基因芯片的分類與應(yīng)用PPT課件(-20頁)

1、基因芯片(Gene Chip)定義基因芯片又稱DNA芯片（DNA Chip）或生物芯片(Biological chip), 是指將大量探針分子固定于支持物上，然后與標(biāo)記的樣品進(jìn)行雜交，通過檢測雜交信號的強(qiáng)度及分布進(jìn)而對靶分子的序列和數(shù)量進(jìn)行分析?；緲?gòu)造1.支持物：如玻片、硅片、NC膜、Nylon膜2.探針：高密度的探針序列按照一定的次序固定在支持物上，每個位點(diǎn)的序列是已知的外觀探針支持物剖面圖平面局部放大基因芯片技術(shù)流程探針的設(shè)計與制備支持物的類型與預(yù)處理芯片的制作點(diǎn)樣后處理樣品的準(zhǔn)備雜交與雜交后清洗檢測分析基本過程用生物素標(biāo)記并經(jīng)擴(kuò)增（也可使用其它放大技術(shù)）的靶序列或樣品然后再與芯片上的大

2、量探針進(jìn)行雜交用鏈霉親和素(streptavidin)偶聯(lián)的熒光素（常用的熒光素還有l(wèi)assamine 和phycoerythrin）進(jìn)行顯色圖象的采集用落射熒光顯微鏡(epifluorescence microscope)、激光共聚焦顯微鏡或其它熒光顯微裝置對片基掃描由計算機(jī)收集熒光信號，并對每個點(diǎn)的熒光強(qiáng)度數(shù)字化后進(jìn)行分析。基因芯片的分類基因芯片有不同的分類方法： 按其片基不同可分為無機(jī)片基芯片和有機(jī)合成片基芯片； 按其應(yīng)用不同，可分為表達(dá)譜芯片、診斷芯片、檢測芯片；按其結(jié)構(gòu)不同可分為DNA 陣列和寡核苷酸芯片； 按其制備方法不同可分為原位合成芯片和合成后交聯(lián)芯片(合成后點(diǎn)樣芯片)。制作方

3、法光刻DNA合成法點(diǎn)接觸法噴墨法光刻DNA合成法寡聚核苷酸原位光刻合成技術(shù)是由Affymetrix公司開發(fā)的，采用的技術(shù)原理是在合成堿基單體的5羥基末端連上一個光敏保護(hù)基。合成的第一步是利用光照射使羥基端脫保護(hù)，然后一個5端保護(hù)的核苷酸單體連接上去，這個過程反復(fù)進(jìn)行直至合成完畢。使用多種掩蓋物能以更少的合成步驟生產(chǎn)出高密度的陣列，在合成循環(huán)中探針數(shù)目呈指數(shù)增長。優(yōu)點(diǎn)： 合成效率高，點(diǎn)陣密度高，實現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)化和批量化大規(guī)模生產(chǎn)缺點(diǎn)： 設(shè)備昂貴，技術(shù)復(fù)雜，反應(yīng)產(chǎn)率低點(diǎn)接觸法(點(diǎn)膜法)點(diǎn)樣法是將合成好的探針、cDNA或基因組DNA通過特定的高速點(diǎn)樣機(jī)器人直接點(diǎn)在芯片上。采用的機(jī)器人有一套計算機(jī)控制三維移

4、動裝置；多個打印/噴印針的打印/噴印頭；一個減震底座，上面可放內(nèi)盛探針的多孔板和多個芯片。根據(jù)需要還可以有溫度和濕度控制裝置；針洗滌裝置。打印/噴印針將探針從多孔板取出直接打印或噴印于芯片上。直接打印時針頭與芯片接觸，而在噴印時針頭與芯片保持一定距離。優(yōu)點(diǎn)：設(shè)備廉價，技術(shù)簡便，研制周期短，靈活性高 缺點(diǎn)：點(diǎn)陣密度低 噴墨法芯片原位噴印合成原理與噴墨打印類似，不過芯片噴印頭和墨盒有多個，墨盒中裝的是四種堿基等液體而不是碳粉。噴印頭可在整個芯片上移動并根據(jù)芯片上不同位點(diǎn)探針的序列需要將特定的堿基噴印在芯片上特定位置。該技術(shù)采用的化學(xué)原理與傳統(tǒng)的DNA固相合成一致，因此不需要特殊制備的化學(xué)試劑。 三

5、種制作芯片方法的示意圖normalcancerDNADNAGENERAL SCANNING - ScanArray System 檢測分析芯片技術(shù)的應(yīng)用1. DNA序列測定基因芯片不僅可對大量基因或序列同時、快速進(jìn)行定性、定量分析，而且作為一種極有發(fā)展前途的測序策略也倍受人們的重視。2. 蛋白質(zhì)芯片 基因組計劃后的另一項重要計劃：蛋白組計劃； 正常與癌變細(xì)胞蛋白譜的差異分析。3. 基因突變檢測與遺傳病和腫瘤診斷 點(diǎn)突變，基因缺失、擴(kuò)增、插入、重復(fù)、倒位等。4. 藥物篩選 在基因水平上尋找藥物靶標(biāo)，毒性對基因的影響。5. 微型化分析儀器 快速、平行、重復(fù)性檢測。展望 盡管基因芯片技術(shù)已經(jīng)在一些科

