè)的“顯示基準(zhǔn)”顯示)。5、點(diǎn)擊“新建項(xiàng)目”開始新的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目, 點(diǎn)擊“場(chǎng)景設(shè)定”來進(jìn)行實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景的設(shè)定:按住鼠標(biāo)左鍵在左側(cè)標(biāo)記點(diǎn)按下不放,拖動(dòng)鼠標(biāo)沿著左側(cè)標(biāo)記點(diǎn)到右側(cè)標(biāo)記點(diǎn)放開鼠標(biāo)。然后按住鼠標(biāo)左鍵在上側(cè)標(biāo)記點(diǎn)按下不放,拖動(dòng)鼠標(biāo)沿著上側(cè)標(biāo)記點(diǎn)到下側(cè)標(biāo)記點(diǎn)放開鼠標(biāo)。則系統(tǒng)自動(dòng)根據(jù)以上標(biāo)記畫出場(chǎng)景6、場(chǎng)景設(shè)置完成后,用戶可點(diǎn)擊“確定平臺(tái)”按鍵進(jìn)行平臺(tái)位置和大小的設(shè)置。第一次
19、實(shí)驗(yàn)時(shí)實(shí)平臺(tái)和虛平臺(tái)的位置和大小是一致的,以后每次實(shí)驗(yàn)點(diǎn)擊該按鍵時(shí)所確定的為實(shí)平臺(tái)的位置,虛平臺(tái)自動(dòng)設(shè)為第一次實(shí)驗(yàn)時(shí)的設(shè)置,不用再設(shè)定。7、將有標(biāo)記色的小鼠放在攝像頭下,點(diǎn)擊“目標(biāo)選取”,屏幕上出現(xiàn)了紅色色塊,如果色塊不明顯或與實(shí)際標(biāo)記的部分相差太大說明閾值設(shè)置不合適或攝像頭設(shè)置不當(dāng)??赏ㄟ^“調(diào)節(jié)閾值”調(diào)節(jié)到出現(xiàn)合適形狀為止(確保屏幕上只有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物標(biāo)記的地方為紅色,這樣實(shí)驗(yàn)過程中的追蹤才準(zhǔn)確可靠)。8、點(diǎn)擊“清除屏幕”按鈕,恢復(fù)到正常顯示狀態(tài)。點(diǎn)擊“保存設(shè)置”按鈕,保存當(dāng)前合適的顏色配置為默認(rèn)值。9、設(shè)置系統(tǒng)坐標(biāo)參數(shù),點(diǎn)擊“系統(tǒng)定標(biāo)”,本系統(tǒng)使用的實(shí)驗(yàn)桶已設(shè)定了四個(gè)標(biāo)記點(diǎn),只需移動(dòng)鼠標(biāo)到相應(yīng)標(biāo)
20、記點(diǎn),按住鼠標(biāo)左鍵拖動(dòng)鼠標(biāo)到其對(duì)應(yīng)標(biāo)記點(diǎn)松開即可,此時(shí)系統(tǒng)彈出一個(gè)對(duì)話框,在其中選擇正確的單位即完成本項(xiàng)操作。完成以上步驟后,即可開始實(shí)驗(yàn)。(二)實(shí)驗(yàn)開始:1、在軟件主界面右方中部有“實(shí)驗(yàn)設(shè)置”面板,其中有“定位航行實(shí)驗(yàn)”,“空間搜索實(shí)驗(yàn)”,兩種實(shí)驗(yàn)類型可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇,系統(tǒng)默認(rèn)為“定位航行實(shí)驗(yàn)”。 (1)定位航行實(shí)驗(yàn)觀察和記錄小鼠尋找并爬上平臺(tái)的路線圖及所需時(shí)間,即記錄其潛伏期和游泳速度,無設(shè)定時(shí)間限制。 (2)空間搜索實(shí)驗(yàn)要求動(dòng)物在設(shè)定時(shí)間內(nèi)能否能夠找到平臺(tái),用于測(cè)量動(dòng)物對(duì)平臺(tái)空間位置記憶的保持能力。2、在 “動(dòng)物編號(hào)”選擇框中選擇本次實(shí)驗(yàn)的小鼠編號(hào),然后放入實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(小鼠、大鼠),點(diǎn)擊
21、“開始實(shí)驗(yàn)”進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。3、訓(xùn)練: (1)每日將動(dòng)物頭朝池壁按東、南、西、北4個(gè)入水點(diǎn)分別放入水池,將站臺(tái)置于某一象限中央,實(shí)驗(yàn)過程保持站臺(tái)位置不變。 (2)每次實(shí)驗(yàn)以120s為限,系統(tǒng)自動(dòng)記錄動(dòng)物從入水點(diǎn)到達(dá)站臺(tái)所需時(shí)間以及在這段時(shí)間內(nèi)的游泳路程,以所需時(shí)間作為學(xué)習(xí)和記憶成績,若設(shè)定時(shí)間內(nèi)未找到站臺(tái),計(jì)算機(jī)停止跟蹤,記錄時(shí)間為120s。(3)訓(xùn)練中若動(dòng)物在120s內(nèi)找到站臺(tái),讓其在站臺(tái)上停留20s,若動(dòng)物未找到站臺(tái),將其放在站臺(tái)上使其停留20s。20S后將其從平臺(tái)上拿下,休息一分鐘后再次開始訓(xùn)練。一般正常動(dòng)物經(jīng)56個(gè)訓(xùn)練日可學(xué)會(huì)以最快最佳的軌跡找到平臺(tái)的正確位置。4、測(cè)試:第7日開始可將平臺(tái)轉(zhuǎn)
22、移到另一象限,記錄動(dòng)物入水后找到遷移后的平臺(tái)的潛伏期,在原來平臺(tái)位置所逗留的時(shí)間以及動(dòng)物找到遷徙后的平臺(tái)的路徑。5、數(shù)據(jù)的導(dǎo)出:1)軌跡的導(dǎo)出當(dāng)一次或多次實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,點(diǎn)擊“數(shù)據(jù)查看”切換到實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示窗口,此時(shí)模式為“圖像模式”,窗口中顯示的為實(shí)驗(yàn)的軌跡圖像。窗口正下方有一軌跡選擇框,可用鼠標(biāo)選擇需顯示的軌跡,此時(shí)點(diǎn)擊“導(dǎo)出”按鈕將窗口中的圖像保存為一幅位圖(后綴名為.BMP)??捎谩爱嫻P”或PHOTOSHOP等圖像軟件打開進(jìn)行修正和打印等操作。2)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的導(dǎo)出在點(diǎn)擊“數(shù)據(jù)查看”后點(diǎn)擊“數(shù)據(jù)模式”則切換到實(shí)驗(yàn)結(jié)果數(shù)據(jù)顯示窗口,此時(shí)窗口中顯示的為本項(xiàng)目中所有實(shí)驗(yàn)的結(jié)果數(shù)據(jù)信息。點(diǎn)擊“導(dǎo)出”則可
