第十一章細(xì)胞增殖及其調(diào)控復(fù)習(xí)題

1、第十一章 細(xì)胞增殖及其調(diào)控復(fù)習(xí)題本章基本內(nèi)容概要： 本章主要講了兩個問題： 細(xì)胞增殖是生物繁殖和生長發(fā)育的基礎(chǔ)。 細(xì)胞周期的時(shí)間長短可以通過多種方法測定。 細(xì)胞 周期還可以通過某些方式實(shí)現(xiàn)同步化。最重要的人工細(xì)胞周期同步化方法包括 DNA 合成阻 斷法和分裂周期阻斷法。真核細(xì)胞的細(xì)胞周期一般可分為四個時(shí)期，即 G1 期、 S 期、 G2 期和 M 期。前三個時(shí) 期合稱為分裂間期， M 期即分裂期。 分裂間期是細(xì)胞分裂前重要的物質(zhì)準(zhǔn)備和積累階段， 分裂期即為細(xì)胞分裂實(shí)施過程。根據(jù)細(xì)胞繁殖情況，可將機(jī)體內(nèi)所有細(xì)胞相對地分為三 類，即周期中細(xì)胞、 靜止期細(xì)胞和終末分化細(xì)胞。 周期中細(xì)胞一直在進(jìn)行細(xì)胞

2、周期運(yùn)轉(zhuǎn)。 靜止期細(xì)胞為一些暫時(shí)離開細(xì)胞周期，去執(zhí)行其生理功能的細(xì)胞。靜止期細(xì)胞在一定因 素誘導(dǎo)下，可以很快返回細(xì)胞周期。體外培養(yǎng)的細(xì)胞在營養(yǎng)物質(zhì)短缺時(shí)，也可以進(jìn)入靜 止期狀態(tài)。終末分化細(xì)胞為那些一旦生成后終身不再分裂的細(xì)胞。在一個細(xì)胞周期中， DNA 只復(fù)制一次，發(fā)生在 S 期。在 M 期，復(fù)制的 DNA 伴隨其他 相關(guān)物質(zhì)， 平均分配到新形成的兩個子細(xì)胞中。 M 期也可以人為地劃分為前期、 前中期、 中期、后期、末期和胞質(zhì)分裂登記個時(shí)期。減數(shù)分裂是一種特殊的有絲分裂方式。生殖 細(xì)胞在成熟過程中發(fā)生減數(shù)分裂。其特點(diǎn)是， DNA 復(fù)制一次，然后發(fā)生兩次連續(xù)的有 絲分裂，導(dǎo)致最終生成的子細(xì)胞中染

3、色體數(shù)目減半。減數(shù)分裂 I 的前期 I 時(shí)間長，過程 復(fù)雜，因而又分為細(xì)線期、偶線期、粗線期、雙線期和終變期。由于減數(shù)分裂過程中有 一串物質(zhì)的交換和受精時(shí)不同個體遺傳物質(zhì)的混合，而使子代個體具有更大的變異性。細(xì)胞周期的調(diào)控 細(xì)胞周期運(yùn)轉(zhuǎn)受到細(xì)胞內(nèi)外各種因素的精密調(diào)控，細(xì)胞內(nèi)因素是調(diào)控依據(jù)。周蛋白依賴性CDK 激酶是細(xì)胞周期調(diào)控中重要因素。目前已發(fā)現(xiàn)，在哺乳動物細(xì)胞內(nèi)至少存在 8 種 CDK 激酶，即CDK1至CDK8。CDK激酶至少含有兩個亞單位，即周期蛋白和CDK蛋白。周期蛋白為其調(diào)節(jié)亞單位， CDK 蛋白為其催化亞單位。周期蛋白也有多種，在哺乳動物細(xì)胞中 包括周期蛋白 A、B、C、D、E、

4、F、G 和 H 等，分別與不同的 CDK 蛋白結(jié)合。不同的 CDK 激酶在細(xì)胞周期中期調(diào)節(jié)作用的時(shí)期不同。 CDK 激酶通過磷酸化其底物而對細(xì)胞周期進(jìn)行 調(diào)控。 CDK 激酶活性也受到其他因素的直接調(diào)節(jié)。除 CDK 激酶及其直接活性調(diào)節(jié)因子外， 還有不少其他因素參與細(xì)胞周期調(diào)控過程， 如各種檢驗(yàn)點(diǎn)等。 各種檢驗(yàn)點(diǎn)也有專門的調(diào)控機(jī) 制。所有這些因素，可能組成一個綜合的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，共同推動著細(xì)胞周期的運(yùn)轉(zhuǎn)。DNA 復(fù)制起始調(diào)控是近十年細(xì)胞周期調(diào)控研究中的又一大進(jìn)展。DNA 復(fù)制起始并不僅僅是在 G1 期末的起始點(diǎn)處才決定的。早在 G1 期開始時(shí)，許多與 DNA 復(fù)制有關(guān)的物質(zhì)即已表 達(dá)并與染色質(zhì)結(jié)合

5、，開始了 DNA 復(fù)制的起始調(diào)控。目前已經(jīng)知道，Orc、Cdc6、 Cdc45、Mcm 等蛋白參與了 DNA 復(fù)制起始調(diào)控過程。這一調(diào)控過程也需要某些 CDK 激酶參與，尤 其是周期蛋白 E-CDK2 激酶。分裂后期促進(jìn)因子 APC 的發(fā)現(xiàn)是細(xì)胞周期研究領(lǐng)域的又一重大進(jìn)展。到達(dá)分裂中期后，周 期蛋白 B/A 與 CDK1 分離， 在 APC 介導(dǎo)下， 通過泛素化途徑而降解。 CDK1 激酶活性消失， 細(xì)胞由分裂中期向后期轉(zhuǎn)化。 APC 的成份至少分為 8 種，分別稱為 APC1 APC8。 APC 活 性也受到多種因素的綜合調(diào)控。其中 Cdc20 為 APC 有效的正調(diào)控因子。在分裂中期之前，

