SEC工作站指南教案資料

1、Good is good, but better carries it.精益求精，善益求善。SEC工作站指南-SEC操作指南SEC概述體積排阻色譜（SEC）是被用來測定大分子和聚合物類分子量分布的一門色譜科技。運行SEC（也可以叫做GPC）可以通過進入一個樣品到由已知孔徑的剛性聚合物凝膠構(gòu)成的柱子里，小分子滲入到孔里并且比大分子保留時間長，在SEC里不包含柱吸附，是典型的分離色譜。因為分子的大小與它們的分子量有關(guān)，洗脫時間因此能被用來估計分子的分子量。大分子首先洗脫出來，小分子最后被洗脫。在使用SEC分析天然組分時（通常是高分量聚合物），能碰到一個清楚的色譜圖是比較少見的，在分離色譜里能出現(xiàn)基

2、線分離的峰。因此在計算時，通常被設(shè)置成產(chǎn)生分子量分布（MWD）或平均分子量，而不去估計分子量的值。因為對分子量的分布感興趣，所以結(jié)果通常不僅只是包含平均分子量的值，同時也列出了這個樣品的面積片斷值，連同與它相對應(yīng)的平均分子量值。這種類型的報告叫做“SliceReport”。SEC校正EZChromEliteSEC單元提供了三種SEC校正方法：標(biāo)準(zhǔn)窄分布校正（NarrowStandardsCalibration），寬范圍分布校正（BroadRangeCalibration，有兩種類型）和通用校正（UniversalCalibration）。注意：為校正和分子量計算，時間單位被轉(zhuǎn)換成秒。標(biāo)準(zhǔn)窄分布

3、校正（NarrowStandardsCalibration）通過運行一個由已知分子量組分組成的標(biāo)準(zhǔn)品來建立校正曲線。這種校正的標(biāo)準(zhǔn)曲線是通過與保留時間相對應(yīng)的分子量的對數(shù)來繪制的（LogM）。寬范圍分布校正（BroadRangeCalibration）將要使用的Hamielec方法：他為寬范圍分布校正提供了兩種可用的計算方法。BroadRange1是一個線性校正方法并且需要一支SEC柱來提供一條線性的校正曲線。它僅僅使用標(biāo)準(zhǔn)聚合物的平均MW值，但是卻接近GPC校正曲線的線性（標(biāo)準(zhǔn)聚合物的Mn和Mw值必須是已知的并且能通過光散射和滲透壓技術(shù)檢測到）。這個方法需要一個與未知樣品有相同結(jié)構(gòu)的寬分子量

4、分布（Broad-MWD）的標(biāo)準(zhǔn)品。它也應(yīng)該盡可能地在任意組合的Mn和Mw里去使用兩個不同的標(biāo)準(zhǔn)分子量與兩個已知的MW值。BroadRange2是使用一個寬范圍的標(biāo)準(zhǔn)品而沒有線性校正的方法。通用校正（UniversalCalibration）通用校正允許用一個窄范圍的聚苯乙烯標(biāo)準(zhǔn)校正曲線來校正一個寬范圍的聚合物。利用流體體積之間的關(guān)系（物質(zhì)的分子量M與聚合物固有的粘度和它的洗脫體積），窄分布校正曲線能被調(diào)整倒最精密地應(yīng)用于被分析的樣品。聚合物固有的粘度是通過直接測量聚合物溶液粘度的試驗方法測定的。通過的聚合物分子量與Mark-Houwink等式有關(guān)。=KmaK和a是一個隨聚合物種類、溶劑和溫度

5、改變的常數(shù)。表格里包含公共的K和a常數(shù)，使用于一般的聚合物種類。因此，使用公共的K和a值，或者是已測定的聚合物的粘度，一樣都能檢測出樣品的分子量信息。SEC的應(yīng)用SEC通常被用在高分子聚合物的質(zhì)量控制上。分子量分布表示的是聚合物的物理性質(zhì)。像這種性質(zhì)包含有強度、柔韌性和粘性，等等其它。因為寬范圍SEC峰的圖形是可以改變的，在大多數(shù)情況下，只是檢測平均分子量是不能充分說明聚合物的特征的，如兩種聚合物可能有相同的平均分子量但分子量分布卻非常不相同。因此它對計算不同范圍的分子量非常重要，像檢測一個有效的尖峰一樣（在這里可以用重疊比較輔助）來得到一個正確的聚合物分子量信息。各種不同的分子量數(shù)值被用來表

6、示聚合物的不同特征，如下所示：Mn數(shù)均分子量，被用來測定樣品的粘性和柔韌性，是一種低分子量物質(zhì)均衡性的函數(shù)。Mw重均分子量，表示為聚合物的強度，它給出了在樣品里高分子量物質(zhì)的比例。MzZ均分子量，被用來檢測易脆性，并且指示樣品里非常高的分子量物質(zhì)的均衡性。Mv粘均分子量，被用來說明樣品的平均粘度與分子量之間的關(guān)系。Mw/Mn聚合度，是一個用來表示樣品是如何單一的。一個小的數(shù)值表示的是最大的單一性，或者是窄分子量分布。較高的數(shù)值表示的是大的合成聚合物。使用EZChromEliteSEC軟件EZChromEliteSEC軟件是一個可選的附件包，可以在EZChromElite色譜數(shù)據(jù)系統(tǒng)里執(zhí)行SEC

