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1、第七章 細(xì)菌感染的檢查方法與防治原則2021/7/18 星期日一、細(xì)菌感染的診斷標(biāo)本的采集和處理原則細(xì)菌的形態(tài)學(xué)檢查細(xì)菌的分離培養(yǎng)和生化鑒定細(xì)菌的非培養(yǎng)檢測(cè)方法檢測(cè)方法2021/7/18 星期日病原菌的檢驗(yàn)程序藥物敏感試驗(yàn)標(biāo)本直接涂片檢查分離培養(yǎng)生化試驗(yàn)血清學(xué)試驗(yàn)動(dòng)物試驗(yàn)初步診斷分子生物學(xué)技術(shù)其他檢測(cè)技術(shù)明確診斷2021/7/18 星期日1、標(biāo)本的采集和處理原則 標(biāo)本采集的一般原則 標(biāo)本的處理When? What? How?何時(shí)取,取什么,怎么??? 如何保持細(xì)菌的活性2021/7/18 星期日When?盡早采集: 在發(fā)病的早期或急性期采集標(biāo)本 最好在抗生素使用前(如使用過抗生素應(yīng)在申請(qǐng)單上注明
2、)。選擇不同采集時(shí)機(jī)和標(biāo)本種類:不同病程致病菌在體內(nèi)分布和排出部位不同。2021/7/18 星期日What ? 根據(jù)病史與臨床表現(xiàn)確定標(biāo)本采集的類型與部位,盡量采集病變明顯部位標(biāo)本。食物中毒 : 可疑食物, 嘔吐物, 糞便 痢疾:膿血便 敗血癥: 血 化膿感染的病灶2021/7/18 星期日How ?無(wú)菌采集。 無(wú)菌標(biāo)本:腦脊液、血液、穿刺液等。 有菌標(biāo)本: 無(wú)菌容器根據(jù)目的菌的特性,采用不同的方法采集,以保證目的菌的活性。 (需氧菌、厭氧菌、兼性厭氧菌、L型細(xì)菌)安全采集污染:環(huán)境,正常菌群2021/7/18 星期日上呼吸道標(biāo)本采集標(biāo)本:鼻拭子、咽拭子上呼吸道存在正常菌群,在采集標(biāo)本與結(jié)果分
3、析時(shí)應(yīng)予考慮。直接涂片檢查;分離培養(yǎng)。2021/7/18 星期日標(biāo)本:痰液、支氣管灌洗液等。采集時(shí)間:晨痰,且在取痰前用清水反復(fù)漱口。方法:(1)自然咳痰法:(2)氣管鏡下采集法;(3)氣管穿刺法。 下呼吸道標(biāo)本采集直接涂片檢查;分離培養(yǎng)。2021/7/18 星期日1.對(duì)環(huán)境敏感的細(xì)菌如腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌和流感嗜血桿菌等應(yīng)保溫并立即送檢。2.其他所有的標(biāo)本采集后最好在2h之內(nèi)送檢。3.用于細(xì)菌培養(yǎng)的標(biāo)本保存時(shí)間不應(yīng)超過24h。4.若不能及時(shí)送檢,標(biāo)本應(yīng)置于4保存。5.送檢過程中要采取適當(dāng)?shù)谋4娣绞剑⒁夥雷o(hù)。標(biāo)本的處理時(shí)間?保存?保持細(xì)菌的活性2021/7/18 星期日1早期采集,不同病
4、程不同標(biāo)本。2無(wú)菌采集3采集病變明顯部位的新鮮標(biāo)本。4根據(jù)目的菌的特性用不同的方法采集5. 采集適量標(biāo)本。6. 安全采集。7. 及時(shí)送檢,注意保溫。標(biāo)本采集和處理的一般原則安全、有效地采集到可能存在的病原菌,并保持其活性。2021/7/18 星期日2、細(xì)菌形態(tài)學(xué)檢查觀察細(xì)菌形態(tài)、排列、結(jié)構(gòu)和染色性。有助于對(duì)病原菌的初步識(shí)別,對(duì)臨床早期診斷和治療有一定的參考意義。了解有無(wú)細(xì)菌及大致的菌量。2021/7/18 星期日形態(tài)學(xué)檢查方法 不染色法:懸滴法 壓片法 染色法:革蘭染色法, 抗酸染色法。2021/7/18 星期日細(xì)菌不經(jīng)染色直接鏡檢,主要用于檢查生活狀態(tài)下細(xì)菌的動(dòng)力及運(yùn)動(dòng)狀況。初步鑒定細(xì)菌。常