23、將這些信息保存為一個(gè)EXCEL文件(擴(kuò)展名為.CSV)。這個(gè)文件可用EXCEL打開進(jìn)行統(tǒng)計(jì)打印。三、適用動(dòng)物、環(huán)境等其他要求 適用動(dòng)物:大鼠、小鼠適用環(huán)境:1、實(shí)驗(yàn)水溫2325,安靜的環(huán)境下。2、實(shí)驗(yàn)過程中在視頻區(qū)域內(nèi)必須沒有干擾標(biāo)記色存在。四、實(shí)驗(yàn)指標(biāo)1、潛伏期:動(dòng)物入水后找到遷移后的平臺(tái)所用的時(shí)間。2、總路徑長度:動(dòng)物入水后到找到遷移后的平臺(tái)游泳路徑的長度總和。3、朝向角:動(dòng)物入水點(diǎn)和動(dòng)物入水后一秒鐘所在位置點(diǎn)兩點(diǎn)形成的直線與入水點(diǎn)和平臺(tái)所在點(diǎn)倆點(diǎn)形成的直線之間的夾角,即為朝向角。4、平均運(yùn)動(dòng)速度:總路徑長度與潛伏期的比值。5、經(jīng)過虛平臺(tái)次數(shù):動(dòng)物在空間搜索過程中經(jīng)過平臺(tái)移動(dòng)前位置的次數(shù)。
24、6、虛平臺(tái)停留時(shí)間:動(dòng)物在空間搜索過程中停留在平臺(tái)移動(dòng)前位置的時(shí)間總和。7、四個(gè)象限的時(shí)間/路徑:軟件將圓形水箱劃分為四個(gè)象限,動(dòng)物在任一象限所用的時(shí)間之和/路徑長度之和。8、內(nèi)/中/外環(huán)的時(shí)間/路徑長度:軟件可將圓形水箱用兩個(gè)直徑依次增大的圓形劃分為內(nèi)、中、外三個(gè)區(qū)域,動(dòng)物分別在三個(gè)區(qū)域中所用的時(shí)間之和/運(yùn)動(dòng)的路徑長度之和。9、有效區(qū)時(shí)間/路徑:用戶可通過軟件將平臺(tái)周圍區(qū)域劃分為有效區(qū),有效區(qū)直徑一般為平臺(tái)直徑的2倍。10、6時(shí)段中各時(shí)段有效率:將整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程分為6段,各個(gè)時(shí)段中動(dòng)物呆在有效區(qū)內(nèi)的時(shí)間與對(duì)應(yīng)的時(shí)段時(shí)間的比值即為此時(shí)段的有效率。五、注意事項(xiàng)1、在訓(xùn)練時(shí),動(dòng)物需要利用實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的固
25、有環(huán)境和設(shè)施的空間定位作為參照物來綜合判斷安全位置或途徑,所以實(shí)驗(yàn)時(shí),實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的一切設(shè)備的位置(包括儀器、工作臺(tái)、門窗、燈具、椅子等)以及實(shí)驗(yàn)者的位置都需保持相對(duì)固定,以減小實(shí)驗(yàn)誤差。2、動(dòng)物上平臺(tái)后,讓其環(huán)顧四周20秒時(shí)間,讓其辨別記憶空間線索。3、實(shí)驗(yàn)結(jié)束后注意動(dòng)物的除濕保暖。不要把血管固定器浸泡酸性溶液中,放置堵塞氣道出口。RM-200八臂迷宮實(shí)驗(yàn)簡明指導(dǎo)一、實(shí)驗(yàn)原理八臂迷宮廣泛應(yīng)用于測(cè)試動(dòng)物空間探索工作記憶和參考記憶實(shí)驗(yàn)。該實(shí)驗(yàn)方法基于受試動(dòng)物耗費(fèi)最小的努力完成尋找各臂上的食物為前提,記錄潛伏期、參考錯(cuò)誤(RME)和存取錯(cuò)誤(WME)。實(shí)驗(yàn)時(shí),記錄動(dòng)物在中央隔離區(qū)到有放置食物臂的記憶能
26、力,比如第1,2,4,7號(hào)臂放置有食物(食物放置在臂端頭的食物槽內(nèi)不可見),動(dòng)物能夠全部吃完這四臂所需的時(shí)間為潛伏期,參考錯(cuò)誤次數(shù)(Reference Memory Error,RME)指跑到無食物臂的次數(shù),工作記憶錯(cuò)誤次數(shù)(Work Memory Error,WME)指多次跑到已經(jīng)吃過的食物臂上。二、操作步驟1、開機(jī)進(jìn)入傳感器檢查界面,正常無異物時(shí)傳感器不觸發(fā),用手去通道臂內(nèi)試探觀察傳感器能否正常被觸發(fā);2、將動(dòng)物放在八臂迷宮的中央?yún)^(qū)域內(nèi),旋轉(zhuǎn)中央?yún)^(qū)蓋子使門洞不對(duì)準(zhǔn)臂入口,以免動(dòng)物進(jìn)臂;3、打開儀器電源,選擇 “設(shè)置”,通過上下方向鍵設(shè)定哪些放置食物的臂(即工作臂),黑底數(shù)字表示該臂號(hào)有食物
27、,設(shè)定實(shí)驗(yàn)時(shí)間等參數(shù);4、旋轉(zhuǎn)中央?yún)^(qū)蓋子使門洞對(duì)準(zhǔn)臂入口,按下“啟/?!卑粹o,儀器開始計(jì)時(shí);5、動(dòng)物進(jìn)入全部吃完食物臂,實(shí)驗(yàn)自動(dòng)結(jié)束,計(jì)時(shí)時(shí)間為潛伏期,同時(shí)統(tǒng)計(jì)出WME和RME。三、適用動(dòng)物、環(huán)境及其他要求1、成年200g左右體重的大鼠為宜,小鼠可能會(huì)探測(cè)不敏感;2、在通風(fēng)、安靜、相對(duì)昏暗的環(huán)境下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。3、學(xué)習(xí)和測(cè)試實(shí)驗(yàn)過程中周圍物品等環(huán)境盡量保持一致。四、結(jié)果評(píng)價(jià) 1、潛伏期:指動(dòng)物開始實(shí)驗(yàn)到取完所有食物所花費(fèi)的時(shí)間。 2、工作記憶錯(cuò)誤WME:指第二次進(jìn)入工作臂的次數(shù)。 3、參考記憶錯(cuò)誤RME:指進(jìn)入未放置食物的參考臂的次數(shù)。五、注意事項(xiàng)1、為了避免動(dòng)物氣味循跡效應(yīng),應(yīng)該保證實(shí)驗(yàn)后清潔和
