邁瑞B(yǎng)riCyteE6流式細(xì)胞儀介紹課件

1、BriCyte E6流式細(xì)胞儀流式細(xì)胞儀基礎(chǔ)知識(shí)目錄競(jìng)爭(zhēng)產(chǎn)品介紹流式細(xì)胞術(shù)應(yīng)用邁瑞流式細(xì)胞儀BriCyte E6介紹流式細(xì)胞儀基礎(chǔ)知識(shí)流式細(xì)胞儀的定義流式細(xì)胞儀(flow cytometer)：是一種集激光技術(shù)、電子物理技術(shù)、光電測(cè)量技術(shù)、計(jì)算機(jī)技術(shù)以及細(xì)胞熒光化學(xué)技術(shù)、單克隆抗體技術(shù)為一體的高科技儀器?？蓪?duì)單個(gè)生物顆粒在流動(dòng)狀態(tài)進(jìn)行分子功能水平上的定量定性分析。 研究對(duì)象：生物顆粒；檢測(cè)信號(hào)：光信號(hào)（散射光，熒光）；分析特點(diǎn)：快速，特異，準(zhǔn)確，客觀，多參數(shù)； 流式細(xì)胞儀基本構(gòu)造液流系統(tǒng)光學(xué)系統(tǒng)電子系統(tǒng)數(shù)據(jù)分析系統(tǒng)流式細(xì)胞儀分析流程流式細(xì)胞儀檢測(cè)單個(gè)細(xì)胞懸液制備樣本細(xì)胞熒光標(biāo)記數(shù)據(jù)分析處理12

2、34FL4FL6FL5(PE-cy7)FL3(PerCP)FL2(PE)FL1(FITC)SS488/10530/30FS488/10585/40785/60670LP491/LP550LP645LP660/20785/60740LP488/10反光鏡tvFL6(APC-cy7)FL4(APC)反光鏡tvtvtvtvtvtvtvFSCSSCFL1FL2FL3FL5流式細(xì)胞儀工作原理常用的激光器和標(biāo)記單克隆抗體的熒光素488nm激光激發(fā)：FITC（異硫氰酸熒光素）： 熒光強(qiáng)度可受pH的影響，當(dāng)pH降低時(shí)其熒光強(qiáng)度也隨之減弱PE（藻紅蛋白）PerCP（多甲藻葉綠素蛋白）：光量子產(chǎn)量并不太高，最好應(yīng)

3、用在檢測(cè)表達(dá)較高的抗原上PerCP-Cy5.5（葉綠素蛋白偶聯(lián)物）PE-Cy7（藻紅蛋白偶聯(lián)物）PE-Cy5（藻紅蛋白偶聯(lián)物）PE-Texas Red（藻紅蛋白-德州紅偶聯(lián)物）638nm激光激發(fā)：APC（別藻青蛋白）APC-Cy7（別藻青蛋白偶聯(lián)物）熒光素的選擇FITC530/30PE585/40熒光補(bǔ)償+FITC通道信號(hào)=PE通道信號(hào)=實(shí)測(cè)實(shí)測(cè)真實(shí)真實(shí) 由于每一種熒光素分子都發(fā)射某一特定波長(zhǎng)范圍內(nèi)的光，然而這些熒光的發(fā)射光譜會(huì)發(fā)生部分重疊，有時(shí)這種重疊現(xiàn)象非常顯著。 為了能夠在存在熒光泄露的情況下，得到真實(shí)的多色熒光發(fā)射信號(hào)，在流式細(xì)胞儀中采用了稱之為顏色補(bǔ)償?shù)姆椒?，通過測(cè)得信號(hào)經(jīng)修正得到真

