動物細胞培養(yǎng)與核移植技術PPT

1、關于動物細胞培養(yǎng)和核移植技術PPT第一張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月動物細胞工程常用的技術手段：動物細胞培養(yǎng)、 動物細胞核移植、動物細胞融合、 單克隆抗體動物細胞培養(yǎng)技術是其他動物細胞工程技術的基礎。提問：植物細胞工程常用的技術手段有哪些？植物組織培養(yǎng), 植物體細胞雜交第二張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月一、動物細胞培養(yǎng)原理：1、動物細胞培養(yǎng)過程細胞增殖（有絲分裂）221 動物細胞培養(yǎng)和核移植技術第三張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月 從動物機體中取出相關組織，將它們分散成單個細胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細胞生長和增殖。一、動物細胞培養(yǎng)1 、動物細胞培養(yǎng)的

2、概念第四張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月動物胚胎或幼齡動物的組織、器官（剪碎）細胞懸浮液無限增殖（細胞發(fā)生突變）單個細胞培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)培養(yǎng)液稀釋制備原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)胰蛋白酶或膠原蛋白酶出現(xiàn)貼壁生長，接觸抑制約10代以內(nèi)細胞（正常的二倍體核型）約10-50代細胞（部分細胞核型改變）胰蛋白酶第五張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月細胞懸浮液細胞貼滿瓶壁50代細胞原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)原代培養(yǎng): 將動物組織經(jīng)胰蛋白酶等處理后的初次培養(yǎng)。傳代培養(yǎng): 對貼滿瓶壁的細胞用胰蛋白酶處理，然后再分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。第六張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月動物組織單個細胞細胞懸液貼壁生長分瓶培養(yǎng)10代細

3、胞50代細胞不死細胞原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)胰蛋白酶或膠原蛋白酶剪碎加培養(yǎng)液接觸抑制少數(shù)癌變少數(shù)動物細胞培養(yǎng)技術流程失去接觸抑制現(xiàn)象細胞核型不變第七張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月 當貼壁細胞生長到表面相互接觸時，細胞就會停止分裂增殖細胞出現(xiàn)接觸抑制。哪些細胞失去了接觸抑制？ 傳代培養(yǎng)時，少數(shù)超過50代的細胞，由于遺傳物質(zhì)發(fā)生改變，可無限增殖，并失去了接觸抑制腫瘤細胞。接觸抑制第八張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月動物胚胎或幼齡動物的組織、器官細胞懸浮液胰蛋白酶10代細胞50代細胞細胞株無限傳代（不死性）細胞系遺傳物質(zhì)改變遺傳物質(zhì)未改變第九張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月例

4、1、正常細胞在分裂時，只要和相鄰細胞接觸，就停止活動，不再分裂。這一現(xiàn)象稱為“接觸抑制”。對這一事實的有關推測，正確的有 （ ）A動物體細胞培養(yǎng)過程中，在遺傳物質(zhì)發(fā)生變化以后，只能形成單層細胞。B癌細胞在體外培養(yǎng)時，不可能成為隆起的多層細胞。 C癌細胞不受“接觸抑制”，這可能與它的細胞表面發(fā)生變化有關。D單細胞生物分裂產(chǎn)生的子細胞，彼此間也存在“接觸抑制” 。C第十張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月多細胞生物的細胞膜上存在著糖蛋白，細胞之間的信息識別功能使細胞間存在“接觸抑制”。單細胞生物分裂產(chǎn)生的子細胞，能獨立進行生命活動，不存在“接觸抑制”。第十一張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于202

5、2年6月4、動物細胞培養(yǎng)條件：1、無菌、無毒的環(huán)境 （添加一定量的抗生素，定期更換培養(yǎng)液）2、營養(yǎng)（葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素、動物血清等。）3、溫度和PH 36.5+（-）0.5度, 7.2-7.44、氣體環(huán)境： O2和CO2（95%空氣和5% CO2 ） O2是細胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。保證細胞順利的生長增殖維持培養(yǎng)液的PH第十二張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月 4、應用、生產(chǎn)生物制品（病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體）。、作為基因工程中的受體細胞。、培養(yǎng)正常細胞或各種病變的細胞，用于生理、病理、藥理等方面的研究。、培養(yǎng)的動物細胞可以用于檢測有毒物質(zhì)，