28、通風(fēng)。2、避免人圍觀干擾動(dòng)物實(shí)驗(yàn),學(xué)習(xí)和測(cè)試過程實(shí)驗(yàn)平臺(tái)維持環(huán)境條件不變。CPP-100條件位置偏愛實(shí)驗(yàn)簡明指導(dǎo)一、實(shí)驗(yàn)原理CPP實(shí)驗(yàn)的基本原理是,將環(huán)境刺激與作為條件性強(qiáng)化的某種藥物搭配,使動(dòng)物在環(huán)境刺激和藥物之間建立聯(lián)系,形成操作性行為,從而觀察動(dòng)物對(duì)搭配環(huán)境的偏愛程度來測(cè)定所搭配藥物的強(qiáng)化效應(yīng)。CPP可以評(píng)價(jià)各種具有依賴性的藥物,對(duì)于一些具有鎮(zhèn)靜或肌松作用的藥物,如安定類,CPP比自身給藥實(shí)驗(yàn)更有效。本儀器由黑箱,灰箱和白箱三箱和最多可控制6臺(tái)實(shí)驗(yàn)箱的控制器組成,黑箱編號(hào)為A,灰箱為B,白箱為C。二、操作步驟1、放下黑箱和白箱入口處的門,使黑-灰-白三箱處于隔離狀態(tài),把動(dòng)物放置灰箱內(nèi),適
29、應(yīng)數(shù)分鐘。2、打開儀器電源,按下“設(shè)置”按鍵,用左右鍵選擇“EXP SETTING”按“確定”按鈕進(jìn)入?yún)?shù)設(shè)置狀:(1) 在MODE項(xiàng)用上下鍵選擇:“AUTO”表示按設(shè)定的實(shí)驗(yàn)時(shí)間TIME倒計(jì)時(shí),實(shí)驗(yàn)自動(dòng)停止,“MANUL”表示正向計(jì)時(shí),人工控制實(shí)驗(yàn)停止。(2) TIME格式為“時(shí):分:秒”,用上下鍵設(shè)置實(shí)驗(yàn)倒計(jì)時(shí),DETI格式為“時(shí):分:秒”,表示實(shí)驗(yàn)開始后的舒緩期時(shí)間(即動(dòng)物適應(yīng)時(shí)間,默認(rèn)時(shí)間為0),在此計(jì)時(shí)時(shí)間內(nèi)不記錄動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果。(3) IA:設(shè)定動(dòng)物的初始位置處于哪個(gè)箱內(nèi),黑箱為A,灰箱為B,白箱為C。(4) 左右鍵移動(dòng)到“Exit”,按“確定”按鈕退出設(shè)置狀態(tài)。3、按下“啟/?!卑?/p>
30、鈕,同時(shí)向上提旋90度打開黑-灰箱,灰-白箱之間的隔離門;4、系統(tǒng)按實(shí)驗(yàn)設(shè)置的時(shí)間和方式,自動(dòng)統(tǒng)計(jì)進(jìn)入各箱的次數(shù)和停留時(shí)間。三、適用動(dòng)物、環(huán)境及其他要求1、體重200-250g成年大鼠;2、在通風(fēng)、安靜、相對(duì)昏暗的環(huán)境下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。四、實(shí)驗(yàn)指標(biāo)1、AT: 在編號(hào)A箱(黑箱)停留的總時(shí)間;2、AE:進(jìn)入編號(hào)A箱(黑箱)的總次數(shù);3、BT:在編號(hào)B箱(灰箱)停留的總時(shí)間;4、BE:進(jìn)入編號(hào)B箱(灰箱)的總次數(shù);5、CT:在編號(hào)C箱(白箱)停留的總時(shí)間;6、CE:進(jìn)入編號(hào)C箱(白箱)的總次數(shù);五、注意事項(xiàng) 實(shí)驗(yàn)前注意設(shè)置實(shí)驗(yàn)參數(shù),包括動(dòng)物初始位置IA。PH-200雙足平衡測(cè)痛儀操作簡明指導(dǎo)一、實(shí)驗(yàn)原理
31、大鼠單側(cè)后肢受傷后,左右足承載力量即發(fā)生變化, PH-200雙足平衡測(cè)痛儀通過測(cè)量動(dòng)物左右后承載力量即可量化該后肢受傷程度及痛反應(yīng)狀況,可用于動(dòng)物單側(cè)后肢創(chuàng)傷恢復(fù)狀況的研究及神經(jīng)損傷程度或痛反應(yīng)程度的評(píng)估。 二、操作步驟、連接儀器連線,打開儀器控制器主機(jī)開關(guān),預(yù)熱15min;、儀器自動(dòng)提示實(shí)驗(yàn)前的校準(zhǔn)操作,踏板空載調(diào)零,然后用500g砝碼進(jìn)行校準(zhǔn);、設(shè)定實(shí)驗(yàn)時(shí)間等參數(shù),然后將實(shí)驗(yàn)大鼠放入特制鼠固定器中,前肢趴伏于固定器隔板上,頭部處于上方黑色籠具中,使其左、右足分別放置在左、右踏板中央,待動(dòng)物適應(yīng)環(huán)境安靜后,按下開始鍵開始實(shí)驗(yàn),儀器自動(dòng)記錄動(dòng)物左右后足當(dāng)前壓力值,最大壓力值以及測(cè)定時(shí)間內(nèi)的平均
32、壓力值;4、若觀察一定時(shí)間內(nèi)動(dòng)物的損傷狀況可每天在同一時(shí)刻對(duì)動(dòng)物進(jìn)行測(cè)量,記錄其壓力分布值;5、也可通過數(shù)據(jù)連線將主機(jī)連接至BL-420生物信號(hào)采集系統(tǒng),便動(dòng)態(tài)地觀察左右足壓力波形變化狀況。三、適用動(dòng)物、環(huán)境及其他要求1、本實(shí)驗(yàn)適合在安靜的情況下進(jìn)行;2、鼠籠適用于200g00g的成年大鼠;個(gè)體太小,易在其中翻轉(zhuǎn),難以安靜,達(dá)到實(shí)驗(yàn)要求。四、實(shí)驗(yàn)指標(biāo)1、當(dāng)前壓力值:動(dòng)物單側(cè)后肢在測(cè)定時(shí)間內(nèi)的實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)顯示的當(dāng)前壓力;2、最大壓力值:動(dòng)物單側(cè)后肢在測(cè)定時(shí)間內(nèi)的最大壓力,測(cè)定時(shí)間結(jié)束后屏幕自動(dòng)顯示;3、平均壓力值:動(dòng)物單側(cè)后肢在測(cè)定時(shí)間內(nèi)的平均壓力,測(cè)定時(shí)間結(jié)束后屏幕自動(dòng)顯示。與其他評(píng)價(jià)誘發(fā)痛的方法