6、 位于動粒上的 Mad2 可以與 Cdc 結(jié)合并抑制或者的活性。 在分裂中期， Mad2 從動粒上消失， 解除對 Cdc20 的抑制作用，促使 APC 活化，細(xì)胞分裂除核分裂外，還要進(jìn)行胞質(zhì)分裂。至 于胞質(zhì)分裂與核分裂如何協(xié)調(diào)，目前還不清楚。動植物細(xì)胞的胞質(zhì)分裂過程有較大差別。本章的學(xué)習(xí)要求：掌握有絲分裂和減數(shù)分裂的過程、細(xì)胞周期的同步化方法和成熟促進(jìn)因子等相關(guān)知識。理解細(xì)胞周期的關(guān)鍵性事件和細(xì)胞周期的有序運(yùn)轉(zhuǎn)及調(diào)控機(jī)制。理解各種內(nèi)在因素和外在因素在細(xì)胞周期調(diào)控中的作用及其機(jī)制， 并與細(xì)胞信號傳導(dǎo)的 有關(guān)內(nèi)容聯(lián)系起來。本章的重點(diǎn)與難點(diǎn)：1 本章的基本內(nèi)容都是掌握和理解的重點(diǎn)內(nèi)容。2 本章的難點(diǎn)

7、是：細(xì)胞周期時(shí)間的測定和細(xì)胞周期同步化方法；又似分裂和減數(shù)分裂 過程及其生理意義的異同比較； 細(xì)胞周期蛋白和成熟促進(jìn)因子及其與細(xì)胞周期調(diào)控 的核心過程及上游事件和下游事件。本章需要掌握的基本概念：細(xì)胞周期 指連續(xù)進(jìn)行有絲分裂的細(xì)胞從一次分裂結(jié)束開始到第二次分裂結(jié)束位置的 順序變化過程，一般分為分裂間期和分裂期兩個時(shí)期。檢驗(yàn)點(diǎn) ：又稱做限制點(diǎn)或監(jiān)控點(diǎn)，指在細(xì)胞周期中可使細(xì)胞周期時(shí)間暫時(shí)剎車的位點(diǎn)。 他通過特異的機(jī)制鑒別細(xì)胞周期進(jìn)程中的錯誤，并誘導(dǎo)產(chǎn)生特異的抑制因子，阻止細(xì)胞 周期進(jìn)一步運(yùn)行， 待錯誤根除后才允許細(xì)胞進(jìn)入下一個階段。 檢驗(yàn)點(diǎn)不僅存在于 G1 期， 也存在于其他時(shí)期，如 S 期檢驗(yàn)點(diǎn)

8、、 G2 期檢驗(yàn)點(diǎn)、紡錘體裝配檢驗(yàn)點(diǎn)等。cdc 基因： 指與細(xì)胞周期過程直接有關(guān)的基因， 此類基因的有序表達(dá)才使得細(xì)胞周期運(yùn) 轉(zhuǎn)。 Cdc 基因的產(chǎn)物是一些蛋白激酶、磷酸酶等。這些酶活性的變化將直接影響到細(xì)胞 周期的變化。細(xì)胞同步化 ：指自然發(fā)生的或人工誘導(dǎo)選擇的，使一群細(xì)胞共同處于細(xì)胞周期的某一階 段的過程或方法。如年均的變形體，眾多核進(jìn)行同步的分裂為自然同步化，用秋水仙素 將細(xì)胞阻斷在有絲分裂中期為誘導(dǎo)同步化。染色體列隊(duì)：又叫染色體中板聚合，只染色體向赤道板上運(yùn)動的過程。中心體周期 ：指細(xì)胞周期過程中，中心體的復(fù)制、變化和分裂分離的整個過程，包括G1期時(shí)開始復(fù)制，S期時(shí)，復(fù)制了的中心體并不

9、分開，分裂前期，一對中心體開始分離，并向兩極移動，參與裝配成紡錘絲。到細(xì)胞分裂結(jié)束，兩個中心體分別進(jìn)入不同的子細(xì) 胞，完成一個周期。中心體列隊(duì) : 中心體分離時(shí)，負(fù)向運(yùn)動的動力蛋白在來自姐妹中心體的胃管之間搭橋， 通過向負(fù)極運(yùn)動，將被結(jié)合的微觀牽拉在一起，組成紡錘體微管；中心體也自然形成了 紡錘體的兩極。這一過程稱為中心體列隊(duì)。成熟促進(jìn)因子 （MPF ）又稱細(xì)胞促進(jìn)分裂因子或M 期促進(jìn)因子，是由細(xì)胞周期蛋白與周期蛋白依賴性蛋白激酶組成的復(fù)合物，能啟動細(xì)胞進(jìn)入 M 期。星體： 指動物細(xì)胞在有絲分裂時(shí)，細(xì)胞兩極圍繞著中心體形成的輻射排列的微管結(jié)構(gòu)。二價(jià)體： 指第一次減數(shù)分裂前期，由兩條同源染色體配

10、對所形成的復(fù)合結(jié)構(gòu)，它包含4條染色單體。聯(lián)會復(fù)合體： 指第一次減數(shù)分裂前期，在同源染色體聯(lián)會的部位形成的一種特殊復(fù)合結(jié) 構(gòu)。聯(lián)會復(fù)合體沿同源染色體長軸分布，可能與同源染色體間遺傳物質(zhì)的交換有關(guān)。周期蛋白框 ：指在各種不同的周期蛋白中共有的一段相當(dāng)保守的氨基酸序列，它介導(dǎo)周 期蛋白與 CDK 結(jié)合。不同的周期蛋白框識別不同的 CDK ，組成不同的周期 -CDK 復(fù)合 體，表現(xiàn)出不同的 CDK 激酶活性。破壞框：指有些周期蛋白分子的近 N 端含有一段由 9個氨基酸組成的特殊序列， 主要參 與由泛素介導(dǎo)的周期蛋白的見解過程。CDK 激酶 ：是細(xì)胞周期中的核心調(diào)節(jié)分子，但在發(fā)揮作用時(shí)，必須與細(xì)胞周期蛋

11、白結(jié) 合才能發(fā)揮作用， 將周期蛋白作為他的調(diào)節(jié)亞基， 所以又稱為周期蛋白依賴性蛋白激酶。 不同的 CDK 結(jié)合不同的周期蛋白形成不同的復(fù)合體，通過使用專一靶蛋白磷酸化的方 式而啟動細(xì)胞周期的不同階段。復(fù)制起始點(diǎn)識別復(fù)合體： 指從酵母細(xì)胞到哺乳類細(xì)胞中普遍存在的識別 DNA 復(fù)制起始 點(diǎn)的蛋白復(fù)合物，由 6 個亞單位組成。DNA 復(fù)制執(zhí)照因子學(xué)說： 是用來解釋在每個細(xì)胞周期中 DNA 只復(fù)制一次的學(xué)說， 是 20 世紀(jì) 80 年代末由 Ju-lianBlow 等通過實(shí)驗(yàn)提出的， 意思是在細(xì)胞質(zhì)中存在一種執(zhí)照因子， 對細(xì)胞核染色質(zhì) DNA 復(fù)制發(fā)行“執(zhí)照” 。在 M 期，細(xì)胞核膜破裂，胞質(zhì)中的執(zhí)照