5、用的方法:壓滴法和懸滴法。 不染色標(biāo)本2021/7/18 星期日單染色法:只能觀察微生物的大小、形狀和細(xì)胞排列狀況,但不能鑒別微生物以及其特殊構(gòu)造等。復(fù)染色法:用兩種或兩種以上染色液進(jìn)行染色,有協(xié)助鑒別微生物的作用,故也稱鑒別染色法。 常用的有:革蘭氏染色法、抗酸染色法、熒光染色等。常用的染色方法2021/7/18 星期日1. 革蘭染色(gram stain) G+球菌 G-桿菌丹麥C.Gram于1884年創(chuàng)建,用于細(xì)菌分類學(xué)研究2021/7/18 星期日革蘭染色的意義初步識(shí)別和鑒定細(xì)菌。為抗菌藥物的選擇提供參考。了解病原菌的致病性。2021/7/18 星期日 3、細(xì)菌的分離培養(yǎng)和鑒定 培養(yǎng)基
6、的種類和選擇 細(xì)菌分離及培養(yǎng)的方法 細(xì)菌生化反應(yīng)和鑒定2021/7/18 星期日4、細(xì)菌的非培養(yǎng)檢測(cè)方法免疫學(xué)檢測(cè)分子生物學(xué)檢測(cè) 細(xì)菌毒素的檢測(cè) 動(dòng)物實(shí)驗(yàn) 2021/7/18 星期日 免疫學(xué)檢測(cè)基本原理 依據(jù)抗原抗體特異性結(jié)合的原理, 用已知的抗原檢測(cè)未知的抗體 或用已知的抗體,檢測(cè)未知的抗原。細(xì)菌抗原的檢測(cè)體內(nèi)抗體的檢測(cè)快速,簡(jiǎn)單、敏感,特異性強(qiáng)。2021/7/18 星期日二、細(xì)菌感染的特異性預(yù)防2021/7/18 星期日獲得性免疫產(chǎn)生的方式主動(dòng)免疫 自然免疫 患病、隱性感染 人工免疫 疫苗、類毒素 被動(dòng)免疫 自然免疫 胎盤、初乳 人工免疫 抗毒素、丙球2021/7/18 星期日人工免疫采用
7、人工方法將疫苗、類毒素等或含有某種特異性抗體、細(xì)胞免疫制劑等接種于人體,以增強(qiáng)宿主的抗病能力。生物制品:人工免疫的免疫原、免疫血清、細(xì)胞制劑及診斷 制劑的生物性制劑。2021/7/18 星期日 將疫苗或類毒素接種于人體,使機(jī)體產(chǎn)生獲得性免疫力的一種防治微生物感染的措施。作用:特異性預(yù)防,人工主動(dòng)免疫artificial active immunity2021/7/18 星期日用于人工主動(dòng)免疫的生物制品死疫苗活疫苗類毒素亞單位疫苗核酸疫苗2021/7/18 星期日區(qū)別點(diǎn)死疫苗活疫苗制劑特點(diǎn)死,強(qiáng)毒株活減毒株接種劑量與特點(diǎn)量較大,23次量較小,1次保存及有效期易保存,約1年不易保存免疫效果較低,維
8、持?jǐn)?shù)月2年較高,維持35年甚至更長(zhǎng)死疫苗與活疫苗的比較2021/7/18 星期日人工被動(dòng)免疫artificial passive immunity 注射含有特異性抗體的免疫血清或純化免疫球蛋白抗體,或細(xì)胞因子等免疫制劑,使機(jī)體即刻獲得特異性免疫。 作用:治療,緊急預(yù)防2021/7/18 星期日抗毒素用于人工被動(dòng)免疫的生物制品丙種球蛋白(麻疹、甲肝、脊髓灰質(zhì)炎)2021/7/18 星期日區(qū)別要點(diǎn)人工主動(dòng)免疫人工被動(dòng)免疫免疫物質(zhì)抗原抗體或細(xì)胞因子等免疫出現(xiàn)時(shí)間慢,24周快,立即免疫維持時(shí)間長(zhǎng),數(shù)年數(shù)月短,23周主要用途預(yù)防治療或緊急預(yù)防人工主動(dòng)免疫與人工被動(dòng)免疫的比較2021/7/18 星期日小 結(jié)細(xì)菌的致病機(jī)制 細(xì)菌的致病的物質(zhì)基礎(chǔ)宿主的免疫防御機(jī)制(詳見免疫學(xué)) 感染的類型醫(yī)院感染細(xì)菌感染的診斷 標(biāo)本的采集和處理原則人工免疫的方法
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