33、不同,該方法可用于動(dòng)物自發(fā)痛的評(píng)價(jià),適用于動(dòng)物造模后損傷恢復(fù)情況的研究以及篩選有效治療藥物。五、注意事項(xiàng)1、實(shí)驗(yàn)時(shí)注意保證動(dòng)物左右足分別踩踏在各自的踏板上;2、注意保護(hù)踏板免受外力沖擊,以免損壞傳感器。PL-200熱刺痛儀實(shí)驗(yàn)簡明指導(dǎo)一、實(shí)驗(yàn)原理利用一定強(qiáng)度的溫?zé)岽碳?dòng)物軀體某一部分,從而產(chǎn)生疼痛反應(yīng),以刺激開始至出現(xiàn)反應(yīng)的潛伏期作為測(cè)痛指標(biāo)評(píng)價(jià)藥物疼痛能力,適用于篩選作用較強(qiáng)的鎮(zhèn)痛藥物。PL-200熱刺痛儀采用高聚光燈產(chǎn)生可變強(qiáng)度的輻射光束,經(jīng)過紅外濾光鏡聚焦照射大小鼠后肢足底中心處皮膚,以大小鼠迅速抬起后肢作為疼痛反應(yīng)指標(biāo),給藥前、后痛閾值的變化來測(cè)定藥物的效應(yīng)。二、操作步驟1、預(yù)熱:打開
34、主機(jī)電源,按“開始”鍵點(diǎn)亮刺激光源,預(yù)熱秒,按下“設(shè)置”按鈕設(shè)置實(shí)驗(yàn)參數(shù),例如組別、實(shí)驗(yàn)停止時(shí)間,光照強(qiáng)度等。2、選擇體重200g左右的大鼠或體重20g左右的小鼠,分別放入實(shí)驗(yàn)平臺(tái)上的鼠盒內(nèi),待動(dòng)物適應(yīng)保持安靜后開始實(shí)驗(yàn)。3、移動(dòng)平臺(tái)下方的熱輻射刺激筒至大小鼠后足部位,使光源發(fā)射中心正對(duì)動(dòng)物足底,按下刺激筒上的開始按鈕,儀器開始計(jì)時(shí),并發(fā)射出紅外光刺激動(dòng)物后足部位,動(dòng)物受刺激抬起或移動(dòng)后足,儀器自動(dòng)感應(yīng)此動(dòng)作立即停止計(jì)時(shí),實(shí)驗(yàn)結(jié)束。4、自照射開始至迅速抬起后肢的潛伏期時(shí)間(s)作為該鼠的痛閾值。一般連測(cè)2次,取其平均值作為基礎(chǔ)痛閾(對(duì)照潛伏期)。三、適用動(dòng)物、環(huán)境及其他要求本實(shí)驗(yàn)適宜在安靜、相
35、對(duì)昏暗的環(huán)境下工作;四、實(shí)驗(yàn)參數(shù)及評(píng)價(jià) 1、以刺激開始至出現(xiàn)反應(yīng)的潛伏期(痛閾)作為測(cè)痛指標(biāo),給藥前、后痛閾值的變化來測(cè)定藥物的效應(yīng)。 2、本法可使動(dòng)物在非約束狀態(tài)下進(jìn)行痛覺測(cè)定,可以排除應(yīng)激影響,操作方便、反應(yīng)靈敏、重復(fù)性好,是優(yōu)于熱板、甩尾等約束動(dòng)物的測(cè)痛閾儀器。五、注意事項(xiàng)、須在動(dòng)物安靜狀態(tài)下開始實(shí)驗(yàn),大鼠安靜時(shí)間一般為min,小鼠一般要min。、實(shí)驗(yàn)時(shí)注意對(duì)準(zhǔn)動(dòng)物后足底部中心區(qū)域;、照射強(qiáng)度的調(diào)節(jié)使得實(shí)驗(yàn)結(jié)果應(yīng)該一般為秒為宜;、不要在短時(shí)間內(nèi)重復(fù)照射同一只動(dòng)物的同一部位;5、設(shè)定恰當(dāng)?shù)恼丈渫V箷r(shí)間,到設(shè)定時(shí)間后儀器自動(dòng)停止照射可防止對(duì)痛覺不敏感動(dòng)物足底造成損傷。PV-200足趾容積測(cè)量
36、儀實(shí)驗(yàn)簡明指導(dǎo)一、實(shí)驗(yàn)原理用一定劑量的致炎劑,注入大小鼠后肢足趾或踝部皮下,造成足趾和關(guān)節(jié)腫脹,通過測(cè)量鼠類足趾致炎腫脹后消腫過程中的體積改變以及比較給藥組和對(duì)照組足趾或踝關(guān)節(jié)腫脹抑制率來評(píng)價(jià)抗炎藥物療效。本儀器亦可用于抗炎類藥物的藥理研究以及藥物產(chǎn)生致炎副作用的檢測(cè)。二、操作步驟 1、預(yù)熱接通儀器相關(guān)設(shè)備連線,打開開關(guān)進(jìn)行預(yù)熱儀器5分鐘; 2、實(shí)驗(yàn)前,請(qǐng)將測(cè)量燒杯裝滿130ml左右清水,并放在工作面上,蓋上保護(hù)蓋。 3、設(shè)置實(shí)驗(yàn)參數(shù),根據(jù)液晶屏提示踩下腳踏開關(guān)或按下清零鍵,完成清零操作。 4、用記號(hào)筆在大小鼠后肢踝關(guān)節(jié)周圍作上記號(hào),測(cè)量時(shí)拉直放入量杯,使記號(hào)線與與量杯水位線相平,穩(wěn)定后等儀器
37、發(fā)出“滴滴”提示音后,踩下腳踏開關(guān)或按測(cè)量按鈕得出結(jié)果。三、適用動(dòng)物、環(huán)境及其他要求 1、用體重120150g的健康大鼠或1825g的健康小鼠對(duì)致炎劑最敏感,腫脹度高,差異性小。 2、動(dòng)物后足碰到量杯中的涼水會(huì)縮足影響實(shí)驗(yàn),采用溫水可便于測(cè)量操作。四、實(shí)驗(yàn)參數(shù)及評(píng)價(jià) 1、觀察給藥前后各鼠踝關(guān)節(jié)容積(即腫脹度)的變化,并比較給藥組與對(duì)照組腫脹度的差異按下列公式計(jì)算腫脹百分率和腫脹抑制百分率。 腫脹率(%)=(致炎后足趾容積致炎前足趾容積)/致炎前足趾容積 *100% 抑制率(%)=(對(duì)照組平均腫脹度給藥組平均腫脹度)/對(duì)照組平均腫脹度*100% 2、足趾容積:測(cè)量結(jié)果采用ml為單位。五、注意事項(xiàng)
38、 1、測(cè)量時(shí)量杯的上方應(yīng)蓋上保護(hù)蓋,同時(shí)避免風(fēng)扇等直接吹壓量杯,導(dǎo)致無法測(cè)量; 2、測(cè)量時(shí)動(dòng)物足趾注意不要碰觸量杯杯壁,以免測(cè)量不準(zhǔn)。 3、由同一人觀察,多次測(cè)量取平均值為宜。RB-200智能熱板儀實(shí)驗(yàn)簡明指導(dǎo)一、實(shí)驗(yàn)原理利用一定強(qiáng)度的溫?zé)岽碳?dòng)物軀體某一部分,從而產(chǎn)生疼痛反應(yīng),以刺激開始至出現(xiàn)反應(yīng)的時(shí)間為潛伏期作為測(cè)痛指標(biāo)評(píng)價(jià)藥物抗疼痛能力,適用于篩選作用較強(qiáng)的鎮(zhèn)痛藥物。熱刺激強(qiáng)度在4555,在這一范圍內(nèi)動(dòng)物可產(chǎn)生明顯的痛反應(yīng),又不致造成皮膚灼傷,此為熱刺激法。RB-200熱板儀就是利用上述原理,將大小鼠放到預(yù)先加熱到55C左右的金屬板上,以舔后足作為疼痛反應(yīng)指標(biāo),測(cè)定潛伏期,觀察給藥前、后
