煙草和煙草制品中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維、酸洗木質素的測定洗滌劑法(報批稿)

1、國家煙草專賣局 發(fā)布2010-實施2010-發(fā)布煙草及煙草制品 中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維、酸洗木質素的測定 洗滌劑法Tobacco and tobacco productsDetermination of neutral detergent fiber、acid detergent fiber and acid detergent ligninVan Soest methodYC/T YC中華人民共和國煙草行業(yè)標準ICS65.160X 87備案號：前 言本標準依據(jù)GB/T1.1和GB/T20001.4起草。請注意本文件的某些內容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構不承擔識別這些專利的責任。本標準由

2、國家煙草專賣局提出。本標準由全國煙草標準化技術委員會卷煙分技術委員會（SAC/TC144/SC1）歸口。 本標準起草單位：上海煙草（集團）公司、江蘇中煙工業(yè)有限責任公司。 本標準主要起草人：沈軼、佘永楨、楊斌、殷引、石懷彬、劉獻軍。煙草及煙草制品 中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維、酸洗木質素的測定 洗滌劑法范圍本標準規(guī)定了煙草及煙草制品中中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維、酸洗木質素含量的洗滌劑測定方法。本標準適用于各種煙草及煙草制品中中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維、酸洗木質素含量的測定。本方法測定煙草及煙草制品中中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維、酸洗木質素含量的檢測限和定量限見表1。表1 檢測限和定量限（以煙草及煙

3、草制品的干物質記） 單位為% 檢測限定量限中性洗滌纖維0.260.86酸性洗滌纖維0.170.57酸洗木質素0.170.572 規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。YC/T31 煙草及煙草制品 試樣的制備和水分測定 烘箱法3 術語和定義下列術語和定義適用于本標準。3.1 中性洗滌纖維（NDF） neutral detergent fiber用中性洗滌劑去除煙草及煙草制品中的糖類、脂肪、蛋白質等成分后，殘留的不溶解物質的總稱。3.2酸性洗滌纖維（ADF） acid

4、 detergent fiber用酸性洗滌劑去除煙草及煙草制品中的糖類、脂肪、蛋白質以及半纖維素等成分后，殘留的不溶解物質的總稱。3.3 酸洗木質素（ADL） acid detergent lignin用72硫酸溶液（質量分數(shù)）去除酸性洗滌纖維中的纖維素等成分后，殘留的不溶解物質的總稱。4 原理在對試驗樣品進行脫脂后，分別使用中性洗滌劑、酸性洗滌劑和72硫酸溶液去除樣品中的可溶性物質，經(jīng)干燥、灰化后，利用重量法得到中性洗滌纖維（NDF）、酸性洗滌纖維（ADF）和酸洗木質素（ADL）的含量。5 儀器和設備5.1 植物樣品粉碎機。5.2 試驗篩，孔徑0.42mm（40目）。5.3 分析天平，精確至

5、0.0001g。5.4 電熱恒溫箱。5.5 抽濾裝置：抽濾瓶和真空泵或水抽泵。5.6 pH計。5.7 纖維分析儀：配置石英過濾坩堝（G2）。5.8 馬弗爐。5.9 干燥器：無水氯化鈣或變色硅膠為干燥劑。5.10 脫脂裝置：配冷凝管的250mL圓底燒瓶。5.11 電加熱裝置：可調功率。6 試劑和材料所有試劑均為分析純級試劑，水為蒸餾水或同等純度的水。6.1 苯。6.2 乙醇。6.3 乙醚。6.4 十二烷基硫酸鈉（C12H25OSO3Na）。6.5 乙二胺四乙酸二鈉（C10H14N2O8Na22H2O，EDTA二鈉鹽）。6.6 四硼酸鈉（Na2B4O710H2O）。6.7 無水磷酸氫二鈉（Na2H

6、PO4）。6.8 乙二醇乙醚（C4H10O2）。6.9 正辛醇（C8H18O，消泡劑）。6.10 丙酮（CH3COCH3）。6.11 98濃硫酸（質量分數(shù)）。6.12 十六烷基三甲胺溴（C19H42BrN）。6.13 -高溫淀粉酶（活性50kU/g）6.14 石英砂。6.15 中性洗滌劑（3十二烷基硫酸鈉溶液）稱取約18.6g乙二胺四乙酸二鈉（6.5）和約6.8g四硼酸鈉（6.6），放入100mL燒杯中，加適量蒸餾水溶解（可加熱），再加入約30g十二烷基硫酸鈉（6.4）和10mL乙二醇乙醚（6.8）；稱取約4.65g 磷酸氫二鈉（6.7）置于另一燒杯中，加蒸餾水后加熱溶解，冷卻后將上述兩溶液轉