4、實(shí)信號(hào)加以使用。數(shù)據(jù)分析-圖形類型直方圖數(shù)據(jù)顯示散點(diǎn)圖等高線圖密度圖三維圖散射光雙參數(shù)散點(diǎn)圖熒光雙參數(shù)散點(diǎn)圖流式細(xì)胞儀與幾種檢驗(yàn)儀器的比較項(xiàng)目流式細(xì)胞儀血球儀生化分析儀免疫分析儀測(cè)試對(duì)象細(xì)胞細(xì)胞(測(cè)量設(shè)置全部固定化）血清血清測(cè)試目標(biāo)物理或化學(xué)性質(zhì)（如細(xì)胞大小、內(nèi)部復(fù)雜程度、DNA含量）；小分子物質(zhì)（如抗原，抗體）物理或化學(xué)性質(zhì)（如細(xì)胞大小、內(nèi)部復(fù)雜程度、DNA含量）化學(xué)成分和一些小分子物質(zhì)（如鉀、鈉、鈣、酶）小分子物質(zhì)（如抗原、抗體、激素）測(cè)試原理流式細(xì)胞術(shù)+抗原抗體反應(yīng)流式細(xì)胞術(shù)化學(xué)比色法抗原抗體反應(yīng)計(jì)量百分比或絕對(duì)計(jì)數(shù)（如 %、*個(gè)/uL）；物質(zhì)的量或定性判定（L、UI/L、 陰性、陽(yáng)pm

5、ol/m性）百分比和絕對(duì)計(jì)數(shù)（如 %、*個(gè)/L）物質(zhì)的量（mol/L）物質(zhì)的量或定性判定（L、UI/L、 陰性、陽(yáng)pmol/m性）宏觀和微觀測(cè)量宏觀對(duì)象（細(xì)胞）上的微觀物質(zhì)（抗原、看不見、摸不到）測(cè)定宏觀對(duì)象（細(xì)胞）上的宏觀物質(zhì)（物理、復(fù)雜度、含量，看得見、摸得到）測(cè)量微觀物質(zhì)（可溶性成分和一些小分子物質(zhì)，看不見、摸不到）測(cè)量微觀物質(zhì)（小分子物質(zhì)，看不見、摸不到）輸出流式細(xì)胞術(shù)應(yīng)用臨床研究血液，腫瘤，藥理，免疫生物學(xué)研究遺傳，生殖，微生物，細(xì)胞生物，毒理，分子生物農(nóng)業(yè)畜牧業(yè)選種，育種環(huán)境研究湖泊，海洋生態(tài)研究食品制藥工業(yè)食品檢測(cè)、藥物篩選，疫苗研究流式細(xì)胞儀的應(yīng)用主要科室： 檢驗(yàn)科、中心實(shí)驗(yàn)室

6、、血液科、腫瘤科、病理科、腎病研究、免疫中心、國(guó)內(nèi)三甲醫(yī)院中流式細(xì)胞儀分布圖（2012年）流式細(xì)胞儀的臨床應(yīng)用主要項(xiàng)目：淋巴細(xì)胞亞群分析HLA-B27檢測(cè)白血病免疫分型 急性白血病、慢性淋巴增生性疾病（CLD)/淋巴瘤造血干細(xì)胞分析 造血干細(xì)胞相對(duì)計(jì)數(shù)； 造血干細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)；陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥（PNH）診斷 CD55/CD59檢測(cè)血小板相關(guān)分析 血小板計(jì)數(shù)、血小板免疫表型分析細(xì)胞周期與DNA倍體分析流式細(xì)胞儀的臨床應(yīng)用淋巴細(xì)胞根據(jù)功能分類淋巴細(xì)胞種類特異性分子標(biāo)記T淋巴細(xì)胞CD3+B淋巴細(xì)胞CD3-CD19+NK淋巴細(xì)胞CD3-CD16+CD56+T淋巴細(xì)胞根據(jù)表面分子分類淋巴細(xì)胞種類特

