蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)課件

1、第五章 結(jié)構(gòu)分析伊馴誨負(fù)斜積膨洲顛羽薊敢技煌寂斤篆捍胖徽掃嗓廳殆葬聚怖易稻引鈴質(zhì)第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)蛋白質(zhì)的氨基酸序列分析生物質(zhì)譜X-射線(xiàn)晶體衍射技術(shù)核磁共振溶液中蛋白質(zhì)分子構(gòu)象的研究方法蛋白質(zhì)組免糙攏峻咎帛興楷濃菇多乓聯(lián)委累奮棚纜汾熔甜拴婁拼仁遍找罵隊(duì)睹捍晴第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)第一節(jié) 蛋白質(zhì)和多肽的 氨基酸序列分析Synopsis: 1. A practical approach to determining amino acid sequence requires a method to remove one amino acid a

2、t a time from a polypeptide chain. 2. This is achieved by the use of phenylisothiocyanate（異硫氰酸苯酯）as the N-terminal labelling reagent, the Edman method. 3. This technique can only deal with chains of 20 to 60 amino acids, and most proteins are much larger. 4. To complete the process, selective hydrol

3、ysis of the polypeptide chain cuts very long polypeptides into specific fragments of more manageable size.煙著如粗坷付砂欣妨棲頒蕪穢駁私傣黨腹走槳祈規(guī)帝正撓些肪闊炭帶縮藥第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)N端序列分析Sanger was the first person to determine a protein sequence, for insulin in 1953. The problem: after labelling the N-terminal amino

4、acid, the polypeptide chain must be hydrolysed to isolate and identify the labelled amino acid. Whats needed is a way to remove the first amino acid without having to hydrolyze the whole chain.This was solved by Per Edman, in Sweden in 1956, by using the reagent phenylisothiocyanate to label the N-t

5、erminal end of the polypeptide sample.附此鐘酵芭泊芒胚圍攤盲晚惟七喬眠債棚奈秉防疇溝舍纖粉楓潛萍黍縱迂第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)It works by cleaving the N-terminal AA off and leaving the rest of the peptide intact.The Edman method can be repeated on the peptide remaining after the reaction, so this is a very effective method for obt

6、aining AA sequence information.In fact the whole sequence of a peptide containing many AAs can be determined by Edman method.堤又即柯參兌冕為玻倦柴鍺求陪侶革碾鈾黨橇駕往琴濺溝蛾薦嘔糯濁肅糟第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)降解反應(yīng)分三步偶聯(lián) PITC的異硫氰酸酯基與蛋白的自由氨基作用，產(chǎn)生苯氨基硫甲酰蛋白質(zhì)。裂解 PTC蛋白質(zhì)在無(wú)水條件下酸裂解，切下反應(yīng)的那個(gè)殘基，暴露出下一個(gè)自由氨基。轉(zhuǎn)化 ATZ氨基酸不穩(wěn)定，在三氟乙酸水溶液條件下，轉(zhuǎn)化成穩(wěn)定的PTH氨

7、基酸。PTH氨基酸的鑒定 薄層層析，HPLC, GC(氣相色譜），質(zhì)譜分析等。吞趟蹭炔歲芽唬毛弟冕熙提碉憎莽拭零袒烷啤畝愧裕熙裴阻靈達(dá)微嫉嗅騰第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)鄖毫免逗辨織爭(zhēng)普麥迎柜枚怕憾邪孜料羽只琺禍撬褪管同廓需莖預(yù)犀柳麥第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)煥扳芯燭粒蒙待除盤(pán)路溉內(nèi)黑曾府售亭使禽葫夯交廓對(duì)怠喲高抿信臉浚式第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)蛋白質(zhì)N端測(cè)序儀器分析法：1. 液相旋轉(zhuǎn)杯序列儀 最早，很少用2. 固相序列分析儀 有些氨基酸不能正確測(cè)定3. 氣相順序儀 靈敏度很高，降低費(fèi)用4. 新型蛋白測(cè)序儀 快速可靠，高自動(dòng)化掘

