正交投影鑒別決明子色譜指紋圖譜峰純度

1、正交投影區(qū)分決明子色譜指紋圖譜峰純度方洪壯沈德鳳任淑清【關(guān)鍵詞】正交摘要：應(yīng)用正交投影法對色譜指紋圖譜的峰舉行區(qū)分。用比較組分光譜與目的色譜峰前后的零濃度區(qū)光譜構(gòu)建正交投影陣，對目的色譜峰的光譜舉行投影，以投影前后光譜的夾角余弦作為判據(jù)來區(qū)分目的色譜峰的峰純度。對決明子藥材色譜指紋圖譜的峰純度區(qū)分，識別出大黃素、大黃素甲醚及大黃酚三個純色譜峰。正交投影區(qū)分色譜指紋圖譜峰的純度要領(lǐng)效果可靠，配景的滋擾可消除。關(guān)鍵詞：正交投影；色譜指紋圖譜；色譜峰純度；決明子正確識別色譜峰的純度是色譜的定性和定量闡發(fā)的條件。由于中藥的化學(xué)身分多為次生代謝產(chǎn)物，互相間的化學(xué)布局不同很孝理化性子近似，其色譜峰在色譜指

2、紋圖譜上不成制止有重疊，正確鑒別色譜峰純度更顯緊張。區(qū)分色譜指紋圖譜色譜峰的純度、確認(rèn)色譜峰不但增長指紋圖譜的信息量，并且有助于對中藥的深化研究。色譜峰純度的定性可歸結(jié)為儀器要領(lǐng)和化學(xué)計量學(xué)要領(lǐng)1，此中后一要領(lǐng)又是前一要領(lǐng)的基矗本研究按照正交投影的原理和多組分色譜相干光譜的要領(lǐng)2，3，應(yīng)用正交投影法對中藥決明子藥材的色譜指紋圖譜中的色譜峰舉行了純度區(qū)分，識別出三種蒽醌類身分的純色譜峰。實行效果表現(xiàn)，所提出的要領(lǐng)效果可靠，有必然的有用代價。1要領(lǐng)原理設(shè)X為接納聯(lián)用色譜測得的中藥色譜指紋圖譜的N階二維數(shù)據(jù)矩陣,它們的行標(biāo)的目的表征了色譜的流出信息個流出時間點,列標(biāo)的目的表征了光譜信息N個汲取波長；

3、用Xa表現(xiàn)X中的待區(qū)分的目的組分色譜峰的N階二維數(shù)據(jù)矩陣，思量到儀器的配景，可把矩陣Xa分成兩個部門，即：XaXbX(1)X表現(xiàn)來自目的組分的重要信息，而Xb那么表現(xiàn)來自儀器的配景。在目的色譜峰前后的零濃度區(qū)內(nèi)別離各拔取一點s目的色譜峰前與e目的色譜峰后，以此兩點的光譜矢量Bs和Be及比較組分的光譜失量B，構(gòu)成光譜矩陣A：A=Bs,Be,B(2)并布局正交投影陣：IAA+(3)此中,I為單元矩陣，A+為A的廣義逆陣。用矩陣對X沿色譜標(biāo)的目的的每一光譜矢量xj舉行投影運(yùn)算：xj*xj(4)xj表現(xiàn)X的第j條光譜,xj*表現(xiàn)xj投影后的剩余光譜。為消除不等性噪聲4的影響，令投影后所得的剩余光譜xj

4、*與投影前的原始光譜xj的夾角余弦為rj，即：rj=xj*xjT/(xj*xjT)JY(5)并以rj作為區(qū)分色譜峰純度的判據(jù)3。由于扣除了xj與A相干的光譜信息，xj*保存了xj與A不相干的光譜信息，以是，rj值越小,即經(jīng)投影所得的剩余光譜xj*與投影前的原始光譜xj的夾角越大，說明xj*保存xj的光譜信息越少，xj與A相干性越大；反之rj值越大,說明xj*保存xj的光譜信息越多,xj與A的光譜相干性越校當(dāng)rj值即是0時,xj*與xj完全正交,完全扣除了xj與A相干的光譜信息,xj*完全只剩下隨機(jī)噪聲。以投影矩陣對指紋圖譜X中的目的色譜峰X的每一列光譜舉行投影，可得沿色譜標(biāo)的目的的光譜殘差夾角

