定性定量方法

1、第八章色譜分析基礎(chǔ)5.3.1 色譜定性分析5.3.2 色譜定量分析第三節(jié)色譜定性與定量分析Fundamental of chromatograph analysis Qualitative and quantitative analysis in chromatograph2022/7/295.3.1 色譜定性鑒定方法1.利用純物質(zhì)定性的方法 利用保留值定性：通過對比試樣中具有與純物質(zhì)相同保留值的色譜峰，來確定試樣中是否含有該物質(zhì)及在色譜圖中的位置。不適用于不同儀器上獲得的數(shù)據(jù)之間的對比。 利用加入法定性：將純物質(zhì)加入到試樣中，觀察各組分色譜峰的相對變化。2022/7/29 2.利用文獻(xiàn)保留值

2、定性 利用相對保留值r21定性 相對保留值r21僅與柱溫和固定液性質(zhì)有關(guān)。在色譜手冊中都列有各種物質(zhì)在不同固定液上的保留數(shù)據(jù)，可以用來進(jìn)行定性鑒定。2022/7/293.保留指數(shù) 又稱Kovats指數(shù)()，是一種重現(xiàn)性較好的定性參數(shù)。測定方法： 將正構(gòu)烷烴作為標(biāo)準(zhǔn)，規(guī)定其保留指數(shù)為分子中碳原子個數(shù)乘以100（如正己烷的保留指數(shù)為600）。 其它物質(zhì)的保留指數(shù)（IX）是通過選定兩個相鄰的正構(gòu)烷烴，其分別具有Z和Z1個碳原子。被測物質(zhì)X的調(diào)整保留時間應(yīng)在相鄰兩個正構(gòu)烷烴的調(diào)整保留值之間如圖所示：2022/7/29保留指數(shù)計算方法2022/7/294.與其他分析儀器聯(lián)用的定性方法 小型化的臺式色質(zhì)譜

3、聯(lián)用儀（GC-MS；LC-MS） 色譜-紅外光譜儀聯(lián)用儀； 組分的結(jié)構(gòu)鑒定SampleSample58901.0 DEG/MINHEWLETTPACKARDHEWLETTPACKARD5972AMass Selective DetectorDCBAABCDGas Chromatograph (GC)Mass Spectrometer (MS)SeparationIdentificationBACD2022/7/295.3.2 色譜定量分析方法1. 峰面積的測量 （1）峰高（h）乘半峰寬（Y 1/2）法：近似將色譜峰當(dāng)作等腰三角形。此法算出的面積是實際峰面積的0.94倍： A = 1.064 h

4、Y1/2 （2）峰高乘平均峰寬法：當(dāng)峰形不對稱時，可在峰高0.15和0.85處分別測定峰寬，由下式計算峰面積： A = h（Y 0.15 + Y 0.85 ）/ 2 （3）峰高乘保留時間法：在一定操作條件下，同系物的半峰寬與保留時間成正比，對于難于測量半峰寬的窄峰、重疊峰（未完全重疊），可用此法測定峰面積： A = hbtR （4）自動積分和微機(jī)處理法2022/7/292. 定量校正因子 試樣中各組分質(zhì)量與其色譜峰面積成正比，即： m i = fi Ai 絕對校正因子：比例系數(shù)fi ，單位面積對應(yīng)的物質(zhì)量： f i =m i / Ai 定量校正因子與檢測器響應(yīng)值成倒數(shù)關(guān)系： f i = 1 /

5、 Si 相對校正因子fi ：即組分的絕對校正因子與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的絕對校正因子之比。 當(dāng)mi、mS以摩爾為單位時，所得相對校正因子稱為相對摩爾校正因子（f M）,用表示；當(dāng)mi、mS用質(zhì)量單位時, 以（f W）,表示。2022/7/293.常用的幾種定量方法 （1）歸一化法 特點及要求： 歸一化法簡便、準(zhǔn)確；進(jìn)樣量的準(zhǔn)確性和操作條件的變動對測定結(jié)果影響不大；僅適用于試樣中所有組分全出峰的情況。2022/7/29 （2）外標(biāo)法外標(biāo)法也稱為標(biāo)準(zhǔn)曲線法。特點及要求： 外標(biāo)法不使用校正因子，準(zhǔn)確性較高， 操作條件變化對結(jié)果準(zhǔn)確性影響較大。 對進(jìn)樣量的準(zhǔn)確性控制要求較高，適用于大批量試樣的快速分析。2022/7/29（3）內(nèi)標(biāo)法內(nèi)標(biāo)物要滿足以下要求： （a）試樣中不含有該物質(zhì)；（b）與被測組分性質(zhì)比較接近；（c）不與試樣發(fā)生化學(xué)反應(yīng)；（d）出峰位置應(yīng)位于被測組分附近。試樣配制： 準(zhǔn)確稱取一定量的試樣W，加入一定量內(nèi)標(biāo)物mS2022/7/29內(nèi)標(biāo)法計算式：試樣配制： 準(zhǔn)確稱取一定量的試樣W，加入一定量內(nèi)標(biāo)物mS計算式：2022/7/29內(nèi)標(biāo)法特點：(a) 內(nèi)標(biāo)法的準(zhǔn)確性較高，操作條件和進(jìn)樣量的稍許變動對定量結(jié)果的影響不大。(b) 每個試樣的分析，都要進(jìn)行兩次稱量，不適合大批量試樣的快速分析。(c) 若將內(nèi)