微生物實驗思考題復(fù)習(xí)課程

1、此文檔僅供收集于網(wǎng)絡(luò)，如有侵權(quán)請聯(lián)系網(wǎng)站刪除只供學(xué)習(xí)與交流此文檔僅供收集于網(wǎng)絡(luò)，如有侵權(quán)請聯(lián)系網(wǎng)站刪除只供學(xué)習(xí)與交流微生物實驗思考題、 用油鏡觀察時應(yīng)該注意哪些問題？在載破片和鏡頭之間加滴什么油？起什么作用？答： 應(yīng)該先用擦鏡紙將鏡頭擦干凈,以防上次實驗的污染.操作時 ,先低倍再高倍.用完要擦掉油.加滴香柏油。作用：增加折光率,也就是增加了顯微鏡的分辨率.、 根據(jù)實驗體會， 談?wù)剳?yīng)如何根據(jù)所觀察微生物的大小， 選擇不同的物鏡進(jìn)行有效的觀察。答： 細(xì)菌用油鏡 ,真菌用高倍鏡.都是先用低倍鏡找到目標(biāo)后,再用高倍鏡調(diào)到合適的視野和合適的清晰度 . 放線菌、 酵母菌、 多細(xì)胞真菌相對較大， 用放大 4

2、0 倍的物鏡就可以看了，細(xì)菌小， 要用放大 1000 倍的物鏡看，感覺還很小。病毒那就要用電子顯微鏡看了。、 哪些環(huán)節(jié)會影響革蘭氏染色結(jié)果的正確性？其中最關(guān)鍵的環(huán)節(jié)是什么？答： 涂片環(huán)節(jié)、加熱固定環(huán)節(jié)、脫色環(huán)節(jié) ；其中最關(guān)鍵的環(huán)節(jié)是脫色環(huán)節(jié)。、 進(jìn)行革蘭氏染色時，為什么特別強(qiáng)調(diào)菌齡不能太老，用老齡細(xì)菌染色會出現(xiàn)什么問題？ TOC o 1-5 h z 答： 著色不均， 染色效果不好。 陰性陽性不明顯分不太清楚,問題是：不便于顯微鏡下觀察是陽性菌還是陰性菌。、 革蘭氏染色時， 初染前能加碘液嗎?乙醇脫色后復(fù)染之前，革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌應(yīng)分別是什么顏色?答： 不可以。因為碘與染料會結(jié)合成大分子

3、，使得染料分子不能穿過細(xì)胞的細(xì)胞壁，對實驗結(jié)果造成影響。脫色后復(fù)染前，革蘭氏陽性菌呈紫色，陰性菌無色。6、不經(jīng)過復(fù)染這一步，能否區(qū)別革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌？答： 不行。在復(fù)染之前，革蘭氏陰性菌是無色透明的，在顯微鏡下很難觀察到；或者脫色過度，也會造成陽性菌脫色，不經(jīng)過復(fù)染，無法進(jìn)一步區(qū)別。此文檔僅供收集于網(wǎng)絡(luò)，如有侵權(quán)請聯(lián)系網(wǎng)站刪除此文檔僅供收集于網(wǎng)絡(luò)，如有侵權(quán)請聯(lián)系網(wǎng)站刪除只供學(xué)習(xí)與交流此文檔僅供收集于網(wǎng)絡(luò)，如有侵權(quán)請聯(lián)系網(wǎng)站刪除7、你認(rèn)為制備細(xì)菌染色標(biāo)本時，應(yīng)該注意哪些環(huán)節(jié)？答：1制備適宜的培養(yǎng)基2在超凈工作臺上進(jìn)行，保持無菌環(huán)境3對培養(yǎng)基，接種環(huán)等物品的高溫高壓滅菌.4倒置培養(yǎng)基 ，

