山萸肉飲片中黃曲霉毒素B1含量及限度的研究

1、山萸肉飲片中黃曲霉毒素B1含量及限度的研究許閩，張振凌，吳筱菁，李朋麗，李琪玲【摘要】目的測(cè)定山萸肉飲片中黃曲霉毒素B1AFB1的含量并創(chuàng)立限度尺度。要領(lǐng)間接競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫吸附法ELISA。效果山萸肉飲片均有差異程度的污染黃曲霉毒素B1AFB1，炮制后低落，但都在國(guó)度劃定的食品類(lèi)AFB1限度范疇之內(nèi)。結(jié)論山萸肉飲片中黃曲霉毒素B1的含量限度尺度開(kāi)端確定為5g/kg，與國(guó)度食品類(lèi)限度尺度雷同。【關(guān)鍵詞】山萸肉；酶聯(lián)免疫吸附法；黃曲霉毒素Abstrat：bjetiveTassaythententfAFB1inutrudedrugfFrutusrnisastestablishthestandardli

2、itatin.ethdsEnzyeLinkedIunsbent(ELIA).ResultsThereisanis-degreentainatedbyAFB1inrudedrugfFrutusrni,butpressingdrugsulddegradethententfAFB1,thententfAFB1stillreainedithinnatinratedfdstuffnvarietyAFB1irusriptin.nlusinThestandardfAFB1ntentsliitatininutrudedrugfFrutusrniisinitialdeterined5g/kg.Itisident

3、ialtthenatinfdstuffnvarietyliitatinstandard.Keyrds：Frutusrni;Enzyelinkediunsrbentassay;AFB1黃曲霉毒素是如今致癌物質(zhì)中危害較大的一種。1982年，國(guó)度公布劃定用薄層層析法測(cè)定食品中AFB1容許量的尺度1。酶聯(lián)免疫吸附法ELISA是近1020年出現(xiàn)的一種新技能，具有特異性強(qiáng)、闡發(fā)時(shí)間短的特點(diǎn)，而且其敏捷度與TL或HPL相稱(chēng)或更高，樣品制備簡(jiǎn)樸2。本研究接納文獻(xiàn)報(bào)道的間接競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫吸附法3對(duì)河南地域差異產(chǎn)地的山萸肉舉行測(cè)定，并在檢測(cè)效果的底子上開(kāi)端確定河南產(chǎn)區(qū)山萸肉的黃曲霉毒素B1的限度尺度。1儀器與試藥1

4、.1儀器EAB1-2000黃曲霉毒素測(cè)定儀、BS210S型電子天平、LDZX-40SI型高壓滅菌器，H11B11600BS電熱恒溫造就箱、GS101-2D電熱風(fēng)枯燥器。1.2試劑黃曲霉毒素酶聯(lián)免疫試劑盒按試劑盒通例設(shè)置，無(wú)錫市艾賽生物技能有限責(zé)任公司，批號(hào)20221206；黃酒濮陽(yáng)亞光制藥廠(chǎng)。1.3藥材山萸肉為河南差異產(chǎn)地產(chǎn)物，購(gòu)自鄭州市帆海路藥材市場(chǎng)，經(jīng)河南中醫(yī)學(xué)院斷定教研室陳隨清傳授斷定為山茱萸科山茱萸rnusffiinalisSieb.etZu的枯燥成熟果肉。1.4樣品前處置懲罰2要領(lǐng)與效果2.1樣品液的制備取差異產(chǎn)地、差異炮制山萸肉肉飲片粗粉5.0g，置100l具塞瓶中，正確參加25.

5、0l水11溶液，振搖15in，過(guò)濾，棄去1/4的初濾液，即得。將試劑盒平衡至室溫，用洗滌液洗板2次，洗液不得溢出，每次隔斷1in，在吸水紙上拍干，13號(hào)孔為尺度比較孔，別的為樣品孔，按所列依次參加配制好的溶液及待測(cè)樣品稀釋液。安排30in，取出反響板，用E洗滌液洗板5次，洗液不得溢出，隔斷2in/次，拍干。每孔參加50l底物液FaGb搖勻，37安排15in，目測(cè)法測(cè)定。表1樣品液參加黃曲霉素酶聯(lián)免疫試劑盒操縱環(huán)境略2.2效果斷定先比力13孔顏色，假設(shè)3號(hào)最深，2號(hào)次之，1號(hào)孔靠近無(wú)色，說(shuō)明尺度正確，比力樣品孔與2號(hào)孔的顏色，假設(shè)淺者，那么為陽(yáng)性，假設(shè)深者，那么為陰性。2.3儀器法測(cè)定每孔別離參

6、加停頓液50l，然后用酶標(biāo)測(cè)定儀在450n波優(yōu)點(diǎn)測(cè)定各孔的吸光度A值。效果河南產(chǎn)區(qū)山萸肉均不有同程度的黃曲霉毒素B1污染，其含量在0.2177.406gkg-1范疇內(nèi)，除實(shí)行室陳品中黃曲霉毒素B1含量略高外，別的均在5gkg-1以下。3討論3.1山萸肉是茱萸和果實(shí)經(jīng)去核以后的果肉及果皮部門(mén)，富含糖類(lèi)身分。產(chǎn)地加工常用手工和天然枯燥要領(lǐng)，加上貯藏保管不妥，經(jīng)常引起發(fā)霉。作為珍貴藥的山萸肉，臨床應(yīng)用大概制備六味地黃丸等中成藥消費(fèi)經(jīng)常打成粉末應(yīng)用，因此創(chuàng)立山萸肉飲片的黃曲霉毒素限量尺度有必然意義。3.2山萸肉AFB1定性及含量測(cè)定效果表時(shí)，山萸肉中含有必然量的AFB1，樣品吸光度值凌駕陽(yáng)性吸光度值，說(shuō)明山萸肉中AFB1含量均小于5g/kg，此限度尺度是國(guó)度食品尺度，因此山萸肉AFB1限度尺度可與食品尺度通用，即AFB1的含量限度尺度開(kāi)端確定為5g/kg，與食品AFB1限度雷同。3.3山萸肉中黃曲霉毒素B1生品含量和酒炙品含量有必然差異，而且炮制后含量低落，說(shuō)明炮制對(duì)山萸肉中黃曲霉毒素含量有必然影響。但是由于黃曲霉毒素B1是一種耐高溫的毒素，一樣平常的炮制要領(lǐng)對(duì)其沒(méi)有徹底粉碎作用，因此炮成品中黃曲霉毒素B1的仍有必然含量。【參考文獻(xiàn)】1中國(guó)防范醫(yī)學(xué)科學(xué)院.食品衛(wèi)生國(guó)度尺度S.北京：中國(guó)尺度出書(shū)社，1