7、計算。一旦SEC可用，它能夠讓用戶去為已與系統(tǒng)連接的任意一個（或多個）儀器配置一個SEC儀器。當(dāng)在另外一個儀器上執(zhí)行SEC計算時，也可以在其它的儀器上執(zhí)行正常的色譜分離計算。（注意SEC和色譜分離是明顯不同的技術(shù)，因此它們不能在一個儀器里同時執(zhí)行）通常，執(zhí)行一個SEC計算包含以下步驟：運行SEC標(biāo)準(zhǔn)校正并且利用它去為SEC樣品設(shè)置校正信息（方法/SEC設(shè)置，Method/SECSetup）;為您的分析創(chuàng)建一個包含您想要的圖譜和SEC報告的自定義報告；創(chuàng)建一個批處理（如果需要的話）并且運行您的SEC樣品。八、運行SEC標(biāo)準(zhǔn)校正為了所有數(shù)據(jù)是正確地取樣，在運行您的SEC標(biāo)準(zhǔn)校正之前，您首先必須設(shè)置

8、采集參數(shù)并保存到您的磁盤。您可以使用方法下的儀器設(shè)置進行操作（Method/InstrumentSetup）或點擊儀器設(shè)置按鈕（InstrumentSetup）。儀器設(shè)置在方法的采集設(shè)置部分將告訴您如何從您的色譜儀上采集數(shù)據(jù)。注意：默認(rèn)1Hz的數(shù)據(jù)采集頻率已充分滿足SEC的運行。您可以在方法的SEC設(shè)置部分為獨立的切片報告調(diào)整切片寬度（SliceWidth）。Detector1x為配置儀器上的每一個檢測器通道，需要定義以下采集信息：采集通道ON（AcquisitionChannelON）選擇這個單選框可以使這個通道的數(shù)據(jù)采集可用，如果這個復(fù)選框沒有選擇，那么這個通將不能采集數(shù)據(jù)。采樣（Samp

9、ling）這個是通過系統(tǒng)采集數(shù)據(jù)的頻率。您可以選擇您想要的取樣頻率，當(dāng)您選擇一個取樣頻率時，一個說明在這個取樣頻率下可滿足的最小峰寬的提示將會顯示。建議您為您的色譜圖采用圖形事件程序來測定最佳的取樣頻率。頻率（Frequency）這個選項的單位為Hz（每秒采樣數(shù)），它可以滿足大多數(shù)的色譜應(yīng)用。點擊下拉鍵頭，從列表里選擇可用的頻率來配置您的系統(tǒng)。周期（Period）當(dāng)您選擇這種采樣方式時，您必須選擇每個數(shù)據(jù)點之間的間隔秒（或毫秒）數(shù)。確定一個數(shù)值，然后選擇周期是在秒或毫秒（mSec）。運行時間（Runtime）運行時間用來確定將要取樣的數(shù)據(jù)時間的長度。采集延時（AcquisitionDelay）

10、采集延時是為這個通道在開始運行（觸發(fā)器）和數(shù)據(jù)正式采集之間設(shè)置一個時間間隔。觸發(fā)（Trigger）為這個儀器從觸發(fā)表單里選擇一個觸發(fā)類型。觸發(fā)類型（TriggerType）確定數(shù)據(jù)采集如何開始。沒有（None）：在點擊Start之后數(shù)據(jù)采集立即開始，在批處理運行期間沒有暫停；手動（Manual）：操作者在按Enter鍵后開始采集數(shù)據(jù)，批處理運行期間會暫停等待確認(rèn)；外部（External）：如果是從一個外部的觸發(fā)器開始數(shù)據(jù)采集，選擇這個觸發(fā)類型。這個觸發(fā)器的類型在儀器配置時已經(jīng)設(shè)定好。當(dāng)您完成了采集參數(shù)設(shè)置后，點擊對話框右上角的X按鈕關(guān)閉對話框，然后選擇File/Method/Save命令保存設(shè)

11、置。十、單次運行采集（SingleRunAcquisition）在EZChromEliteClient/Server里有兩種方法可以采集數(shù)據(jù)。第一種是使用批處理（為重復(fù)多樣品運行），而另外一種就是使用一個單次運行。為了使用單次運行數(shù)據(jù)采集，您必須定義被用來分析的方法名和用來保存數(shù)據(jù)的文件名。注意：確定用來采集數(shù)據(jù)的方法，在儀器設(shè)置時采集通道已打開，采樣頻率和運行時間以設(shè)置好。為了使用單次運行，您可以點擊SingleRun按鈕或者從主菜單上點擊Control/SingleRun命令，以下對話框?qū)@示。運行信息（RunInformation）在這一段允許您為運行指定文件。樣品ID（SampleI

