綜合項目一不同蔬菜水果中基本營養(yǎng)成分分析

1、-. z.綜合工程一 不同蔬菜水果中根本營養(yǎng)成分分析實驗一 總糖含量的測定3,5-二硝基水楊酸法一、實驗?zāi)康?、掌握總糖的測定原理。2、學(xué)習(xí)用比色法測定復(fù)原糖的方法。二、實驗原理三、實驗試劑1、2mol/L氫氧化鈉溶液：稱取4g氫氧化鈉，加少量的蒸餾水溶解后，定容至50mL。2、3,5-二硝基水楊酸試劑：稱取0.325g 3,5-二硝基水楊酸溶于15mL熱蒸餾水中，溶解后移入50ml容量瓶中，參加2mol/L氫氧化鈉溶液16.25mL，再參加2.25ml丙三醇，搖勻，冷卻后定容至50mL。3、2mg/mL葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱取0.04g葡萄糖，加少量的蒸餾水溶解后，定容至20mL。4、6mol/

2、L鹽酸：取25mL濃鹽酸用蒸餾水稀釋至50mL。5、6mol/L氫氧化鈉：稱取12g氫氧化鈉，加少量的蒸餾水溶解后，定容至50mL。四、實驗步驟1、葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作取6支試管，按下表參加2mg/mL葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液和蒸餾水：管號2mg/mL葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液/mL蒸餾水/mL葡萄糖濃度mg/mLOD540101020.20.80.430.40.60.840.60.41.250.80.21.66102在上述試管中分別參加3,5-二硝基水楊酸試劑2mL，搖勻后于沸水浴中參加2min進展顯色，取出后用流動水迅速冷卻，各參加蒸餾水9mL，搖勻，在540nm波長處測定光吸收值。以葡萄糖含量mg/mL為橫坐

3、標(biāo)，光吸收值為縱坐標(biāo)，繪制葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線，得出回歸方程。2、總糖的提取稱取1g實驗材料如新鮮果蔬，充分研磨后，放在錐形瓶中，參加6mol/L鹽酸10mL，蒸餾水15mL，在沸水浴中加熱30min。水解完畢后，冷卻至室溫后，參加8mL 6mol/L氫氧化鈉，最終用蒸餾水定容至50mL，此為總糖水解液，用于總糖測定。3、總糖含量的測定取4支試管，按下表參加不同溶液：管號蒸餾水/mL總糖水解液/mL3,5-二硝基水楊酸試劑/mLOD5401102201230124012加完試劑后，搖勻后于沸水浴中參加2min進展顯色，取出后用流動水迅速冷卻，各參加蒸餾水9mL，搖勻，在540nm波長處測定光吸收值。

4、測定后，取樣品的光吸收值平均值在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出相應(yīng)的糖含量mg/mL。4、計算總糖的百分含量總糖=CV / m1000稀釋倍數(shù)0.9100%式中,C為總糖提取液的濃度mg/mL；V為總糖提取液的總體積mL；m為樣品質(zhì)量g五、實驗結(jié)果1、葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制1光吸收值測得結(jié)果管號2mg/mL葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液/mL蒸餾水/mL葡萄糖濃度mg/mLOD540101020.20.80.430.40.60.840.60.41.250.80.21.661022葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線圖：3回歸方程為：2、樣品總糖含量的測定1材料_總糖含量的測定管號蒸餾水/mL總糖水解液/mL3,5-二硝基水楊酸試劑/mLOD5401

5、102201230124012樣品的光吸收值平均值為_。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程計算得出總糖濃度為_。請說明具體計算過程：從而得出樣品_總糖的百分含量為_。請說明具體計算過程：2材料_總糖含量的測定管號蒸餾水/mL總糖水解液/mL3,5-二硝基水楊酸試劑/mLOD5401102201230124012樣品的光吸收值平均值為_。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程計算得出總糖濃度為_。請說明具體計算過程：從而得出樣品_總糖的百分含量為_。請說明具體計算過程：3材料_總糖含量的測定管號蒸餾水/mL總糖水解液/mL3,5-二硝基水楊酸試劑/mLOD5401102201230124012樣品的光吸收值平均值為_。根據(jù)

6、標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程計算得出總糖濃度為_。請說明具體計算過程：從而得出樣品_總糖的百分含量為_。請說明具體計算過程：3、比照分析不同樣品總糖含量。實驗二 蛋白質(zhì)含量的測定考馬斯亮藍法一、實驗?zāi)康?、學(xué)習(xí)用考馬斯亮藍法測定蛋白質(zhì)濃度的根本原理與方法。2、了解考馬斯亮藍法測定蛋白質(zhì)濃度的優(yōu)缺點。二、實驗原理三、實驗試劑1、0.15mol/L氯化鈉溶液：稱取0.2633g氯化鈉，加少量的蒸餾水溶解后，定容至30mL。2、0.1mg/mL牛血清白蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液：1母液：稱取0.01g牛血清白蛋白溶于10mL 0.15mol/L氯化鈉溶液中，配成濃度為1mg/mL的溶液。2標(biāo)準(zhǔn)液：取母液1mL，用0.15m