12、因子 與染色質(zhì)接觸并與之結(jié)合，使后者獲得 DNA 復(fù)制所必需的執(zhí)照。細(xì)胞通過 G1 期后進(jìn) 入 S 期， DNA 開始復(fù)制。隨著 DNA 復(fù)制的進(jìn)行，執(zhí)照信號不斷減弱直至消失。到達(dá) G2 期，細(xì)胞核中不再含有執(zhí)照信號，DNA 復(fù)制結(jié)束也就不再起始了?，F(xiàn)在已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，執(zhí)照因子的主要成分是 Mcm 蛋白。zygDNA ：即偶線期 DNA 。指減數(shù)分裂前的間期， DNA 的復(fù)制是不完全的，仍留下有 百分之 0.1 0.3 部分，這部分的等到前期 I 的偶線期才合成。而且這部分 DNA 在偶線 期轉(zhuǎn)錄活躍，故得名。 ZygDNA 由 500010000 個小片段組成，分散存在于整個基因組 中，每個片段長

13、約 10005000bp。問答題：細(xì)胞周期時(shí)間是如何測定的？ 細(xì)胞周期時(shí)間的長短可用脈沖標(biāo)記 DNA 復(fù)制和觀察細(xì)胞分裂指數(shù)的方法來測定。這里以體 外培養(yǎng)細(xì)胞為例介紹該方法的應(yīng)用。首先3H-TdR 短期飼養(yǎng)細(xì)胞，數(shù)分鐘至半小時(shí)后，將3H-TdR 洗脫，置換新鮮培養(yǎng)液并繼續(xù)培養(yǎng)，隨后，定期取樣，做放射自顯影觀察分析，從 而確定細(xì)胞周期各時(shí)相的長短。 因?yàn)榻?jīng) 3H-TdR 暫短標(biāo)記后， 凡是處于 S 期的細(xì)胞均被標(biāo)記， 轉(zhuǎn)換到新鮮培養(yǎng)液中一段時(shí)間后，被標(biāo)記的細(xì)胞將陸續(xù)進(jìn)入 M 期， 最先進(jìn)入 M 期的標(biāo)記細(xì) 胞是被標(biāo)記的 S 期最晚期細(xì)胞，所以，從更換培養(yǎng)液培養(yǎng)開始，到被標(biāo)記的 M 期細(xì)胞開始 出

14、現(xiàn)所用的時(shí)間應(yīng)為 G2 期時(shí)間（ tG2 ） .從被標(biāo)記的 M 期細(xì)胞開始，到其所占 M 期細(xì)胞總 數(shù)的比例達(dá)到最大值是，所經(jīng)歷的時(shí)間為 M 期時(shí)間（ tM ）。從被標(biāo)記的 M 期細(xì)胞數(shù)占 M 期 細(xì)胞總數(shù)的50%開始，經(jīng)歷最大值，再下降到50%，所經(jīng)歷的時(shí)間為 S期（tS）。從被標(biāo)記的 M 期細(xì)胞開始出現(xiàn)并逐漸消失，到被標(biāo)記的 M 期細(xì)胞再次出現(xiàn)， 所經(jīng)歷的時(shí)間為一個細(xì) 胞周期的總時(shí)間（tC）。TC減去tG2、tM和tS即得tG1。中期阻斷法制備 M 期同步化細(xì)胞的原理。該方法的主要有缺點(diǎn)是什么？有絲分裂中期阻斷藥物可抑制細(xì)胞質(zhì)微管的聚合， 從而抑制紡錘體的形成， 將細(xì)胞阻斷在 M 期。常用

15、的中期阻斷藥物有秋水仙素或秋水仙胺。此方法的最大優(yōu)點(diǎn)是可獲得大量的M 期同步細(xì)胞。 缺點(diǎn)是此種阻斷可逆性較差阻斷時(shí)間較長時(shí)， 解除阻斷后許多細(xì)胞不能完成正常 的有絲分裂。紡錘體裝置有哪些典型結(jié)構(gòu)？（1）具有兩類紡錘絲。動力微管，她從一極延伸至著絲粒；極性微管，它從一 極延伸超過細(xì)胞中央一段距離。 來自每一極的極性微管蛋白在細(xì)胞中相互重疊。（2） 每個染色體上都具有紡錘絲的附著點(diǎn)一一動粒。一個約400nm長的暗染多蛋白纖維結(jié)構(gòu)一一附著于著絲粒中特殊的DNA序列和紡錘體裝置的動力微管 /在前期中，由微管蛋白纖維構(gòu)成的紡錘體在細(xì)胞的兩極之間出現(xiàn)。在紡錘體的每一 端是一個微管組織中心或中心體。（3）

16、具有微管組織中心。在將要進(jìn)行有絲分裂的動物細(xì)胞中，每個MTOC中具有一對叫做中心粒；植物細(xì)胞的MTOC中心一般不含有中心粒。 每個中心粒在結(jié)構(gòu)上 與纖毛和鞭毛的基粒相似。在準(zhǔn)備細(xì)胞分裂的過程中，每一對中心?？砂盐⒐?聚集形成第二對中心粒，這就是所謂的中心粒的復(fù)制，但其如何形成的細(xì)節(jié)目 前尚不清楚。在前期紡錘體形成時(shí)，復(fù)制了的中心體分裂為二，每對中心粒攜 帶纏繞中心體物質(zhì)移動到兩極，形成新的中心體，并隨細(xì)胞分裂而進(jìn)入到子細(xì) 胞。細(xì)胞通過什么機(jī)制將染色體排列在赤道板上？有和生物學(xué)意義？ 在有絲分裂前期， 隨著紡錘體的形成， 一些微管迅速捕獲染色體， 并與染色體一側(cè)的動粒結(jié) 合，形成動粒微管。 而另