7、異性分子標(biāo)記T輔助/誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞CD3 + CD4 + T抑制/細(xì)胞毒淋巴細(xì)胞CD3 + CD8 + 淋巴細(xì)胞亞群分析淋巴細(xì)胞亞群分析的臨床應(yīng)用淋巴細(xì)胞亞群分析可以了解機(jī)體在不同條件下的免疫功能狀態(tài)，主要包括細(xì)胞免疫功能和體液免疫功能。在臨床上，主要用于對(duì)免疫系統(tǒng)造成明顯干擾的相關(guān)疾病的輔助診斷，分析疾病的發(fā)病機(jī)理，監(jiān)控疾病的病程進(jìn)展，觀測(cè)療效及監(jiān)測(cè)預(yù)后等等。淋巴細(xì)胞亞群分析在腫瘤內(nèi)科中的應(yīng)用臨床意義CD3+CD3+ CD4+CD3+ CD8+ CD4+ / CD8+B細(xì)胞NK細(xì)胞腫瘤進(jìn)展預(yù)后不良復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移有效手術(shù)有效化療臨床意義CD3+CD3+ CD4+CD3+ CD8+ CD4+ / CD8

8、+B細(xì)胞NK細(xì)胞SLE類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎自身免疫性溶血性貧血重癥肌無(wú)力免疫缺陷病淋巴細(xì)胞亞群分析在風(fēng)濕免疫科中的應(yīng)用急性排斥反應(yīng)是器官移植的第一大障礙；動(dòng)態(tài)觀測(cè)受者淋巴細(xì)胞亞群變化特點(diǎn)，對(duì)判斷急性排斥反應(yīng)和估計(jì)移植后感染等預(yù)后具有重要意義；當(dāng)CD4+ / CD8+比值持續(xù)升高且大于1.2時(shí)應(yīng)當(dāng)考慮排斥發(fā)生；當(dāng)CD4+ / CD8+比值持續(xù)降低表明移植后出現(xiàn)感染；若CD4+ / CD8+比值小于0.2時(shí)，應(yīng)立即停用免疫抑制劑；淋巴細(xì)胞亞群分析在器官移植中的應(yīng)用常見疾病的淋巴細(xì)胞亞群變化細(xì)胞亞群變化常見疾病CD3+T細(xì)胞增高T系淋巴細(xì)胞白血病、SLE、重癥肌無(wú)力、慢性活動(dòng)性肝炎；降低惡性腫瘤晚期、B系

9、細(xì)胞白血病、多發(fā)性骨髓瘤，傳染性單核細(xì)胞增多癥、免疫缺陷??；CD3+ CD4+T細(xì)胞增高類風(fēng)濕（活動(dòng)期）、自身溶血性貧血；降低AIDS、腫瘤晚期、巨細(xì)胞病毒感染、麻風(fēng)、血小板減少；CD3+ CD8+ T細(xì)胞增高病毒感染（HBV、EB）、腫瘤、傳染性單核細(xì)胞增多癥；降低類風(fēng)濕、重癥肌無(wú)力、免疫缺陷病、腫瘤放射治療；（CD3+ CD4+ ） / （ CD3+ CD8+ ）比值增高類風(fēng)濕、重癥肌無(wú)力、SLE、自身溶血性貧血；降低AIDS、傳染性單核細(xì)胞增多癥、病毒感染、腫瘤；B細(xì)胞增高M(jìn)M、巨球蛋白血癥、淋巴瘤、AIDS；降低先天性免疫缺陷病、惡性腫瘤；NK細(xì)胞增高病毒感染早期、骨髓移植術(shù)后、習(xí)慣性

10、流產(chǎn)；降低惡性腫瘤、部分病毒細(xì)菌和真菌感染；HLA-B27檢測(cè)與強(qiáng)直性脊柱炎診斷強(qiáng)直性脊柱炎（AS）定義：一種慢性、進(jìn)行性和炎性疾病，主要累計(jì)骶髂關(guān)節(jié)、脊柱、脊柱軟組織及四肢關(guān)節(jié)，表現(xiàn)為椎間盤纖維環(huán)和纖維環(huán)結(jié)締組織的骨化，椎間動(dòng)關(guān)節(jié)和四肢關(guān)節(jié)滑膜的炎癥和增生，嚴(yán)重者可失去勞動(dòng)能力。淋巴細(xì)胞HLA-B27檢測(cè)在AS中的診斷價(jià)值：許多研究證據(jù)表明人群中HLA-B27的表達(dá)頻率與AS的發(fā)病率高度相關(guān)；AS患者中HLA-B27的陽(yáng)性率顯著高于普通人群，高達(dá)90%以上，而普通人群HLA-B27的陽(yáng)性率低于10%，HLA-B27陰性的普通人群未患AS的幾率為99.9%；HLA-B27檢測(cè)陽(yáng)性可顯著增加正確