12、D）為運行輸入一個樣品ID，這里可以包含字符和數(shù)字，并且它將會被保存在數(shù)據(jù)文件里。方法（Method）輸入一個用來采集數(shù)據(jù)和將來處理數(shù)據(jù)的方法名。如果方法不在默認(rèn)的方法目錄里必須包含輸入路徑。您也可以點擊輸入框右邊的文件按鈕從您磁盤的可用方法列表里選擇一個方法。數(shù)據(jù)路徑（DataPath）輸入一個路徑名指定這次運行采集的數(shù)據(jù)將被保存在哪。也可以點擊文件按鈕從您的磁盤列表里選擇一個路徑。數(shù)據(jù)文件（DataFile）輸入一個文件名用來將數(shù)據(jù)保存到磁盤上。不能使用一個已存在的文件名，除非這個文件存在的目錄路徑里包含有“Public”。例如，如果您保存數(shù)據(jù)文件的路徑命名為“C:PublicData”，

13、那么保存在個目錄里的數(shù)據(jù)文件可以被覆蓋。打印方法報告（PrintMethodReport）當(dāng)這個但選框被選中，在結(jié)束運行后，這個方法報告（或它的報告）將會被打印。總量數(shù)值（AmountValues）在這一部分，您可以輸入一些值對怎樣計算濃度起作用。如果您是在準(zhǔn)備校正方法以前做單次數(shù)據(jù)采集，那么這些值可以保持默認(rèn)的值。樣品量（SampleAmount）這個樣品量的數(shù)值在計算濃度期間被當(dāng)作一個除數(shù)。它是被用來做不同樣品之間的稱量與當(dāng)已經(jīng)計算的樣品總量的百分?jǐn)?shù)值并非這次進樣所檢測到的值之間的補償。內(nèi)標(biāo)量（InternalStandardAmount）為校正運行，內(nèi)標(biāo)量的值取自于方法的峰組份表里。為一

14、個未知運行，在您的未知樣品里輸入內(nèi)標(biāo)量。倍乘因子（MultiplicationFactor）為這次運行輸入一個倍乘因子，所有被測量的峰將與這個因子相乘。校正（Calibrate）這個選項僅僅用在分離色譜樣品的校正上，不能用在SEC運行。當(dāng)您完成了對單次運行采集對話框的設(shè)置后，點擊Start按鈕開始數(shù)據(jù)采集。當(dāng)前的數(shù)據(jù)將顯示在譜圖窗口上，隨著采集并被保存在磁盤上。在運行結(jié)束后，譜圖將根據(jù)方法參數(shù)被分析，并且會產(chǎn)生一個報告（如果您已經(jīng)設(shè)定好）。如果在結(jié)束采集運行后，譜圖沒有被分析，如果您想查看結(jié)果，可以點擊Analyze按鈕對譜圖進行分析。樣品描述（SampleDescription）當(dāng)您點擊De

15、scription按鈕，您可以為這個樣品輸入一些描述文本，它會與數(shù)據(jù)文件一起保存。從打開文件對話框里可以查看這個描述，或者當(dāng)這個文件被打開并成為當(dāng)前數(shù)據(jù)時，可以通過使用Data/Properties命令查看。提交（Submit）當(dāng)正在使用一個批處理或單運行采集當(dāng)前數(shù)據(jù)時，點擊RunSingle按鈕，這個按鈕將會顯示。Submit按鈕允許您提交一個單次采集在當(dāng)前運行完成后被運行。如果您當(dāng)前正在進行一個批處理的運行，這個運行將會放在運行序列（RunQueue）的最后。優(yōu)先提交（SubmitPriority）當(dāng)正在使用一個批處里采集當(dāng)前數(shù)據(jù)時，點擊RunSingle按鈕，這個按鈕將會顯示。當(dāng)您點擊S

16、ubmitPriority，您可以提交一個單運行在運行序列的當(dāng)前正在運行的批處理運行記錄的后面立即執(zhí)行。在這個樣品運行完成以后，這個批處里重新開始。注意：如果在運行結(jié)束后譜圖沒有被分析，或者如果您期望打印的報告沒有打印，點擊Method/Properties命令確定在這個方法里的數(shù)據(jù)分析和報告選項被啟用。十一、定義SEC基線（DefiningSECBaseline）您可以使用已經(jīng)保存的SEC標(biāo)準(zhǔn)校正譜圖為這次分析建立SEC基線。將譜圖顯示在譜圖窗口，從工具欄上選擇點擊SECBaseline圖標(biāo)。然后在要設(shè)定SEC基線的譜圖段的開始和結(jié)束處各點擊一下鼠標(biāo)左鍵。您選擇的范圍值將顯示在這個對話框里。

17、點擊Add添加這段基線范圍值到您方法的SEC設(shè)置里。又或者您可以在SEC設(shè)置窗口手動地輸入SEC基線，在執(zhí)行SEC分析以前必須有SEC基線。十二、定義SEC結(jié)果范圍（DefiningSECResultRanges）您可以使用已經(jīng)保存的SEC標(biāo)準(zhǔn)校正譜圖為這次分析建立SEC結(jié)果范圍。將譜圖顯示在譜圖窗口，從工具欄上選擇點擊SECRange圖標(biāo)。然后再要設(shè)定結(jié)果范圍的每個譜圖段的開始和結(jié)束處各點擊一下鼠標(biāo)左鍵。將會對您選擇的每一個結(jié)果范圍計算分子量。定義的結(jié)果范圍值會顯示在這個對話框里。如果結(jié)果范圍屬于已經(jīng)輸入的基線范圍之列，那么基線范圍將被顯示。點擊Add按鈕添加設(shè)定的結(jié)果范圍到您的SEC設(shè)置里

