分光光度法補(bǔ)充

1、72型分光光度計(jì)光學(xué)系統(tǒng)圖光源吸收池檢測(cè)系統(tǒng)121 光源在可見光區(qū)鎢絲發(fā)出的白光 波長(zhǎng)為320nm2500nm工作溫度 2600K2870K鎢絲的溫度與工作電壓關(guān)系密切需要穩(wěn)壓電源在近紫外區(qū)，用氫燈和氘燈波長(zhǎng)范圍：180nm375nm32單色器濾光片棱鏡光柵作用：將連續(xù)光譜分解為單色光4A濾光片濾光片由有機(jī)玻璃制成，只允許和它顏色相同的光通過，得到的是單色光。5濾光片的透光曲線半寬度最大透過光波長(zhǎng)最大透過光強(qiáng)67濾光片的選擇原則濾光片最易透過的光應(yīng)是溶液最易吸收的光，應(yīng)當(dāng)選擇溶液顏色的互補(bǔ)色的波長(zhǎng)作為濾光片的波長(zhǎng)。半寬度越小，靈敏度越高。8B 棱鏡介紹棱鏡的工作原理單色器的純度決定于棱鏡的色散

2、率和出射狹縫的寬度。優(yōu)點(diǎn)：得到純度較高的單色光方便改變波長(zhǎng)靈敏度、選擇性、準(zhǔn)確度高。9棱鏡單色器的原理圖10C 光 柵11123 吸收池也稱比色皿用無色透明、能耐腐蝕的玻璃比色皿，通常配有0.5、1、2、3cm等一套長(zhǎng)方形或圓柱形的比色皿。注意：比色皿的位置比色皿的清潔134 檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)器將光強(qiáng)度轉(zhuǎn)換為電流進(jìn)行測(cè)量，這種光電轉(zhuǎn)換器為檢測(cè)器。A 硒光電池B 光電管14A 硒光電池光照在硒光半導(dǎo)體上產(chǎn)生電子電子貯存在金屬薄膜上成為負(fù)極因?yàn)槲雽?dǎo)體的性質(zhì)，電子只能單向移動(dòng)，使鐵片成為正極。通過外電路連接起來，產(chǎn)生的光電流，可用檢流計(jì)測(cè)量。1516B 光電管由一個(gè)陽極和一個(gè)光敏陰極組成的真空二極管。

3、陰極表面鍍有堿金屬或堿金屬氧化物等光敏材料。當(dāng)光子照射時(shí)，能夠發(fā)射電子。當(dāng)兩極有電位差時(shí)，發(fā)射出的電子就流向陽極產(chǎn)生電流。電流的大小決定于照射光的強(qiáng)度。17181920思考題1朗伯比耳定律的物理意義是什么？什么是透光度？什么是吸光度？?jī)烧咧g的關(guān)系是什么？212摩爾吸光系數(shù)的物理意義是什么？其大小與哪些因素有關(guān)？在分析化學(xué)中它有何意義？223什么是吸收光譜曲線？什么是工作曲線？什么是標(biāo)準(zhǔn)曲線？它們有何實(shí)際意義？利用標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行定量分析時(shí)可否使用透光度和濃度為坐標(biāo)？231朗伯比耳定律的物理意義有色溶液的吸光度與液層的厚度和溶液的濃度成正比。24透光度、吸光度和兩者的關(guān)系T I/I0AlgI0/I

4、兩者關(guān)系：A=lg1/T252 摩爾吸光系數(shù)的物理意義T I/I0AlgI0/I兩者關(guān)系：A=lg1/T263工作曲線確定待測(cè)液的濃度吸收曲線確定選用的波長(zhǎng)27利用標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行定量分析時(shí)可否使用透光度和濃度為坐標(biāo)？不行Tlg1/A=lg(1/ bc)T與濃度和液層厚度不成直線關(guān)系。28顯色反應(yīng)顯色反應(yīng)是什么反應(yīng)通常是絡(luò)合反應(yīng)或氧化還原反應(yīng)顯色反應(yīng)？顯色劑？29顯色反應(yīng)的選擇顯色劑的靈敏度高摩爾吸光系數(shù)的大小是靈敏度高低的重要標(biāo)志顯色劑的選擇性好顯色劑在測(cè)定波長(zhǎng)處無明顯吸收反應(yīng)生成的有色化合物組成恒定，化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定30顯色條件的選擇顯色劑的用量酸度顯色溫度顯色時(shí)間干擾的消除311顯色劑的用量實(shí)驗(yàn)