17、一側(cè)的動粒也與另一極星體發(fā)出的微管迅速結(jié)合。 近期的研究發(fā)現(xiàn)， 至少有數(shù)種蛋白質(zhì)與上述過程有關(guān)。其中首要的兩組蛋白稱為Mad 蛋白和 Bub 蛋白。 Mad2蛋白和 Bub 蛋白可以使動粒敏化，促使微管與動粒接觸，免疫熒光染色發(fā)現(xiàn)， Mad1 蛋白和 Bubl蛋白很快會從動粒上消失。一側(cè)的動粒被微管捕獲，一側(cè)的Mad1和Bubl消失；兩側(cè)的動粒都被微管捕獲， 兩側(cè)的Madl和Bubl都消失。如果染色體動粒不被微管捕捉，則Madl和Bubl不從動粒上消失。因而認(rèn)為Madl蛋白和Bubl蛋白與染色體裝配入紡錘體有關(guān)。當(dāng)染色體的兩個動粒都與紡錘體微管結(jié)合后， 前期紡錘體的裝配才算完成。 此時(shí)， 紡錘

18、 體赤道直徑相對較大， 兩級直徑的距離也相對較短。 與同一條染色體的兩個動粒相聯(lián)接的兩 極動粒微管并不等長。 因而染色體并不完全分布于赤道板上， 排列狀況貌似雜亂無章。 隨后， 在各種相關(guān)因素的共同作用下。 紡錘體赤道直徑逐漸收縮， 兩極距離拉長， 染色體逐漸向赤 道方向運(yùn)動。 至于染色體排列到赤道板上的機(jī)制，目前流行兩種學(xué)說， 即牽拉假說和外推假說。牽拉假說認(rèn)為， 染色體向赤道板方向運(yùn)動， 是由于動力微管牽拉的結(jié)果。 動粒微管越長， 拉力越大， 當(dāng)來自兩極的動力微管的拉力相等時(shí)，染色體即被穩(wěn)定在赤道板上。 外推假說認(rèn)為，染色體向赤道板方向移動， 是由于星體的排斥力將染色體外推的結(jié)果。 染色體

19、距離中心 越近， 星體對染色體外推力越強(qiáng)， 當(dāng)來自兩極的推力達(dá)到平衡時(shí)， 染色體即被穩(wěn)定在赤道板 上。這兩種假說并不相互排斥， 有時(shí)可能同時(shí)作用，或有其他機(jī)制共同參與，最終將染色體 排列在赤道板上。染色體與微管連接并移動到赤道板具有重要意義， 它是啟動染色單體分離并向兩個子細(xì) 胞中平均分配的先決條件。 染色體列隊(duì)不整齊， 細(xì)胞不能從分裂種氣象后期轉(zhuǎn)化， 兩條染色 單體也不能相互分離。 個別情況， 細(xì)胞分裂雖然可以繼續(xù)進(jìn)行， 但常常導(dǎo)致染色體不能平均 分配，最終導(dǎo)致細(xì)胞死亡。5簡述聯(lián)會復(fù)合體的結(jié)構(gòu)與功能 聯(lián)會復(fù)合體是同源染色體之間在減數(shù)分裂前期聯(lián)會時(shí)形成的一種臨時(shí)性結(jié)構(gòu)，他在銅元染色體聯(lián)會處沿同

20、源染色體長軸分布，由位于中間的中央成分和位于兩側(cè)的側(cè)成分共同構(gòu) 成。側(cè)成分的外側(cè)則為配對的同源染色體。聯(lián)會復(fù)合體的中央成分寬約100nm,側(cè)成分寬2040nm。從兩側(cè)的側(cè)成分向中央成分方向發(fā)出橫向纖維，交會于中央成分的中間部位。蛋 白質(zhì)是聯(lián)會復(fù)合體的主要組成成分之一。 用胰蛋白酶等處理聯(lián)會復(fù)合體， 其中中央成分、 側(cè) 成分以及橫向纖維等結(jié)構(gòu)消失。 目前已經(jīng)鑒定了幾種聯(lián)會復(fù)合體蛋白， 其中有的分布于側(cè)成 分，有的在中央成分，有的兩處均有分布，但他們的功能還不清楚。另外發(fā)現(xiàn)，DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶 II 存在于側(cè)成分和其周圍的染色之中。DNA片段也是聯(lián)會復(fù)合體的組成成分。這些DNA片段多在50550bP

21、之間。他們很可能是掛在或包含于側(cè)成分的染色體纖維的部分DNA片段。序列分析顯示，這些DNA片段的大小和堿基序列在不同細(xì)胞間會有明顯差異，即無序列特異性。這些DNA片段很可能完全穿越側(cè)成分而進(jìn)入中央成分，在此處參與同源染色體間的基因重組。在中央成分和側(cè)成分中還發(fā)現(xiàn)有RNA因此聯(lián)會復(fù)合體中很可能含有核糖核蛋白復(fù)合物。聯(lián)會復(fù)合體從細(xì)線期開始裝配，到偶線期明顯形成。粗線期時(shí)重組結(jié)合開始裝配。聯(lián)會復(fù)合體的功能就是參與同源染色體的配對和重組，使同源染色體準(zhǔn)確配對， 并使等位基因發(fā)生交換重組。有絲分裂與減數(shù)分裂有哪些區(qū)別？ 有絲分裂體細(xì)胞分裂的主要方式 染色體復(fù)制一次，細(xì)胞分裂一次 分裂前期，無聯(lián)會發(fā)生，染

22、色體單個存在， 每個都含有兩條染色單體 分裂中期，每個染色體單獨(dú)排列到赤道板 分裂后期，著絲粒分裂，染色彈體分離 分裂結(jié)果是子細(xì)胞中的染色體數(shù)目與親代 細(xì)胞相同， 所得子細(xì)胞仍為體細(xì)胞減數(shù)分裂發(fā)生于有性生殖細(xì)胞成熟之前 染色體復(fù)制一次，細(xì)胞連續(xù)分裂兩次 前期 I ，有同源染色體聯(lián)會，形成四分體， 并發(fā)生遺傳物質(zhì)的交換和基因重組 中期 I ，四分體排列到赤道板上 后期 I ，著絲粒不分裂，同源染色體分離 分裂結(jié)果是所得到的子細(xì)胞中染色體數(shù)目 減為親代細(xì)胞的一半， 所得子細(xì)胞為性細(xì)胞MPF的成分是什么？他在細(xì)胞周期調(diào)控中有和作用？MPF即卵細(xì)胞促成熟因子，或細(xì)胞促分裂因子，或M期促進(jìn)因子。20世紀(jì)