18、。又或者您可以在SEC設(shè)置窗口手動地輸入SEC基線，在執(zhí)行SEC分析以前必須有一個或多個SEC結(jié)果范圍。十三、定義SEC峰（DefineSECPeaks）您可以使用您已經(jīng)保存的標(biāo)準(zhǔn)校正譜圖來輸入峰和它們的保留時間到SEC校正設(shè)置里。確認(rèn)當(dāng)前顯示的譜圖是您的標(biāo)準(zhǔn)校正譜圖并且它已經(jīng)被分析過（如果未曾分析，點擊Analyze按鈕）。選擇Method/DefineSECPeaks命令或則點擊譜圖窗口工具條上的DefineSECPeaks按鈕。您應(yīng)及時地在您想要添加到SEC峰表的第一個SEC峰的前面和最后一個SEC峰的后面各點擊一下鼠標(biāo)左鍵。一旦您已經(jīng)點擊定義了峰的范圍，一個有定義峰選項的對話框?qū)@示

19、。添加（Add）選擇這個選項，您可以添加已選擇的峰到當(dāng)前的SEC校正峰表里，已經(jīng)存在于這個表里的峰不會被覆蓋。替換（Replace）選擇這個選項可以選擇性地替換當(dāng)前SEC校正表里的峰。這個偏差（Tolerance）被用來測定一個已存在的時間是否因該被替換為一個新的時間。如果偏差是0那么這個值應(yīng)該恰好符合。在新的值與已存值之間變化比較大時，設(shè)定一個比較大的百分偏差值，系統(tǒng)將認(rèn)為它們是符合的。平均（Average）選擇這個選項將會選擇性地用新的時間與當(dāng)前SEC校正表里已存在的一個時間進行平均。偏差用來測定一個已存在的時間是否應(yīng)該與新時間進行平均。如果偏差是0那么這個值應(yīng)該恰好符合。在新的值與已存值

20、之間變化比較大時，設(shè)定一個比較大的百分偏差值，系統(tǒng)將認(rèn)為它們是符合的。僅僅可以平均5個試驗值，如果您嘗試去平均第六個時間值，那么舊的試驗值將會被拋棄。偏差（Tolerance）當(dāng)使用替換或平均選項時，百分偏差值被用來測定“匹配（Matching）”值。如果偏差是0那么這個值應(yīng)該恰好符合。在新的值與已存值之間變化比較大時，設(shè)定一個比較大的百分偏差值，系統(tǒng)將認(rèn)為它們是符合的。點擊OK按鈕輸入已定義的峰到SEC設(shè)置表里。十四、標(biāo)注SEC譜圖（AnnotationSECChromatography）當(dāng)您在譜圖窗口察看一個SEC譜圖時，那些對SEC樣品特征的注釋是可用的。您可以在譜圖窗口上右擊鼠標(biāo)并選擇

21、Annotation(注釋)設(shè)置這些可用的特征注釋。一個對話框?qū)@示，在那里您可以選擇SEC特征和/或正常譜圖的注釋。為了查看SEC特征參數(shù)注釋，從下拉列表里選擇SEC（peaks/SEC）。一個SEC計算值的列表將會顯示，在那你可以選擇您譜圖上的注釋。為選擇一個參數(shù)，在這個參數(shù)上雙擊鼠標(biāo)左鍵將它移動到右邊的方格里。注意標(biāo)準(zhǔn)基線沒有被用在SEC上，因此Baseline不應(yīng)該被選中。為標(biāo)注SECBaseline（SEC基線），應(yīng)在這個單選框點擊選中它。一旦選擇完注釋，點擊OK按鈕它們將顯示在您的譜圖上，如下所示。注意：如果您還未曾在您的SEC方法里輸入SEC基線和SEC結(jié)果范圍值，那么它們將不

22、會在您的譜圖上顯示。從Appearance對話框里您可以更改注釋的顏色和字體。（點擊鼠標(biāo)右鍵并選擇Appearance）十五、分子量分布（Slicevs.Mol.WtTrace）為創(chuàng)建一個切片相對于分子量（分子量分布）的圖形，打開一個數(shù)據(jù)文件并且分析它。從主菜單選擇View/Overlay命令，也可以在譜圖窗口右擊鼠標(biāo)并選擇AddTrace。對數(shù)據(jù)源可以選擇當(dāng)前數(shù)據(jù)（CurrentData）(或定義另外的數(shù)據(jù))，并且然后為圖形（Trace）選擇MolWtDist。并且將比例（Scaleto）設(shè)為最大的峰（LargestPeak）,然后點擊OK。因為比例是完全不同的，您應(yīng)該在不同的窗口查看比較當(dāng)