39、痛閾值的變化。二、操作步驟1、開啟電源設(shè)置日期、溫度等參數(shù),系統(tǒng)默認(rèn)溫度為55,可以通過“”調(diào)節(jié)目標(biāo)溫度。2、在熱板實(shí)際溫度沒有達(dá)到目標(biāo)溫度之前,系統(tǒng)處于加熱狀態(tài),這時(shí)不能做實(shí)驗(yàn),實(shí)際溫度達(dá)到目標(biāo)設(shè)定溫度后,系統(tǒng)“恒溫指示燈”點(diǎn)亮,表示可以正常實(shí)驗(yàn)了。3、將待測(cè)動(dòng)物放在預(yù)熱好的金屬板上,在放入動(dòng)物的同時(shí),踩下腳踏開關(guān)或按下“啟/?!卑粹o,系統(tǒng)自動(dòng)開始計(jì)時(shí),等觀察到動(dòng)物添后足后,再次踩下腳踏開關(guān)或按下“啟/?!卑粹o,計(jì)時(shí)結(jié)束,所得時(shí)間即為潛伏期。4、同只動(dòng)物兩次實(shí)驗(yàn)間隔5min,測(cè)23次取其均值計(jì)算潛伏期。三、適用動(dòng)物、環(huán)境等其他要求1、實(shí)驗(yàn)前應(yīng)篩選動(dòng)物,一般將反應(yīng)潛伏期小于5s或大于30s的動(dòng)
40、物篩除。2、雄性鼠可能因?yàn)殛幠蚁陆刀艽碳ぃ时緦?shí)驗(yàn)宜用雌性鼠。3、室溫對(duì)實(shí)驗(yàn)有影響,過低動(dòng)物反應(yīng)遲鈍,過高則敏感,易引起跳躍。室溫1318范圍內(nèi)動(dòng)物波動(dòng)較小。四實(shí)驗(yàn)參數(shù)及評(píng)價(jià)1、不同個(gè)體對(duì)熱板刺激反應(yīng)有不同表現(xiàn),多數(shù)舔足,故常采用舔足為痛反應(yīng)指標(biāo),有些動(dòng)物反應(yīng)易跳躍而不舔足,還有的老鼠只在熱板上快速走動(dòng)而不出現(xiàn)舔足反應(yīng).舔足反應(yīng)為一保護(hù)反應(yīng),而跳躍為逃避反應(yīng)。故實(shí)驗(yàn)中只宜取其一為指標(biāo),將其他反應(yīng)鼠剔除。2、以刺激開始至出現(xiàn)反應(yīng)的潛伏期(痛閾)作為測(cè)痛指標(biāo)評(píng)價(jià)藥物疼痛能力。3、為防止足部燙傷,若痛閾值超過60s,即停止測(cè)試而按60s計(jì)。4、本方法簡便易行,痛感指標(biāo)明確,對(duì)組織損傷最小,動(dòng)物可反
41、復(fù)利用,故為目前最常用的方法之一,但對(duì)作用較弱的鎮(zhèn)痛藥不太敏感。SW-200光熱尾痛儀實(shí)驗(yàn)簡明指導(dǎo)一、實(shí)驗(yàn)原理用小型聚光燈產(chǎn)生一定強(qiáng)度的紅外光束,通過透鏡聚焦照射大鼠或小鼠的尾巴來致痛,從而產(chǎn)生疼痛反應(yīng),以刺激開始至出現(xiàn)甩尾反應(yīng)的時(shí)間作為潛伏期測(cè)痛指標(biāo),以給藥前、后痛閾值的變化來測(cè)定藥物的效應(yīng),評(píng)價(jià)藥物疼痛能力,適用于篩選作用較強(qiáng)的鎮(zhèn)痛藥物。二、操作步驟1、打開電源開關(guān),按下設(shè)置鍵系統(tǒng)進(jìn)入?yún)?shù)設(shè)置界面,根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求設(shè)定日期、光照強(qiáng)度、照射停止時(shí)間等實(shí)驗(yàn)參數(shù)項(xiàng);、將準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)的老鼠裝入合適的固定筒內(nèi);尾部暴露于外,實(shí)驗(yàn)前先用75%乙醇擦凈鼠尾,墨汁涂于尾部的下1/3處作為光刺激點(diǎn)的標(biāo)志,實(shí)驗(yàn)時(shí)使光
42、刺激點(diǎn)標(biāo)志正對(duì)光照輻射處,稍待動(dòng)物安靜后即可進(jìn)行實(shí)驗(yàn);、動(dòng)物處于安靜狀態(tài)時(shí),將鼠尾光刺激點(diǎn)標(biāo)志移至正對(duì)光照輻射處。按下“開始”鍵開始實(shí)驗(yàn),此時(shí)輻射燈被點(diǎn)亮,透過紅外玻璃發(fā)熱,實(shí)驗(yàn)計(jì)時(shí)開始;當(dāng)鼠尾被光熱刺痛時(shí),實(shí)驗(yàn)動(dòng)物會(huì)迅速甩動(dòng)尾巴,儀器自動(dòng)偵測(cè)到該動(dòng)作,實(shí)驗(yàn)計(jì)時(shí)自動(dòng)停止,記錄保存于系統(tǒng)中。三、適用動(dòng)物、環(huán)境等其他要求1、大鼠體重200g左右,小鼠體重20g左右,裝入特制的固定筒內(nèi);2、一般選擇5s左右引起甩尾的動(dòng)物供實(shí)驗(yàn)用,少于3s或大于10s,表示動(dòng)物反應(yīng)過于靈敏或遲鈍,舍棄不用;3、室溫的影響:由于鼠尾表面積很大,易于散熱,改變室溫可使尾溫發(fā)生相應(yīng)變化,隨著室溫的升高,甩尾閾值降低。實(shí)驗(yàn)時(shí)
43、,最好將室溫維持在20左右,并且每日同一時(shí)間進(jìn)行。四、實(shí)驗(yàn)參數(shù)評(píng)價(jià)1、實(shí)驗(yàn)時(shí),儀器自動(dòng)計(jì)時(shí),從照射開始到甩尾反應(yīng)的潛伏期(tail flick latency,TEL)作為痛閾。刺激強(qiáng)度的確定一般選用TEL為5秒左右的為宜。2、評(píng)定藥物鎮(zhèn)痛強(qiáng)度:將給藥前、后的痛閾變化按下列公式計(jì)算反應(yīng)抑制百分率,以評(píng)定藥物的鎮(zhèn)痛效應(yīng)。痛閾提高率=(給藥后TEL-基礎(chǔ)TEL)/基礎(chǔ)TEL *100% 五、注意事項(xiàng)1、測(cè)痛部位,通常選用鼠尾下1/3處,但反復(fù)連續(xù)測(cè)定時(shí),應(yīng)將測(cè)痛部位稍加移動(dòng),防止局部燙傷影響測(cè)定效果,注意排除明顯的動(dòng)物自主甩尾行為。、避免動(dòng)物在固定筒內(nèi)自由旋轉(zhuǎn),鼠尾照射位置改變會(huì)得出較大差異的結(jié)果
