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文檔簡介
1、華西(Hux)藥學(xué)院2009-2010學(xué)年上學(xué)期 分子生物學(xué) 考題 答案(d n) 2013年1月22日晚使用(shyng)說明:此答案僅供參考,如有謬誤,還請見諒!英文翻譯【12*0.5=6分】1 SNP 單核苷酸多態(tài)性 2 Transposon 轉(zhuǎn)座子3 RNA splicing RNA剪接 4 Attenuator 衰減子5 determination of DNA sequence DNA序列測定 6 Interrupted gene 斷裂基因7 DDRP DNA指導(dǎo)的DNA聚合酶 8 CRP 分解代謝基因活化蛋白9 site-specific in vitro mutation 體外
2、定向突變 10 frameshift mutation 移碼突變(這個過時了,不考)11 translocation 移位 12 primase 引物酶二、名詞解釋【10*2=20分】 1 Enhancer 增強子 :指遠離轉(zhuǎn)錄起點,決定基因表達的時空特異性,增強啟動子轉(zhuǎn)錄活力的一段DNA序列。2 Molecular chaperone 分子伴侶:細胞內(nèi)能夠幫助新生肽鏈正確折疊和裝配組裝成為成熟蛋白質(zhì)的一類蛋白因子,在真核生物和原核生物中廣泛存在。3 semidiscontinous replication 半不連續(xù)復(fù)制:一條鏈上的DNA在DNA聚合酶的作用下以5-3方向連續(xù)合成一條長的DNA
3、鏈,而另一條另一條鏈的DNA合成是不連續(xù)的,即先合成一段段短的DNA片段,再將這些短片段連成DNA長片段,這樣的過程稱為半不連續(xù)復(fù)制4 supergene family 超基因家族: 來源相同、結(jié)構(gòu)相似,但功能卻不盡相同的一大批基因,這一大批基因分屬于不同的基因家族,總稱為超基因家族5 promoter 啟動子:RNA聚合酶識別、結(jié)合和開始轉(zhuǎn)錄的一段DNA序列,是RNA聚合酶起始轉(zhuǎn)錄需要的輔助因子6 mic RNA 干擾mRNA的互補RNA,即反義RNA,通過堿基互補和特定mRNA的SD序列、起始密碼子AUG以及它們的上下游的部分核苷酸序列結(jié)合,從而抑制mRNA的翻譯7 reverse tra
4、nscription 逆轉(zhuǎn)錄:以RNA為模板合成DNA,這與通常轉(zhuǎn)錄過程遺傳信息從DNA到RNA的方向相反,故稱為逆轉(zhuǎn)錄作用,通常又叫做RNA指導(dǎo)的DNA合成。8 stringent response 嚴緊反應(yīng)(這個過時了,不考)9 gRNA(這個過時了,不考)10 physical map物理圖譜:以一段已知的核苷酸序列的DNA為“位標(biāo)”,以堿基對Mb或Kb等物理距離為圖距的基因組圖。三、填空【60*0.5=30分】1、RNA生物合成抑制劑有【 】、【 】、【 】三種,其中堿基類似物是屬于【 】(這個過時了,不考)2、Southern印跡雜交是鑒別【DNA 】靶分子的雜交,Northern印
5、跡雜交是鑒別【 RNA】靶分子的雜交,而Western印跡雜交可以用來分析【蛋白質(zhì) 】3、端粒的復(fù)制依賴【端粒酶 】的催化,以【 RNA】為模板通過【逆轉(zhuǎn)錄 】方式來完成4、RNA聚合酶對轉(zhuǎn)錄起始的調(diào)控主要是通過【亞基替換 】來調(diào)控,這是因為【因子 】能夠識別DNA分子上的RNA合成的起始信號,不同的【因子】會競爭性的與核心酶結(jié)合,而且【 環(huán)境】的變化可以誘導(dǎo)產(chǎn)生特定的【 因子】,從而開啟特定的基因。5、DNA復(fù)制后修復(fù)主要有【重組修復(fù) 】和【 SOS修復(fù)】兩大類,其中【 SOS修復(fù)】屬于差錯傾向性修復(fù)。6、根據(jù)突變帶來的效果,DNA突變可分為【無義突變 】、【同義突變 】和【錯義突變 】,其