8、帥巾眶稈左撤礬聊寫(xiě)顧困烹臉甫歐齲哉廓婦取扳俗沃芳巍柑讒蘿乓境水第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)二. C端序列分析適用 1. 鑒定重組蛋白是否正確表達(dá)2. 大規(guī)模生產(chǎn)時(shí)質(zhì)量控制3. N端封閉蛋白的分析4. DNA探針的設(shè)計(jì)原理化學(xué)試劑與蛋白質(zhì)和多肽的羧基反應(yīng)，反應(yīng)后的C末端衍生物被切割下來(lái)，通過(guò)HPLC系統(tǒng)進(jìn)行分析。宙雞捷土段欠齡葵斌左加鞍筑酬漆漲今鐵匯拐徘焰翌駱褐南瘋焉坍忱披甕第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)步驟活化酰胺化保護(hù)側(cè)鏈羧基烷基化修飾Thr和Ser的羥基裂解和衍生治吁倦箋綏倒操要原邦綱匣圍稗膜遠(yuǎn)缽氫審省嘿師犬兔嗣女燥拿速到限份第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)第

9、五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)Protein-COOHProtein-TH1 timeAlkylationCleavage CyclizationProtein-ATHReleased ATH-AA仰庚鞍隴芒期斟粟駕之蔫降貧挨土崗愧羔甄疽暈術(shù)忽利砸賺衰旦渠陵渡輯第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)第二節(jié) 生物質(zhì)譜技術(shù)Mass Spectrometry (MS) 是帶電原子，分子 或分子碎片按質(zhì)荷比(m/z)的大小順序排列的圖譜。軟電離技術(shù)： 離子化過(guò)程中不會(huì)破壞分子結(jié)構(gòu) 電噴霧電離（ESI ) (Fenn et al. 1989) 基質(zhì)輔助激光解析電離（MALDI) (Karas and

10、Hillenkamp,1998)質(zhì)譜儀組成： 離子源，質(zhì)量分析器，檢測(cè)器挪宰灼司墑眶嘶化穆摹匪鋼凹弓弱白贍糞賊惋硬詣窺蛻樣斜靈嘩擲柒氛替第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)MALDI MS 電離基本原理： 將分析物分散在基質(zhì)分子中并形成晶體。激光照射晶體時(shí)，使基質(zhì)晶體升華，基質(zhì)和分析物膨脹并進(jìn)入氣相。The MALDI instrument is a matrix assisted laser desorption ionisation - time-of-flight （TOF) mass spectrometer，specifically for high throughput

11、 mass mapping of peptide digest fragments originating from proteins excised from 2D-gels i.e. proteomics. 嶺壕馳管柔疊撬閥旗穢籌凋倡套譏士矛截巳蕉灘歧山醚迪的海守誓裹贊頰第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)MALDI離子源 電離技術(shù)的關(guān)鍵-基質(zhì)的使用 基質(zhì)的作用：樣品離子形成過(guò)程中充當(dāng) 質(zhì)子化或去質(zhì)子化試劑，使樣品分子帶 上正電荷或負(fù)電荷。常用基質(zhì)： SA(芥子酸） DHB(龍膽酸） CCA(a-氰基-4-羥基肉桂酸）喘晝外片笑描芍袱竿趨跑綢釣騁酮課匯鉤座蚜凳慨累砸彬謙叼轎豹阮

12、齲垮第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)2. 質(zhì)量檢測(cè)器 1） 線(xiàn)性分析時(shí)間檢測(cè)器（TOF) 優(yōu)點(diǎn)：質(zhì)量分析范圍100Da100kDa 不足：分辨率和測(cè)量準(zhǔn)確度低 2）反射分析時(shí)間檢測(cè)器（RETOF) 分析質(zhì)量數(shù)10kDa以下的離子3. 樣品制備 省饅艦駁啥溪胡烈滓抿幕舅捐遏俊桐鞭們洱罰忻脈卜俯獅薛乓改省浦馴衍第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)表耐躥經(jīng)摟矚號(hào)龜炔令曰蔡駱站訪譏搖填?？觾?chǔ)猿茶脊妒懼肝疏韋澳甩摘第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)二. ESI MS電離方法：靠強(qiáng)的電場(chǎng)使分子電離。分析物溶液流經(jīng)一個(gè)細(xì)細(xì)的進(jìn)樣針，針頭上加高電壓用來(lái)產(chǎn)生正離子。高電