11、診斷AS的幾率，陰性則為排除AS的診斷提供了有力的證據(jù)；TBNK四色試劑盒簡(jiǎn)單準(zhǔn)確的淋巴細(xì)胞亞群的分型方案雙管四色;無(wú)需儀器設(shè)置，信號(hào)采集、分析與報(bào)告一鍵式解決方案全自動(dòng)TBNK四色試劑盒配套分析軟件;檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠，陽(yáng)性細(xì)胞峰熒光強(qiáng)度高，陰陽(yáng)性細(xì)胞群分離度好試劑分析性能優(yōu)于同類主流產(chǎn)品；HLA-B27檢測(cè)雙色試劑有效排除HLA-B7和非特異性吸附帶來(lái)的假陽(yáng)性并且準(zhǔn)確識(shí)別HLA-B27/HLA-B7雙陽(yáng)性樣本HLA-B27/HLA-B7雙抗原與同型對(duì)照雙管分析設(shè)計(jì);無(wú)需儀器設(shè)置，信號(hào)采集、分析與報(bào)告一鍵式解決方案全自動(dòng)HLA-B27檢測(cè)雙色試劑配套分析軟件;邁瑞流式細(xì)胞儀Bricyte E6

12、介紹全中文操作界面BriCyte E6 產(chǎn)品特點(diǎn)LISLaboratory Information System條碼掃描儀條碼掃描儀通過掃描含lis編碼的條碼，可直接從lis庫(kù)中調(diào)取樣本信息，如“姓名”、“年齡”等，并錄入軟件相應(yīng)界面。MRFLOWMRFLOW軟件將測(cè)試完成的樣本通過“審核”按鈕，直接傳入“LIS”系統(tǒng)。智能化的獲取和傳遞BriCyte E6 產(chǎn)品特點(diǎn)機(jī)型支持上樣容器種類圖片自動(dòng)進(jìn)樣機(jī)型1275 mm試管（每盤容納40管）手動(dòng)上樣機(jī)型1275 mm試管1.5mL、2mL微量離心管靈活多樣的進(jìn)樣方式BriCyte E6 產(chǎn)品特點(diǎn)自動(dòng)TBNK軟件自動(dòng)HLA-B27軟件自動(dòng)設(shè)置自動(dòng)測(cè)

13、試智能化自動(dòng)設(shè)置BriCyte E6 產(chǎn)品特點(diǎn)自動(dòng)電壓自動(dòng)熒光補(bǔ)償手動(dòng)測(cè)試自動(dòng)電壓BriCyte E6 產(chǎn)品特點(diǎn)8.00自動(dòng)熒光補(bǔ)償BriCyte E6 產(chǎn)品特點(diǎn)自動(dòng)測(cè)試軟件BriCyte E6 產(chǎn)品特點(diǎn)全封閉光路，惡劣環(huán)境有效防塵，光路不受影響智能光學(xué)溫控，15-32 性能穩(wěn)定插拔式濾光片，支持更多熒光素搭配先進(jìn)的光路設(shè)計(jì)模式BriCyte E6 產(chǎn)品特點(diǎn)低生物風(fēng)險(xiǎn)低攜帶污染率的拭子式進(jìn)樣針自動(dòng)清洗模塊可使鞘液充分消耗的高精度檢測(cè)裝置。報(bào)警時(shí)鞘液液位1/2卓越的液流檢測(cè)系統(tǒng)BriCyte E6 產(chǎn)品特點(diǎn)部件BriCyte E6BD FACSCanto IIBCI FC500 儀器尺寸*(mm