7、ol/L氯化鈉溶液定容至10mL，配成0.1mg/mL的牛血清白蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液。3、考馬斯亮藍G-250試劑：稱取0.005g考馬斯亮藍G-250溶于2.5mL 95%乙醇，加蒸餾水40mL，加5mL 85%磷酸，最后加蒸餾水定容至50mL。四、實驗步驟1、繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線取6支試管，按下表參加各種試劑。試劑加完后混勻，室溫靜置3min，以1號管為空白調(diào)零，在595nm處測定其吸光值。以蛋白質(zhì)含量mg/mL為橫坐標(biāo)，對應(yīng)的吸光值為縱坐標(biāo)，繪制蛋白質(zhì)含量標(biāo)準(zhǔn)曲線，得出回歸方程。試劑/mL管號1234560.1mg/mL牛血清白蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液00.20.40.60.81.00.15mol/L氯化鈉溶液1.

8、00.80.60.40.20考馬斯亮藍G-250試劑555555蛋白質(zhì)濃度ug/mL020406080100OD5952、總蛋白的提取稱取1g實驗材料如新鮮果蔬，加5mL蒸餾水研磨，過濾后將濾液用蒸餾水定容至10mL。3、總蛋白測定取3支試管，分別加0.1mL未知濃度的蛋白質(zhì)樣品液，加0.9mL 0.15mol/L氯化鈉溶液，再參加5mL考馬斯亮藍G-250試劑，搖勻，室溫靜置3min，以1號管為空白管調(diào)零，在595nm處測其吸光值。測定后，取樣品的光吸收值平均值在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出相應(yīng)的蛋白濃度ug/mL。4、蛋白質(zhì)含量mg/g蛋白質(zhì)含量mg/g=CVT/1000VSWF式中，C為蛋白質(zhì)提取液的

9、濃度ug/mL；VT為提取液總體積mL；VS為測定時加樣量mL；WF為樣品鮮重g。五、實驗結(jié)果1、牛血清白蛋白標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制1光吸收值測得結(jié)果試劑/mL管號1234560.1mg/mL牛血清白蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液00.20.40.60.81.00.15mol/L氯化鈉溶液1.00.80.60.40.20考馬斯亮藍G-250試劑555555蛋白質(zhì)濃度ug/mL020406080100OD5952標(biāo)準(zhǔn)曲線圖：3回歸方程為：2、樣品蛋白質(zhì)含量的測定1樣品_的光吸收值分別為_、_、_，其平均值為_。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程計算得出蛋白質(zhì)濃度為_。請說明具體計算過程：從而得出樣品_蛋白質(zhì)的含量為_。請說明具體計算

10、過程：2樣品_的光吸收值分別為_、_、_，其平均值為_。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程計算得出蛋白質(zhì)濃度為_。請說明具體計算過程：從而得出樣品_蛋白質(zhì)的含量為_。請說明具體計算過程：3樣品_的光吸收值分別為_、_、_，其平均值為_。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程計算得出蛋白質(zhì)濃度為_。請說明具體計算過程：從而得出樣品_蛋白質(zhì)的含量為_。請說明具體計算過程：3、比照分析不同樣品蛋白質(zhì)含量。實驗三 維生素C含量的測定2,6-二氯酚靛酚滴定法一、實驗?zāi)康?、學(xué)習(xí)并掌握2,6-二氯酚靛酚滴定法測定維生素C的原理與方法。2、了解水果與蔬菜中維生素C的含量情況。二、實驗原理 三、實驗試劑1、2%草酸：稱取1g草酸，加少量

11、的蒸餾水溶解后，定容至50mL。2、1%草酸：稱取0.5g草酸，加少量的蒸餾水溶解后，定容至50mL。3、0.1mg/mL標(biāo)準(zhǔn)抗壞血酸溶液：稱取0.0025g抗壞血酸溶于少量1%草酸溶液中，最終加1%草酸定容至25mL。用棕色試劑瓶保存于4。最好臨用前配制。4、0.05% 2,6-二氯酚靛酚溶液：稱取0.025g 2,6-二氯酚靛酚溶于15mL含有0.0052g碳酸氫鈉的熱水中，冷卻后加水定容至50mL。濾去不溶物，用棕色試劑瓶保存于4。約可保存1周。四、實驗步驟1、樣品的制備稱取10g實驗材料如新鮮果蔬，參加5-10mL 2%草酸，研磨成漿狀，過濾后，將濾液定容至25mL。2、標(biāo)準(zhǔn)液滴定準(zhǔn)確