23、70年代就開始了對 MPF的研究。最初觀察到蛙胚胎早期發(fā)育時(shí)，卵裂細(xì)胞質(zhì)中出現(xiàn) 震蕩沖擊波。抽出其細(xì)胞質(zhì)，注入到未成熟的蛙卵母細(xì)胞中， 能刺激卵母細(xì)胞提早成熟。提 示分裂的胚胎細(xì)胞中存在促成熟因子（MPF）.生化分析表明， MPF 是由兩個亞單位組成的二聚體。其中一個是催化亞基，使細(xì)胞周期 蛋白依賴性激酶 。另一個亞單位是細(xì)胞周期蛋白B .CDK家族的基礎(chǔ)成員是一些通源基因編碼的34KD的蛋白質(zhì)，是裂殖酵母cdc2基因和釀酒酵母的cdc28基因產(chǎn)物的同源物。在酵母細(xì)胞周期中僅由一種CDK控制，釀酒酵母為 P34cdc2,芽殖酵母為P34cdc28.在脊椎動物細(xì)胞中已經(jīng)檢測到8種CDK1 CDK

24、2-CDK8他們的分子質(zhì)量在3340KDa之間。在不同時(shí)相中各種不同的CDK與相應(yīng)的周期蛋白結(jié)合來發(fā)揮作用。細(xì)胞周期蛋白的種類在酵母細(xì)胞中一般分為G1期細(xì)胞周期蛋白和 G2期細(xì)胞周期蛋白兩類。在脊椎動物何人細(xì)胞至今已檢測到10多種，其中，參與 MPF構(gòu)成的是細(xì)胞周期蛋白 B。MPF可磷酸化多種蛋白質(zhì)，如組蛋白H1、核纖層蛋白、微管蛋白等，誘導(dǎo)細(xì)胞通過G2/M期及完成M期過程。8何謂細(xì)胞周期檢驗(yàn)點(diǎn)？他有何作用？細(xì)胞周期運(yùn)轉(zhuǎn)是十分有序的，沿著G1t S tG2 M的順序進(jìn)行，這是與細(xì)胞周期進(jìn)行有關(guān)的基因有序表達(dá)的結(jié)果。 這些基因的有序表達(dá)是受周期中一些檢驗(yàn)點(diǎn)或成為調(diào)控點(diǎn)調(diào)節(jié)的。該點(diǎn)是作用于細(xì)胞周期

25、轉(zhuǎn)換程序的調(diào)控通路， 保證細(xì)胞周期中關(guān)鍵事件高度準(zhǔn)確地完成。他受制于一系列特異或非特異環(huán)境信號的影響， 從分子水平看是基于一些基因及其產(chǎn)物對外界信 號的反應(yīng)。 因而有人提出檢驗(yàn)電視信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路， 可能也包含有起始信號、 感受因子、 轉(zhuǎn)導(dǎo) 因子和效應(yīng)因子等。 細(xì)胞周期檢驗(yàn)點(diǎn)普遍存在于高等真核生物和酵母中。 許多檢驗(yàn)點(diǎn)通路最 初是通過分析酵母中 cdc突變株鑒定出來的。如存在于酵母細(xì)胞中 DNA合成開始前的啟動點(diǎn) 和高等真核生物 G1期中的R點(diǎn)或限制點(diǎn)、DNA損傷檢驗(yàn)點(diǎn)、DNA復(fù)制檢驗(yàn)點(diǎn)、G2/M檢驗(yàn)點(diǎn)、 M中期至M后期即紡錘體組裝檢驗(yàn)點(diǎn)等。這些檢驗(yàn)點(diǎn)監(jiān)視和調(diào)控周期時(shí)相正常轉(zhuǎn)換與按順序 嚴(yán)格地進(jìn)行

26、。如當(dāng)細(xì)胞 DNA損傷時(shí)，DNA損傷檢驗(yàn)點(diǎn)通過執(zhí)行下列機(jī)制發(fā)揮作用，如檢測到 DNA損傷即產(chǎn)生信號將細(xì)胞周期阻斷在G1期或G2期，誘導(dǎo)修復(fù)基因的轉(zhuǎn)錄等。如DNA損傷未修復(fù)前就不能從 G1期進(jìn)入S期和從G2期進(jìn)入M期。從而防止了由于損傷的堿基的拷貝所 引起的基因突變和損傷 DNA的復(fù)制引起的染色體高頻率重排。在哺乳動物中一直有幾種因子 在DNA損傷檢驗(yàn)點(diǎn)起作用，如 P53和CDK抑制因子P21等。又如，S期DNA為完成復(fù)制時(shí)， 復(fù)制復(fù)合物內(nèi)的結(jié)構(gòu)和為復(fù)制的DNA可以發(fā)出信號以組織細(xì)胞進(jìn)入M期，已知當(dāng)細(xì)胞從 M期進(jìn)入后期時(shí)，正常的染色單體分離是需要建立在完成M期的一系列事件的基礎(chǔ)上的。如兩 極的紡

27、錘斯正確組裝、 染色體通過動粒附著在紡錘體上、 正確附著的染色體不許排列在赤道 板上等。 當(dāng)上述過程未正確完成前如紡錘體組裝異常等， 則可通過紡錘體組裝檢驗(yàn)點(diǎn)發(fā)揮作 用，影響染色單體的分離，導(dǎo)致細(xì)胞不能進(jìn)入后期，在此過程中， 紡錘體組裝中一些組分可 能在該檢驗(yàn)點(diǎn)中作為信號而被感受。 因此不難看出， 通過上述各個檢驗(yàn)點(diǎn)保證了產(chǎn)生具有正 常遺傳性能和生理功能的子細(xì)胞， 如果這些調(diào)控途經(jīng)異常， 周期不能正常運(yùn)轉(zhuǎn)和喪失周期關(guān) 鍵事件的忠實(shí)性，從而導(dǎo)致遺傳性能紊亂、增值分化異常和細(xì)胞癌變，甚至導(dǎo)致死亡。 9細(xì)胞周期各時(shí)相的主要事件及其核心調(diào)控機(jī)制。細(xì)胞周期分為 G1、S、G2|、和M四個時(shí)期，他的有序運(yùn)