5、舉例：取50毫升容量瓶7個(gè)，編號(hào)。用5毫升移液管移取10微克/毫升鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液5毫升于容量瓶中，加入1毫升10的鹽酸羥胺溶液。32經(jīng)2分鐘后，再加入5毫升1mol.L-1醋酸鈉溶液，然后加入0.1鄰二氮雜菲溶液0.3、0.6、1.0、1.5、2.0、3.0、4.0ml，用水稀釋至刻度，搖勻。33在分光光度計(jì)上，用適宜波長(zhǎng)510nm，2厘米比色皿，以水作參比，測(cè)定上述個(gè)溶液的吸光度。以加入顯色劑的體積為橫坐標(biāo)，以吸光度為縱坐標(biāo)繪制曲線。確定顯色劑的加入量3435b 曲線Mo(SCN)32+ Mo(SCN)5 Mo(SCN)6 - 淺 紅 橙 紅 淺 紅 36c曲線Fe(SCN)2+ Fe (SCN

6、)2 + Fe (SCN)3 Fe(SCN)4-. 顏 色 越 來 越 深 應(yīng)十分嚴(yán)格控制顯色劑用量372 顯色溫度顯色溫度通常在室溫但有的反應(yīng)需要加熱有的反應(yīng)在加熱時(shí)會(huì)分解，不必加熱383 溶液酸度對(duì)絡(luò)合物的影響準(zhǔn)確移取10微克/毫升鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液5毫升于100毫升容量瓶中，加入5毫升12摩爾/升的鹽酸和10毫升10的鹽酸羥胺溶液。經(jīng)2分鐘后，加入0.1%鄰二氮雜菲溶液30ml，用水稀釋至刻度，搖勻。39取50毫升容量瓶7只，編號(hào)。用移液管分別準(zhǔn)確移取上述溶液10毫升于個(gè)容量瓶中。在滴定管中裝0.4mol.L-1氫氧化鈉溶液0.0、 2.0、3.0、4.0、6.0、8.0和10.0毫升，以水稀釋

7、至刻度，搖勻。40使個(gè)溶液的pH值從小于2開始逐步增加到12以上。測(cè)定容量瓶中各個(gè)溶液的pH值，同時(shí)在在分光光度計(jì)上測(cè)定吸光度，繪制酸度與吸光度的曲線。414 顯色時(shí)間的影響作出顯色時(shí)間和吸光度的關(guān)系曲線選擇最佳的顯色時(shí)間42例： 鄰二氮雜菲亞鐵絡(luò)合物的穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)用上面的溶液繼續(xù)測(cè)定，方法是在最大波長(zhǎng)處510nm，每隔一定時(shí)間測(cè)定它的吸光度。43在加入顯色劑后立即測(cè)定一次吸光度，經(jīng)30、90、120分鐘后，再各測(cè)一次吸光度，然后以時(shí)間為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)繪制曲線，此曲線表示絡(luò)合物的穩(wěn)定性。445 干擾的消除加入絡(luò)合隱蔽劑或氧化還原隱蔽劑選擇適當(dāng)?shù)娘@色條件以避免干擾分離干擾離子455.1加絡(luò)

8、合隱蔽劑或氧化還原隱蔽劑使干擾離子生成無色絡(luò)合物或無色離子NH4SCN顯色劑測(cè)定Co2+時(shí) 雜質(zhì) Fe3+ + 6F- =FeF63-（無色離子） 干擾消除了465.2 選擇適當(dāng)?shù)娘@色條件以避免干擾利用酸效應(yīng)，控制離解平衡，降低R（指示劑的陰離子），使干擾離子不與R作用?；腔畻钏酕e3+雜質(zhì)Cu2+R黃色絡(luò)合物475.3分離干擾離子的方法沉淀離子交換溶劑萃取48顯色劑A無機(jī)顯色劑B有機(jī)顯色劑49A無機(jī)顯色劑硫氰酸鹽鉬酸銨過氧化氫50B有機(jī)顯色劑偶氮類顯色劑三苯甲烷類顯色劑51發(fā)色團(tuán)：分子中含有的一個(gè)或一個(gè)以上的某些不飽和基團(tuán)（共軛體系）的有機(jī)化合物，往往是有顏色的。這些基團(tuán)是發(fā)色團(tuán)。偶氮基N

