實(shí)驗(yàn)九絲狀真菌形態(tài)特征觀察

1、實(shí)驗(yàn)九絲狀真菌形態(tài)特征觀察生物112周泓兆1102040226一、目的學(xué)習(xí)并掌握觀察毛霉和根霉形態(tài)特征的基本方法。二、原理毛霉和根霉都屬于真菌的接合菌門。它們是空氣中最常見(jiàn)的污染菌。菌落生長(zhǎng)迅速，表 面呈棉花樣，初為白色，以后變灰至褐灰色。菌絲單細(xì)胞無(wú)橫隔，有分枝，多核。毛霉無(wú)假 根；根霉有假根和匍匐絲。無(wú)性生殖產(chǎn)生孢囊孢子。孢囊梗直接由菌絲體上長(zhǎng)出，孢囊梗頂 端膨大形成孢囊，孢囊成熟破裂后，露出囊軸，囊軸基部與孢囊梗連接處稱為囊托。毛霉無(wú) 囊托，根霉的假根上方產(chǎn)生孢囊梗。孢囊孢子呈球形、卵形或不規(guī)則形。有性生殖形成接合 孢子，常為異宗配合即由“ +”“ 一”型菌絲接合形成。這些結(jié)構(gòu)均可通過(guò)制

2、水壓片在低倍 鏡下進(jìn)行觀察。很多青霉、曲霉及鐮刀菌尚未發(fā)現(xiàn)它們的有性生殖階段，常稱為半知菌。即只知其生 活周期的一半。目前已發(fā)現(xiàn)有些菌的有性階段屬于子囊菌或擔(dān)子菌。這三種菌的無(wú)性生殖階 段均有特征性的分生孢子梗及分生孢子形態(tài)和分生孢子著生方式。它們多是腐生菌，廣泛分 布于土壤、空氣、水果和糧食中。青霉菌落多為灰綠色，菌落質(zhì)地絨狀、絮狀、繩狀或束狀， 成熟后表面呈粉末狀。青霉菌絲可直接分化形成分生孢子梗，其頂端具有對(duì)稱或不對(duì)稱的掃 帚狀分枝，其上著生幾輪小梗，小梗頂端著生成串的球狀或卵狀的綠色分生孢子。曲霉菌落 呈絨毛狀或絮狀，表面有同心圓形的輪狀帶。分生孢子梗長(zhǎng)在厚壁的足細(xì)胞上，不分枝，頂 端

3、膨大成球形、橢圓形或棍棒狀頂囊。其表面著生一層或兩層小梗，下層為柱狀初生小梗， 上層為瓶狀次生小梗，頂端著生成串的球狀分生孢子。鐮刀菌菌落呈絨毛狀，多為白色、粉 紅色或紫紅色。菌絲分隔有分枝。具有兩種分生孢子，小型分生孢子梗分枝或不分枝，其頂 端有鏈狀或假頭狀著生的小型分生孢子。大型分生孢子梗不分枝，其頂端著生鐮刀狀大型分 生孢子，多隔，單生或叢生。載片培養(yǎng)法是研究絲狀真菌生長(zhǎng)繁殖全過(guò)程的有效方法。即將菌絲體接種在載玻片上的 小塊培養(yǎng)基薄片上，加蓋蓋玻片，使絲狀真菌只能在載玻片和蓋玻片的狹窄空間內(nèi)橫向生長(zhǎng)， 因而可觀察到孢子萌發(fā)、菌絲生長(zhǎng)及孢子形成的各生長(zhǎng)階段，且不會(huì)因觀察而污染標(biāo)本片。三、材

4、料菌種：毛霉(Mucor) “ + ”、“一”型菌株根霉(Rhizopus)青霉(Penicillium sp.) 曲霉(Aspergillus sp.) 鐮刀菌(Fusarium sp.)浮載劑：乳酸酚溶液。培養(yǎng)基：真菌培養(yǎng)基。其它：無(wú)菌培養(yǎng)皿，載玻片，蓋玻片，無(wú)菌水，擦鏡紙，吸水紙及接種鉤。四、實(shí)驗(yàn)步驟取三片干凈的載玻片，分別在每個(gè)載玻片中線的左右側(cè)各滴加一滴乳酸酚溶液(其中一個(gè) 載玻片只需滴加一滴)。分別用接種針挑取毛霉（+ ”、“一”中線部分）、根霉（貼近培養(yǎng)基部分）、青霉（綠色 部分）、曲霉（黑色部分X鐮刀菌于乳酸酚溶液中，用解剖刀和接種針將其拉松散，輕輕蓋 上載玻片。分別置于高倍鏡

5、下觀察，其中鐮刀菌還需在油鏡下觀察其泡子形態(tài)。清理：用二甲苯與干凈擦鏡紙擦凈鏡頭，將水壓片放入廢片缸，蓋玻片與其它固體垃圾置 入垃圾桶，液體垃圾倒入廢液缸，無(wú)腐蝕性毒性液體可倒入下水道。五、結(jié)果與討論（1）真菌形態(tài)特征:1.毛霉：接合孢子配囊柄兩個(gè)配囊柄顏色、大小不同配囊柄兩個(gè)配囊柄顏色、大小不同3.青霉分生抱子小梗?；慵?xì)胞有隔有分枝的 分生孢子梗-分生孢子梗分生孢子次生小梗初生小梗分生孢子頭頂囊5.鐮刀菌厚垣孢子大型分生孢子小型分生孢子（2）菌落特征名稱毛霉根霉青霉曲霉鐮刀酶菌絲質(zhì)地蜘蛛網(wǎng)狀絮狀絨毛狀、粉狀氈狀氈狀正反面顏色正反面均 為白色正反面均 為白色正面為白色， 或青綠色，反 面為白

6、色正面為白色 或黑黃色，反 面為白色正面為白色，反面 為粉紅色（且色素 為水溶性）（3）討論：本次實(shí)驗(yàn)制片難度較小，只有青霉與曲霉在刮取時(shí)較為困難，需要用力刮取一小部分粘 連的培養(yǎng)基才能取得較好的觀察效果。因?yàn)檎婢旧砗休^多色素，在觀察時(shí)會(huì)發(fā)現(xiàn)視野很 雜亂，因此我們需要將菌絲盡可能扯得松散一些，而制片后需要耐心觀察，尋找各種真菌的 不同結(jié)構(gòu)。六、思考題：1、指出根霉和毛霉的形態(tài)差異。答：毛霉沒(méi)有假根、匍匐菌絲和囊托，具有囊領(lǐng)。根霉有假根、匍匐菌絲和囊托，無(wú)囊領(lǐng)。2、比較青霉、曲霉和鐮刀菌的菌落特征和形態(tài)結(jié)構(gòu)差異。名稱青霉曲霉鐮刀酶菌落特征絨毛狀、粉狀正面為白色，或青綠 色，反面為白色氈狀正面為白色或黑黃色，反 面為