4、防止冷凝水內(nèi)流為什么要求制片完全干燥后才能用油鏡觀察？答：1、若未完全干燥，載玻片上的液體會污染油鏡鏡頭。鏡頭非常精密，被污染后不利于下次觀察；2、若未完全干燥，水滴會影響油與玻璃之間折光率，造成視野不夠清晰。如果涂片未以熱固定，將會出現(xiàn)彳f么問題？加熱溫度過高、時間太長，又會怎么樣呢？答:如果沒有加熱固定的話，水分蒸發(fā)太慢或者在染色時菌體會被沖洗掉；如果加熱時間過久，菌體變形或形態(tài)破壞，無法染色。制備培養(yǎng)基的一般程序是什么？答：稱量一一溶解一調(diào) PH值一融化瓊脂一過濾分裝一包扎標(biāo)記一一滅菌一一倒平板做過本次實驗后，你認(rèn)為在制備培養(yǎng)基時要注意些什么問題？答：溶解配料的水要適量；PH要調(diào)到7.3

5、左右；要小心手提式高壓鍋的使用；倒平板時要防止培養(yǎng)基被污染滅菌在微生物學(xué)實驗操作中有何重要意義？答：防止培養(yǎng)基被污染；防止雜菌影響實驗結(jié)果試述高壓蒸汽滅菌的操作方法和原理。答：高壓滅菌的原理是：在密閉的蒸鍋內(nèi)，其中的蒸汽不能外溢，壓力不斷上升，使水的沸點(diǎn)不斷提高，從而鍋內(nèi)溫度也隨之增加。在 0.1MPa的壓力下，鍋內(nèi)溫度達(dá) 121 C。在此蒸 汽溫度下，可以很快殺死各種細(xì)菌及其高度耐熱的芽抱。操作方法：加水一一只供學(xué)習(xí)與交流裝料、加蓋排氣升壓、保壓、和降壓取料高壓蒸汽滅菌時應(yīng)注意哪些事項？ TOC o 1-5 h z 答： 第一， 無菌包不宜過大， 不宜過緊， 各包裹間要有間隙， 使蒸汽能對流

6、易滲透到包裹中央。第二，布類物品應(yīng)放在金屬類物品上，否則蒸汽遇冷凝聚成水珠，使包布受潮。阻 礙蒸 汽進(jìn)入包裹中央，嚴(yán)重影響滅菌效果。第三，定期檢查滅菌效果。試述如何在接種中，貫徹?zé)o菌操作的原則 ?答： 保持操作臺的無菌狀態(tài)與在無菌室操作；操作前，要進(jìn)行手的消毒； 接種環(huán)要加熱滅菌；接種物品要標(biāo)記。以斜面上的菌種接種到新的斜面培養(yǎng)基為例說明操作方法和注意事項。答： 在接種箱或者超凈工作臺上.將母種經(jīng)過消毒處理以后,在酒精燈火焰區(qū)上方打開棉塞.用接種針挑取一小塊菌絲體,接入新的試管培養(yǎng)基上即可.試設(shè)計一個實驗，從土壤中分離酵母菌并進(jìn)行計數(shù)。答： 無標(biāo)準(zhǔn)答案。在酵母菌死活細(xì)胞的觀察中，使用美藍(lán)液有什

7、么作用？答 ：區(qū)別死活細(xì)胞。為何要用乳酸-石碳酸溶液作霉菌水浸片？答： 用乳酸 -石炭酸的優(yōu)點(diǎn)是可使細(xì)胞不變形， 具有殺菌、 防腐作用； 不易干燥， 能保持較 長 時間；能防止孢子四處飛散。細(xì)菌與霉菌的菌落有何區(qū)別？答： 細(xì)菌菌落光滑，易于基質(zhì)脫離；霉菌菌落較大、菌絲細(xì)長只供學(xué)習(xí)與交流, 菌落疏松,呈絨毛狀、蜘蛛網(wǎng)狀、棉絮狀,無固定大小 ,多有光澤 ,不易挑。如何區(qū)分霉菌與放線菌的菌落？什么是擴(kuò)展性菌落？答： 霉菌的菌落形態(tài)較大,質(zhì)地一般比放線菌疏松,細(xì)胞分化明顯菌絲粗壯 有核 菌落邊緣有粗絲狀細(xì)胞生長快 有霉味。而霉菌往往形成復(fù)雜的孢子囊孢子梗等結(jié)構(gòu)。放線菌菌落小 菌絲細(xì)而均勻 菌落邊緣可見