28、轉(zhuǎn)是由以激酶活性為基礎(chǔ)中心控制 體系，并在細(xì)胞周期蛋白以及細(xì)胞周期抑制因子的參與下來實(shí)現(xiàn)的。 目前已經(jīng)了解的各時(shí)期 的調(diào)控機(jī)制如下：（1）G1 期，一般認(rèn)為，在調(diào)節(jié)細(xì)胞生長中，G1 期存在一些關(guān)鍵事件，特別是與 DNA 合成啟動有關(guān)。這一時(shí)期物質(zhì)代謝活躍，細(xì)胞體及增大，進(jìn)行RNA 和蛋白質(zhì)合成。雖然現(xiàn)在人們還未完全清楚貫穿于 G1 期細(xì)胞中全部生化事件，但在這個時(shí)期發(fā)生的與 DNA 合成啟 動有關(guān)的事件已有部分被揭示。如在釀酒酵母的細(xì)胞周期前進(jìn)過程中，Cln1,CIn2和Cln3在 G1 期含量增加，并與 Cdc28 蛋白結(jié)合形成具有蛋白激酶活性的復(fù)合物，相互協(xié)調(diào)配合， 通過影響基因轉(zhuǎn)錄水平，

29、作用于G1期向S期推進(jìn)。當(dāng)細(xì)胞進(jìn)入 S期時(shí)，含量也隨之下降。在高等動物， G1 期的周期蛋白是 cycinD1 、 D2|、 D3， cyclinE 。其中 D1 可能使外界信號 作用于細(xì)胞周期的耦聯(lián)者，他在生長因子刺激下開始表達(dá)，逐漸積累并與CDK4 或 CDK6結(jié)合成復(fù)合體，使 CDK活化，磷酸化PRB，釋放轉(zhuǎn)錄因子E2F，促進(jìn)與S期啟動有關(guān)的基 因轉(zhuǎn)錄，推動細(xì)胞通過 G1 期檢驗(yàn)點(diǎn)，而后降解。 cyclinD2 、 D3 結(jié)構(gòu)與 D1 相似，在 D1 之 后表達(dá)，與 CDK4、CDK6或CDK2結(jié)合，協(xié)助細(xì)胞通過 G1期。D2、D3在缺乏生長因子 時(shí)也可表達(dá)。克服細(xì)胞在缺乏生長因子時(shí)引起

30、的分化或凋亡。cylinD 都在 G1 期末降解。cyclinC在G1中期合成達(dá)高峰，與 CDK2結(jié)合，參與 G1/S轉(zhuǎn)換。cylclinE在G1中期合成， G1晚期達(dá)高峰，與CDK2結(jié)合，是G1/S過渡必需的調(diào)節(jié)者，推動細(xì)胞通過 G1/S過渡，并 啟動 S 期 DNA 副職，在 S 期初被降解。P53 蛋白在 G1 期檢驗(yàn)點(diǎn)中能監(jiān)視 DNA 的損傷，使帶有損傷的 DNA 的細(xì)胞停止 在 G1 期，防止損傷的 DNA 進(jìn)行復(fù)制和產(chǎn)生基因突變或重排現(xiàn)象。 P53 可能是通過刺激編 碼 CDK 抑制因子的基因表達(dá)來發(fā)揮作用。該抑制因子與 G1 期 cyclin-CDK 結(jié)合，抑制其活 性，從而使細(xì)

31、胞周期阻抑在 G1 期，直到 DNA 損傷被修復(fù)。（2）S期.S期的主要生化事件是遺傳物質(zhì)的福祉，即DNA復(fù)制和組蛋白、非組蛋白等的合成，以及新的一套染色體蛋白與 DNA 包裝為核小體等染色質(zhì)結(jié)構(gòu)。研究表明。S期細(xì)胞中有S期活化因子（SPF）。SPF是一種異源二聚體，在釀酒酵母中是由 cdc28和G1期cyclin-Cln1、2、3組成，他們驅(qū)動細(xì)胞通過“ Start”進(jìn)入S期。其具體過程 是：當(dāng)細(xì)胞進(jìn)入早 G1 期時(shí)， cdc28-Cln3 刺激 CLN1 和 CLN2 基因轉(zhuǎn)錄，其基因產(chǎn)物增加， 后分別與cdc28結(jié)合成復(fù)合物，共同促進(jìn)細(xì)胞通過“Start”進(jìn)入S期。在釀酒酵母中有兩個相關(guān)

32、的轉(zhuǎn)錄因子在啟動點(diǎn)被活化，一個是與 MCB 序列結(jié)合的，被稱為 MCB 結(jié)合因子，它 可以活化一系列為 DNA 復(fù)制和托揚(yáng)核苷酸合成所需要的蛋白的基因轉(zhuǎn)錄。另一個是與細(xì)胞 周期框序列結(jié)合的轉(zhuǎn)錄因子CCBF。由于CCBF結(jié)合的細(xì)胞周期框也存在于Cln1和Cln2基因上有活化序列中。因此， CCBF 的活化也與刺激 CLN1 和 CLN2 的表達(dá)密切相關(guān)。在高等動物中，表現(xiàn) SPF功能的是CDK2-cyclinE和CDK2-cyclinA.兩者均可與RB蛋白、 P107及E2F復(fù)合物結(jié)合，使RB蛋白磷酸化而釋放出 E2F。因?yàn)閺腉1期向S期過渡時(shí)為合 成dNTP和DNA復(fù)制所必需的多種酶蛋白的基因

33、上游調(diào)控序列中含有E2F結(jié)合位點(diǎn)。所以，E2F的活化，可使S期所需的多種酶蛋白基因轉(zhuǎn)錄， 導(dǎo)致DNA復(fù)制和S期進(jìn)行。CDK2-cyclinE 激酶活性在 G1/S 過渡時(shí)大峰值， DNA 復(fù)制啟動后， CyclinE 被降解。 而當(dāng)細(xì)胞從 G1 期向 S期轉(zhuǎn)移時(shí)， CyclinA 開始合成并很快形成了 CDK2-cyclinA 復(fù)合物。 CDK2-cyclinA 也作用于 DNA 復(fù)制的起始， 并且起作用貫穿整個 S 期，研究顯示， CDK2-cyclinA 與 DNA 復(fù)制有關(guān)， 在 S 期， CDK2-cyclinA 位于 DNA 中心。 當(dāng)纖維注射 cyclinA 抗體于細(xì)胞中時(shí)， 將抑

