不同給藥方法對(duì)線蟲(chóng)藥物吸收效率的影響

1、不同給藥方法對(duì)線蟲(chóng)藥物吸收效率的影響DrugAbsorptionEfficiencyinCaenorhbditiselegansDeliveredbyDifferentMethodsShan-QingZhenglr2jAi-JunDing12,Guo-PingU3TGui-ShengWu4rHuai-RcngLuq1SldteKeyLaburdi-i口ryofPhyiochemistiy日ndPtmlinWesIQirid,.KurrningIratilLrleerfhinew;AcademyerfSdenc口Kuirning.Yu.rn.ai,Qiino.UnkefsityChlnweAca

2、demyof$dencffis曬町gChina.3Thekejrlaboratoryoftenaiilcs;BefjhgHosptai&e&JmgInEfltuceflfGeriJirtcSiWirst7ofH&alih,Bejing.CMnaKeyLatxifaic*yofAnimalModels,and)HumanDseasjeMechantsms;ChineseAcatiennofSciences弘vunnanProvinceKuuvnmgInsirtuceo*Zoology,Kinming.YunnaixChrna秀麗隱桿線蟲(chóng)在許多研究領(lǐng)域被大量用作的模型生物，并經(jīng)常伴隨著不同的給藥方

3、式將藥物傳遞給線蟲(chóng)的方法因研究的不同而不同，因此很難比較研究結(jié)果。研究者用五種常用的低水溶性白藜蘆醇和水溶性5-氟-2-脫氧尿苷(FUDR)為陽(yáng)性化合物對(duì)線蟲(chóng)的藥物吸收效率進(jìn)行了評(píng)價(jià)。白藜蘆醇和FUDR在線蟲(chóng)體內(nèi)的濃度逐漸增加，在12小時(shí)至一天內(nèi)達(dá)到最高，然后緩慢下降。同時(shí)，藥物濃度越高，代謝率越高。在同一時(shí)間點(diǎn)，喂食死菌的線蟲(chóng)體內(nèi)的藥物濃度高于活菌。結(jié)果表明，活菌培養(yǎng)基中的藥物濃度比死菌培養(yǎng)基中的藥物濃度下降快得多，在12小時(shí)內(nèi)達(dá)到原來(lái)濃度的一半左右。結(jié)論：低水溶性白藜蘆醇與水溶性FUDR具有相同的吸收代謝模式。線蟲(chóng)的藥物代謝率與劑量和時(shí)間有關(guān)。NGMdeadmethod和liquidgro

4、wingmethod在線蟲(chóng)中達(dá)到了最佳的吸收效率。線蟲(chóng)體內(nèi)的藥物濃度與小鼠相當(dāng)，為從線蟲(chóng)到哺乳動(dòng)物的劑量轉(zhuǎn)化提供了一座橋梁。分別是：LBmediummethod:將白藜蘆醇原液用含有OP5O大腸桿菌的LB液體培養(yǎng)基稀釋成最終濃度為100uM，1.5mL的菌液涂布在100mmNGM板。(最常用的！)NGMlivemethod：白藜蘆醇原液用NGM(滅菌后低于65C)稀釋至100uM的濃度，然后將NGM倒入空培養(yǎng)皿中作為線蟲(chóng)的載體，并將活OP50涂布在NGM板的表面(65C30min)。NGMdeadmethod：白藜蘆醇原液用NGM（滅菌后低于65C）稀釋至100uM的濃度，然后將NGM倒入空培

5、養(yǎng)皿中作為線蟲(chóng)的載體，并將死菌OP50涂布在NGM板的表面（65C30min）。（4）spotdeadmethod:在NGM平板表面涂1.5mL的100uM白藜蘆醇，然后覆蓋死菌。（5）liquidgrowingmethod：同期化N2成蟲(chóng)設(shè)為第1天，在含有35mLS培養(yǎng)基的50mL離心管中培養(yǎng)，白藜蘆醇在S培養(yǎng)基中的濃度為100uM，死菌加入S培養(yǎng)基中作為食物。五種處理方法中FUDR的最終濃度為50uM。這里就是已經(jīng)概況絕大部分，下面是細(xì)節(jié)。不看也無(wú)所謂，看了又收費(fèi)。文章題目已經(jīng)有了，可以自己下載羅懷榮教授的文章。高效液相色譜法測(cè)定線蟲(chóng)體內(nèi)白藜蘆醇和FUDR濃度的驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)白藜蘆醇和FUDR的

6、保留時(shí)間分別為7.2和5.2分鐘（圖略）。接著做了，線蟲(chóng)體內(nèi)高效液相色譜法檢測(cè)白藜蘆醇和FUDR的重復(fù)性和穩(wěn)定性，白藜蘆醇和FUDR的HPLC檢測(cè)精度研究（圖略）。說(shuō)明方法可行性。（簡(jiǎn)單的說(shuō)就是，按上述五種方法給藥，然后線蟲(chóng)冷M9沖洗三次，收集，風(fēng)干，稱(chēng)重，重懸，超聲破碎，離心取上清，0.45um過(guò)濾，上樣、檢測(cè)。）藥物吸收效率的五種給藥方法用五種給藥方法，分別在10分鐘、30分鐘、1小時(shí)、3小時(shí)、6小時(shí)、12小時(shí)、第1天、第2天、第4天、第7天、第14天和第20天的時(shí)間點(diǎn)檢測(cè)了給藥線蟲(chóng)中白藜蘆醇和FUDR的濃度。白藜蘆醇和FUDR在線蟲(chóng)中的濃度隨著時(shí)間的推移而穩(wěn)步積累，并在第一天達(dá)到最高，然