6、中【 同義】突變并沒有改變蛋白質(zhì)產(chǎn)物的氨基酸序列,是因為堿基的改變只是使一個密碼子變成了它的【 簡并密碼子】。7、蛋白質(zhì)的生物合成過程中,肽鏈的延長由若干個循環(huán)組成,每一個循環(huán)包括【進位】、【成肽 】和【 移位】三個步驟。8、Trp操縱子結(jié)構(gòu)基因E和D,B和A之間保持翻譯步調(diào)一致的機制是通過【 基因重疊】實現(xiàn)【翻譯偶聯(lián)】。9、TaqDNA聚合酶是在【 PCR】技術(shù)中使用的一個重要工具酶,其最大特點是【耐熱 】,但是由于TaqDNA聚合酶不具有【3-5外切酶 】活力,因此其沒有校對功能。10、乳糖操縱子同時獨立地受到【 正】、【負 】兩個系統(tǒng)的調(diào)控,只有當(dāng)【cAMP-CAP 】結(jié)合到【 CAP結(jié)
7、合位置】上和【阻遏蛋白 】脫離【 操縱基因】時,才開始結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄。11、典型轉(zhuǎn)座子都含有【 】和【 】兩個基本序列,如果按【 】分類,可以分為【 】和【 】。(不考了,過時了)12、染色質(zhì)從形態(tài)上可以分為【 常染色質(zhì)】和【 異染色質(zhì)】,其中【 常染色質(zhì)】是一種【 松懈伸展】的DNA狀態(tài),可以進行活躍的復(fù)制和轉(zhuǎn)錄。13、tRNA的功能位點有【氨基酸接受位點 】、【識別氨酰-tRNA合成酶位點 】【 反密碼子位點】和【核糖體識別位點 】。14、致癌RNA病毒是以【出芽 】方式從細胞中釋放,不會使宿主細胞裂解,其致癌機理是通過【 前病毒的癌細胞基因編碼的蛋白質(zhì)】使細胞發(fā)生癌變,病毒RNA通過【逆
8、轉(zhuǎn)錄】生成dsDNA并整合到宿主DNA序列中是病毒致癌的重要環(huán)節(jié),因此【逆轉(zhuǎn)錄酶 】是新藥設(shè)計和疾病治療的重要靶酶。15、RDDP具有【 依賴RNA的DNA聚合酶】、【依賴DNA的DNA聚合酶 】和【 RNaseH】活力。16、保證DNA復(fù)制忠實性的三大防線是【復(fù)制系統(tǒng)的忠實性 】、【 損傷修復(fù)】、【復(fù)制后修復(fù) 】。四、不定項選擇【7*2=14】【此處以往年判斷并說明理由題代替】1、復(fù)制子是從啟動子到終止子之間的一段DNA序列。參考答案:錯,因為復(fù)制(fzh)子是從復(fù)制起點到復(fù)制終點的一段DNA序列,參與的是DNA的復(fù)制,而啟動子和終止子參與的是轉(zhuǎn)錄過程。2、順反子與基因(jyn)是同義語。參
9、考答案:錯,因為順反子是一段編碼蛋白質(zhì)的核苷酸序列,只是一段編碼序列,而基因(jyn)不僅包含編碼序列,還應(yīng)包括調(diào)控序列。3、核酸分子雜交技術(shù)的目的是擴增DNA。參考答案:錯,因為核酸分子雜交技術(shù)的目的是定性或定量地測量特定的核苷酸序列4、從模版的使用情況來講,DNA轉(zhuǎn)錄是對稱的,全保留的。參考答案:錯,因為轉(zhuǎn)錄是不對稱的5、經(jīng)過剪接的mRNA遺傳信息不全來自DNA。參考答案:錯,因為經(jīng)過剪接的mRNA遺傳信息全部來自DNA(自己再拓展一下吧,結(jié)合剪接的概念和特點)6、真核生物的mRNA是多順反子RNA。參考答案:錯,真核生物的mRNA是單順反子RNA7、PCR擴增產(chǎn)物的特異性是由模板的純度確