23、前的譜圖圖形與MolWt.Dist圖形。為做到這點，您可以在主菜單選擇View/Titled命令，在一個分割的窗口里將顯示MolWt.Dist圖形。請注意這個圖形的坐標(biāo)軸是分子量分布（MolecularWt.）與面積切片（SliceArea）.十六、SEC設(shè)置SEC設(shè)置包括將要輸入的標(biāo)準(zhǔn)品的分子量信息，那些信息將在后面被用來校正計算未知樣品的分子量數(shù)值。使用一個已保存的標(biāo)準(zhǔn)校正數(shù)據(jù)，通過圖形程序可以自動地輸入SEC基線，結(jié)果范圍和峰，這些值也可以手動輸入。為已選擇的SEC校正方法和計算，您必須通過輸入那些必要的信息來完成SEC設(shè)置。顯示在SEC設(shè)置界面的信息隨著選擇的校正類型（Narrow,B

24、road1,Broad2,orUniversal）而改變。詳細(xì)信息，請查看校正方法描述章節(jié)。當(dāng)您已完成SEC設(shè)置，您就可以準(zhǔn)備去采集或處理您的SEC運行。您可以手動（單次進樣）或通過批處理（自動進樣）去采集數(shù)據(jù)。對于創(chuàng)建一個批處理的信息請查看EZChromElite用戶手冊。十七、SEC設(shè)置窄分布標(biāo)準(zhǔn)方法當(dāng)您為校正類型選擇窄分布（Narrow）標(biāo)準(zhǔn)方法時，SEC設(shè)置界面與下面顯示的界面相似。EnableAnalysis選擇這個單選框使當(dāng)前通道的SEC計算可用，每一個通道允許有它們自己的計算條件。MolecularWeight為每一個校正峰輸入一個分子量，用以代表是標(biāo)準(zhǔn)校正峰。AverageTi

25、me(min)輸入標(biāo)準(zhǔn)校正峰的保留時間（分）。如果您已使用圖形程序里的定義SEC峰（DefineSECPeaks）命令，那么這個峰的時間已經(jīng)為您輸入了。注意：這個時間單位為標(biāo)準(zhǔn)校正和分子量計算會被轉(zhuǎn)換位秒。TimeSlice為這次計算選擇一個時間切片寬度（秒），切片寬度將會確定分子量片斷頻率。如果一個切片報告已產(chǎn)生，它將會以您在這里選擇的切片寬度為基礎(chǔ)。軟件將會強制使這個數(shù)值在分析期間作為一個積分的數(shù)據(jù)收集頻率。BaselineStartandStopTimes基線的開始和結(jié)束時間（分）可以手動或通過點擊譜圖窗口工具條上的SECBaseline按鈕圖形化地輸入。ResultsRangeStar

26、tandStop為計算和分子量分布報告，必須為譜圖輸入一個或多個范圍值。通過結(jié)果范圍的開始和停止值來確定這個范圍值。這個時間（分）值可以手動地或使用一個已保存的譜圖圖形化地輸入。HorizontalBaseline如果您希望從基線的開始處向前到結(jié)束處能繪制一條水平的SEC基線，選擇這個選項。當(dāng)它與數(shù)據(jù)曲線交叉時，水平基線會停止。當(dāng)它與曲線上的噪音相會時，必須指定一個以微伏為單位的限定值(threshold)，用來忽略在這個曲線上會引起水平基線停止的任何檢測器基線噪音。如果水平基線在規(guī)定停止時間以前延伸到了已檢測峰的末尾，那么這個范圍值會停止在水平基線與曲線交會的地方。SampleData如果您

27、選擇的是窄分布標(biāo)準(zhǔn)校正，那么這個區(qū)域?qū)@示為空白。ReferencePeakTime(min)如果您想使用一個參考峰的保留時間去調(diào)整流速改變引起的誤差，請選擇這個單選項。通過在這里輸入不同的時間值和樣品里的參考峰時間，所有的洗脫時間/體積將用來做校正時的補償。為參考峰輸入一個預(yù)定的時間，單位為分鐘。ReferenceWindow(%)如果您將使用一個參考峰，請為這個參考峰在窗口%（window%）里輸入一個值。一個峰落在這個參考峰的預(yù)定保留時間的+/-window%范圍之內(nèi)將被認(rèn)為符合參考峰。（如果有兩個峰在這個窗口內(nèi)，最靠近中間的將被選為參考保留時間）FitType從下拉列表里為校正選擇一

28、個合適的曲線類型。包括以下可選項：點到點（Point-to-Point）、線性（Linear）、二次方程（Quadratic）、三次曲線（Cubic）、四次多項式（4thDegreePolynomial）和曲線（Spline）。GoodnessofFit(擬合度)SEC設(shè)置里的數(shù)據(jù)的校正曲線將被顯示在校正曲線窗口框里。R2值表示選擇曲線校正點的擬合度，顯示在曲線的上面，值為1.0表示精確的點。從曲線的下面選擇Time或Volumn按鈕，可以讓X坐標(biāo)軸顯示為保留時間（分鐘）或保留體積。如果您選擇的是體積，請以ml/min輸入流速。分離調(diào)整校正曲線（Removecalibrationcurveou