7、后逐漸下降。（這里應(yīng)該不存在所謂的轉(zhuǎn)板情況，沒(méi)看到）在整個(gè)處理過(guò)程中，白藜蘆醇和FUDR在線蟲(chóng)中的吸收率從高到低依次為NGMdeadliquidgrowingspotdeadtheNGMliveLBmediummethod因此，線蟲(chóng)的最佳吸收效率是NGMdeadoODDOOOOD7CJ佛504CIA020L010min30minIhr3hr6hr12hrday1jy2day4d：jy7ky14day20CiiLturiBETimeNGMdeadmethod*LiquidgrowingmethodSpDtdeadmethodNGMlivemelhodTJBmediummethod010minJ|

8、byfivedeliveringmethods(LLg/gl.TheconcerttrauionofdiugsinivormsivaspresEfiitedasjig/g.ThefigurBshovi&dtheavengeoftfrireerepeatedexperimentsforeachmethod.ThedetJsofdasasummarizedInTable-SiandS2.1NGMdeadmethod-LiquidgrowingmethodSpSdeadmethodNGMlivemethodI.Bmediunimethod為了探討吸收效率與藥物劑量的關(guān)系，用藥物50、100、150u

9、m三個(gè)濃度，給藥7天后，比較了NGMdead和liquidgrowing的吸收效率。白藜蘆醇和FUDR在線蟲(chóng)中的代謝為了測(cè)定線蟲(chóng)體內(nèi)白藜蘆醇和FUDR的代謝，白藜蘆醇和FUDR的濃度從400um到12.5um不等，給藥6小時(shí)，在多個(gè)時(shí)間點(diǎn)測(cè)定。相鄰時(shí)間間隔之間的斜率表示代謝速率。白藜蘆醇和FUDR具有相同的代謝物模式。隨著時(shí)間的推移，代謝速率逐漸增加，在812小時(shí)的時(shí)間間隔內(nèi)達(dá)到最高，且隨著降低給藥濃度降低而降低。oooooooWOOOOOQDOK5-296307418520-634443333222HIM/S=rSlIUOUII二OUEK器H亠200pM100pMTOpM25pM12.5nM

10、Ihr2hrJhT4hr6hr$hr12hr16hrTimeIhr2hr3hr4hr6hrhr12lir16hrTime-400pM*200pMIOOiM50pM-25mM12.5代謝率一般為劑量應(yīng)答，較高濃度的藥物在同一時(shí)間間隔內(nèi)具有較高的代謝率?；畹拇竽c桿菌OP50降低了LBmediummethod和theNGMlive的總藥物濃度。研究者懷疑活的OP50大腸桿菌會(huì)代謝藥物，降低培養(yǎng)基中的總藥物濃度，為了驗(yàn)證這個(gè)假設(shè)，研究者測(cè)定了白藜蘆醇和FUDR在LBmediummethod、NGMlivemethod、NGMdeadmethod的濃度。隨著時(shí)間的推移，含有死菌的培養(yǎng)基中的藥物濃度緩慢降

11、解。然而，與活菌孵育12小時(shí)的培養(yǎng)基中藥物濃度僅為原濃度的一半?；罹囵B(yǎng)基中的藥物濃度比死菌下降快得多。以上結(jié)果表明，活菌可以代謝藥物，降低線蟲(chóng)對(duì)藥物吸收率。一一一-O5050502211m)l=PRUJJ-IT1J1.K雷+-NCMdeadmethodNGMhvenifilifidLBniediummetlxidr1fOJhr1hr3hr6hrCulturinglime12hr42086-1-1?=r.=E啟p豈u啟一工NGM血adnielliud-NGMliveinutliodLBmediuiumethod0.5lu11m3血6hr12luCulluiinuTitiu?結(jié)論：HPLC法測(cè)定線蟲(chóng)體內(nèi)藥物的濃度是有效的。白藜蘆醇和FUDR用NGMdeadmethod和liquidgrowingmethod對(duì)線蟲(chóng)的吸收效率最好。spotdeadmethod能以較少的總藥物量達(dá)到相當(dāng)大的吸收效率?；罹軌蛳糠炙幬?，導(dǎo)致藥物吸收效率降低。低水溶性白藜蘆醇和水溶性FUDR在線蟲(chóng)中具有相同的鐘形積累模式和相同的代謝模式。線蟲(chóng)體內(nèi)的藥物濃度與小鼠相當(dāng)，為從線蟲(chóng)到哺乳動(dòng)物的劑量轉(zhuǎn)換提供了橋梁。（我也不知道從哪里的出來(lái)的結(jié)論）這份結(jié)果可能有助于研究者根據(jù)藥理學(xué)動(dòng)力學(xué)選擇合適的線蟲(chóng)給藥的方法，以及理解研究之間的一些