34、制 DNA 的合成。在體外， CDK2-cyclinA 可使 DNA 復(fù)制因子 RF-A 磷酸化而活性增強(qiáng)，因此， CDK2-cyclinA 在S期行進(jìn)于通過中起著關(guān)鍵作用，使主要的SPF。到達(dá)G2期或稍晚，cyclinA被降解。近年來發(fā)現(xiàn)，在 G1/S 轉(zhuǎn)換時(shí)存在一個 CDK 活性抑制因子的降解過程，只有類似抑制因子 被降解后，S期CDK才能表現(xiàn)出活性。在釀酒酵母中，cdc34蛋白具有連接泛素特性的酶，可使S期cDK抑制因子P40sic1蛋白降解，保證 S期CDK的活性，作用于 G1/S的轉(zhuǎn)換。 細(xì)胞還存在一系列檢查 DNA 復(fù)制進(jìn)程的監(jiān)控機(jī)制， DNA 復(fù)制不完成，細(xì)胞周期便不能向 下一階

35、段轉(zhuǎn)移。因?yàn)?DNA 復(fù)制尚未完成時(shí)。 M 期 CDK 激酶活性就不能表現(xiàn)出來，在非洲 爪蟾中發(fā)現(xiàn)，在 S期，cdc25c的活性比較低，而 Weel的活性則較高。 Weel可使CDK1的 Thr14和Tyr15磷酸化，從而抑制其活性。Cdc25c活性偏低，不能有效地促使 CDK1的Thr14 和Tyr15去磷酸化。因而不能活化CDK1 。若在S期中加過量的cdc25c,可是在DNA復(fù)制 尚未完成時(shí)，便向 G2 和 M 期轉(zhuǎn)化。但目前還不知道 cdc25c 和 Weel 的活性戶和調(diào)節(jié)的。 那么我們可以不難看出，在 S 期的啟動與行進(jìn)中需要很多包括酶蛋白在內(nèi)的多種蛋白質(zhì)的 協(xié)同作用。（3）G2

36、期。這個時(shí)期主要與細(xì)胞進(jìn)入M 期進(jìn)行多種結(jié)構(gòu)與功能的準(zhǔn)備有關(guān)，如關(guān)于 M 期染色體的凝集和有絲分裂紡錘體的形成與發(fā)揮作用等。微管蛋白合成開始于S 期，完成于G2期；cyclinB在S期中起始合成，在 G2期繼續(xù)合成積累，并與 P34cdc2結(jié)合，在有關(guān)酶 和磷酸酶的作用下，形成活化的 MPF ，推動細(xì)胞周期通過 G2/M 期檢驗(yàn)點(diǎn)，使細(xì)胞進(jìn)入 M 期。（4）M期.M期細(xì)胞發(fā)生序列形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化，人們將其劃分為前、中、后、末四個時(shí)期。每個時(shí)期都發(fā)生著特定的事件。 M 期有雙重任務(wù)，既要把一個細(xì)胞分成兩個子細(xì)胞，又要 將兩套染色體準(zhǔn)確軍等地進(jìn)行分配。此期的主要周期蛋白是cyclinB，包括B1、B

37、2和B3 ,B3 僅見于雞細(xì)胞，其他動物細(xì)胞主要是 B1 和 B2， B1 和 b2 的合成比 A 稍晚，含量逐漸增 加，并與 CDK1 結(jié)合形成復(fù)合體。 但在 G2/M 轉(zhuǎn)換之前， 由于 CDK1 的 Thr14 和 Tyr15 磷酸 化而沒有活性。在 cdc25c 的作用下被激活后， MPF 可使許多蛋白磷酸化，其中包括組蛋白 H1、核纖層蛋白A、B、C,核仁蛋白、P60csrc、C-abl等。組蛋白H1磷酸化，促進(jìn)染色體 凝集，合纖層蛋白磷酸化，促進(jìn)核纖層解體，核膜破裂，核仁蛋白磷酸化，核仁解體 , P60csrc蛋白磷酸化，促使細(xì)胞骨架重排，C-abl蛋白磷酸化，促使調(diào)整細(xì)胞形態(tài)等。細(xì)

38、胞分裂運(yùn)轉(zhuǎn)到中期后， M 期周期蛋白迅速降解， CDK1 激酶活性喪失，上述被 CDK1 激 酶磷酸化的蛋白去磷酸化，細(xì)胞周期便從中期向后期轉(zhuǎn)化。cyclinA 和 cycliinB 的降解是通過泛素化途徑。由 20S蛋白酶復(fù)合體來完成的，因此稱為20S蛋白酶復(fù)合體為后期促進(jìn)因子（ APC）。 APC 至少有 8 種成分組成。APC 活性液受多種因素的調(diào)節(jié)。 首先已知 APC 各個成分在分裂間期表達(dá)， 但只有到達(dá) M 期 后才表現(xiàn)出活性，提示 M 期 CDK 激酶活性可能對 APC 活性其調(diào)節(jié)作用。實(shí)驗(yàn)證明，在體 外， APC 可被 M 期 CDK 激酶激活，且 APC 多個成分被 MPF 磷

39、酸化，而活化的 APC 則可 被磷酸化酶作用所失活。其次發(fā)現(xiàn)，cdc20為APC有效的正調(diào)控因子。Cdc20主要位于染色體動粒上，為姐妹染色單體分離所必須。 APC 活性亦受到紡錘體裝配檢驗(yàn)點(diǎn)的檢控。紡錘 體裝配不完全，動粒不能被動粒微管所捕獲， APC 則不能被激活。目前已經(jīng)知道，在紡錘 體裝配完成后，動粒全部被動粒微管不惑， Mad2 從動粒上消失，對 cdc20 的抑制作用被解 除，促使APC活化，降解 M期cyclin,使MPF活性喪失，細(xì)胞由中期向后期轉(zhuǎn)化，姐妹染 色單體分離，并向兩極移動。后期結(jié)束， 染色體平均分配到紡錘體的兩極， 圍繞每一組染色體重組新的核膜， 形成兩個子 間期核