10、定的。錯,PCR擴增產(chǎn)物的特異性是由引物決定的。五、簡答題【30分】1、比較轉(zhuǎn)錄和復(fù)制的異同點答:轉(zhuǎn)錄復(fù)制概念DNA指導(dǎo)的RNA合成DNA指導(dǎo)的DNA合成合成原料NTPdNTP聚合酶DDRPDDDP合成方向5-35-3模板不對稱轉(zhuǎn)錄,只有一條鏈做模板兩條鏈分開各自同作為模板忠實性低,DDRP缺乏校對功能高調(diào)控主要是轉(zhuǎn)錄起始主要是復(fù)制起始2、簡述核糖體的活性中心答:A.mRNA結(jié)合位點 B.Aa-tRNA結(jié)合位點 C. 肽基-tRNA結(jié)合位點 D.tRNA排出位點 E肽酰轉(zhuǎn)移酶位點3、比較DDDP、DDRP、RDDPDDRPDDDPRDDP概念DNA指導(dǎo)的RNA合成DNA指導(dǎo)的DNA合成RNA指
11、導(dǎo)的DNA合成參與反應(yīng)轉(zhuǎn)錄復(fù)制逆轉(zhuǎn)錄模板DNADNARNA原料NTPdNTPdNMP合成方向5-35-35-3特點需鎂離子,模板,不需要引物,能直接啟動一條新鏈合成需鎂離子,模板,需要引物,不能直接啟動一條新鏈合成需模板和引物忠實性低,缺乏校對功能高低,缺乏校對功能4、抗腫瘤藥物(yow)分為哪幾種種類,每一種的作用機理是什么,請舉例說明。參考答案:(1)針對(zhndu)逆轉(zhuǎn)錄酶的抗腫瘤藥,如AZT,抗HIV藥RNA合成(hchng)抑制劑 如烷化劑抗代謝腫瘤藥,如長春新堿。5、請簡述操縱子的基因表達調(diào)控思想。參考答案(不一定對):操縱子水平的調(diào)控主要有以下三種類型:誘導(dǎo)型操縱子(乳糖操縱子
12、)(2)阻遏操縱子(色氨酸操縱子)(3)cAMP-CAP正調(diào)控系統(tǒng)。乳糖操縱子同時獨立地受到正、負兩個系統(tǒng)的調(diào)控,只有當(dāng)cAMP-CAP 結(jié)合到CAP結(jié)合位置上和阻遏蛋白脫離操縱基因時,才開始結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄。其基因調(diào)控思想為:結(jié)構(gòu)基因只是提供了編碼蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)的一種潛在可能性。6、【原文為英文】假設(shè)一個細菌DNA復(fù)制水平較低,而其細胞內(nèi)DNA聚合酶I、III,連接酶、解鏈酶,SSB和旋轉(zhuǎn)酶均正常,dnaA、B、C也均正常,染色體中oriC區(qū)域也為正常水平,為何該細菌DNA復(fù)制水平比較低。參考答案(不一定對):缺少引物酶,同時也缺乏原料7、構(gòu)建一個已知分子大小氨基酸序列的真核生物蛋白的原核表達
13、系統(tǒng),經(jīng)過以下三個步驟:1)從組織和細胞中分離提取RNA2)PCR擴增RNA并逆轉(zhuǎn)錄為DNA3)將DNA整合到載體上問:1) 從組織細胞中提取的RNA應(yīng)該是哪一種,為什么2) PCR擴增的引物有什么要求,為什么3) 有人認為此過程過于繁瑣,可直接用蛋白質(zhì)來制作DNA序列,此方法是否可行,為什么參考答案(不一定對):(1)mRNA,因為只有mRNA才能逆轉(zhuǎn)錄為DNAA.a.5端引物應(yīng)與待擴增片段5端上游的一小段DNA序列相同,引導(dǎo)信息鏈的合成;b.3端引物應(yīng)與待擴增片段3端上游的一小段DNA序列互補,引導(dǎo)互補鏈的合成B.因為引物決定PCR擴增產(chǎn)物的特異性和長度。不能,因為此系統(tǒng)為原核生物的基因系
