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1、與酶相關(guān)的拓展實驗微專題一1.鑒定酶本質(zhì)的兩種常用方法(1)試劑檢測法酶溶液雙縮脲試劑(2)酶解法2.“梯度法”探究酶的最適溫度(1)設計思路(2)設計方案相應溫度保溫3.“梯度法”探究酶的最適pH(1)設計思路(2)設計方案易錯警示(1)在探究酶作用的最適溫度時,酶溶液和反應物混合之前,要把兩者先分別放在各自所需溫度下保溫一段時間,若選擇淀粉和淀粉酶來探究酶的最適溫度,檢測的試劑宜選用碘碘化鉀溶液,不應該選用本尼迪特試劑。因為選用本尼迪特試劑需熱水浴加熱,而該實驗中需嚴格控制溫度。(2)在酶的最適pH探究實驗中,操作時必須先將酶置于不同pH條件下,然后再加入反應物。1.某科研小組經(jīng)研究得知,
2、X酶存在于人的肝細胞中,能將糖原分解為還原糖。酶必須保持正常的結(jié)構(gòu)才能發(fā)揮催化作用,請利用這一原理設計實驗,探究X酶的化學本質(zhì)究竟是蛋白質(zhì)還是RNA。簡要寫出實驗思路,并預期實驗結(jié)果及結(jié)論(要求:實驗包含可相互印證的甲、乙兩個組)。跟蹤訓練跟蹤訓練答案(1)實驗思路:甲組:將X酶用蛋白酶處理,再與糖原溶液混合,在適宜條件下保持一段時間后,檢測是否有還原糖的產(chǎn)生。乙組:將X酶用RNA酶處理,再與糖原溶液混合,在適宜條件下保持一段時間后,檢測是否有還原糖的產(chǎn)生。(2)預期結(jié)果及結(jié)論:若甲組有還原糖生成,乙組沒有還原糖生成,則說明X酶的化學本質(zhì)是RNA;若甲組沒有還原糖生成,乙組有還原糖生成,則說明
3、X酶的化學本質(zhì)是蛋白質(zhì)。跟蹤訓練據(jù)題干可知,X酶的功能是能將糖原分解為還原糖,若X酶的化學本質(zhì)是蛋白質(zhì),被蛋白酶處理后,則不能將糖原分解為還原糖;若X酶的化學本質(zhì)是RNA,被RNA酶處理后,則不能將糖原分解為還原糖。題干中要求設計甲、乙兩組實驗,二者之間要能相互印證,因此聯(lián)想相互對照。2.為了探究某種淀粉酶的最適溫度,某同學進行了如圖所示的實驗操作。實驗步驟如下:跟蹤訓練步驟:取10支試管,均分為五組。每組兩支試管中分別加入1 mL某種淀粉酶溶液和2 mL質(zhì)量分數(shù)為5%的淀粉溶液。步驟:將每組淀粉酶溶液和淀粉溶液混合并搖勻。步驟:將裝有混合溶液的五支試管(編號1、2、3、4、5)分別置于15
4、、25 、35 、45 、55 水浴中。反應過程中每隔1分鐘從各支試管中取出一滴反應液,滴在比色板上,加1滴碘碘化鉀溶液顯色。跟蹤訓練回答下列問題:(1)實驗原理:淀粉在淀粉酶的催化作用下分解成還原糖;淀粉酶的活性受溫度影響;用碘碘化鉀溶液可檢測淀粉,因為淀粉遇碘碘化鉀溶液變藍,根據(jù)藍色深淺來推斷淀粉酶的活性。(2)該實驗的設計存在一個明顯的錯誤,即步驟前應_。先將五組試管分別在15 、25 、35 、45 、55 的水浴中保溫一段時間跟蹤訓練該實驗中在酶溶液和反應物混合之前,需要先把兩者分別放在各自所需溫度下保溫一段時間。跟蹤訓練(3)在本實驗中,各組溶液的pH要保證_,該實驗能否選用本尼迪