8、細(xì)絲狀細(xì)胞 有泥腥味，放線菌的分生孢子形態(tài)結(jié)構(gòu)簡單。擴(kuò)展性菌落：就是原本培養(yǎng)的細(xì)菌由于發(fā)生擴(kuò)散,形成的一些非預(yù)期的菌落,通常這些菌落會影響正常實驗觀察,可以用藥物抑制 .能否用血球計數(shù)板在油鏡下進(jìn)行計數(shù)？為什么？答： 不能。 計數(shù)時滴在血球計數(shù)板上的是菌懸液， 相當(dāng)于在鏡頭和計數(shù)板直接加了一層水。水層會降低視野的亮度和顯微鏡的分辨率，造成菌體和網(wǎng)格線不清晰。根據(jù)自己體會，說明血球計數(shù)板計數(shù)的誤差主要來自那些方面？如何減少誤差？答：誤 差主要來自試劑誤差、方法誤差、儀器誤差；減少誤差有保持樣品的純凈、細(xì)胞溶液必須震蕩均勻、樣品濃度要適中、血球計數(shù)板要整潔清晰。菌種保藏中，石蠟油的作用是什么？答：

9、 作用是密封。防止空氣進(jìn)入，降低菌種的生理活性。經(jīng)常使用的細(xì)菌菌株，使用哪種保藏方法比較好？答： 用甘油冷凍保藏方法保存， 在液體培養(yǎng)基中加入百分子十五的甘油， 然后低溫冷凍（ -7 度）左右。食品檢驗為什么要測定細(xì)菌菌落總數(shù)？答： 測定細(xì)菌菌落總數(shù)是檢驗食品純度程度的指標(biāo)。也是判斷其保存能力的指標(biāo)。實驗操作如何使數(shù)據(jù)可靠 ?答： 1、向平皿傾注液體時,平皿僅微微開啟即可；2、檢樣從開始稀釋到傾注最后一個平皿所用時間不宜超過20min.3、培養(yǎng)液和檢液在培養(yǎng)皿內(nèi)要搖勻；4、培養(yǎng)液傾注培養(yǎng)皿時溫度要在45 攝氏度 , 以免燙死菌落.食品中檢出的菌落總數(shù)是否代表該食品上的所有細(xì)菌數(shù)？為什么？答：

10、不能代表該食品上所有細(xì)菌數(shù)。 因為在實驗過程中會造成細(xì)菌的損失或死亡、 食品上 的 細(xì)菌包括了各種各樣的微生物。為什么營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基在使用前要保持在（ 46 1）的溫度？答 ：營養(yǎng)瓊脂是用來做菌落總數(shù)項目的,如果太熱就會將細(xì)菌燙死,而太冷則瓊脂還沒倒就凝固了（凝固點(diǎn)大約在40 度） 。大腸菌群檢驗中為什么首先要用乳糖膽鹽發(fā)酵管？答： 因為乳糖膽鹽發(fā)酵管中的成分有溴甲酚紫， 中性時呈藍(lán)紫色， 酸性時呈黃色， 如果顏 色不變（呈藍(lán)紫色） ，說明無產(chǎn)酸的大腸菌群；如果顏色變黃色，說明可能出現(xiàn)能分解乳糖產(chǎn) 酸的大腸菌群；膽鹽可以抑制其它細(xì)菌生長繁殖；看杜氏小管中是否有氣體，判斷是否為分解乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣的大腸菌群。做空白對照實驗的目的 ?答： 目的是檢驗培養(yǎng)基是否受到污染，驗證無菌操作只供學(xué)習(xí)與交流為什么大腸菌群的檢驗要經(jīng)過復(fù)發(fā)酵才能證實答 ： 初發(fā)酵是樣品的發(fā)