14、統(tǒng),原核生物的基因為連續(xù)基因,不具內(nèi)含子,而真核生物的基因為不連續(xù)基因,有內(nèi)含子,在轉(zhuǎn)錄(zhun l)時需要進行加工,原核系統(tǒng)無法做到! 補充(bchng):05-06年分子生物學(xué)(重題不再(b zi)寫)一翻譯 replicon 復(fù)制子 2.SSB:單鏈結(jié)合蛋白 nucleic acid hybridization核酸分子雜交 4.DNA ligase DNA連接酶 RDRP RNA指導(dǎo)的RNA聚合酶 6.PDI 蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶 7.nucleosome 核小體 8.exon 外顯子 9.okazaki fragment 岡崎片段 二、名解1.telomerase 端粒酶:是由一條RN
15、A和蛋白質(zhì)組成的復(fù)合物,為逆轉(zhuǎn)錄酶,能夠以其自身攜帶的RNA為模板逆轉(zhuǎn)錄合成DNA2.分子伴侶(上面已有,不再贅述) 3.semi-reservative replication 半保留復(fù)制:DNA在復(fù)制時,兩條鏈解開分別作為模板(mbn),在DNA聚合酶的催化下按照堿基互補配對的原則合成兩條與模板鏈互補的新鏈,以組成新的DNA分子,新合成的DNA分子與親代DNA的堿基順序完全一致,由于子代DNA中一條鏈?zhǔn)切潞铣傻?,一條鏈來自親代DNA,故稱為半保留復(fù)制。4.超基因家族 (上面已有,不再(b zi)贅述)5.operon 操縱子:由幾個功能相關(guān)的結(jié)構(gòu)(jigu)基因和調(diào)控區(qū)組成的一個基因表達的
16、協(xié)同單位。6.micRNA (上面已有,不再贅述)7.translational repression 翻譯阻遏 ,利用阻遏物對翻譯進行調(diào)控的機制,cp通過特異性結(jié)合到rep基因的核糖體結(jié)合位點上阻遏rep基因的翻譯8.hnRNA 核內(nèi)不均一RNA 真核生物的原初轉(zhuǎn)錄物是分子量極大的前體,在核內(nèi)加工過程中會形成分子大小不等的中間物,稱為核內(nèi)不均一RNA 9.gRNA(上面已有,不再贅述)10.嚴緊反應(yīng)(上面已有,不再贅述)三、填空1.tRNA對Aa的選擇性主要通過【氨酰-tRNA合成酶的專一性】來實現(xiàn),而tRNA對mRNA的選擇則是通過【密碼子與反密碼子的配對】來實現(xiàn)的四、問答1簡述原核生物D
17、NA復(fù)制有關(guān)的酶類及其功能:參考答案:A.DNA連接酶:連接DNAB.DNA解鏈酶:水解雙鏈DNAC.引物酶:啟動RNA引物的合成D.DNA旋轉(zhuǎn)酶:又稱拓撲異構(gòu)酶II,兼具內(nèi)切酶和連接酶活力,能放松復(fù)制叉前方的正超螺旋,便于解鏈E.SSB(單鏈結(jié)合蛋白):選擇性地結(jié)合在解開的單鏈DNA上,防止DNA單鏈重新形成雙螺旋結(jié)構(gòu)F.DNA聚合酶:催化新生DNA的合成以操縱子的基因表達調(diào)控為例,說明RNA聚合酶對啟動子或操縱子的選擇主要由細菌賴以生存的培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分決定的。答:在原核生物的基因表達調(diào)控中RNA聚合酶對啟動子或操縱子的選擇主要由細菌賴以生存的培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分決定的,其調(diào)控機制主要是通過誘
18、導(dǎo)型操縱子的調(diào)控機制來實現(xiàn)的。例:乳糖操縱子的調(diào)控,當(dāng)環(huán)境中含有葡萄糖時,葡萄糖的分解代謝產(chǎn)物使細胞內(nèi)cAMP處于低水平,CAP失活,無法打開結(jié)構(gòu)基因,乳糖操縱子關(guān)閉。如果環(huán)境中沒有葡萄糖時,乳糖操縱子也不一定打開,因為如果培養(yǎng)基中沒有乳糖等誘導(dǎo)物的話,調(diào)節(jié)基因編碼的阻遏蛋白會結(jié)合到操縱基因上,阻礙RNA聚合酶的結(jié)合。此時結(jié)構(gòu)基因仍處于關(guān)閉狀態(tài),只有當(dāng)培養(yǎng)基中只含有乳糖時,一方面,乳糖的誘導(dǎo)作用使阻遏蛋白失活,不結(jié)合到操縱基因上,另一方面培養(yǎng)基中葡萄糖的缺乏使細胞的cAMP水平提高,CAP激活,RNA聚合酶與啟動子結(jié)合,從而打開結(jié)構(gòu)基因,使細菌開始合成與乳糖分解代謝有關(guān)的酶。什么(shn me