12、吸取標(biāo)準(zhǔn)抗壞血酸溶液1mL置于50mL錐形瓶中，加9mL 1%草酸，以0.05% 2,6-二氯酚靛酚溶液滴定至淡粉色，并保持15s不褪色，即到達終點；取10mL 1%草酸作空白對照，按以上方法滴定。記錄所用染料溶液的體積mL，計算出1mL染料溶液所能氧化抗壞血酸的量mg。3、樣品滴定準(zhǔn)備吸取樣品濾液2份，每份為10mL，分別放入2個錐形瓶內(nèi)，另取10mL 1%草酸作空白對照滴定；按上面的操作滴定并記錄所用染料溶液的體積mL。4、維生素C含量的計算取2份樣品滴定所用染料體積平均值，代入以下公式中計算100g樣品復(fù)原型抗壞血酸含量。維生素C含量mg/100g樣品=VA-VBCT100/ DW式中，

13、VA為滴定樣品所好用的染料的平均用量mL；VB為滴定空白對照所用的染料的平均用量mL；C為樣品提取液的總體積mL；D為滴定時所取的樣品提取液體積mL；T為1mL染料能氧化抗壞血酸質(zhì)量mg由操作2計算出；W為待測樣品的質(zhì)量g。五、實驗結(jié)果1、標(biāo)準(zhǔn)抗壞血酸溶液滴定時，所用染料溶液的體積為_，從而計算出1mL染料溶液所能氧化抗壞血酸的量為_。2、樣品維生素C含量的測定1樣品_滴定時所用染料溶液的體積分別為_和_。其平均用量為_。則樣品維生素C含量為_。請說明具體計算過程。2樣品_滴定時所用染料溶液的體積分別為_和_。其平均用量為_。則樣品維生素C含量為_。請說明具體計算過程。3樣品_滴定時所用染料溶

14、液的體積分別為_和_。其平均用量為_。則樣品維生素C含量為_。請說明具體計算過程。3、比照分析不同樣品維生素C含量。實驗四 纖維素含量的測定比色法一、實驗?zāi)康?、學(xué)習(xí)并掌握比色法測定纖維素的原理與方法。2、了解水果與蔬菜中纖維素的含量情況。二、實驗原理三、實驗試劑1、60%硫酸：量取30mL濃硫酸，緩慢倒入15mL蒸餾水中，最終加水定容至50mL。2、濃硫酸3、2%蒽酮試劑：將1g蒽酮溶解于50mL乙酸乙酯中，存放在棕色試劑瓶中。4、100ug/mL纖維素標(biāo)準(zhǔn)液：1母液：稱取25mg纖維素，放入燒杯中，將燒杯放入冰浴中，然后加冷的60%硫酸15-17mL，在冷的條件下消化處理20-30min，

15、用60%硫酸定容至25mL。2吸取母液5mL放入另一個容量瓶中，將容量瓶放入冰浴中，加蒸餾水定容至50mL。四、實驗步驟1、纖維素標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制取6支試管，按下表參加不同試劑：試劑/mL管號123456100ug/mL纖維素標(biāo)準(zhǔn)液00.40.81.21.62蒸餾水21.61.20.80.40纖維素含量ug/mL020406080100OD620將各管搖勻后，向每管參加0.5mL 2%蒽酮，再沿管壁參加5mL濃硫酸，緩慢搖勻后，靜置1min。然后在620nm下，測得不同含量纖維素溶液的吸光值。以測得的吸光值為Y值，以對應(yīng)的纖維素含量為*值，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得出回歸方程。2、樣品纖維素含量的測定1稱

16、取1g實驗材料如新鮮果蔬置于燒杯中，將燒杯置于冷水浴中，參加60%硫酸15mL，并消化30min，然后將消化好的纖維素溶液轉(zhuǎn)入25mL容量瓶中，并用60%硫酸定容至25mL。然后用布氏漏斗過濾于另一個燒杯中。2取上述溶液2mL于試管中，參加0.5mL 2%蒽酮試劑，并沿管壁加5mL濃硫酸，緩慢搖勻后，靜置12min，然后在620nm波長下測定光吸收值。3、纖維素百分含量纖維素百分含量=*10-6a / W100%式中，*為按按回歸方程計算出的纖維素含量ug；W為樣品重量g；10-6為微克換算成克的系數(shù)；a為樣品稀釋倍數(shù)。五、實驗結(jié)果1、纖維素標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制1光吸收值測得結(jié)果試劑/mL管號123456100ug/mL纖維素標(biāo)準(zhǔn)液00.40.81.21.62蒸餾水21.61.20.80.40纖維素含量ug/mL0204060