29、tliers）用鼠標(biāo)在一個點上點擊一下，可以從校正曲線上臨時移出一個分離點。它將會改變顏色并且校正曲線會重新計算。重新在這個點上點擊一下，曲線會使用這個點重新計算。Time/Volumn為您的校正曲線選擇查看模式：時間/體積。如果你選擇的是體積，為了正確顯示曲線，您必須輸入流速。Print點擊這個按鈕可以打印您當(dāng)前的SEC方法信息。ExportSettings點擊這個按鈕可以選擇外部輸出選項和路徑?？s放校正曲線通過點擊并拖動鼠標(biāo)可以放大SEC校正曲線，在圖形區(qū)域雙擊鼠標(biāo)可以縮小查看校正曲線。十八、SEC設(shè)置通用校正如果您為校正選擇了通用（Universal），以下界面將會顯示。EnableAn

30、alysis選擇這個單選框使當(dāng)前通道的SEC計算可用，每一個通道允許有它們自己的計算條件。MolecularWeight為每一個校正峰輸入一個分子量，用以代表是標(biāo)準(zhǔn)校正峰。AverageTime(min)輸入標(biāo)準(zhǔn)校正峰的保留時間（分）。如果您已使用圖形程序里的定義SEC峰（DefineSECPeaks）命令，那么這個峰的時間已經(jīng)為您輸入了。注意：這個時間單位為標(biāo)準(zhǔn)校正和分子量計算會被轉(zhuǎn)換位秒。UseConstants從下拉選項里選擇一個常量(Mark-Houwink或粘度)為校正使用?；谀倪x擇，在計算表里的相應(yīng)列將會變?yōu)榭捎玫?。StdMark-Houwinkk如果您為使用常量項選擇了Mar

31、k-Houwink，在這項里輸入標(biāo)準(zhǔn)k值。StdMark-Houwinka如果您為使用常量項選擇了Mark-Houwink，在這項里輸入標(biāo)準(zhǔn)a值。IntrinsicViscosity如果您為使用常量項選擇了固有粘度（IntrinsicViscosity）,在這里輸入一個值。否則這項是沒有作用的。TimeSlice為這次計算選擇一個時間切片寬度（秒），切片寬度將會確定分子量片斷頻率。如果一個切片報告已產(chǎn)生，它將會以您在這里選擇的切片寬度為基礎(chǔ)。軟件將會強制使這個數(shù)值在分析期間作為一個積分的數(shù)據(jù)收集頻率。BaselineStartandStopTimes基線的開始和結(jié)束時間（分）可以手動或通過點擊

32、譜圖窗口工具條上的SECBaseline按鈕圖形化地輸入。ResultsRangeStartandStop為計算和分子量分布報告，必須為譜圖輸入一個或多個范圍值。通過結(jié)果范圍的開始和停止值來確定這個范圍值。這個時間（分）值可以手動地或使用一個已保存的譜圖圖形化地輸入。HorizontalBaseline如果您希望從基線的開始處向前到結(jié)束處能繪制一條水平的SEC基線，選擇這個選項。當(dāng)它與數(shù)據(jù)曲線交叉時，水平基線會停止。當(dāng)它與曲線上的噪音相會時，必須指定一個以微伏為單位的限定值(threshold)，用來忽略在這個曲線上會引起水平基線停止的任何檢測器基線噪音。如果水平基線在規(guī)定停止時間以前延伸到了

33、已檢測峰的末尾，那么這個范圍值會停止在水平基線與曲線交會的地方。Calibration將校正類型選為通用（Universal）SampleData為您的樣品在這個區(qū)域輸入k和a值或已確定的固有粘度值。這些值連同在校正表里定義的Mark-Houwink或固有粘度一起被用來調(diào)整校正曲線，以便更好地描述將被分析的樣品。注：所有以通用校正分析的樣品，在這里必須定義Mark-Houwink常量或固有粘度。如果您分析的樣品有不同的值，為那些樣品您必須以這些值創(chuàng)建一個新的方法。ReferencePeakTime(min)如果您想使用一個參考峰的保留時間去調(diào)整流速改變引起的誤差，請選擇這個單選項。通過在這里輸

34、入不同的時間值和樣品里的參考峰時間，所有的洗脫時間/體積將用來做校正時的補償。為參考峰輸入一個預(yù)定的時間，單位為分鐘。ReferenceWindow(%)如果您將使用一個參考峰，請為這個參考峰在窗口%（window%）里輸入一個值。一個峰落在這個參考峰的預(yù)定保留時間的+/-window%范圍之內(nèi)將被認(rèn)為符合參考峰。（如果有兩個峰在這個窗口內(nèi)，最靠近中間的將被選為參考保留時間）FitType從下拉列表里為校正選擇一個合適的曲線類型。包括以下可選項：點到點（Point-to-Point）、線性（Linear）、二次方程（Quadratic）、三次曲線（Cubic）、四次多項式（4thDegreeP