6、判斷某種物質(zhì)的毒性。檢測有毒物質(zhì)毒性大小，原理是動物細胞經(jīng)該物質(zhì)處理后，根據(jù)變異率判斷（畸變細胞所占的比例越大，說明該物質(zhì)毒性越大）。第十三張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月思考：2、為什么選用動物胚胎或幼齡個體的器官或組織做動物細胞培養(yǎng)材料？1、動物細胞培養(yǎng)液的主要成分是什么？較植物組培培養(yǎng)基有何獨特之處？3、為什么培養(yǎng)前要將組織細胞分散成單個細胞？4、動物細胞培養(yǎng)能否像綠色植物組織培養(yǎng)那樣最終培養(yǎng)成新個體？主要成分：葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素和動物血清等。獨特之處有：1、液體培養(yǎng)基 2、成分中有動物血清等因為這些組織或器官上的細胞生命力旺盛，分裂能力強成塊組織不利培養(yǎng)，分散了做

7、成細胞懸浮液利于培養(yǎng)不能，動物細胞培養(yǎng)只能使細胞數(shù)目增多，不能發(fā)育成新的動物個體第十四張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月小結：植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)的比較比較項目植物組織培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)原理細胞的全能性細胞增殖培養(yǎng)基性質(zhì)固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基培養(yǎng)基特有成分蔗糖 植物激素葡萄糖 動物血清培養(yǎng)結果植物體細胞株、細胞系培養(yǎng)目的快速繁殖、培育無病毒植株獲得細胞或細胞分泌蛋白第十五張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月二.動物細胞核移植技術和克隆動物 將動物的一個細胞核，移入一個已經(jīng)去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發(fā)育成為一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育為動物個體（克隆動物）。 分類胚

8、胎細胞核移植：體細胞核移植：細胞分化程度低，恢復全能性容易；細胞分化程度高，恢復全能性不容易1.動物細胞核移植概念：（難度高）第十六張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月卵母細胞母綿羊母綿羊乳腺細胞細胞質(zhì)細胞核細胞核移植早期胚胎卵裂C母綿羊子宮胚胎移植多莉羊分娩妊娠多莉羊的培育過程融合后的卵母細胞第十七張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月電激處理使供體核進入受體卵母細胞構建重組胚胎卵母細胞采集、培養(yǎng)M中期卵母細胞供體牛供體細胞注入去核卵母細胞代孕母牛克隆牛體細胞培養(yǎng)去核卵母細胞去核胚胎移植2.體細胞核移植過程（體細胞克隆動物）原理：動物細胞核具有全能性顯微操作第十八張，PPT共二十四

9、頁，創(chuàng)作于2022年6月3.體細胞核移植技術的應用前景：1.加速家畜遺傳改良的進程2.保護瀕危物種3. 生產(chǎn)醫(yī)用蛋白質(zhì)及組織器官的移植4.了解胚胎發(fā)育和衰老過程；追蹤研究疾病的發(fā)展過程和治療疾病第十九張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月4、體細胞核移植技術存在的問題 P173（1）成功率非常低（2）克隆動物以表現(xiàn)早衰、生理缺陷等健康問題 成功率低，絕大多數(shù)克隆動物存在健康問題并表現(xiàn)出遺傳和生理缺陷：如體型過大，異常肥胖，發(fā)育困難，臟器缺陷，免疫失調(diào)等。第二十張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月在動物細胞培養(yǎng)的有關敘述中正確的是（ ）A. 細胞的癌變發(fā)生于原代培養(yǎng)向傳代培養(yǎng)的過渡過程中B. 動物細胞培養(yǎng)液中通常含有葡萄糖、氨基酸、無機鹽、生長素和動物血清等C. 動物細胞培養(yǎng)的目的是獲得大量的細胞D. 動物細胞培養(yǎng)前和培養(yǎng)過程中都要用胰蛋白酶處理D第二十一張，PPT共二十四頁，創(chuàng)作于2022年6月治療性克隆有希望最終解決供體器官的短缺和器官移植出現(xiàn)的排異反應。下圖表示治療性克隆的過程，下列說法正確的是第二十二張，PPT共二十四頁，創(chuàng)