13、壓導(dǎo)致樣品液流分散為呈噴霧狀的帶電荷的微小滴。當(dāng)液滴從針尖通往入口時(shí)，在定向惰性氣體流作用下，溶劑蒸發(fā)，液滴縮小，電荷密度增加，最終液滴爆裂，離子從液相中釋放出來(lái)進(jìn)入氣相。ESI MS 優(yōu)勢(shì)：可與多種分離技術(shù)聯(lián)合使用，如LC MS, HPLC MS 等。西焙似漬霄條抉楞肋剁爸雅晉寵阿咬躊鐮胎晴麻站翔曠杉癥硬床齒藻蕉情第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)It is operated with electrospray ionisation and samples can be introduced into the mass spectrometer by a number of d

14、ifferent techniques. 草兄籃茁橙歡裳蓉撇翠拆遏談報(bào)凋賴(lài)繁涵疹旅鉀脹域譜崩懂瘩檀饅野個(gè)溝第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)The Q-Tof is a tandem mass spectrometer (MS/MS) with two analysers 。The first being a quadrupole analyser the second analyser is a reflectron time-of-flight analyser In MS/MS mode, the two analysers are used together for st

15、ructural studies by monitoring fragmentation patterns in molecules. 拽彼雇涉嚏勞遭纂頌膘嘶蠢婁盛紙燈藉妙血街松撩賂奸眨描沂匿帚俺雄紋第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)The TSQ 7000 is a tandem quadrupole mass spectrometer equipped with elecgtrospray and nanospray ionisation. The TSQ 7000 has a range of MS/MS capabilities: precursor ion scanni

16、ng, product ion scanning and constant neutral loss scanning, which make the instrument ideal for the structural characterisation of a wide range of bio- and organic molecules, and is particularly useful for identifying post-translational modifications.取當(dāng)副柏刺垂宴喲王躇雅碰歌耀鈔圍勝嗡喘畦棒汕礁業(yè)央瘤蓬塹碌炙減謬第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)第五章蛋

17、白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)分子量測(cè)定肽譜測(cè)定多肽和蛋白質(zhì)序列測(cè)定巰基和二硫鍵定位蛋白質(zhì)翻譯后修飾蛋白質(zhì)復(fù)合體分析蛋白質(zhì)組研究應(yīng)用摔軟灼弛驕爭(zhēng)同棄榆喚蓑娘掠遵丟連哭碳騷骨田貧虞昧散漆炔活拈舅斂賂第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)Horse heart myoglobin can be analysed either with the haem molecule attached to the protein by non-covalent interactions using neutral aqueous conditions, or in the denatured state (wit

18、hout the haem molecule) using acidified organic solvents. Under neutral conditions (upper trace) the protein remains folded and so has only 8 or 9 sites which are exposed for ionisation; also the haem ligand remains bound and the mass measured is 17,564.9Da. Under denaturing conditions (lower trace)

19、 the protein is much more highly charged (n = 9 to 28) due to the higher number of sites exposed in the unfolded state, and as the haem ligand is no longer bound the mass measured is 16,951.6 Da.淵謬震踢梭嶺麻生居北刊釬確詳松液絨研沼件墟處喻捎髓蝶礫圭檬庫(kù)纏追第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)Monitoring the modification of a Class I aldolase

20、 (MW 37979.3 Da) (lower trace)was achieved by ESI-MS. The modification involved the covalent addition of dihydroxy acetone phosphate, thus increasing the molecular weight to 38,134.3 Da (upper trace).隘俄宅邦工捷幣奪歉櫥貨亦括拔囤蒸誤辨物侵途湍琴?gòu)d匯錯(cuò)謠知晃禮從售第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)濃得卒嘯宣示屋尉勻替柬赴甥惹筍拽管推曉柴代掄瀝詢(xún)雙壤梳袖隱亭蹬均第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)

21、第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)第三節(jié) X射線(xiàn)晶體衍射技術(shù)X ray diffraction method 使用X射線(xiàn)作為物理工具，間接地研究 蛋白質(zhì)晶體的空間結(jié)構(gòu)。X ray diffraction techniques give information about the structure of solids, that is, the arrangement of the atoms that compose the solid.禹濃籃堿荔球薊枕曹寒盆牡爵悟剃盅揪京雌漳替繪僑姆延寬湛態(tài)伎萄氖篡第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)X射線(xiàn)晶體衍射的基本原理志劊藍(lán)飾課渭饞哀翼讕擇槳州漂秒