35、olynomial）和曲線（Spline）。GoodnessofFit(擬合度)SEC設(shè)置里的數(shù)據(jù)的校正曲線將被顯示在校正曲線窗口框里。R2值表示選擇曲線校正點的擬合度，顯示在曲線的上面，值為1.0表示精確的點。從曲線的下面選擇Time或Volumn按鈕，可以讓X坐標(biāo)軸顯示為保留時間（分鐘）或保留體積。如果您選擇的是體積，請以ml/min輸入流速。分離調(diào)整校正曲線（Removecalibrationcurveoutliers）用鼠標(biāo)在一個點上點擊一下，可以從校正曲線上臨時移出一個分離點。它將會改變顏色并且校正曲線會重新計算。重新在這個點上點擊一下，曲線會使用這個點重新計算。Time/Volum

36、n為您的校正曲線選擇查看模式：時間/體積。如果你選擇的是體積，為了正確顯示曲線，您必須輸入流速。Print點擊這個按鈕可以打印您當(dāng)前的SEC方法信息。ExportSettings點擊這個按鈕可以選擇外部輸出選項和路徑?？s放校正曲線通過點擊并拖動鼠標(biāo)可以放大SEC校正曲線，在圖形區(qū)域雙擊鼠標(biāo)可以縮小查看校正曲線十九、SEC設(shè)置寬范圍1校正當(dāng)您選擇寬范圍1作為校正方法時，SEC設(shè)置界面將會如下顯示。EnableAnalysis選擇這個單選框使當(dāng)前通道的SEC計算可用，每一個通道允許有它們自己的計算條件。MolecularWeightTable寬范圍1方法是一個線性的校正方法，不需要使用分子量表格，

37、只需在校正數(shù)據(jù)（CalibrationData）區(qū)域輸入數(shù)據(jù)。AverageTime(min)輸入標(biāo)準(zhǔn)校正峰的保留時間（分）。如果您已使用圖形程序里的定義SEC峰（DefineSECPeaks）命令，那么這個峰的時間已經(jīng)為您輸入了。注意：這個時間單位為標(biāo)準(zhǔn)校正和分子量計算會被轉(zhuǎn)換位秒。TimeSlice為這次計算選擇一個時間切片寬度（秒），切片寬度將會確定分子量片斷頻率。如果一個切片報告已產(chǎn)生，它將會以您在這里選擇的切片寬度為基礎(chǔ)。軟件將會強制使這個數(shù)值在分析期間作為一個積分的數(shù)據(jù)收集頻率。BaselineStartandStopTimes基線的開始和結(jié)束時間（分）可以手動或通過點擊譜圖窗口工

38、具條上的SECBaseline按鈕圖形化地輸入。ResultsRangeStartandStop為計算和分子量分布報告，必須為譜圖輸入一個或多個范圍值。通過結(jié)果范圍的開始和停止值來確定這個范圍值。這個時間（分）值可以手動地或使用一個已保存的譜圖圖形化地輸入。HorizontalBaseline如果您希望從基線的開始處向前到結(jié)束處能繪制一條水平的SEC基線，選擇這個選項。當(dāng)它與數(shù)據(jù)曲線交叉時，水平基線會停止。當(dāng)它與曲線上的噪音相會時，必須指定一個以微伏為單位的限定值(threshold)，用來忽略在這個曲線上會引起水平基線停止的任何檢測器基線噪音。如果水平基線在規(guī)定停止時間以前延伸到了已檢測峰的

39、末尾，那么這個范圍值會停止在水平基線與曲線交會的地方。CalibrationData在提供的輸入框里為Mn和Mx或D1和D2輸入值，然后點擊校正(Calibrate)按鈕。系統(tǒng)將會計算出Mn和Mx或D1和D2的值為校正使用。ReferencePeakTime(min)如果您想使用一個參考峰的保留時間去調(diào)整流速改變引起的誤差，請選擇這個單選項。通過在這里輸入不同的時間值和樣品里的參考峰時間，所有的洗脫時間/體積將用來做校正時的補償。為參考峰輸入一個預(yù)定的時間，單位為分鐘。ReferenceWindow(%)如果您將使用一個參考峰，請為這個參考峰在窗口%（window%）里輸入一個值。一個峰落在這

40、個參考峰的預(yù)定保留時間的+/-window%范圍之內(nèi)將被認(rèn)為符合參考峰。（如果有兩個峰在這個窗口內(nèi)，最靠近中間的將被選為參考保留時間）分離調(diào)整校正曲線（Removecalibrationcurveoutliers）用鼠標(biāo)在一個點上點擊一下，可以從校正曲線上臨時移出一個分離點。它將會改變顏色并且校正曲線會重新計算。重新在這個點上點擊一下，曲線會使用這個點重新計算。Time/Volumn為您的校正曲線選擇查看模式：時間/體積。如果你選擇的是體積，為了正確顯示曲線，您必須輸入流速。Print點擊這個按鈕可以打印您當(dāng)前的SEC方法信息。ExportSettings點擊這個按鈕可以選擇外部輸出選項和路徑