9、N醌基亞硝基NO硫羰基CS52助色團(tuán)：本身沒有顏色，但它們的存在卻會(huì)影響有機(jī)試劑及其與金屬離子的反應(yīng)產(chǎn)物的顏色，這些基團(tuán)稱為助色團(tuán)。-NH2-NR2-OH-OR-SH-Cl5354為什么會(huì)發(fā)生顏色的改變當(dāng)金屬離子與有機(jī)顯色劑形成絡(luò)合物時(shí)，金屬離子與顯色劑中的不同基團(tuán)通常形成一個(gè)共價(jià)鍵和一個(gè)配位鍵，改變了整個(gè)試劑分子內(nèi)共軛體系的電子云情況，從而引起顏色的改變。55偶氮類顯色劑凡含有偶氮結(jié)構(gòu)的有機(jī)化合物，都是帶色的物質(zhì)。優(yōu)點(diǎn)：性質(zhì)穩(wěn)定、顯色反應(yīng)靈敏度高、選擇性好、對(duì)比度高。主要有Par和偶氮砷III。5657三苯甲烷類顯色劑如鉻天青、二甲酚橙、結(jié)晶紫、 羅丹明B等。鉻天青可與很多金屬離子及陽離子表

10、面活性劑作用形成三元絡(luò)合物，摩爾吸光系數(shù)高達(dá)104105。58金屬離子有Al3+、Be2+、Co2+、Cu2+等。陽離子表面活性劑有氯化十六烷基三甲基胺、溴化十六烷基三甲基胺等。5960三元絡(luò)合物在光度分析中的應(yīng)用三元絡(luò)合物比較穩(wěn)定三元絡(luò)合物對(duì)光有較大的吸收容量形成三元絡(luò)合物的顯色反應(yīng)比二元體系具有更高的選擇性611 三元絡(luò)合物比較穩(wěn)定三元絡(luò)合物的穩(wěn)定性比二元絡(luò)合物的穩(wěn)定性高1000或100倍。由于三元絡(luò)合物比較穩(wěn)定，測(cè)定的準(zhǔn)確度和重現(xiàn)性較好。622 三元絡(luò)合物對(duì)光有較大的吸收容量H2O2測(cè)定釩，靈敏度低Par測(cè)定釩，靈敏度高，但選擇性差。將三者混合形成紫紅色的三元絡(luò)合物，靈敏度得到提高，有時(shí)提高25倍。633 形成三元絡(luò)合物的顯色反應(yīng)比二元體系具有更高的選擇性在二元絡(luò)合物中，一種顯色劑常與多種金屬離子形成絡(luò)合物，而當(dāng)體系中兩種配位體形成三元絡(luò)合物時(shí)，就減少了這種可能。64吸光度測(cè)量條件的選擇1入射光波長(zhǎng)的選擇2參比溶液的選擇3吸光度讀數(shù)范圍的選擇651 入射光波長(zhǎng)的選擇為什么選擇入射光的波長(zhǎng)？因?yàn)?摩爾吸光系數(shù)大2靈敏度高3準(zhǔn)確度高 （入射光波長(zhǎng)的范圍?。?667A、B兩條曲線不同。絡(luò)合物的吸收曲線顯色劑的吸收曲線如何選擇波長(zhǎng)？420 nm500nm682 參比溶液的選擇若僅待測(cè)物與顯色劑的反應(yīng)產(chǎn)物有吸收，可用純?nèi)軇┳鲄⒈热芤骸Ｈ麸@色劑和其它溶劑略有吸收，可選用空白溶液作參比