5、余弦曲線，假設(shè)該曲線目的色譜峰時間范疇的rj值為零或靠近于零，那么說明它所對應(yīng)的目的色譜峰為一與比較組分雷同的單一物質(zhì)峰，不然，目的色譜峰為一重疊峰。2實行部門21儀器與試劑HP1100高效液相色譜儀，包羅Agilent1100四元泵，HP1100二極管陣列檢測器，HP色譜化學(xué)事情站。決明子藥材河北；大黃素、大黃素甲醚、大黃酚比較品均購自中國藥品生物成品檢定所。乙腈、甲醇為色譜純，鹽酸、磷酸及氯仿為闡發(fā)純。22樣品制備221比較品溶液稱取大黃素、大黃素甲醚、大黃酚比較品適量，以甲醇為溶劑，配制成200g/l的大黃素、大黃素甲醚、大黃酚三種身分的混淆比較品溶液。222供試品溶液取決明子樣品，破壞

6、，過80目篩，稱取2g，加1.5l/L的鹽酸溶液30l，加熱回流1.5h，放冷，加氯仿25l，回流20in,取出，分取氯仿層，酸水層再加氯仿25l，回流20in，分取氯仿層，同上法操縱，加氯仿再回流提取2次，歸并4次氯仿提取液，加水20l振搖洗脫，棄去水層，將氯仿液蒸干，殘渣加甲醇微熱使溶解，定量轉(zhuǎn)移10l量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻。安排，取上清液經(jīng)0.45微孔濾膜過濾。23色譜條件色譜柱：HypersilDS(4.0250,5),庇護(hù)柱：Sienhe18柱(3.020,5)；活動相：乙腈A-0.1%磷酸水溶液(B)作梯度洗脫，0in，5%A-95%B；10in，15%A-85%B；20in，

7、35%A-65%B；55in，70%A-30%B；56in后100%A；流速：1.0l/in；柱溫：室溫；檢測波長：278n；參比波長：340n；光譜數(shù)據(jù)記載范疇：220500n，波長隔斷2n；進(jìn)樣量：10l。24目的峰確定取決明子供試品溶液按選定色譜條件測定,記載其色譜圖，效果見圖1。另取大黃素、大黃素甲醚、大黃酚比較品混淆溶液同法測定。比力比較品與決明子圖譜，并使用色譜事情站峰判斷成效，開端確定圖1中的8、9、10號峰別離為大黃素、大黃酚、大黃素甲醚目的峰。25色譜峰純度區(qū)分別離于大黃素、大黃素甲醚、大黃酚比較品混淆溶液的各色譜峰處網(wǎng)羅色譜光譜二維數(shù)據(jù)，并在供試品溶液色譜8，9，10號峰前

8、后的零組分區(qū)網(wǎng)羅色譜光譜二維數(shù)據(jù)，按3式別離布局各比較品的正交投影陣，以投影矩陣對指紋圖譜中相對應(yīng)的圖譜片斷的每一列光譜舉行投影，并按5式盤算目的色譜峰的光譜正交投影前后光譜失量的夾角余弦。由盤算效果可知圖1中的8、9、10號峰別離為大黃素、大黃酚、大黃素甲醚的色譜純峰。3效果與討論31目的色譜峰的配景的影響試驗中創(chuàng)造目的色譜峰的峰前與色譜峰后的二維數(shù)據(jù)配景對色譜峰純度的區(qū)分均有影響，對付色譜指紋圖譜中的大黃素、大黃酚、大黃素甲醚峰純度的區(qū)分，如光譜矩陣A中不包羅Bs和Be，即不思量對配景舉行扣除，均難以得到確定的效果。以10號峰大黃素甲醚為例，正交投影前后光譜失量的夾角余弦曲線圖圖2表白，對配景滋擾舉行扣除后可正確地識別。這是由于中藥身分的龐大性及色譜的流出時間較長，在中藥色譜指紋圖譜的測定中不成制止地存在著儀器的配景，如不舉行二維數(shù)據(jù)的配景扣除，必將對色譜峰純度產(chǎn)生誤判。32不等性噪聲影響實行表白，對目的色譜峰的光譜舉行投影后，得到的剩余光譜并非為零或靠近于零，而剩余光譜與投影前的光譜余弦值近似為零。圖3為在相應(yīng)色譜保存時間內(nèi)的大黃素甲醚剩余光譜模的曲線及相應(yīng)的剩余光譜與投影前的光譜余弦值曲線，從圖3中可知，兩者相差很大。實行所區(qū)分的大黃素與大黃酚的盤算出現(xiàn)了雷同的效果。這是由于，當(dāng)無滋擾存在時，假設(shè)指紋圖譜X中目的色譜峰與比較組分為同