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文檔簡介
1、食品衛(wèi)生微生物檢驗原始記錄樣品編號: 檢驗開始時間: 年 月 日樣品名稱: 檢驗完成時間: 年 月 日檢測項目: 檢測依據(jù): 一、菌落總數(shù)/霉菌酵母菌落數(shù)測定: 無菌操作稱(量)取樣品25g或ml加入225ml的無菌生理鹽水中,均質(zhì)2分鐘,做成110樣品液。取110稀釋液1ml加入到9ml生理鹽水中,混勻,做成1100樣品均液。以上法制備10倍系列稀釋樣品均液。選擇2-3個適宜稀釋度的樣品均液,吸取1ml樣品均液于無菌平皿內(nèi),每個稀釋度做2個平皿。同時,分別吸取1ml空白稀釋液加入兩個無菌平皿內(nèi)作空白對照,及時將15-20ml冷至46的平板計數(shù)培養(yǎng)基傾注平皿,轉(zhuǎn)動平皿使其混合均勻,凝固后翻轉(zhuǎn)平
2、板,置 361 培養(yǎng) 小時,計數(shù)平板上菌落數(shù)(CFU)。霉菌和酵母菌計數(shù)采用孟加拉紅培養(yǎng)基,正置,281 培養(yǎng) 天,計數(shù)平板上菌落數(shù)(CFU)。稀 釋 度lO0lO-110-210-310-4 空白對照菌落總數(shù)(CFU/板)霉菌菌落數(shù)(CFU/板)酵母菌落數(shù)(CFU/板)計算及結(jié)果: 菌落總數(shù)(CFU/g,ml): 霉菌菌落數(shù)(CFU/g,ml): 酵母菌落數(shù)(CFU/g,ml): 二、大腸菌群測定(MPN計數(shù)法): 按菌落總數(shù)測定方法制備lO0、10-1、10-2、10-3、10-4稀釋液。選擇3個適宜的連續(xù)稀釋度的樣品均液,每個稀釋度接種3管乳糖膽鹽發(fā)酵管內(nèi),每管接種1ml(接種量在1mL
3、以上者,則用雙料乳糖膽鹽發(fā)酵管),361培養(yǎng)箱培養(yǎng)24h2h,如所有乳糖膽鹽發(fā)酵管都不產(chǎn)氣,則可報告大腸菌群陰性;如有產(chǎn)氣,將產(chǎn)氣的發(fā)酵管分別轉(zhuǎn)種在伊紅美藍瓊脂平板上,置361培養(yǎng)箱培養(yǎng)18h24h,然后取出,觀察菌落形態(tài),并做革蘭氏染色和驗證試驗。在上述平板上,挑去12個進行革蘭氏顏色,同時接種乳糖發(fā)酵管,置361培養(yǎng)箱培養(yǎng)24h2h,觀察產(chǎn)氣情況。凡乳糖管產(chǎn)氣、革蘭氏染色為陰性的無芽孢桿菌,即可報告為大腸菌群陽性。接種量g,ml培養(yǎng)時間(h)培養(yǎng)溫度()空白乳糖膽鹽(MPN法)361EMB分離培養(yǎng)革蘭氏染色鏡檢/乳糖發(fā)酵管361注: eq oac(,+)產(chǎn)酸產(chǎn)氣;+產(chǎn)酸不產(chǎn)氣或有可疑菌落;
4、-不產(chǎn)酸不產(chǎn)氣或無可疑菌落;G-b革蘭氏陰性桿菌;G+b革蘭氏陽性桿菌;G+c革蘭氏陽性球菌。結(jié)果:根據(jù)證實為大腸菌群陽性的管數(shù),查MPN檢索表,得 MPN/100g(ml)。電子天平編號: 使用狀況 試驗前: 試驗后:培養(yǎng)箱編號: 使用狀況 試驗前: 試驗后:檢測人: 校核人: 審核人:樣品編號: 按菌落總數(shù)測定方法制備lO0、10-1、10-2、10-3、10-4稀釋液。選擇3個適宜的連續(xù)稀釋度的樣品均液,每個稀釋度接種3管月桂基硫酸鹽胰蛋白胨(LST)肉湯,每管接種1ml(接種量超過1ml,則用雙料LST肉湯),361培養(yǎng)24h2h,觀察倒管內(nèi)是否有氣泡產(chǎn)生,對于24h2h產(chǎn)氣者,用接種
5、環(huán)從產(chǎn)氣的LST肉湯中分別取培養(yǎng)物一環(huán),移種到BGLB管中,361培養(yǎng)48h2h進行復(fù)發(fā)酵實驗,觀察產(chǎn)氣情況,產(chǎn)氣者記為大腸菌群陽性,對于未產(chǎn)氣者,則繼續(xù)培養(yǎng)至48h2h,觀察,產(chǎn)氣者進行復(fù)發(fā)酵實驗,未產(chǎn)氣者為大腸菌群陰性。接種量g,ml培養(yǎng)時間(h)培養(yǎng)溫度()空白LST初發(fā)酵(MPN法)361361BGLB肉湯復(fù)發(fā)酵361注: eq oac(,+)產(chǎn)氣;-不產(chǎn)氣;結(jié)果:根據(jù)證實為大腸菌群陽性的管數(shù),查MPN檢索表,得 MPN/g(ml)。三、致病菌檢驗:檢 驗 項 目沙門氏菌志賀氏菌金黃色葡萄球菌(定性檢驗)型溶血性鏈球菌接 種 量25g,ml25g,ml25g,ml25g,ml前增菌培 養(yǎng) 基BPW 225ml/培養(yǎng)溫度361培養(yǎng)時間18h增菌培養(yǎng)培 養(yǎng) 基1 ml +TTB 10ml1 ml+SC 10ml志賀氏菌增菌肉湯 225ml7.5%氯化鈉肉湯225mlmTSB225ml培養(yǎng)溫度42136141.51(厭氧)361361培養(yǎng)時間24h24h20h24h24h分離培養(yǎng)培 養(yǎng) 基BSXLDXLD志賀氏菌顯色培養(yǎng)基Baird-Parker 平板血平板哥倫比亞CAN血平板培養(yǎng)溫度361361361361361361361(厭氧)培養(yǎng)時間48h24h24h24h48h24h24h結(jié) 果生 化 及 血清 學 試 驗結(jié)果:結(jié)果:結(jié)果:結(jié)
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