7、入1000mL容量瓶并用水定容至刻度。此溶液pH值應在6.97.1之間。6.16 酸性洗滌劑（2十六烷基三甲胺溴）用50mL量筒量取約27.2mL98濃硫酸（6.11），緩慢加入已裝有500mL蒸餾水的燒杯中，冷卻后轉移至1000mL容量瓶，使用水定容至刻度，配置成1.0mol/L硫酸(1/2H2SO4)溶液；稱取約20g十六烷基三甲胺溴（6.12）于1000ml燒杯中，加入配置好的1.0mol/L硫酸(1/2H2SO4)溶液，攪拌溶解，轉移至1000mL容量瓶，使用水定容至刻度。6.17 72硫酸溶液（質量分數(shù)）。7 測定步驟7.1 試樣的制備按YC/T31進行試樣的制備。7.2 測定7.2

8、.1 測定次數(shù)每個試樣應平行測定兩次。7.2.2 水分的測定按YC/T31進行試樣含水率的測定。7.2.3 試樣脫脂7.2.3.1 準確稱取約5g試樣（記作m1），置于250mL圓底燒瓶（5.10）中。向圓底燒瓶中依次加入 50mL苯（6.1）、50mL乙醇（6.2）和10mL乙醚（6.3）。將加入試劑后的圓底燒瓶中置于電加熱裝置上，在冷凝水開啟后，開始加熱。待沸騰后，調節(jié)電加熱裝置功率至維持其微沸狀態(tài)，保持4h。7.2.3.2 另取小燒杯和經(jīng)與試樣相同脫脂處理并經(jīng)丙酮沖洗后的濾紙置于烘箱中烘干至恒重，測定燒杯和濾紙的準確總質量，記作m2，放入干燥器（5.9）中備用。7.2.3.3 待加熱停止

9、后，將燒瓶靜置冷卻，轉移全部液體到濾紙上進行抽濾，并用丙酮(6.10)沖洗至濾出液無色，然后將濾紙和濾渣一起轉移到小燒杯中，放入烘箱中在（1052）條件下烘干至恒重。稱出其總質量（記作m3）。脫脂后的試樣應置于干燥器中。7.2.4 中性洗滌纖維的測定7.2.4.1 稱取約2g石英砂（6.14）放入石英過濾坩堝中，然后準確稱取約0.5g脫脂后試樣（7.2.3），記作m4，放置于石英砂上面。將盛有樣品的石英坩堝放置在纖維分析儀（5.7）的熱浸提單元上，在熱浸提單元中加入約100mL 中性洗滌劑（6.15）和25mg-高溫淀粉酶（6.13），并加入1.0mL正辛醇（6.9）作為消泡劑，快速加熱至沸，

10、并調整功率保持微沸狀態(tài)1h。7.2.4.2 加熱結束后，立即進行抽濾，并用（90100）水沖洗管壁和剩余物，直至濾出液無泡沫。7.2.4.3 將熱浸提后的試樣和坩堝放在纖維分析儀的冷浸提單元上，用丙酮(6.10)沖洗剩余物3次，確保剩余物與丙酮充分混和，至濾出液無色為止。7.2.4.4 抽干后將坩堝和剩余物放入（1052）烘箱中烘干34h至恒量。在干燥器中冷卻后稱量。再烘干30min，冷卻，稱量，直至兩次稱量之差小于0.002g。記錄坩堝和剩余物的總重為m5。7.2.4.5 將坩堝和剩余物置于馬弗爐中，在（51010）條件下灰化3h，于干燥器中冷卻后稱重，記作m6。7.2.5 酸性洗滌纖維的測

11、定7.2.5.1 稱取約2g石英砂（6.14）放入石英過濾坩堝中，然后準確稱取約0.5g脫脂后的試樣（7.2.3），記作m7，放置于石英砂上面，將盛有樣品的石英坩堝放置在纖維分析儀的熱浸提單元上，在熱浸提單元中加入約100mL 酸性洗滌劑（6.16），并加入1.0mL正辛醇（6.9）作為消泡劑，快速加熱至沸，并調整功率保持微沸狀態(tài)1h。7.2.5.2 加熱結束后，立即進行抽濾，并用（90100）水沖洗管壁和剩余物，直至濾出液無泡沫。7.2.5.3 將熱浸提后的試樣和坩堝放在纖維分析儀的冷浸提單元上，用丙酮(6.10)沖洗剩余物3次，確保剩余物與丙酮充分混和，至濾出液無色為止。7.2.5.4 抽