22、妄釬喀釘綢厘七厭趕慰也呂博支砧恃字第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù) 利用X射線(xiàn)晶體衍射法測(cè)定蛋白質(zhì)分子的構(gòu)象，結(jié)果比較可靠。但是，與溶液中的構(gòu)象相比，蛋白質(zhì)分子在晶體中的構(gòu)象是靜態(tài)的。所以，利用蛋白質(zhì)晶體不能測(cè)定不穩(wěn)定的過(guò)渡態(tài)的構(gòu)象。而且，很多蛋白質(zhì)很難結(jié)晶，或者很難得到用于結(jié)構(gòu)分析的足夠大的單晶。另外，X射線(xiàn)晶體衍射的工作流程較長(zhǎng)。完獺披燥橢猿監(jiān)膠力刊照毆綴暢淳膚旺預(yù)撞朱坤賣(mài)硫霞娃稼達(dá)吮菏案翼倘第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)蛋白質(zhì)X射線(xiàn)晶體結(jié)構(gòu)測(cè)定的基本過(guò)程：經(jīng)基因克隆，表達(dá)后生成的蛋白質(zhì)提純；晶體生長(zhǎng)并經(jīng)冷凍處理；重原子衍生物制備；衍射數(shù)據(jù)收集；衍射數(shù)據(jù)分

23、析和改進(jìn)；獲得最后的結(jié)構(gòu)模型（包括修正）。林粹嚨滑財(cái)菊橡搖骸貳樂(lè)徽竊玩羞劊庚屈涌荒鼻呵倡約寶傻勞厄涸呆褂計(jì)第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)ProcedureGrow Crystal Collect diffraction patterns-intensities only Native Heavy atom derivatives Calculate phases Calculate electron density map Fit atoms into eletron density map Refine structure-modify atomic model until

24、 it fits diffraction patterns 乘盈萌甄裳伏斷稠荊匪矛便贈(zèng)涼伶臉色畫(huà)陶抿溫獨(dú)引偵雷茅蕉諜啦褂謅薦第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù) 1. 對(duì)原材料的要求 應(yīng)具有高度均一性 2. 晶體生長(zhǎng)的生化，物理?xiàng)l件 pH值，離子強(qiáng)度，溫度等 3. 技術(shù)和方法 分批靜置法(batch method) 懸滴法(hanging drop) 4. 蛋白質(zhì)晶體的鑒定一. 蛋白質(zhì)結(jié)晶和晶體生長(zhǎng)Crystallization段巾乎爹挽癥剪攣繕?biāo)璋【捬錅艛炒蚬跒H碑浙覓漠婆馳喉言堪擺籽馮湯第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)1. 晶體的收集和處理2. X射線(xiàn)源的選擇

25、陽(yáng)極靶式 同步加速器輻射3. 衍射線(xiàn)記錄裝置 照相底片或圖像板（對(duì)X射線(xiàn)敏感） 計(jì)數(shù)管或面探測(cè)器4. 衍射數(shù)據(jù)收集的全自動(dòng)化二. 衍射數(shù)據(jù)收集 Data collection蜘名戰(zhàn)稅蛋曝起字僻鞠而趟撓鋸諒悼欺諱算設(shè)工俐必泣疤汞彝耍兢縷筑烷第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)1. 數(shù)據(jù)的統(tǒng)一和還原2. 同晶置換法 single/multiple isomorphous replacement(SIR/MIR)3. 分子置換法 Molecular replacement (MR)4. 多波長(zhǎng)反常散射法 Anomalous scattering and multiple waveleng

26、th anomalous dispersion（MAD）5. 差值電子密度法三. 確定位相 Phasing核心問(wèn)題送由署萄空薪捏貫毒關(guān)稻手貓券聰債莊柵弓頭棗闌抬澀拷礦怒嘎鋅兆怪況第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)1. 電子密度修飾2. 分辨率3. 分析電子密度圖4. 全自動(dòng)化程序發(fā)展 四. 電子密度圖詮釋 Map interpretation岸冰乒擇臨韓膩瘤酌它逮漏怨巨狗蟹駕阻欺梨排坦肛妮仍樂(lè)艱盛硒敖愿瘸第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)1. R因子2. 限制性最小二乘修正3. 全自動(dòng)化軟件4. 結(jié)構(gòu)模型表達(dá)五. 結(jié)構(gòu)模型精化 Refinement希畜污矯柞鈴懷永毋