19、)是多核糖體和核糖體循環(huán)?答:(1)多核糖體:一個(y )mRNA分子與一定數(shù)目的單個rb結(jié)合而成(2)核糖體循環(huán):在蛋白質(zhì)合成的起始階段,核糖體以游離的大小兩個亞基參與,并在mRNA分子的協(xié)助下組成完整的核糖體,完成(wn chng)蛋白質(zhì)的合成過程,在蛋白質(zhì)合成結(jié)束后,核糖體又分解成大小兩個亞基,游離的核糖體亞基可以參與下一輪的蛋白質(zhì)合成或再次組裝成為穩(wěn)定的核糖體。穩(wěn)定的核糖體顆粒只有解離或游離亞基才能參與蛋白質(zhì)合成。4、抗腫瘤藥物分為哪幾種種類,每一種的作用機理是什么,請舉例說明。(上面已有,不再贅述)06-07級一、翻譯enhancer 增強子 2.messenger 信使RNA 3.
20、genome 基因組 4.DDRP DNA指導(dǎo)(zhdo)的RNA聚合酶 5.DNA polymerase DNA聚合酶 6.genetic code 遺傳(ychun)密碼 其他皆為重復(fù)(chngf),不再打出二、名解1.半保留復(fù)制(已有)2.基因:gene 指DNA分子中能夠編碼一條多肽鏈或RNA,并具有一定長度的片段,不僅包括編碼RNA或蛋白質(zhì)肽鏈的核酸序列,還包括為保證轉(zhuǎn)錄所必需的調(diào)控序列3.反義mRNA4.逆轉(zhuǎn)錄5.閱讀框架 reading frame 指mRNA中從起始密碼子AUG到終止密碼子之間的一段可翻譯的核苷酸序列,對應(yīng)的是一個蛋白質(zhì)的氨基酸序列6.順式作用元件:與相關(guān)基因處
21、在同一DNA分子上起調(diào)控作用的DNA序列。7.反式作用因子:對基因表達具有調(diào)控作用的可擴散性蛋白因子8.衰減子:attenuator 操縱子前導(dǎo)區(qū)類似于終止子結(jié)構(gòu)的一段DNA序列三、填空1.DNA聚合酶的【3-5外切酶活性】具有【校對】作用,可以【切除錯配的核苷酸序列】2.DNA復(fù)制的機理是【半保留復(fù)制】,復(fù)制的方式是【半不連續(xù)復(fù)制】,所有的DNA都是在特定的【復(fù)制起點】開始復(fù)制,而復(fù)制的方式有【單向復(fù)制】和【多向復(fù)制】3.操縱子是由功能相關(guān)的【結(jié)構(gòu)基因】及其【調(diào)控區(qū)】所組成的一個基因表達的協(xié)同單位,是原核生物在【轉(zhuǎn)錄】水平進行表達調(diào)控的基本單元,是原核生物基因的【組織形式】和【表達調(diào)控】的單
22、位4.大腸桿菌的RNA聚合酶是由【因子】和【核心酶】兩部分組成的,其中【核心酶】的作用是催化RNA鏈的【延伸】反應(yīng),而【因子】的作用是負責(zé)模板鏈的選擇和轉(zhuǎn)錄起始,而且不同的【因子】會打開不同的基因5.mRNA的帽子結(jié)構(gòu)具有【為rb對mRNA的結(jié)合提供信號】和【保護mRNA分子免受5端外切酶的降解作用】兩方面的生理功能6.PCR是由【變性】、【退火】、【延伸】三個基本步驟組成的循環(huán)7.蛋白質(zhì)的生物合成過程中,【mRNA】是指令氨基酸摻入的模板,【tRNA】是攜帶氨基酸的工具,【核糖體】是蛋白質(zhì)的合成場所。8.在原核生物中,翻譯延伸的調(diào)控主要是通過【稀有密碼子】來進行調(diào)控,如果基因中含較多【稀有密