12、干后將坩堝和剩余物放入（1052）烘箱中烘干34h至恒量，在干燥器中冷卻后稱量。再烘干30min，冷卻，稱量，直至兩次稱量之差小于0.002g。記錄坩堝和剩余物的總重為m8。7.2.5.5 將坩堝和剩余物置于馬弗爐中，在（51010）條件下灰化3h，于干燥器中冷卻后稱重，記作m9。7.2.6 酸洗木質素的測定7.2.6.1 稱取約2g石英砂（6.14）放入石英過濾坩堝中，然后準確稱取約0.5g脫脂后的試樣（7.2.3），記作m10，放置于石英砂上面，將盛有樣品的石英坩堝放置在纖維分析儀的熱浸提單元上，在熱浸提單元中加入約100mL 酸性洗滌劑（6.16），并加入1.0mL正辛醇（6.9）作為消

13、泡劑，快速加熱至沸，并調整功率保持微沸狀態(tài)1h。7.2.6.2 加熱結束后，立即進行抽濾，并用（90100）水沖洗管壁和剩余物，直至濾出液無泡沫。7.2.6.3 將熱浸提后的試樣和坩堝放在纖維分析儀的冷浸提單元上，用丙酮(6.10)沖洗剩余物3次，確保剩余物與丙酮充分混和，至濾出液無色為止。7.2.6.4 抽干后在每個坩堝內放置一玻棒，加入25mL 72硫酸（6.17），并不時攪拌，3小時后過濾。過濾后用熱水（90100）沖洗，直至濾出液無酸性為止。7.2.6.5 將坩堝和剩余物放入（1052）烘箱中烘干34h至恒量，在干燥器中冷卻后稱量。再烘干30min，冷卻，稱量，直至兩次稱量之差小于0.

14、002g。記錄坩堝和剩余物的總重為m11。7.2.6.6 將坩堝和剩余物置于馬弗爐中，在（51010）條件下灰化3h，于干燥器中冷卻后稱重，記作m12。8 結果的計算與表述8.1 樣品脫脂剩余率樣品脫脂剩余率可按式（1）計算得出： （1）式中： 樣品脫脂剩余率。8.2以干基計的中性洗滌纖維（NDF）含量以干基計的中性洗滌纖維（NDF）含量可按式（2）計算得出： （2）式中：NDF樣品的中性洗滌纖維含量，單位為質量百分數(shù)（）； 樣品脫脂剩余率；W樣品含水率，單位為質量百分數(shù)（%）。8.3以干基計的酸性洗滌纖維（ADF）含量以干基計的酸性洗滌纖維（ADF）含量可按式（3）計算得出： （3）式中：A

15、DF樣品的酸性洗滌纖維含量，單位為質量百分數(shù)（）； 樣品脫脂剩余率；W樣品含水率，單位為質量百分數(shù)（%）。8.4以干基計的酸洗木質素（ADL）含量以干基計的酸洗木質素（ADL）含量可按式（4）計算得出： （4）式中：ADL樣品的酸洗木質素含量，單位為質量百分數(shù)（）； 樣品脫脂剩余率；W樣品含水率，單位為質量百分數(shù)（%）。8.5 結果的表述樣品中中性洗滌纖維（NDF）、酸性洗滌纖維（ADF）、酸洗木質素（ADL）含量大于或等于10時，兩次平行測定結果的相對偏差應不大于5；樣品中中性洗滌纖維（NDF）、酸性洗滌纖維（ADF）、酸洗木質素（ADL）含量小于10時，兩次平行測定結果的相對偏差應不大于10。結果以兩次平行測定的平均值表示，精確至0.01。9 回收率和檢出率樣品中加入微晶纖維素標準品后的回收率、檢出率測試結果如表2所示。表2 樣品回收率、檢出率測試結果 單位為樣品名稱NDF加入纖維素量測定值回收率ADF加入纖維素量測定值回收率ADL加入纖維素量測定值檢出率空白樣品0.00100.0096.9996.990.00100.0099.8999.890.00100.000.010.01樣品一24.098.3931.5889.