44、。BP-6無創(chuàng)血壓測(cè)量儀實(shí)驗(yàn)簡明指導(dǎo)一、實(shí)驗(yàn)原理BP-6 動(dòng)物無創(chuàng)血壓測(cè)試系統(tǒng)采用尾袖法測(cè)量動(dòng)物的血壓,測(cè)量原理與人體手臂血壓測(cè)量方法相似。即通過對(duì)動(dòng)物肢體或尾部加壓,阻斷其血壓,以不能記錄肢體或尾部脈搏為準(zhǔn);然后逐漸減壓,當(dāng)尾部重新出現(xiàn)脈搏波時(shí)(即內(nèi)外壓相等時(shí)),獲得動(dòng)物的收縮壓;繼續(xù)減壓,直至脈搏波逐漸增至最大,得到動(dòng)物的舒張壓。二、操作步驟1、使用專門的連接線連接加熱箱控制面板上的脈搏傳感器輸出口與動(dòng)物無創(chuàng)血壓采集系統(tǒng) 8 道系統(tǒng),具體的連接方法為: BP-6 無創(chuàng)動(dòng)物血壓測(cè)試箱面板上的壓力輸出接口通過連接線接到 BP-6 無創(chuàng)動(dòng)物血壓采集處理系統(tǒng)的 CH1通道; BP-6 無創(chuàng)動(dòng)物血壓
45、測(cè)試箱面板上的 CH1CH6 分別通過連接線依次連接到 BP-6 無創(chuàng)動(dòng)物血壓采集處理系統(tǒng)的 CH2CH7;2、將光電脈搏探測(cè)器上的傳感器接頭插到對(duì)應(yīng)機(jī)箱內(nèi)的連接器接頭上;3、將動(dòng)物血壓測(cè)量系統(tǒng)通過USB連接線連接到電腦上;打開 TM_WAVE 軟件,進(jìn)入軟件界面。4、打開加熱箱電源開關(guān),系統(tǒng)開始進(jìn)行加熱,默認(rèn)溫度為36C,并按動(dòng)加熱箱控制面板上的按鍵(名稱已標(biāo)注)設(shè)定實(shí)驗(yàn)所需的加熱溫度,實(shí)驗(yàn)時(shí)間等實(shí)驗(yàn)參數(shù);5、將大鼠裝入鼠籠,整體放入加熱箱內(nèi),然后將大鼠鼠尾穿過光電脈搏探測(cè)器的阻斷端,從另一端串出。即使光電傳感器阻斷進(jìn)氣口靠近大鼠尾根部; 6、從實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目菜單中選擇“無創(chuàng)血壓測(cè)量”命令;選擇工
46、具條上的“啟動(dòng)實(shí)驗(yàn)”按鈕,軟件界面中即有脈搏波波形出現(xiàn)。7、待大鼠的脈搏波波形穩(wěn)定后,按下加熱箱控制面板上的“啟/?!鞍存I,系統(tǒng)開始按照設(shè)定參數(shù)對(duì)大鼠尾部進(jìn)行加壓阻斷,調(diào)節(jié)放氣速度,得到最佳的脈搏波波形。8、到達(dá)設(shè)定時(shí)間系統(tǒng)自動(dòng)停止運(yùn)行或者再按“啟/?!卑存I停止實(shí)驗(yàn),將波形保存以供分析。三、適用動(dòng)物、環(huán)境等其他要求適用于大鼠;實(shí)驗(yàn)進(jìn)行在安靜,常溫的條件下即可。四、實(shí)驗(yàn)指標(biāo)評(píng)價(jià) 1、設(shè)定壓力: 用于設(shè)定自動(dòng)充氣氣壓,當(dāng)系統(tǒng)自動(dòng)充氣到該氣壓時(shí)將停止充氣,做短暫的保氣后開始放氣。 2、時(shí)間:間隔時(shí)間:系統(tǒng)每次加氣的時(shí)間間隔。 工作時(shí)間:系統(tǒng)自動(dòng)充氣工作時(shí)間。 已用時(shí)間:自動(dòng)充氣功能已經(jīng)工作的時(shí)間。
47、保氣時(shí)間:自動(dòng)充氣后氣壓保持時(shí)間的長短。 3、溫度:設(shè)定加熱箱內(nèi)的溫度。五、注意事項(xiàng)1、 從沒做過實(shí)驗(yàn)的大鼠應(yīng)該先進(jìn)行訓(xùn)練。訓(xùn)練方法:將 BP-6無創(chuàng)動(dòng)物血壓測(cè)試箱的溫度設(shè)定到36,將大鼠裝入鼠籠放入箱內(nèi),讓其適應(yīng)實(shí)驗(yàn)環(huán)境。對(duì)個(gè)別特別不能適應(yīng)環(huán)境的大鼠(主要表現(xiàn)為應(yīng)激反應(yīng)太厲害,始終不安靜)進(jìn)行剔除。 2、 在默認(rèn)溫度 36時(shí),大鼠一般預(yù)熱 10分鐘就可以出較好的脈搏波形;如果使用更低的溫度(如 32)需要適當(dāng)?shù)难娱L預(yù)熱時(shí)間。 3、 為了能夠縮短加熱時(shí)間,在實(shí)驗(yàn)過程中盡量減少打開實(shí)驗(yàn)箱門次數(shù)。 4、 如果實(shí)驗(yàn)的大鼠少于 6 只,在自動(dòng)充氣時(shí)請(qǐng)用硅膠管打一個(gè)結(jié)將不用的通道的充氣口阻塞。 HV-4
48、離體組織器官灌流實(shí)驗(yàn)簡明指導(dǎo)一、實(shí)驗(yàn)原理 本儀器適合血管或組織平滑肌離體后,在藥物作用下血管張力活性的定量測(cè)量,基本原理是把血管或組織平滑肌固定在一端和張力傳感器相連的裝置上,在組織浸泡的營養(yǎng)液中通加氧氣和保溫功能使其保持活性,同時(shí)調(diào)節(jié)組織固定裝置施加需要的前負(fù)荷,添加藥物后觀察張力的變化。二、操作步驟1、連接儀器:張力傳感器(血管張力易選擇10g以內(nèi)小量程)連接到生物信號(hào)采集系統(tǒng),設(shè)定好信號(hào)類型,采樣頻率1Hz。鎖扣血管2、掛接血管:用設(shè)備提供的一對(duì)不銹鋼三角形和待掛血管放置到培養(yǎng)皿中,打開一個(gè)三角形的鎖扣,輕輕穿過血管,關(guān)閉鎖扣;打開另一個(gè)三角形的鎖扣,與鎖扣相對(duì)穿過血管,關(guān)閉鎖扣,仔細(xì)理
49、平三角形,使力量平衡(如右圖所示)。3、固定血管和張力傳感器:用連接傳感器的不銹鋼絲固定環(huán)套入固定好血管的三角形上端輕輕提起,一端掛在固定棒尾端,另一端掛在張力傳感器上,調(diào)整繃緊不脫開。4、輕輕調(diào)節(jié)螺旋千分尺旋鈕,施加前負(fù)荷,觀察生物信號(hào)采集儀信號(hào)變化情況。三、適用動(dòng)物、環(huán)境及其他要求1、標(biāo)配的三角形鋼絲適合血管粗細(xì)大于0.6mm。2、在室溫10度以上的環(huán)境下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。四、注意事項(xiàng)1、穿血管時(shí)防止刺破血管壁,保持血管和三角形的力量平衡。2、不要把血管固定器浸泡酸性溶液中,放置堵塞氣道出口。GL-2離體心臟灌流系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)簡明指導(dǎo)一、實(shí)驗(yàn)原理離體Langendorff心臟灌流原理:心臟從動(dòng)物體內(nèi)摘出