5、特試劑來檢測實驗結(jié)果?_,理由是_。相同且適宜不能利用本尼迪特試劑檢測時需要熱水浴加熱,會改變各試管的溫度,影響最終實驗結(jié)果跟蹤訓練本實驗的自變量為溫度,因變量為酶的活性變化,本實驗通過淀粉遇碘碘化鉀溶液變藍的深淺來推斷其變化,而各溶液pH屬于無關(guān)變量,要保證相同且適宜。利用本尼迪特試劑檢測時需熱水浴加熱,會改變實驗的自變量溫度,所以該實驗不能選用本尼迪特試劑來檢測實驗結(jié)果。跟蹤訓練(4)糾正實驗步驟后,進行操作。一段時間后,當?shù)?組試管中的反應物與碘碘化鉀溶液混合開始呈棕黃色時,各組實驗現(xiàn)象如下表所示(“”表示藍色程度)。組別12345處理溫度/1525354555結(jié)果棕黃色分析上述實驗結(jié)果
6、,可以得出該淀粉酶的最適溫度在_之間。某同學在進行本實驗的過程中,發(fā)現(xiàn)反應時間過長。為縮短反應時間,請你提出合理的改進措施:_。2545 增加淀粉酶的量(或降低底物的濃度)跟蹤訓練根據(jù)表中數(shù)據(jù)可知,第3組試管開始呈棕黃色,說明此試管中已經(jīng)沒有淀粉了,因此淀粉酶的最適溫度介于25 和45 之間。組別12345處理溫度/1525354555結(jié)果棕黃色3.下面的表格分別是某興趣小組探究溫度對酶活性影響的實驗步驟和探究過氧化氫酶作用的最適pH的實驗結(jié)果。據(jù)此回答下列問題:跟蹤訓練探究溫度對酶活性的影響(實驗一)實驗步驟分組甲組乙組丙組新鮮-淀粉酶溶液1 mL1 mL1 mL可溶性淀粉溶液5 mL5 m
7、L5 mL控制溫度0 60 90 將新鮮-淀粉酶溶液與可溶性淀粉溶液混合后分別放在恒溫水浴中保溫一段時間測定單位時間內(nèi)淀粉的_跟蹤訓練探究過氧化氫酶作用的最適pH(實驗二)組別A組B組C組D組E組pH56789H2O2完全分解所需時間(秒)30018090192284(1)pH在實驗一中屬于_變量,而在實驗二中屬于_變量。無關(guān)自跟蹤訓練實驗一探究的是溫度對酶活性的影響,因此自變量是溫度,因變量是酶活性,pH屬于無關(guān)變量;而實驗二是探究過氧化氫酶作用的最適pH,自變量是pH。(2)實驗一的步驟為錯誤操作,正確的操作應該是_。實驗一的步驟最好選用_(試劑)測定單位時間內(nèi)淀粉的_。跟蹤訓練使新鮮-淀
8、粉酶溶液和可溶性淀粉溶液分別達到預設溫度后再混合(其他合理答案也可)碘碘化鉀溶液剩余量跟蹤訓練探究溫度對酶活性影響的實驗中,應該先使酶和底物分別達到預設溫度,然后再將底物和酶混合后,在預設溫度下進行反應,否則會影響實驗結(jié)果的準確性。因此,實驗一的步驟為錯誤操作。淀粉遇碘碘化鉀溶液變藍,因此實驗一的步驟最好選用碘碘化鉀溶液來測定單位時間內(nèi)淀粉的剩余量,單位時間內(nèi)淀粉的剩余量越多,說明酶活性越低。(3)如將實驗一的新鮮-淀粉酶溶液和可溶性淀粉溶液換為鮮肝勻漿和H2O2溶液,你認為是否科學?_。為什么?_。(4)分析實驗二的結(jié)果,可得到的結(jié)論是_;在該預實驗的基礎(chǔ)上要進一步探究該過氧化氫酶的最適pH,可在pH為_之間
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