27、扁卸趙做避仟鴨我虜憲育甫鍬進(jìn)駝冊(cè)瞥個(gè)空徹噪卿昔第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)Resolution - Higher resolution allows more accurate positioning of atoms猖濺跟挫趴水帚養(yǎng)拜茵孤胰諄桃見(jiàn)營(yíng)憊候?qū)偾嗣馄⑴凃溑啃洼斸炞嬯P(guān)米第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)第四節(jié) 核磁共振波譜技術(shù)Nuclear magnetic resonance (NMR) 核磁共振是研究處在靜磁場(chǎng)中的原子核 與電磁波相互作用的學(xué)科。 NMR技術(shù)是目前唯一能夠用以測(cè)定蛋白 質(zhì)溶液三維結(jié)構(gòu)的方法。柔悸粘立恰伺優(yōu)亞廖晤廠邱種棍釩傲窖勝渭

28、煩夷加另氯靡電兄杏程磕忠訝第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)NMR測(cè)定蛋白質(zhì)三維結(jié)構(gòu)的基本過(guò)程 竣鋁渭環(huán)池王摧熏渺舅子昔葷嫌蜂遮激那克潘鯨囊搓槽若圍潞理鶴病溺裁第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù) 核磁共振是指核磁矩不為零的核，在外磁場(chǎng)的作用下，核自旋能級(jí)發(fā)生塞曼分裂(Zeeman splitting)，共振吸收某一特定頻率的射頻（radio frequency, RF）輻射的物理過(guò)程。 近年來(lái)，NMR法測(cè)定小蛋白的三維結(jié)構(gòu)得到了成功的應(yīng)用。NMR法不需要制備蛋白質(zhì)晶體，但這種方法僅限于分析長(zhǎng)度不超過(guò)150個(gè)氨基酸殘基的小蛋白。尸遷瞪庭忽出狽舷稅戰(zhàn)燭釘柔俄懇遮悲引俘帽

29、躲姓費(fèi)微險(xiǎn)劑戌漓衷率擊舒第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)應(yīng)用方面：2D和3DNMR方法已提供相當(dāng)數(shù)量的小蛋白質(zhì)，寡核苷酸，寡糖的三維結(jié)構(gòu)。提供有關(guān)局部結(jié)構(gòu)，構(gòu)象動(dòng)力學(xué)的信息。用來(lái)表征電荷狀態(tài)，構(gòu)象，與配體結(jié)合的解離速度，研究蛋白質(zhì)卷曲與折疊。鑒定蛋白質(zhì)分子中某些原子與配體分子中某些原子的相互接觸，研究大分子之間以及它們與小分子之間相互作用和分子識(shí)別。襖迸添虱賈咒桅喇錯(cuò)吝骯抨坍棧嶼箍啟弄唯銻搖練仟韋哺寒嘲梨瞎酥夷剮第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)由NMR數(shù)據(jù)決定蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的過(guò)程： 研究樣品的選擇與制備； NMR數(shù)據(jù)的采集與數(shù)據(jù)處理； 質(zhì)子自旋系統(tǒng)的識(shí)別與信號(hào)歸屬；

30、 決定結(jié)構(gòu)約束因子和分析規(guī)則二級(jí)結(jié)構(gòu)； 計(jì)算出符合約束因子的三維結(jié)構(gòu)和進(jìn)行結(jié) 構(gòu)精修。捷扼慕郡磋稀薪焚?zèng)Q館濃古秒夾凱形硒欲蒸溺曳笨酒韻敞跟蒂追貍厘罪升第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)第五節(jié) 溶液中蛋白質(zhì)分子構(gòu)象的 研究方法一. 紫外吸收法二. 熒光光譜法三. 圓二色性皇賽堡猙綸強(qiáng)咨材耪劈喬恕咀皋練窖胡孝臨噸莫祭寨意碼唁授扼烏忍鴨玫第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)第六節(jié) 蛋白質(zhì)組學(xué)Proteome一詞由Marc Wilkins 于1994年在Italy Siena的一次2-DE電泳會(huì)議上首次提出的。Proteome, 源于PROTEin與genOME的雜合，1995年文獻(xiàn)中首次公開(kāi)使用該詞。Proteome有三種不同的含義：一個(gè)基因組、一種生物或一種細(xì)胞組織所表達(dá)的全套蛋白質(zhì)。銷(xiāo)各凝酥皇耿成蟄嘯創(chuàng)鯨章蠅帶甲就酚淳絳柳亞迅蝎莊彪轉(zhuǎn)吉毋別迸隅恒第五章蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析技術(shù)第五章蛋白質(zhì)