50、后,用灌流液營養(yǎng)心臟,可維持其節(jié)律性活動(dòng)。離體心臟可排除神經(jīng)及體液因素的影響,利用其觀察某些化學(xué)物質(zhì)或離子濃度的改變對(duì)心臟的作用。從主動(dòng)脈逆行插管灌注,灌流液經(jīng)冠狀動(dòng)脈開口處進(jìn)入冠脈,然后回到右心房,經(jīng)腔靜脈口和肺動(dòng)脈口流出,單位時(shí)間內(nèi)的流出量即代表冠脈流量。在灌注壓恒定不變的條件,可研究藥物對(duì)冠脈流量的影響,心臟的收縮、舒張活動(dòng)可通過壓力換能器進(jìn)行記錄。工作心臟實(shí)驗(yàn)原理:灌流液從左心耳流入左心室,左心室收縮克服主動(dòng)脈阻力將心室內(nèi)液體射入模擬主動(dòng)脈管道,使心臟在生理狀態(tài)下進(jìn)行灌流實(shí)驗(yàn)。在此裝置中,左心室充盈壓(前負(fù)荷)及主動(dòng)脈柱高(后負(fù)荷)可以保持恒定或更改,可觀察藥物對(duì)心肌收縮性能的影響。二
51、、操作步驟1、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:主要包括灌流液的充氧、溫度和壓力的調(diào)整。2、連接恒溫水循環(huán)通路:將GL-2灌流溢流瓶的恒溫水出口連接至恒溫水浴的回水口,恒溫浴槽的恒溫水入口連接至恒溫水浴的出水口,其余恒溫水路連接通過串聯(lián)方式連接;根據(jù)室溫及出、入水管的長短調(diào)整超級(jí)恒溫水浴的水溫,使心臟灌流液的溫度應(yīng)在37左右。3、連接氧氣通路:通過硅膠管連接分別將儲(chǔ)液瓶和氧合溢流瓶的氧氣輸入端接入氧氣瓶,(根據(jù)實(shí)驗(yàn)的需要選擇95%O2 + 5%CO2的混合氣體),打開氧氣瓶的開關(guān),然后調(diào)節(jié)氧氣流速使灌流液充分充氧,儲(chǔ)液瓶中氧氣流速約1.5L/min,實(shí)驗(yàn)前預(yù)充10min使灌流液處于氧飽和狀態(tài),且排除灌流液管道內(nèi)的氣
52、泡,灌流管道內(nèi)不能有空氣,防止形成冠脈內(nèi)空氣栓塞。4、Langendorff灌注壓及工作心臟前負(fù)荷、后負(fù)荷的調(diào)整:若進(jìn)行離體心臟Langendoff灌流實(shí)驗(yàn)可通過調(diào)整Langendorff支路的氧合溢流瓶(上端氧合溢流瓶)高度來調(diào)節(jié)Langendorff灌注壓大小;溢流瓶的高度一般應(yīng)距心臟7090cm,可按心臟大小進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整,豚鼠和大鼠的給藥前冠脈流量58ml/min為宜;若進(jìn)行離體工作心臟實(shí)驗(yàn)可通過調(diào)整前負(fù)荷溢流瓶(下端氧合溢流瓶)的高度來調(diào)節(jié)前負(fù)荷(一般為1020cm)的大小,調(diào)整流量計(jì)量管的高度則可調(diào)節(jié)后負(fù)荷的大小。5、摘取心臟:離體心臟灌流裝置及K-H液準(zhǔn)備妥當(dāng)后,取大鼠或豚鼠擊昏頭
53、部,迅速開胸暴露心臟,剪破心包膜,輕輕拿住心臟,剪斷上下腔靜脈、肺動(dòng)脈、主動(dòng)脈(保留0.51cm左右備插管用)及心臟周圍組織,迅速將心臟連同一段主動(dòng)脈取出。6、標(biāo)本制備:心臟摘出后,立即放入預(yù)先備好的用氧飽和的冷K-H液(約4)的小玻璃皿中,用手指輕輕擠壓心臟,以利于心室內(nèi)剩余血液的排出,防止凝血塊形成。7、心臟主動(dòng)脈插管:用鑷子輕輕將心臟主動(dòng)脈套入主動(dòng)脈插管中,避免插入過深損傷主動(dòng)脈瓣和堵塞冠狀動(dòng)脈口,用手術(shù)棉線將主動(dòng)脈和套管一起扎緊(注意扎線處需處于動(dòng)脈分支下方)確保灌流液不會(huì)溢漏,用手將扎線處輕輕下拉,使之滑落至套管末端并防止脫落。8、心臟langendorff逆向灌注:打開主動(dòng)脈插管處
54、的調(diào)液閥及三通開關(guān),使灌注液通過主動(dòng)脈進(jìn)入冠狀動(dòng)脈口經(jīng)冠狀循環(huán)從冠狀靜脈竇流出,通過冠狀動(dòng)脈循環(huán)給心臟提供氧氣和營養(yǎng),心臟頃刻便恢復(fù)起跳,調(diào)節(jié)恒溫浴槽高度,使心臟處于浴槽內(nèi)腔中央為心臟保溫。9、相關(guān)指標(biāo)測(cè)定:穩(wěn)定2030min后,在恒溫浴槽排液口下端放一容量杯記錄單位時(shí)間的流出量換算即可得出冠脈流量(CBF),連續(xù)測(cè)定三次;通過左心房插入細(xì)導(dǎo)管至左心室,通過壓力換能器接入BL-420生物信號(hào)采集系統(tǒng)記錄左室內(nèi)壓(LVP)以及左室舒張末期壓力(LVEDP)并可計(jì)算出心率。10、穩(wěn)定后,先記錄正常心臟的LVP曲線和冠脈流量(ml/min)作為對(duì)照;然后轉(zhuǎn)換三通開關(guān)在加藥口處注射一定藥物濃度的灌流液
55、,觀察相關(guān)指標(biāo)的變化。11、左心室插管:在心臟進(jìn)行Langendoff逆行灌注恢復(fù)起跳以后,調(diào)整主動(dòng)脈插管和肺靜脈插管的距離,將心臟肺靜脈輕輕套入肺靜脈插管中插入左心房,用手術(shù)棉線將肺靜脈和插管一起扎緊確保心臟射血時(shí)不會(huì)溢漏。12、離體工作心臟灌流:關(guān)閉主動(dòng)脈插管處的調(diào)液閥停止langendorff逆行灌注,轉(zhuǎn)換工作心臟支路的三通活塞使預(yù)熱后的灌流液進(jìn)入前負(fù)荷溢流瓶進(jìn)行順向灌流,灌流液經(jīng)過肺靜脈插管進(jìn)入標(biāo)本心臟左心室,恢復(fù)跳動(dòng)的心臟通過心室收縮將左心室內(nèi)的充盈液通過主動(dòng)脈插管射出,經(jīng)過主動(dòng)脈緩沖器進(jìn)入流量計(jì)量管。13、相關(guān)指標(biāo)測(cè)定:心臟于工作狀態(tài)持續(xù)灌流1020min后,測(cè)定以下指標(biāo),左室內(nèi)壓