6、學(xué)研究和醫(yī)學(xué)臨床實踐中得到了一些應(yīng)用，但是在一些領(lǐng)域尤其在獸醫(yī)領(lǐng)域中基因芯片技術(shù)還尚處于初步的探索發(fā)展階段，在基因治療和基因疫苗的研制等方面基因芯片技術(shù)還沒有得到廣泛的應(yīng)用，但隨著生物信息學(xué)的進(jìn)步和發(fā)展，基因芯片技術(shù)一定會進(jìn)一步成熟，必將給人類提供越來越多的方便，發(fā)揮越來越大的重要作用，從而幫助人們認(rèn)識、掌握和利用生命科學(xué)的規(guī)律。1、不是井里沒有水，而是你挖的不夠深。不是成功來得慢，而是你努力的不夠多。2、孤單一人的時間使自己變得優(yōu)秀，給來的人一個驚喜，也給自己一個好的交代。3、命運(yùn)給你一個比別人低的起點(diǎn)是想告訴你，讓你用你的一生去奮斗出一個絕地反擊的故事，所以有什么理由不努力!4、心中沒有過

7、分的貪求，自然苦就少。口里不說多余的話，自然禍就少。腹內(nèi)的食物能減少，自然病就少。思緒中沒有過分欲，自然憂就少。大悲是無淚的，同樣大悟無言。緣來盡量要惜，緣盡就放。人生本來就空，對人家笑笑，對自己笑笑，笑著看天下，看日出日落，花謝花開，豈不自在，哪里來的塵埃!5、心情就像衣服，臟了就拿去洗洗，曬曬，陽光自然就會蔓延開來。陽光那么好，何必自尋煩惱，過好每一個當(dāng)下，一萬個美麗的未來抵不過一個溫暖的現(xiàn)在。6、無論你正遭遇著什么，你都要從落魄中站起來重振旗鼓，要繼續(xù)保持熱忱，要繼續(xù)保持微笑，就像從未受傷過一樣。7、生命的美麗，永遠(yuǎn)展現(xiàn)在她的進(jìn)取之中;就像大樹的美麗，是展現(xiàn)在它負(fù)勢向上高聳入云的蓬勃生機(jī)

8、中;像雄鷹的美麗，是展現(xiàn)在它搏風(fēng)擊雨如蒼天之魂的翱翔中;像江河的美麗，是展現(xiàn)在它波濤洶涌一瀉千里的奔流中。8、有些事，不可避免地發(fā)生，陰晴圓缺皆有規(guī)律，我們只能坦然地接受;有些事，只要你愿意努力，矢志不渝地付出，就能慢慢改變它的軌跡。9、與其埋怨世界，不如改變自己。管好自己的心，做好自己的事，比什么都強(qiáng)。人生無完美，曲折亦風(fēng)景。別把失去看得過重，放棄是另一種擁有;不要經(jīng)常艷羨他人，人做到了，心悟到了，相信屬于你的風(fēng)景就在下一個拐彎處。10、有些事想開了，你就會明白，在世上，你就是你，你痛痛你自己，你累累你自己，就算有人同情你，那又怎樣，最后收拾殘局的還是要靠你自己。11、人生的某些障礙，你是逃

9、不掉的。與其費(fèi)盡周折繞過去，不如勇敢地攀登，或許這會鑄就你人生的高點(diǎn)。12、有些壓力總是得自己扛過去，說出來就成了充滿負(fù)能量的抱怨。尋求安慰也無濟(jì)于事，還徒增了別人的煩惱。13、認(rèn)識到我們的所見所聞都是假象，認(rèn)識到此生都是虛幻，我們才能真正認(rèn)識到佛法的真相。錢多了會壓死你，你承受得了嗎?帶，帶不走，放，放不下。時時刻刻發(fā)悲心，饒益眾生為他人。14、夢想總是跑在我的前面。努力追尋它們，為了那一瞬間的同步，這就是動人的生命奇跡。15、懶惰不會讓你一下子跌倒，但會在不知不覺中減少你的收獲;勤奮也不會讓你一夜成功，但會在不知不覺中積累你的成果。人生需要挑戰(zhàn)，更需要堅持和勤奮!16、人生在世：可以缺錢，但不能缺德;可以失言，但不能失信;可以倒下，但不能跪下;可以求名，但不能盜名;可以低落，但不能墮落;可以放松，但不能放縱;可以虛榮，但不能虛偽;可以平凡，但不能平庸;可以浪漫