23、碼子】,基因的表達效率必然很低,這是因為【稀有密碼子所對應(yīng)的tRNA含量少】四、簡述1.真核生物的基因特征。答:a.真核基因都由一個結(jié)構(gòu)基因與相關(guān)的調(diào)控區(qū)域組成,轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為單順反子mRNA b.基因組含大量重復(fù)序列c. 存在多拷貝基因,形成基因家族和超基因家族d.真核生物基因組內(nèi)非編碼序列占90%以上e.大多數(shù)真核生物的結(jié)構(gòu)基因為不連續(xù)基因(斷裂基因)f、真核生物(shngw)基因組DNA的末端有端粒結(jié)構(gòu)g.真核生物(shngw)基因組存在細胞器基因組,如葉綠體基因組和線粒體基因組對比:原核(yun h)生物的基因特征:功能上密切相關(guān)的基因構(gòu)成操縱子多順反子mRNA結(jié)構(gòu)基因重復(fù)序列少蛋白質(zhì)基因
24、通常以單拷貝形式存在RNA基因(編碼rRNA,tRNA)常是多拷貝的結(jié)構(gòu)基因連續(xù),轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRNA一般不需要加工,可直接進行翻譯單個染色體呈環(huán)狀,DNA并不和蛋白質(zhì)固定結(jié)合DNA大部分用于編碼蛋白質(zhì),只有很少不編碼的DNA序列保證DNA復(fù)制忠實性的原理/機制答:1DNA聚合酶的高度專一性(嚴格遵守堿基互補配對原則,且錯配率為710-6)DNA聚合酶的校對功能(錯配堿基被3-5外切酶切除)起始時以RNA為引物比較DDDP、DDRP、RDDP(已有)試述增強子、衰減子、啟動子和終止子答:(1).啟動子(promoter):RNA聚合酶識別、結(jié)合和開始轉(zhuǎn)錄的一段DNA序列,是RNA聚合酶起始轉(zhuǎn)錄需要
25、的輔助因子,屬順式作用元件.終止子(terminator):提供轉(zhuǎn)錄終止信號的RNA(DNA)序列.增強子Enhancer :指遠離轉(zhuǎn)錄起點,決定基因表達的時空特異性,增強啟動子轉(zhuǎn)錄活力的一段DNA序列。屬順式作用元件.衰減子 attenuator:操縱子前導(dǎo)區(qū)類似于終止子結(jié)構(gòu)的一段DNA序列.屬負調(diào)控元件5.比較轉(zhuǎn)錄和復(fù)制的異同點(已有)試述原核生物基因表達調(diào)控的特點答:(1).基因表達主要取決于環(huán)境因素的誘導(dǎo)及細胞對環(huán)境條件的適應(yīng).主要是轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控.操縱子是轉(zhuǎn)錄調(diào)控的主要形式負調(diào)控占主導(dǎo)對比:真核生物基因表達調(diào)控的特點:.能在特定時間和特定細胞中激活特定的基因多層次調(diào)控有瞬時調(diào)控和發(fā)育調(diào)控,后者為真核基因表達調(diào)控的精髓以正調(diào)控為主判斷對錯(只給正確答案)在同一操縱子中,結(jié)構(gòu)基因的表達差異主要取決于環(huán)境因素的誘導(dǎo)和細胞對環(huán)境條件的適應(yīng)2.閱讀框架:指mRNA中從起始密碼子AUG到終止密碼子之間的一段可翻譯的核苷酸序列,對應(yīng)的是一個蛋白質(zhì)的氨基酸序列3.正調(diào)控對基因表達具有開啟(kiq)和激活作用4.PCR擴增產(chǎn)物的特異性和長度(chngd)由引物決定5.從模板的使用情況(qngkung)看,轉(zhuǎn)錄是不對稱
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