14、，寬高深)500500550910630610610978889重量*(Kg)6085146液流車小型試劑組件大內(nèi)置鞘液桶、清洗液桶、外置廢液桶氣源無(wú)有有精致小巧的外形結(jié)構(gòu)BriCyte E6 產(chǎn)品特點(diǎn)項(xiàng)目BriCyte E6BD FACSCanto IIBCI FC500采集速度12,000個(gè)粒子/s10,000個(gè)粒子/s3,300個(gè)粒子/s檢測(cè)速度90 管/h42 管/h88 管/h攜帶污染率 0.1% 0.1% 1%良好的性能檢測(cè)結(jié)果BriCyte E6 產(chǎn)品特點(diǎn)無(wú)外接氣源，低噪音超快的測(cè)試速度精致小巧的外形結(jié)構(gòu)報(bào)告格式自由編輯一鍵式故障解決方式防塵光路設(shè)計(jì)智能光學(xué)控溫插拔式濾光片布局低

15、攜帶污染率鞘液充分消耗 BriCyte E6易智捷簡(jiǎn)BriCyte E6 特點(diǎn)總結(jié)中文界面多樣進(jìn)樣自動(dòng)設(shè)置雙向LIS競(jìng)爭(zhēng)比較型號(hào)BD:CaliburBCI：FC500BD：Canto IIMindray：BriCyte E6上市時(shí)間1994200220062014配置雙光4色，市場(chǎng)裝機(jī)基本為開放進(jìn)樣機(jī)型標(biāo)配單激光5色自動(dòng)進(jìn)樣；雙激光5色自動(dòng)進(jìn)樣（基本沒有出貨量）；沒有開放進(jìn)樣機(jī)型雙激光6色；三激光8色；上述配置分別有開放進(jìn)樣機(jī)型和自動(dòng)進(jìn)樣機(jī)型雙激光4色；雙激光5色；雙激光6色上述配置分別有開放進(jìn)樣機(jī)型和自動(dòng)進(jìn)樣機(jī)型優(yōu)劣比較已經(jīng)上市20年，接近退市；產(chǎn)品陳舊，使用老蘋果系統(tǒng)年內(nèi)；產(chǎn)品不能升級(jí)；B

16、CI臨床主力機(jī)型；軟件復(fù)雜；英文界面；無(wú)自動(dòng)算法軟件；不能直接連接LIS；BD臨床中高端主力機(jī)型；英文界面；不能直接連接LIS；全中文界面（國(guó)際英文版本）；雙向LIS直連； 自動(dòng)電壓、補(bǔ)償設(shè)置；自動(dòng)算法軟件；性能 精密度：CV3%精密度：CV2% 精密度：CV2%精密度：CV2% 靈敏度： 750 MESF 靈敏度：FITC 600 MESF； PE 300 MESF；APC 600 MESF靈敏度：FITC100 靈敏度：FITC200速度：10000個(gè)/秒 速度:3300個(gè)/秒 速度:10000個(gè)/秒 速度:12000個(gè)/秒 競(jìng)爭(zhēng)比較產(chǎn)品Bricyte E6BD CaliburBD Can

17、to IIBCI FC500BCI Navios上市時(shí)間20141994200620022009Physical Dimensions尺寸和重量Cytometer細(xì)胞儀500*500*550914*673*615910*640*610900*610*889960*610*70060kg109.1kg145kg84.8kg104kgSupply Cart液流車N/AN/A790457724640584298610711495515930System Configuration儀器配置配置雙激光4色開放進(jìn)樣及自動(dòng)進(jìn)樣；雙激光5色開放進(jìn)樣及自動(dòng)進(jìn)樣；雙激光6色開放進(jìn)樣及自動(dòng)進(jìn)樣雙激光4色開放和自動(dòng)進(jìn)