56、(LVP)和用流量計(jì)量管測(cè)定主動(dòng)脈流量(ABF),然后進(jìn)行加藥測(cè)定加藥后指標(biāo)的變化。三、適用動(dòng)物、環(huán)境及其他要求1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物一般為大鼠或豚鼠,也可選用兔、貓的離體心臟,應(yīng)麻醉后取心臟標(biāo)本;2、灌流液要充分充氧;3、灌流溫度要嚴(yán)格維持恒定,應(yīng)根據(jù)輸出灌注液溫度調(diào)節(jié)恒溫循環(huán)水浴的設(shè)定溫度,當(dāng)輸出口處灌流液達(dá)37后,再開始準(zhǔn)備取心臟;四、結(jié)果評(píng)價(jià)1、langendorff逆向灌注時(shí),排除了在體狀態(tài)下神經(jīng)和體液因素的影響,直接觀察藥物對(duì)心臟功能和冠脈流量的影響,是篩選研究作用于心血管藥物的常用方法之一;2、工作心臟實(shí)驗(yàn)時(shí),排除了在體狀況下神經(jīng)和體液因素的影響,而且可以固定負(fù)荷狀態(tài),觀察藥物對(duì)左室內(nèi)壓和
57、心輸出量的影響;2、標(biāo)本穩(wěn)定性好,各項(xiàng)心功能指標(biāo)均能穩(wěn)定1h以上,基本能滿足生理和藥理實(shí)驗(yàn)的時(shí)間要求;五、注意事項(xiàng)1、摘取心臟時(shí)動(dòng)作要迅速、仔細(xì)、準(zhǔn)確,主動(dòng)脈最好橫斷,且保留一定長度。2、向主動(dòng)脈插入心臟套管時(shí),不可過深,以防損傷主動(dòng)脈瓣及堵塞冠狀動(dòng)脈入口。3、灌流液要保證有足夠的氧氣和恒定的灌流壓力與溫度。4、左心房插管及室內(nèi)壓導(dǎo)管均應(yīng)盡可能短,前者旨在防止室溫影響入心液體的溫度,后者是為了減少導(dǎo)管內(nèi)液體的阻力慣性效應(yīng),防止波形失真。5、手術(shù)操作完成后,要判斷主動(dòng)脈瓣和二尖瓣的功能是否正常。若作逆灌時(shí),心臟明顯呈球形,手指擠壓后一旦松開,立即恢復(fù)球形,說明主動(dòng)脈瓣返流,應(yīng)放棄重做實(shí)驗(yàn)。PM-
58、200高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)簡明指導(dǎo)一、實(shí)驗(yàn)原理高架十字迷宮是利用動(dòng)物對(duì)新異環(huán)境的探究特性和對(duì)高懸敞開的恐懼形成矛盾沖突行為來考察動(dòng)物的焦慮狀態(tài)。高架十字迷宮具有一對(duì)開臂和一對(duì)閉臂,嚙齒類動(dòng)物由于嗜暗性會(huì)傾向于在閉臂中活動(dòng),但出于好奇心和探究性又會(huì)在開臂中活動(dòng),十字迷宮距離地面較高,相當(dāng)于人站在峭壁上,使實(shí)驗(yàn)對(duì)象產(chǎn)生恐懼和不安心理,在面對(duì)新奇刺激時(shí), 動(dòng)物同時(shí)產(chǎn)生探究的沖動(dòng)與恐懼,這就造成了探究與回避的沖突行為,從而產(chǎn)生焦慮心理。而抗焦慮藥物能明顯增加進(jìn)入開臂的次數(shù)與時(shí)間。二、操作步驟1、實(shí)驗(yàn)前57天每天撫摸動(dòng)物以減少無關(guān)刺激的影響;2、實(shí)驗(yàn)時(shí)先將大小鼠置于一敞箱中活動(dòng)5min,然后放入迷宮開始實(shí)驗(yàn)
59、;3、實(shí)驗(yàn)前參數(shù)設(shè)置:包括顏色調(diào)節(jié)和位置校正,調(diào)整攝象鏡頭位置和焦距,使視頻顯示范圍剛好覆蓋整個(gè)十字迷宮區(qū)域;4、實(shí)驗(yàn)方式選擇,新建項(xiàng)目還是打開項(xiàng)目,點(diǎn)擊“新建項(xiàng)目”可設(shè)置項(xiàng)目的各項(xiàng)數(shù)據(jù),如項(xiàng)目名稱、實(shí)驗(yàn)時(shí)間、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物數(shù)、大/小鼠迷宮等;5、進(jìn)行場(chǎng)景設(shè)定,以區(qū)分實(shí)驗(yàn)時(shí)的場(chǎng)景區(qū)域,標(biāo)記出每一個(gè)拐角點(diǎn),確保被正確包圍;點(diǎn)擊“添加區(qū)域”,定義出四個(gè)臂的區(qū)域;點(diǎn)擊“系統(tǒng)定標(biāo)”,正確選擇類型、長度和單位;6、將大/小鼠放在迷宮中,點(diǎn)擊“目標(biāo)選取”,屏幕上出現(xiàn)紅色色塊,調(diào)節(jié)上下閾值到出現(xiàn)合適形狀為止,避免錯(cuò)誤跟蹤;7、選擇本次實(shí)驗(yàn)的動(dòng)物編號(hào),將大鼠置于中央開闊地,頭朝閉臂,點(diǎn)擊開始實(shí)驗(yàn),系統(tǒng)自動(dòng)跟蹤軌跡并
60、計(jì)算相關(guān)數(shù)據(jù);8、5min后,實(shí)驗(yàn)完成,點(diǎn)擊“停止試驗(yàn)”,實(shí)驗(yàn)停止;系統(tǒng)自動(dòng)統(tǒng)計(jì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,點(diǎn)擊“數(shù)據(jù)模式”可查看實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。三、適用動(dòng)物、環(huán)境及其他要求1、實(shí)驗(yàn)時(shí)用體重200250g的大鼠或體重2025g的小鼠;2、實(shí)驗(yàn)宜在無外界強(qiáng)光、噪聲干擾的環(huán)境下進(jìn)行,實(shí)驗(yàn)室內(nèi)光線昏暗(以1.5 m距離處能區(qū)分大鼠細(xì)微活動(dòng)的最低亮度為準(zhǔn))并保持恒亮。四、結(jié)果評(píng)價(jià)1、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)包括觀察時(shí)間,在四個(gè)臂和中央?yún)^(qū)域的停留時(shí)間/路徑長度,總時(shí)間和總路徑長度,進(jìn)臂次數(shù),進(jìn)臂最大深度,進(jìn)臂平均深度,平均運(yùn)動(dòng)速度,進(jìn)入開臂/閉臂次數(shù)百分比,休息時(shí)間等;其中開臂探頭次數(shù)和閉臂站立次數(shù)由實(shí)驗(yàn)過程中手動(dòng)點(diǎn)擊計(jì)數(shù)。2、計(jì)算5min內(nèi)
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