40、。隨后進(jìn)行細(xì)胞質(zhì)分裂，一個細(xì)胞分裂為兩個子細(xì)胞。10 DNA 復(fù)制是如何限制到每一個細(xì)胞周期一輪的？ 如果在 S 期時(shí)真核細(xì)胞 DNA 復(fù)制超過一輪，則最后得到的細(xì)胞每個染色體有多個拷貝，這 對于細(xì)胞的正常功能是有害的。為了防止這種情況發(fā)生，細(xì)胞必須有一個機(jī)制在 DNA 復(fù)制 開始一輪后阻止 DNA 復(fù)制的開始， 為了解釋這一現(xiàn)象， 20 世紀(jì) 80 年代末由 Junlian Blow 和 Ron Laskey 通過實(shí)驗(yàn)提出的 DNA 復(fù)制的執(zhí)照因子學(xué)說， 意思是在細(xì)胞質(zhì)中存在一種執(zhí)照因 子，對細(xì)胞核染色質(zhì) DNA 復(fù)制發(fā)行“執(zhí)照” 。在 M 期，細(xì)胞核膜破裂，胞質(zhì)中執(zhí)照因子與 染色直接觸并與

41、直結(jié)合，是后者獲得 DNA 復(fù)制所必需的執(zhí)照。細(xì)胞通過 G1 期進(jìn)入 S 期， DNA 開始副職。隨著 DNA 復(fù)制地進(jìn)行，執(zhí)照信號不斷減弱直至消失。到達(dá) G2 期。細(xì)胞核 中不再含執(zhí)照信號， DNA 復(fù)制結(jié)束也就不再起始了。隨后研究又取得了突破性進(jìn)展，現(xiàn)已 發(fā)現(xiàn)，執(zhí)照因子的主要成分是 Mcm 蛋白。 Mcm 蛋白共有 6 種，分別稱為 Mcm2 、3、4、 5、 6、 7。在細(xì)胞中除去任何一種 Mcm 蛋白，都將使細(xì)胞失去 DNA 復(fù)制起始的功能。除 Mcm 蛋白之外，執(zhí)照因子中還包含有其他某些成分，但目前還不十分清楚。細(xì)胞融合試驗(yàn)：S期細(xì)胞與G1期細(xì)胞融合可誘導(dǎo) G1期細(xì)胞DNA提前副職，

42、而 G2期細(xì)胞 與 G1 期細(xì)胞融合則不能誘導(dǎo) G1 期細(xì)胞 DNA 提前復(fù)制， 使 DNA 每周期只復(fù)制一次的機(jī)理 遠(yuǎn)非執(zhí)照因子學(xué)說所能解釋， 還有很多復(fù)雜調(diào)控機(jī)制， 有人認(rèn)為， G1 期周期蛋白在刺激 G1 期和 S 期事件的同時(shí)， 也激活了 H1 和 Rb 和泛素依賴性蛋白降解作用。 據(jù)報(bào)道， G1 期細(xì)胞 周期蛋白不僅是酵母 DNA 復(fù)制起始所需的，還是 DNA 延伸所需的，因?yàn)?DNA 延伸需要 DNA聚合酶S -細(xì)胞周期蛋白復(fù)合體。游離G1期周期蛋白的去磷酸化作用或通過泛素系統(tǒng) 使之破壞將幫助 DNA 復(fù)制限制到每一個細(xì)胞周期一輪。11.SPF 和 MPF 的主要差別是什么？ 能夠

43、結(jié)合的周期蛋白不同，功能不同。12細(xì)胞周期關(guān)卡的作用。 細(xì)胞周期關(guān)卡是環(huán)境不適合細(xì)胞分裂或進(jìn)行 DNA 復(fù)制時(shí)，細(xì)胞周期可在該點(diǎn)終止。 13比較后期 A 后期 B 。后期有兩個獨(dú)立但同步的事件發(fā)生，后期A和后期B。后期A指染色體向兩極移動，后期B 指紡錘體兩極相互遠(yuǎn)離。14如何證明分裂期的細(xì)胞中有促成熟因子（MPF ）的存在？將同步化的分裂期細(xì)胞與同步化的處于其他周期的細(xì)胞進(jìn)行融合，然后分析染色體的早熟現(xiàn)象，如有早熟，則證明有 MPF 的存在。15真核生物 G2/M 轉(zhuǎn)換的機(jī)制。真核生物的 G2/M 的轉(zhuǎn)換實(shí)際上就是 MPF 的完全激活。 P34cdc2 與周期蛋白 B 結(jié)合，形成的 是無活性

44、的MPF。然后再激酶 Weel和mikl的作用下，將P34cdc2的Tyr15和Thr167磷酸化， 形成的是無活性的錢 MPF，然后在Cdc25磷酸酶的作用下，將 Tyr15位的磷酸脫去，形成 活性MPF，使一系列的底物發(fā)生磷酸化，進(jìn)入M期。由此看來，Tyr15位的磷酸化起抑制作用， Thr167 磷酸化起激活作用。16關(guān)卡維與細(xì)胞周期的那些階段？每次檢查什么？控制系統(tǒng)至少有三個關(guān)卡，G1關(guān)卡（靠近G1末期）、G2期關(guān)卡、（靠近G2末期）、中期關(guān)卡（中期末） 。每一個關(guān)卡處，由細(xì)胞所處的狀態(tài)與環(huán)境決定細(xì)胞能否通過此關(guān)卡，進(jìn)入下 一階段。 G1 關(guān)卡檢測細(xì)胞大小和環(huán)境。如果條件合適就會激發(fā) DNA 復(fù)制，使控制系統(tǒng)向 前移動。 G2 關(guān)卡處，控制系統(tǒng)檢測細(xì)胞大小、狀態(tài)以及 DNA 復(fù)制是否完畢。在中期關(guān)卡， 控制系統(tǒng)檢測所有染色體是否都與紡錘體相連并排列于赤道板上，檢測MPF 是否失活，否則不能進(jìn)行有絲分裂和胞質(zhì)分裂。17何謂早期染色體凝集？ 將處于分裂期的細(xì)胞與處于其他周期階段的細(xì)胞融合， 分裂期的細(xì)胞質(zhì)總是能誘導(dǎo)非分裂期 的細(xì)胞中的染色體發(fā)生凝劑，這種現(xiàn)象稱為棗樹染色體凝劑。該現(xiàn)象說明 M 期的細(xì)胞中存 在某種促進(jìn)染色體凝集的物質(zhì)。三、選擇題 1用適當(dāng)濃度的秋水仙素處理分裂期細(xì)胞，可導(dǎo)致（B） .A.姐妹染色單體不分離B.微管破壞C.微管和微絲都被破壞，使細(xì)