41、。縮放校正曲線通過點擊并拖動鼠標(biāo)可以放大SEC校正曲線，在圖形區(qū)域雙擊鼠標(biāo)可以縮小查看校正曲線。二十、SEC設(shè)置寬范圍2校正如果你為校正類型選擇寬范圍2，以下界面將會顯示。EnableAnalysis選擇這個單選框使當(dāng)前通道的SEC計算可用，每一個通道允許有它們自己的計算條件。MolecularWeight輸入一系列分子量用來確定寬范圍校正曲線。AverageTime(min)輸入標(biāo)準(zhǔn)校正峰的保留時間（分）。如果您已使用圖形程序里的定義SEC峰（DefineSECPeaks）命令，那么這個峰的時間已經(jīng)為您輸入了。注意：這個時間單位為標(biāo)準(zhǔn)校正和分子量計算會被轉(zhuǎn)換位秒。UseConstants從下

42、拉選項里選擇一個常量(Mark-Houwink或粘度)為校正使用?；谀倪x擇，在計算表里的相應(yīng)列將會變?yōu)榭捎玫摹tdMark-Houwinkk如果您為使用常量項選擇了Mark-Houwink，在這項里輸入標(biāo)準(zhǔn)k值。StdMark-Houwinka如果您為使用常量項選擇了Mark-Houwink，在這項里輸入標(biāo)準(zhǔn)a值。IntrinsicViscosity如果您為使用常量項選擇了固有粘度（IntrinsicViscosity）,在這里輸入一個值。否則這項是沒有作用的。TimeSlice為這次計算選擇一個時間切片寬度（秒），切片寬度將會確定分子量片斷頻率。如果一個切片報告已產(chǎn)生，它將會以您在這里

43、選擇的切片寬度為基礎(chǔ)。軟件將會強制使這個數(shù)值在分析期間作為一個積分的數(shù)據(jù)收集頻率。BaselineStartandStopTimes基線的開始和結(jié)束時間（分）可以手動或通過點擊譜圖窗口工具條上的SECBaseline按鈕圖形化地輸入。ResultsRangeStartandStop為計算和分子量分布報告，必須為譜圖輸入一個或多個范圍值。通過結(jié)果范圍的開始和停止值來確定這個范圍值。這個時間（分）值可以手動地或使用一個已保存的譜圖圖形化地輸入。HorizontalBaseline如果您希望從基線的開始處向前到結(jié)束處能繪制一條水平的SEC基線，選擇這個選項。當(dāng)它與數(shù)據(jù)曲線交叉時，水平基線會停止。當(dāng)它

44、與曲線上的噪音相會時，必須指定一個以微伏為單位的限定值(threshold)，用來忽略在這個曲線上會引起水平基線停止的任何檢測器基線噪音。如果水平基線在規(guī)定停止時間以前延伸到了已檢測峰的末尾，那么這個范圍值會停止在水平基線與曲線交會的地方。CalibrationData在提供的輸入框里為Mn和Mx或D1和D2輸入值，然后點擊校正(Calibrate)按鈕。系統(tǒng)將會計算出Mn和Mx或D1和D2的值為校正使用。您必須在完成分子量表格以前輸入這些數(shù)據(jù)。ReferencePeakTime(min)如果您想使用一個參考峰的保留時間去調(diào)整流速改變引起的誤差，請選擇這個單選項。通過在這里輸入不同的時間值和樣

45、品里的參考峰時間，所有的洗脫時間/體積將用來做校正時的補償。為參考峰輸入一個預(yù)定的時間，單位為分鐘。ReferenceWindow(%)如果您將使用一個參考峰，請為這個參考峰在窗口%（window%）里輸入一個值。一個峰落在這個參考峰的預(yù)定保留時間的+/-window%范圍之內(nèi)將被認(rèn)為符合參考峰。（如果有兩個峰在這個窗口內(nèi)，最靠近中間的將被選為參考保留時間）FitType從下拉列表里為校正選擇一個合適的曲線類型。包括以下可選項：點到點（Point-to-Point）、線性（Linear）、二次方程（Quadratic）、三次曲線（Cubic）、四次多項式（4thDegreePolynomial

46、）和曲線（Spline）。GoodnessofFit(擬合度)SEC設(shè)置里的數(shù)據(jù)的校正曲線將被顯示在校正曲線窗口框里。R2值表示選擇曲線校正點的擬合度，顯示在曲線的上面，值為1.0表示精確的點。從曲線的下面選擇Time或Volumn按鈕，可以讓X坐標(biāo)軸顯示為保留時間（分鐘）或保留體積。如果您選擇的是體積，請以ml/min輸入流速。分離調(diào)整校正曲線（Removecalibrationcurveoutliers）用鼠標(biāo)在一個點上點擊一下，可以從校正曲線上臨時移出一個分離點。它將會改變顏色并且校正曲線會重新計算。重新在這個點上點擊一下，曲線會使用這個點重新計算。Time/Volumn為您的校正曲線選擇查看模式：時間/體積。如果你選擇的是體積，為了正確顯示曲線，您必須輸入流速。Print點擊這個按鈕可以打印您當(dāng)前的SEC方法信息。ExportSettings點擊這個按鈕可以選擇外部輸出選項和路徑?？s放校正曲線通過點擊并拖動鼠標(biāo)可以放大SEC校正曲線，在圖形區(qū)域雙擊鼠標(biāo)可以縮小查看校正曲線。二十一、