18、樣雙激光6色自動(dòng)進(jìn)樣和開放進(jìn)樣；三激光8色自動(dòng)進(jìn)樣和開放進(jìn)樣單激光5色自動(dòng)進(jìn)樣；雙激光6色開放進(jìn)樣雙激光6色自動(dòng)進(jìn)樣和開放進(jìn)樣；雙激光8色自動(dòng)進(jìn)樣和開放進(jìn)樣；雙激光10色自動(dòng)進(jìn)樣和開放進(jìn)樣43競(jìng)爭(zhēng)比較產(chǎn)品Bricyte E6BD CaliburBD Canto IIBCI FC500BCI NaviosLaser Specification 激光器配置Blue Laser藍(lán)色激光器Blue solid state diode, 488nm, 43mWAir-cooled argon-ion laser, 15 mW,488 nmBlue 488-nm solid state, 20-mWuni

19、phase argon ion, 488nm, 20mWBlue solid state diode, 488nm, 22mWRed Lasr紅色激光器Red solid state diode, 638nm, 55mWOptional second laser: 635 nm.633-nm HeNe, 17-mW coherent red solid diode, 635nm, 25mWRed solid state diode, 638nm, 25mWViolet Laser紫色激光器N/AN/A405-nm solid state diode, 30-mWN/AViolet solid

20、state diode, 405nm, 40mW是否溫控是否否否是Fluorescent Dyes 熒光素Blue laser藍(lán)色激光FITC, PE, PerCP or PerCP-Cy5.5,PE-Cy7FITC, PE/PI, PerCPFITC, PE, PerCP or PerCP-Cy5.5,PE-Cy7FITC, PE, ECD, PC5 or PEC5.5, PECy7FITC, PE, ECD, PC5 or PEC5.5, PECy7Red laser紅色激光APC, APC-Cy7APCAPC, APC-Cy7APC ,APCCy7, APC or Alexa Fluor

21、 647, APCAlexa Fluor 700, APCCy7, APCAlexa Fluor 750Violet laser紫色激光N/AN/APacific Blue, AmCyanN/AN/A44競(jìng)爭(zhēng)比較產(chǎn)品Bricyte E6BD CaliburBD Canto IIBCI FC500BCI NaviosData Management數(shù)據(jù)管理Workstation外置工作站BD FACStation Mac Pro computerSoftware流式軟件全中文軟件英文軟件英文軟件英文軟件英文軟件自動(dòng)化軟件系統(tǒng)集成自動(dòng)淋巴亞群及HLA-B27有自動(dòng)軟件，但非集成有自動(dòng)軟件，但非集成N

22、ANA自動(dòng)設(shè)置自動(dòng)設(shè)置電壓、熒光補(bǔ)償N/AN/AN/AN/Abi-LIS雙向LIS直連需中間件需中間件需中間件需中間件Signal Processing信號(hào)處理Dynamic Range動(dòng)態(tài)范圍20bitFour Decade18-bitFour Decade20-bit data acquisition45競(jìng)爭(zhēng)比較產(chǎn)品Bricyte E6BD CaliburBD Canto IIBCI FC500BCI Navios手動(dòng)進(jìn)樣支持試管1275-mm試管，1.5mL或2mL離心管1275mm test tube 試管1275mm test tube 試管N/AN/A自動(dòng)進(jìn)樣Carousel Lo

23、ader圓盤進(jìn)樣器40管40 (12 x 75-mm) tubes per rack.40-tube carousel32管32管 Max Acquisition Rate 最大采集速度12,000 events/secN/A10,000 events/sec3,300 events/sec25,000 events/secFluorescence熒光信號(hào)Fluorescence Sensitivity熒光靈敏度FITC200 MESF; PE100 MESF 750 MESFFITC 100 MESF; PE 50 MESF FITC 600 MESF ; PE 300 MESF;APC 600 MESF FITC 112 MESF ; PE 78 MESF;PECy5 15 MESF;APC 75 MESF Fluorescence resolution熒光分辨率FITC、PE2.0%；PerCP、PE-Cy7、APC和APC-Cy74.0%CV in FL2-Area 3%N/AN/AN/A46競(jìng)爭(zhēng)比較產(chǎn)